壯藥牙膏的研制及藥效研究

【摘要】目的:對(duì)山風(fēng)、九層風(fēng)、戰(zhàn)骨、三葉青藤、山芝麻、紅魚眼等6種壯藥及其復(fù)方牙膏進(jìn)行抗炎鎮(zhèn)痛止血活性篩選，研制高效壯藥牙膏。方法:用小鼠耳腫脹法及大鼠足腫脹法觀察其抗炎作用，用小鼠扭體法和熱板法觀察其鎮(zhèn)痛作用，小鼠局部止血實(shí)驗(yàn)觀察其止血作用。結(jié)果:6種牙膏在抗炎方面與空白組比，均有顯著性差異(P<0.05)，而在鎮(zhèn)痛方面，除三葉青藤組和戰(zhàn)骨組外，其他組與空白組相比均具有顯著性差異(P<0.05)，山風(fēng)和山芝麻及其復(fù)方牙膏還具有明顯的止血作用(P<0.05)。結(jié)論:山風(fēng)等6種壯藥牙膏均具有較強(qiáng)的抗炎作用;三葉青藤和戰(zhàn)骨牙膏鎮(zhèn)痛效果不理想，而其他壯藥牙膏均具有較強(qiáng)鎮(zhèn)痛作用。尤其是山風(fēng)單方和復(fù)方牙膏山風(fēng)牙膏鎮(zhèn)痛止血效果優(yōu)于兩面針牙膏。

【關(guān)鍵詞】山風(fēng);山芝麻;壯藥;抗炎;鎮(zhèn)痛;牙膏

【中圖分類號(hào)】R284.1【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2010)12-195-2

我國(guó)中藥資源主要由中藥、民間藥和民族藥三個(gè)部分組成，藥物資源中85%為民族藥[1]。民族藥具有鮮明的地域性和民族傳統(tǒng)。

壯族主要集中于廣西壯族自治區(qū)，據(jù)調(diào)查，廣西中草藥、民族藥資源達(dá)到4623種，居全國(guó)第二，但開發(fā)利用不到20%。壯藥是少數(shù)民族人口最多的民族藥，至今仍未有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，有待于進(jìn)一步研究[2]。

山風(fēng)(Blumea aromatica DC.)、九層風(fēng)(Cladostachys frutescens D.Don)、戰(zhàn)骨(Premna fulva crai)、三葉青藤(Illigera rhodantha Hance)、山芝麻(Helicteres angustifolia L.)、紅魚眼(Phyllanthus reticulatus Poir.var.glaber Muell. Arg)和兩面針(Radix Zanthoxyli)均是廣西道地藥材和常用壯藥，有祛風(fēng)、消腫、止痛、清熱、解毒等作用[2-3]。治療跌打損傷和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎滿意的療效[3]。本實(shí)驗(yàn)將它們各自及藥效顯著的山風(fēng)復(fù)方引入牙膏體系中，研制高效壯藥牙膏。

1材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

昆明種小鼠和SD大鼠分別由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心和長(zhǎng)沙開福區(qū)東創(chuàng)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物科技服務(wù)部提供，許可證號(hào):scxk桂2003-0003和scxk湘2006-0001。

1.2儀器

RB—200智能熱板儀(成都泰盟科技有限公司，序列號(hào):TM026-0710-02-022-009)。

1.3藥品

壯藥均經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院劉壽養(yǎng)副教授鑒定，二甲苯(上海試劑一廠，試—2004-12-08)，0.6%的醋酸(自行配制)，弗氏完全佐劑(sigma公司CAS 9007-81-2)。

2方法

2.1壯藥牙膏的制備

稱取每種藥材各500g，分別加入10倍量、8倍量、6倍量75%EtOH熱回流提取3次，時(shí)間分別為2h、1.5h、1h，抽濾，減壓濃縮，冷凍干燥，得干燥粉末。將相當(dāng)于1.25g、2.5g或4g(高、中、低濃度)藥材的干燥粉末加入空白基質(zhì)牙膏，得到相應(yīng)的壯藥牙膏，復(fù)方牙膏的配比為1:1。

