SiSo細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合型癌抗原基因與胰腺癌

耿瑞慧 李淑德 李兆申

·綜述·

SiSo細(xì)胞表達(dá)的受體結(jié)合型癌抗原基因與胰腺癌

耿瑞慧 李淑德 李兆申

SiSo細(xì)胞系表達(dá)的受體結(jié)合型癌抗原(receptor-binding cancer antigen expressed on siso cells, RCAS1)可出現(xiàn)在多種不同類型腫瘤細(xì)胞表面，與腫瘤的分化、侵襲和轉(zhuǎn)移有關(guān)，并提示預(yù)后不良。本文就RCAS1與胰腺癌的關(guān)系作一綜述。

一、RCAS1的基因結(jié)構(gòu)

Sonoda等[1]用人宮頸癌細(xì)胞系SiSo免疫的小鼠骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞融合，發(fā)現(xiàn)了22-1-1單克隆抗原。另外，Watanabe等[2]也從人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7分離出了雌激素受體結(jié)合片段相關(guān)抗原9(estrogen receptor-binding fragment-associated gene 9,EBAG9)。后經(jīng)研究證實(shí)，22-1-1抗原與EBAG9的cDNA具有同源性，實(shí)質(zhì)上為同一種蛋白質(zhì)，并最終命名為RCAS1[3]。

人的EBAG9/RCAS1基因定位于8號(hào)染色體長臂q23?？寺〉腞CAS1cDNA包括5′端242個(gè)核苷酸的非翻譯區(qū)，639個(gè)核苷酸(213個(gè)氨基酸)的編碼區(qū)以及3′端179個(gè)核苷酸的非翻譯區(qū)。RCAS1蛋白是一種Ⅱ型膜蛋白，由213個(gè)氨基酸組成，含有一個(gè)N端的跨膜片段(8～27個(gè)氨基酸)和一個(gè)C端卷曲螺旋結(jié)構(gòu)(179～206個(gè)氨基酸)，其氨基端位于細(xì)胞質(zhì)中，羧基端位于細(xì)胞膜外。螺旋結(jié)構(gòu)在RCASl與其受體的結(jié)合中起重要作用。RCAS1可通過C末端卷曲螺旋結(jié)構(gòu)形成同源寡聚體，也可以可溶性的形式(sRCAS1)存在于血清中，這可能是由于胞外結(jié)構(gòu)域的脫落，從細(xì)胞膜釋放而形成[4]。

然而對(duì)于RCAS1的結(jié)構(gòu)，有學(xué)者持不同觀點(diǎn)。Engelsberg[5]等通過對(duì)膜的局部解剖學(xué)和RCASl編碼基因的亞細(xì)胞定位研究認(rèn)為，RCAS1定位于高爾基體而非細(xì)胞膜，是一個(gè)Ⅲ型的跨膜蛋白，其長C端位于胞質(zhì)內(nèi)。另外，Reimer等[6]研究認(rèn)為，雌激素誘導(dǎo)的EBAG9基因產(chǎn)物和22-1-1抗原在結(jié)構(gòu)和功能上是相互獨(dú)立的，兩者并不相同。

二、RCAS1蛋白的生物學(xué)功能

RCAS1蛋白是一種腫瘤相關(guān)抗原，主要表達(dá)于卵巢、子宮、乳房、肺和膽管癌等多種腫瘤細(xì)胞以及李-斯細(xì)胞和紅系祖細(xì)胞，與腫瘤的低分化、惡性程度呈正相關(guān)。然而，RCAS蛋白在正常組織中亦有表達(dá)。Kawano等[7]研究顯示，RCAS1蛋白可表達(dá)于正常女性子宮頸和子宮體組織，且表達(dá)程度與年齡相關(guān)，但與凋亡指數(shù)無明顯相關(guān)性，其作用可能是影響化生過程以及腫瘤的進(jìn)程。

RCAS1蛋白能充當(dāng)人不同細(xì)胞系上相關(guān)受體的配體，如白血病細(xì)胞K562和正常的周圍淋巴細(xì)胞(T、B、NK細(xì)胞)。RCAS1蛋白與其受體結(jié)合后，可通過白介素1β轉(zhuǎn)化酶樣蛋白酶的活化，抑制淋巴細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)活化的細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTLs)和自然殺傷細(xì)胞(NK)凋亡，但對(duì)靜息淋巴細(xì)胞的生長和存活沒有作用。Han等[8]用shRNA干擾敲除MCF-7細(xì)胞的RCAS1基因表達(dá)，然后再加入RCAS1蛋白，發(fā)現(xiàn)T細(xì)胞生長率減少，凋亡比例增加，同時(shí)可增加Caspase-3蛋白的活性，減少IFN- 的分泌。表明抑制RCAS1的表達(dá)可有效地恢復(fù)T細(xì)胞增殖，減少細(xì)胞凋亡和局部逆轉(zhuǎn)IFN-分泌物的 細(xì)胞功能。在腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的早期，NK細(xì)胞和腫瘤抗原提呈T細(xì)胞對(duì)腫瘤的識(shí)別和清除有重要作用，因而可以認(rèn)為，RCAS1參與腫瘤細(xì)胞逃避免疫監(jiān)視，促進(jìn)腫瘤的進(jìn)展。此外，活化的淋巴細(xì)胞可增加RCAS1的受體表達(dá)，增強(qiáng)RCAS1的作用。

