改良Hodge試驗檢測肺炎克雷伯菌中的碳青霉烯酶：必須注意假陽性結(jié)果

改良Hodge試驗檢測肺炎克雷伯菌中的碳青霉烯酶：必須注意假陽性結(jié)果

Modified Hodge test for carbapenemase detection inK.pneumoniae：attention to the false positive results

肺炎克雷伯菌引起的感染為臨床治療帶來了巨大的挑戰(zhàn)。碳青霉烯類抗生素是治療產(chǎn)超廣譜B內(nèi)酰胺酶(ESBLs)肺炎克雷伯菌感染的最重要的抗生素。但目前該菌對碳青霉烯類抗生素的耐藥性呈逐漸上升趨勢,其主要的耐藥機(jī)制是產(chǎn)生 Amb ler A類碳青霉烯酶尤其KPC酶或Amb ler B類金屬B內(nèi)酰胺酶如IMP和VIM型酶。此外,細(xì)菌產(chǎn)生ESBL和(或)Am pC酶合并外膜孔蛋白缺失亦能導(dǎo)致對碳青霉烯類抗生素耐藥。

作者選擇28株對碳青霉烯類抗生素敏感性降低的肺炎克雷伯菌,進(jìn)行藥敏試驗、同源性分析、改良H odge試驗和PCR法檢測碳青霉烯酶基因。結(jié)果顯示28株細(xì)菌對亞胺培南、美羅培南和厄他培南的敏感率分別為93%、57%和11%。PFGE同源性分析28株細(xì)菌可分為7種不同的基因型。厄他培南和美羅培南改良H odge試驗檢測結(jié)果顯示分別有7株或6株為產(chǎn)碳青霉烯酶株。用高接種菌量法則可檢出15株或12株產(chǎn)酶株。所有菌株均不能水解亞胺培南。PCR檢測結(jié)果顯示,所有菌株均未檢測到碳青霉烯酶基因,96%(27株)的菌株產(chǎn)CTX-M型ESBLs,其中2株同時產(chǎn)GES-1型酶。SDS-PAGE電泳結(jié)果顯示,除1株細(xì)菌同時表達(dá)OmpK35和OmpK36 2種外膜孔蛋白外,其余菌株均缺失至少1種外膜孔蛋白。

以上結(jié)果表明采用改良Hodge試驗檢測細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶可能產(chǎn)生假陽性結(jié)果,細(xì)菌產(chǎn)ESBLs酶(尤其CTX-M型酶)同時伴有外膜孔蛋白缺失?？蓪?dǎo)致細(xì)菌對碳青霉烯類抗生素敏感性降低,這一點在產(chǎn)ESBLs菌高發(fā)地區(qū)應(yīng)引起注意。

[1]Carvalhaes CG,Picao RC,Nicoletti AG,et al.Cloverleaf test(modified H odge test)for detecting carbapenemase production inKlebsiellapneumoniae:be aw areof false positive results.JAn t-i m icrob Chemother,2010,65(2):249-251.

[2]Girlich D,Poirel L,Nordm ann P.Do CTX-M B-lactamases hydroly se ertapenem?JAntim icrob Chemother,2008,62(5):1155-1156.

胡付品摘譯 朱德妹審校

2010-04-29

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