1000g藥物(空白)牙膏膏體的制備:在暫存缸中投入計(jì)量好的純凈水、160g山梨醇、50g丙二醇、100g甘油等液料;在預(yù)分散釜中投入200g二氧化硅、3g糖精鈉、10g羥基纖維素鈉、23g十二烷基硫酸鈉、相當(dāng)于1.25g、2.5g或4g藥材的提取物、1.5g苯甲酸鈉等粉料進(jìn)行預(yù)分散、混合;開制膏釜真空泵吸入上述液料;然后開刮刀，進(jìn)上述粉料，開攪拌器和膠體磨，50min后投入10g薄荷香精，10min后依次關(guān)閉膠體磨、攪拌器、刮刀、破真空，停真空，取樣檢測(cè)合格后制成。

2.2單味壯藥牙膏的藥效研究

2.2.1壯藥牙膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

取健康雌性小鼠90只，隨機(jī)分為隨機(jī)分為空白組、陰性對(duì)照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。在小鼠右耳均勻涂二甲苯0.02m1/只，30min后，分別在右耳涂于相應(yīng)的藥物1g，涂藥后1小時(shí)后處死小鼠，擦凈耳部所涂藥物，用打孔器取下左右耳孔，以左右耳片重量之差計(jì)算腫脹度。

2.2.2壯藥牙膏對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎原發(fā)病變的治療作用

選用雌性大鼠90只，隨機(jī)分為隨機(jī)分為空白組、陰性對(duì)照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。把大鼠固定好后，測(cè)量致炎前大鼠左后足跖厚度后，給大鼠左后足跖注射弗氏完全佐劑0.1ml，然后將1g藥物涂于大鼠左后足，于致炎后3h，將所涂藥物搽凈，用游標(biāo)卡尺測(cè)定致炎后3h大鼠左后足厚度。以其致炎前后的足厚度差值為腫脹度。

2.2.3壯藥牙膏鎮(zhèn)痛作用(扭體法)

取小鼠90只，雌性，隨機(jī)分為隨機(jī)分為空白組、陰性對(duì)照組、陽性組，受試藥物組共9組。腹部剃毛(2cm×2cm)24h后，各組將不同藥物1g涂于每只小鼠腹部皮膚，給藥30min后，每鼠分別ip0.6%醋酸溶液0.2ml，觀察并記錄15min內(nèi)的扭體次數(shù)。

2.2.4壯藥牙膏小鼠熱板法鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)

取小鼠90只，雌性，隨機(jī)分為隨機(jī)分為空白組、陰性對(duì)照組、陽性組，受試藥物組(6組)共9組。將小鼠固定好后，在小鼠雙足涂相應(yīng)藥物1g，1小時(shí)后，熱板法測(cè)定各藥物組小鼠在55±0.5℃的熱板儀上的痛閾值。計(jì)算痛閾值之差。

2.2.5壯藥牙膏小鼠局部止血實(shí)驗(yàn)

取小鼠80只，雌性，隨機(jī)分為為空白組、陰性對(duì)照組、陽性組，藥物組(5組)共8組。其中，空白組不做任何處理，陰性對(duì)照組涂空白基質(zhì)牙膏1g，陽性組涂?jī)擅驷樠栏?g。將小鼠麻醉后，開腹，暴露肝臟，用剪刀在肝臟表面剪去一塊長(zhǎng)約1cm，寬約0.2cm的組織，將涂有1g受試藥物的紗布覆蓋上去，每隔15s，觀察一次，記錄止血時(shí)間，比較各組之間的止血時(shí)間差異。

2.3復(fù)方壯藥牙膏的藥效學(xué)研究實(shí)驗(yàn)方法同2.2

2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以eχ±s表示，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行方差分析，并作組間兩兩比較。

3結(jié)果

3.1壯藥牙膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響

表1 單味壯藥牙膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(eχ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對(duì)照組102.61±1.09△

兩面針牙膏組

(陽性組)101.12±0.57*

空白基質(zhì)牙膏組102.28±1.09△

山風(fēng)牙膏101.21±0.47*

九層風(fēng)牙膏組101.11±0.84*

戰(zhàn)骨牙膏組101.42±0.76*

三葉青藤牙膏組101.56±1.04*

山芝麻牙膏組101.54±0.80*

紅魚眼牙膏組101.07±0.61*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

表2 山風(fēng)復(fù)方壯藥牙膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(-χ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對(duì)照組103.91±1.23△

兩面針牙膏組(陽性組)100.88±0.29*

空白基質(zhì)牙膏組103.59±0.90△

山風(fēng)牙膏組102.18±0.73*△

(山風(fēng)∶九層風(fēng))復(fù)方牙膏組102.12±0.67*△

(山風(fēng)∶山芝麻)復(fù)方牙膏組101.22±0.43*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