RCAS1蛋白主要由骨髓的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，脂多糖可以刺激巨噬細(xì)胞產(chǎn)生RCAS1蛋白，誘導(dǎo)紅系祖細(xì)胞的死亡，從而對(duì)紅細(xì)胞產(chǎn)生負(fù)調(diào)節(jié)[9]。Sonoda等[10]研究發(fā)現(xiàn)，RCAS1蛋白通過胞外功能區(qū)的脫落而被分泌，它的表達(dá)與細(xì)胞外基質(zhì)特性的改變和波形蛋白陽性的腫瘤間質(zhì)細(xì)胞數(shù)目減少相關(guān)。結(jié)果表明RCAS1蛋白可以誘導(dǎo)結(jié)締組織重塑，增強(qiáng)腫瘤的侵襲能力。此外，RCAS1蛋白表達(dá)與鈣粘素家族蛋白的反常表達(dá)相關(guān)，其表達(dá)增高和E-鈣粘蛋白減少在人結(jié)腸癌復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移的機(jī)制中起重要作用[11]。在風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中，RCAS1基因缺乏可導(dǎo)致逃避免疫攻擊的能力喪失，誘導(dǎo)CTLs滲透和滑膜襯里細(xì)胞的凋亡[12]。

三、RCAS1基因與胰腺癌

1．RCAS1蛋白在胰腺癌組織中表達(dá)：應(yīng)用抗RCAS1蛋白抗體免疫組化結(jié)果顯示， RCAS1陽性細(xì)胞表達(dá)于免疫細(xì)胞或炎癥靶細(xì)胞。Enjoji等[13]在一篇綜述中列出了良性肝臟、膽道和胰腺疾病中RCAS1蛋白的免疫組化結(jié)果，慢性胰腺炎的陽性率為20%。Akashi等[14]在20例胰腺導(dǎo)管腺癌和其他胰腺疾病組織中，用22-1-1單克隆抗體染色檢測RCAS1蛋白表達(dá)，發(fā)現(xiàn)慢性胰腺炎組織陽性率為40%。慢性胰腺炎可出現(xiàn)明顯的不典型增生和纖維化，因而RCAS1蛋白在慢性胰腺炎表達(dá)被認(rèn)為是相當(dāng)常見的表現(xiàn)。RCAS1蛋白陽性細(xì)胞主要在活動(dòng)性炎癥區(qū)，常呈低水平表達(dá)。目前還不清楚正常組織中RCAS1蛋白的功能。推測其功能可能是，RCAS1蛋白在健康狀態(tài)下沒有作用，但在某種情況下如自身免疫性疾病，RCAS1蛋白則很容易被檢測到。當(dāng)遭遇免疫攻擊時(shí)，RCAS1蛋白在胰腺細(xì)胞中的表達(dá)出現(xiàn)質(zhì)和量的變化，從而逃避或者攻擊免疫系統(tǒng)、有效地促進(jìn)反應(yīng)性增生[13]。

