廣西莪術(shù)水提取物對小鼠的急性毒性反應(yīng)研究

【摘要】目的:觀察廣西莪術(shù)水提取物對小鼠的急性毒性反應(yīng)。方法:采用灌胃法給予小鼠1日內(nèi)最大濃度及最大體積廣西莪術(shù)水提取物，觀察及檢測小鼠給藥后7d的情況。結(jié)果:實驗小鼠最大耐受藥量為原生藥材224g生藥/Kg，為成人臨床用藥最大量的794.3倍，未出現(xiàn)任何毒性反應(yīng)。結(jié)論:廣西莪術(shù)入水煎劑用藥安全無毒性。

【關(guān)鍵詞】廣西莪術(shù);急性毒性;小鼠

【中圖分類號】R-332【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】A【文章編號】1007-8517(2010)12-193-2

廣西莪術(shù)為姜科植物廣西莪術(shù)Curcuma kwangsiensis S.G.Lee et C.F. Liang 的干燥根莖， 具有行氣破血、消積止痛的功效，臨床常用于血氣心痛、飲食積滯、脘腹脹痛、血滯經(jīng)閉、痛經(jīng)、跌打損傷。本實驗通觀察廣西莪術(shù)水提取物的急性毒性反應(yīng)，以評價廣西莪術(shù)水提取物的其安全性，為臨床及研究提供依據(jù)。

1實驗材料

1.1藥物廣西莪術(shù)由廣西民族醫(yī)院藥劑科提供，經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院中藥鑒定教研室鑒定為姜科植物廣西莪術(shù)Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang的根莖，經(jīng)水提取濃縮成可供小鼠灌胃的最大濃度的稠膏，相當(dāng)于2.8g生藥/mL。

1.2動物清潔級昆明種小鼠，體重18±2g，由廣西醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供，動物許可證號:2009A055。

2實驗方法

2.1半數(shù)致死量實驗(LD50)清潔級昆明種小鼠20只， 雌雄各半，動物禁食不禁水12小時后，按體積0.4ml/10g灌胃給藥(廣西莪術(shù)水提取物2.8g生藥/mL)，灌胃后常規(guī)飼養(yǎng)，觀察小鼠死亡情況。如果小鼠大于半數(shù)量死亡，則調(diào)整減少給藥劑量重復(fù)實驗，直至找到實驗小鼠半數(shù)死亡時的給藥劑量范圍。

2.2最大耐受量試驗清潔級昆明種小鼠40只， 雌雄各半，隨機分空白對照組(A)和廣西莪術(shù)實驗組(B)，每組20只。小鼠禁食不禁水12小時后給藥，B組按體積0.4ml/10g灌胃給藥(廣西莪術(shù)水提取物2.8g生藥/mL)兩次，兩次間隔6小時，間隔期禁食不禁水，A組則給予等體積的生理鹽水，給藥后動物正常飲食。連續(xù)觀察小鼠7d后處死尸檢，觀察各鼠主要臟器(肝、心、脾、肺、腎)，看是否有任何異常改變。

2.3觀察項目LD50實驗觀察小鼠死亡情況，最大耐受量試驗則在小鼠給藥前和給藥后的第1、3、5、7d監(jiān)測小鼠體重變化，并觀察小鼠的行動，反射活動，飲水量，大、小便，存活情況等。

2.4實驗數(shù)據(jù)結(jié)果及統(tǒng)計學(xué)處理實驗計量資料以-x±S表示， 用組間t檢驗異顯著性，用統(tǒng)計軟件SPSS13.0處理，P>0.05時表示組間比較沒有顯著性差異。

3實驗結(jié)果

3.1LD50結(jié)果最大體積最大濃度的廣西莪術(shù)水提取物給藥后，小鼠活動、精神狀態(tài)、飲食正常，7d內(nèi)未見小鼠死亡及其它異常發(fā)生，因受試藥物濃度和體積的限制，所以一次給藥無法測出LD50。處死小鼠后尸檢，觀察各鼠主要臟器(肝、心、脾、肺、腎)未發(fā)現(xiàn)任何異常改變。因此，無法測出該中藥的半數(shù)致死量(LD50)，改做小鼠最大耐受量試驗。

3.2最大耐受量試驗結(jié)果結(jié)果小鼠無一死亡，在第2次給藥后，B組小鼠停止進(jìn)食，活動減少，但第2d起能恢復(fù)正常進(jìn)食，活動也無異。所有小鼠體重有所增長，毛色光亮，皮毛無疏松，口、眼、鼻、耳無異常分泌物，大小便正常。7d后處死動物，肉眼剖檢心、肝、脾、肺、腎、胃腸等重要臟器，結(jié)果均未見異常改變，對照組和實驗組體重比較無顯著性差異(P>0.05)。見表1、表2

表1 廣西莪術(shù)水提取物最大耐受量試驗小鼠反應(yīng)情況

Tab 1.activite of mice with maximally tolerated dose Curcuma extract

組別性別n四肢活動體毛引水糞便尿液死亡

A組雄10----------0

雌10----------0

B組雄10----------0

雌10----------0

注:-- 代表正常

4討論

莪術(shù)中主要含有揮發(fā)油、姜黃素以及多糖類成分，藥理作用主要表現(xiàn)為抗腫瘤、抗病毒、保肝、抗肝纖維化、抗炎鎮(zhèn)痛等方面[1][2][3]，這些報道多集中在莪術(shù)油上。莪術(shù)在臨床應(yīng)用上多入湯劑，湯劑是中藥治病的主要劑型，具有易吸收，療效快，并能結(jié)合辨證施治，隨證加減，全面兼顧的優(yōu)點，莪術(shù)入湯劑煎煮時則不可避免的有揮發(fā)油流失，但莪術(shù)水提取液中尚含有姜黃素類化合物、多糖、β-谷甾醇、棕櫚酸及多種微量元素等成分[4]，研究表明，莪術(shù)水提液還具有免疫調(diào)節(jié)、抑制血小板聚集的功能[5] [6]，水提醇沉液對體內(nèi)

(下轉(zhuǎn)第199頁)

(上接第193頁)

血栓有顯著抑制的作用[7]。廣西莪術(shù)為廣西產(chǎn)大宗中藥材，所以，通過對廣西莪術(shù)水提取液的急性毒性研究，對于指導(dǎo)臨床中醫(yī)師掌握莪術(shù)入藥用量具有積極的指導(dǎo)意義。

文獻(xiàn)報道廣西莪術(shù)的乙醇提取物小鼠口服的LD50為86.8±12g生藥/Kg[8]，在本實驗中，廣西莪術(shù)水提取物L(fēng)D50未能測出，而其一日內(nèi)分兩次給藥于小鼠的最大給藥量為224g生藥/Kg，為成人臨床用藥最大量的794.3倍(按70Kg成人最大用藥量為每天20g計算)。實驗組動物與空白對照組動物在七天內(nèi)行的、體重增長等方面沒有顯著性差異，毛色，皮毛，口、眼、鼻、耳無異常分泌物及大小便等也屬正常范圍，7d后處死動物，肉眼剖檢心、肝、脾、肺、腎、胃腸等重要臟器，結(jié)果均未見異常改變。按體重計算，如果小鼠1d內(nèi)能夠承受的最大給藥量相當(dāng)于成人臨床日用量的100倍以上時，則認(rèn)為該藥比較安全[9]，本實驗結(jié)果表明廣西莪術(shù)入水煎劑用藥是比較安全的，從而為臨床中醫(yī)師掌握莪術(shù)入藥安全用量提供了實驗依據(jù)。

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