表3 不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響(-χ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(×10-3，g)

空白對(duì)照組102.86±0.81△

兩面針牙膏組(陽性組)101.85±0.63*

空白基質(zhì)牙膏組102.76±0.70△

山風(fēng)牙膏組102.19±0.50*

山風(fēng)(高濃度)牙膏組101.71±0.54*

山風(fēng)(低濃度)牙膏組102.47±0.53△

(山風(fēng)∶山芝麻)(高濃度)復(fù)方牙膏組101.58±0.47*

(山風(fēng)∶山芝麻)(低濃度)復(fù)方牙膏組102.25±0.77*

注:和空白組相比:*P<0.05，和兩面針牙膏組比較:△P<0.05。

由表1可知，對(duì)于小鼠耳廓腫脹度，空白組與陽性組、6種壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)。由表2、表3可知，除低濃度山風(fēng)牙膏組外，空白組與陽性組、山風(fēng)單方和復(fù)方壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)，其中，高濃度山風(fēng)單方及復(fù)方壯藥牙膏抗炎效果均優(yōu)于陽性組。

3.2壯藥牙膏對(duì)大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎原發(fā)病變的治療作用

由表4、表5可知，對(duì)于3h后大鼠足跖腫脹度，空白組與陰性組、陽性組、其它壯藥牙膏之間的差異有顯著性意義(P<0.05)，其中，低濃度山風(fēng)單方壯藥牙膏無抗炎作用，山風(fēng)單方及復(fù)方壯藥牙膏抗炎效果均優(yōu)于陽性組。

表4 單味壯藥牙膏對(duì)弗氏完全佐劑所致大鼠足腫脹的影響(eχ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(cm)

空白對(duì)照組100.4271±0.0744△

兩面針牙膏組(陽性組)100.1752±0.1032*

空白基質(zhì)牙膏組100.3624±0.0374*△

山風(fēng)牙膏100.2214±0.0339*

九層風(fēng)牙膏組100.2512±0.0759*△

戰(zhàn)骨牙膏組100.2848±0.0687*△

三葉青藤牙膏組100.3624±0.0354△

山芝麻牙膏組100.2368±0.0459*

紅魚眼牙膏組100.2624±0.0908*△

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組比較:△P<0.05。

表5 不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏對(duì)弗氏完全佐劑所致大鼠足腫脹的影響(-χ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(×10-4，m)

空白對(duì)照組1029.32±4.32△

兩面針牙膏組

(陽性組)1020.36±8.98*

空白基質(zhì)牙膏組1028.76±4.48△

山風(fēng)牙膏組1022.14±6.26*

山風(fēng)(高濃度)

牙膏組1019.08±5.16*

山風(fēng)(低濃度)

牙膏組1027.32±4.93△

(山風(fēng)∶山芝麻)(高濃度)復(fù)方牙膏組1017.16±6.11*

(山風(fēng)∶山芝麻)(低濃度)復(fù)方牙膏組1022.66±5.52*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

表6 單味壯藥牙膏對(duì)扭體法所致小鼠扭體次數(shù)的影響(eχ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)扭體次數(shù)(次/15min)

空白對(duì)照組1027.0±5.4△

兩面針牙膏組(陽性組)108.4±3.0*

空白基質(zhì)牙膏組1023.1±9.28△

山風(fēng)牙膏107.4±2.2*

九層風(fēng)牙膏組1019.6±7.6*△

戰(zhàn)骨牙膏組1024.3±4.7△

三葉青藤牙膏組1024.0±5.9△

山芝麻牙膏組108.5±2.8*

紅魚眼牙膏組1017.0±4.9*△

*:和空白組相比:P<0.05，△:和陽性組比較:P<0.05。

表7 不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏對(duì)扭體法所致小鼠扭體次數(shù)的影響(-χ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)扭體次數(shù)(次/15min)

空白對(duì)照組1019.9±7.9△

兩面針牙膏組(陽性組)106.8±2.9*

空白基質(zhì)牙膏組1019.3±6.8△

山風(fēng)牙膏組107.9±2.9*

山風(fēng)(高濃度)牙膏組106.1±2.0*

山風(fēng)(低濃度)牙膏組1018.0±5.9△

(山風(fēng)∶山芝麻)(高濃度)復(fù)方牙膏組104.5±2.1*

(山風(fēng)∶山芝麻)(低濃度)復(fù)方牙膏組109.9±2.6*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

3.3壯藥牙膏鎮(zhèn)痛作用(扭體法)