Hiraoka等[15]對(duì)80例外科手術(shù)切除的胰腺腺癌組織進(jìn)行免疫組化分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，RCAS1蛋白表達(dá)陽性率為77例(96%)；RCAS1蛋白表達(dá)和患者年齡、性別、腫瘤浸潤程度、腫瘤直徑、外科切除邊界、淋巴侵襲、血管侵犯和組織病理學(xué)分級(jí)無關(guān)，但與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和組織病理學(xué)階段有臨界關(guān)系(分別為P=0.0608，P=0.0934)；RCAS1蛋白高表達(dá)患者的存活時(shí)間顯著短于低表達(dá)者(P=0.0012)；Cox回歸模型多元分析表明，RCAS1蛋白可作為胰腺腺癌有意義的腫瘤標(biāo)志物，是外科手術(shù)切除患者預(yù)后的不良預(yù)測因子。Giaginis等[16]對(duì)76例胰腺腺癌患者組織切片檢查結(jié)果顯示，RCAS1蛋白陽性、表達(dá)增強(qiáng)和染色強(qiáng)度與腫瘤細(xì)胞增殖能力、臨床病理參數(shù)和患者的存活率相關(guān)。在上述76例標(biāo)本中65例(86%)RCAS1蛋白表達(dá)陽性，其中36例(55%)表達(dá)增強(qiáng)。RCAS1蛋白陽性與胰腺癌組織病理學(xué)分級(jí)顯著相關(guān)(P=0.026)，同時(shí)與腫瘤大小相關(guān)(P=0.071)；RCAS1蛋白表達(dá)增強(qiáng)和染色強(qiáng)度也與腫瘤的組織病理學(xué)分級(jí)顯著相關(guān)(分別為P=0.06和P=0.089)，但RCAS1蛋白表達(dá)陽性、染色強(qiáng)度和表達(dá)增強(qiáng)與腫瘤增殖能力和患者的存活率無關(guān)。結(jié)果提示RCAS1蛋白對(duì)胰腺癌有診斷價(jià)值，但還不能作為標(biāo)志物對(duì)患者存活率進(jìn)行預(yù)測。在上述兩項(xiàng)研究中，RCAS1蛋白的表達(dá)對(duì)生存期的影響作用是不一致的，可能是因?yàn)镽CAS1蛋白陽性細(xì)胞定義的標(biāo)準(zhǔn)以及RCAS1陽性細(xì)胞百分比臨界點(diǎn)的設(shè)定不同所致。因此，RCAS1陽性和胰腺癌的增殖、轉(zhuǎn)移等惡性表型是否呈正相關(guān)，還需要進(jìn)一步的研究證實(shí)。

2．血清RCAS1蛋白檢測對(duì)胰腺癌的診斷價(jià)值：在大多數(shù)良性疾病患者中，RCAS1蛋白血清水平在正常范圍，但在其相關(guān)細(xì)胞如免疫攻擊的靶細(xì)胞中，RCAS1抗原免疫反應(yīng)陽性，這表明RCAS1血清水平不反映組織的RCAS1蛋白表達(dá)。Ozkan等[17]檢測39例胰腺腺癌、19例膽管和胰腺良性疾病、13例健康志愿者血清RCAS1蛋白水平，結(jié)果顯示血清RCAS1蛋白水平在上述3組中均超過正常值，分別為92.3%、26.3%和23.0%；RCAS1蛋白對(duì)胰腺癌的診斷特異性與CA19-9相似，但敏感性較CA19-9高(P<0.05)；當(dāng)腫瘤分期增加時(shí)，血清RCAS1蛋白中位數(shù)增加。Yamaguchi等[18]將48例胰腺癌血清RCAS1蛋白檢測結(jié)果與CEA和CA19-9結(jié)果進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)單獨(dú)應(yīng)用一種腫瘤標(biāo)志物診斷良性和惡性狀態(tài)時(shí)， RCAS1蛋白的敏感性(55%)高于CEA(27%)，RCAS1蛋白的特異性高于CA19-9(78%)；當(dāng)兩種標(biāo)志物聯(lián)合檢測時(shí)，RCAS1蛋白聯(lián)合CA19-9(95%)檢測優(yōu)于單獨(dú)的CEA(78%)、RCAS1蛋白和CEA聯(lián)合(59%)以及CA19-9和CEA聯(lián)合(82%)檢測。上述結(jié)果表明，血清RCAS1蛋白是診斷胰腺癌的有價(jià)值標(biāo)志物，與CA19-9聯(lián)合檢測可提高診斷的敏感性。Enjoji等[19]研究結(jié)果表明，當(dāng)患者血清腫瘤標(biāo)志物如CEA和CA19-9水平不升高時(shí)，RCAS1蛋白檢測是膽管癌和胰腺癌非常有意義的血清標(biāo)志物。腫瘤根治后，如果患者血清RCAS1蛋白水平增加，則提示腫瘤有復(fù)發(fā)可能。

四、小結(jié)

目前，RCAS1對(duì)胰腺癌的腫瘤免疫調(diào)節(jié)作用尚無相關(guān)報(bào)道，但是已有多項(xiàng)研究結(jié)果顯示，RCAS1蛋白在胰腺癌組織中高表達(dá)，患者血清RCAS1蛋白濃度明顯升高，且與腫瘤臨床病理學(xué)參數(shù)和預(yù)后相關(guān)，因此可作為胰腺癌新的腫瘤標(biāo)志物，對(duì)胰腺癌的診斷和預(yù)后判斷有重要價(jià)值。然而， RCAS1基因表達(dá)的具體機(jī)制和功能還有待進(jìn)一步研究。

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2009-06-26)

(本文編輯：屠振興)

10.3760/cma.j.issn.1674-1935.2010.01.025

200433 上海，第二軍醫(yī)大學(xué)長海醫(yī)院消化內(nèi)科

李淑德，Email: lishude57@126.com