由表6、表7可知，對(duì)于小鼠15min內(nèi)的扭體次數(shù)，除戰(zhàn)骨、三葉青滕牙膏組、山風(fēng)(低濃度)牙膏組外，其余各組與空白組相比P<0.05，其中，山風(fēng)單方及復(fù)方高濃度牙

(下轉(zhuǎn)第235頁)

(上接第196頁)

膏組鎮(zhèn)痛效果均優(yōu)于陽性組。

表8 單味壯藥牙膏對(duì)熱板法所致小鼠鼠足痛閾值的影響(eχ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)痛閾時(shí)間差(s)

空白對(duì)照組104.3±1.0△

兩面針牙膏組(陽性組)1011.6±1.3*

空白基質(zhì)牙膏組105.4±1.8△

山風(fēng)牙膏109.8±2.0*△

九層風(fēng)牙膏組107.1±2.0*△

戰(zhàn)骨牙膏組109.0±1.9*△

三葉青藤牙膏組106.3±1.2*△

山芝麻牙膏組1010.7±2.5*

紅魚眼牙膏組107.7±1.71*△

*:和空白組相比:P<0.05，△:和陽性組比較:P<0.05。

表9 不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏對(duì)熱板法所致小鼠鼠足痛閾值的影響(eχ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)痛閾時(shí)間差(s)

空白對(duì)照組101.85±0.74△

兩面針牙膏組(陽性組)1016.74±7.24*

空白基質(zhì)牙膏組109.27±3.82△

山風(fēng)牙膏組1017.18±7.90*

山風(fēng)(高濃度)牙膏組1021.33±9.49*

山風(fēng)(低濃度)牙膏組109.23±2.08△

(山風(fēng)∶山芝麻)(高濃度)復(fù)方牙膏組1021.91±8.58*

(山風(fēng)∶山芝麻)(低濃度)復(fù)方牙膏組1014.18±5.47*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

3.4壯藥牙膏小鼠熱板法實(shí)驗(yàn)

由表8、表9可知，對(duì)于小鼠痛閾的影響，除山風(fēng)(低濃度)牙膏組和空白基質(zhì)牙膏組外，其余各組與空白組相比P<0.05，其中，山芝麻牙膏組與陽性組之間的差異沒有顯著性意義(P>0.05)，而山風(fēng)單方及復(fù)方牙膏組鎮(zhèn)痛效果均優(yōu)于陽性組。

3.5不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏小鼠局部出血實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表10 不同濃度山風(fēng)單方復(fù)方壯藥牙膏對(duì)小鼠局部出血止血時(shí)間的影響(-χ±s)

組別動(dòng)物數(shù)(只)止血時(shí)間(s)

空白對(duì)照組10111.75±33.95△

兩面針牙膏組(陽性組)1053.22±17.84*

空白基質(zhì)牙膏組10110.43±34.17△

山風(fēng)牙膏組1070.36±10.07*

山風(fēng)(高濃度)牙膏組1037.28±8.78*

山風(fēng)(低濃度)牙膏組10100.16±17.27△

(山風(fēng)∶山芝麻)(高濃度)復(fù)方牙膏組1036.28±7.91*

(山風(fēng)∶山芝麻)(低濃度)復(fù)方牙膏組1063.84±20.55*

注:和空白組相比:*P<0.05，和陽性組組比較:△P<0.05。

由表10可知，除山風(fēng)(低濃度)壯藥牙膏組和空白基質(zhì)牙膏組外，其余組與空白組相比P<0.05，其中，山風(fēng)單方及復(fù)方高濃度牙膏組止血效果均優(yōu)于陽性組。

4結(jié)論

本研究結(jié)果顯示，山風(fēng)等6種壯藥牙膏均具有較強(qiáng)的抗炎作用，三葉青藤和戰(zhàn)骨壯藥牙膏鎮(zhèn)痛效果不理想，而其他壯藥牙膏均具有一定的鎮(zhèn)痛作用。尤其是山風(fēng)單方及復(fù)方高濃度牙膏抗炎鎮(zhèn)痛止血效果均優(yōu)于兩面針牙膏。

本研究將山風(fēng)等六種壯藥及復(fù)方引入牙膏體系中，測(cè)試其抗炎鎮(zhèn)痛止血效果，研制高效壯藥牙膏，希望能為擴(kuò)大其應(yīng)用范圍起到拋磚引玉的作用。

參考文獻(xiàn)

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