nm23基因在消化道腫瘤研究中的應(yīng)用

【關(guān)鍵詞】nm23基因;消化道腫瘤;應(yīng)用

【中圖分類號(hào)】R735【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】1007-8517(2010)12-024-2

nm23基因是1988年由Steeg首次從小鼠黑色素瘤K-1735細(xì)胞株中用消減雜交法分離出來的能抑制肺癌轉(zhuǎn)移的相關(guān)基因。原位雜交發(fā)現(xiàn)，其在低轉(zhuǎn)移株中的表達(dá)強(qiáng)度為高轉(zhuǎn)移株的10倍。人類nm23基因有兩種，即nm23-H1和nm23-H2，其編碼蛋白與核苷二磷酸激酶(NDPK)的A、B亞基分別相對(duì)應(yīng)，編碼蛋白的氨基酸序列與NDPK的同源性分別為89%和97%，二者之間的同源性為88%[1]。人類nm23基因家族數(shù)目有8個(gè)，即nm23-H1、nm23-H2、DR-nm23、nm23-H4、nm23-H5、nm23-H6、nm23-H7、nm23-H8[2]，其中研究最多的是主要與腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)的nm23-H1和調(diào)控c-myc和PDGF基因轉(zhuǎn)錄的nm23-H2。周清華等發(fā)現(xiàn)，nm23基因水平的低表達(dá)或雜合性缺失與多種腫瘤的高轉(zhuǎn)移潛力、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良有關(guān)，而且常伴有一些腫瘤侵襲相關(guān)分子的異常。還有研究表明，nm23在某些腫瘤基因組中表現(xiàn)為丟失、擴(kuò)增和突變，并與轉(zhuǎn)移有關(guān)，起轉(zhuǎn)移抑制基因的作用，但在轉(zhuǎn)移能力不同腫瘤中的表達(dá)并非一致。本文就nm23基因在消化道腫瘤研究中的應(yīng)用概述如下。

1食管癌

陳峰等[3]報(bào)道，食管癌組織標(biāo)本中nm23-H1蛋白陽性表達(dá)率為54.1%(33/61)，與性別、年齡、腫瘤部位、大小、病理類型和浸潤(rùn)程度無關(guān);食管癌旁無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組nm23-H1陽性表達(dá)率為61.5%(32/52)，顯著高于有轉(zhuǎn)移組(11.1%，1/9);還與術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)有關(guān)，nm23-H1陽性表達(dá)組術(shù)后生存期明顯長(zhǎng)于nm23-H1陰性表達(dá)組(p<0.01)。結(jié)果表明:食管癌伴腫瘤轉(zhuǎn)移者nm23-H1蛋白的陽性表達(dá)率明顯低于無腫瘤轉(zhuǎn)移者，且高表達(dá)對(duì)食管癌轉(zhuǎn)移有一定的作用，其低表達(dá)預(yù)示患者術(shù)后腫瘤轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)的可能性大，生存期短，預(yù)后差。因此，檢測(cè)nm23-H1的表達(dá)有助于了解食管癌生物學(xué)行為和判斷預(yù)后。

2胃癌

Nakayama等分別用Southern、Northern及Western印跡法研究胃癌患者nm23基因表達(dá)，結(jié)果80%的有基因雜合性丟失(LOH)，84%的原發(fā)灶mRNA表達(dá)高于移行組織，但與臨床病理特征無密切關(guān)系。用免疫組化法則發(fā)現(xiàn)有轉(zhuǎn)移的胃癌患者，52%的轉(zhuǎn)移灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)nm23表達(dá)低于原發(fā)灶，72%的肝轉(zhuǎn)移灶呈弱陽性，提示nm23過度表達(dá)與胃癌形成有關(guān)，降低則促進(jìn)轉(zhuǎn)移。Kodera等[4]在31例胃癌中，T3、T4期胃癌nm23-H1mRNA顯著降低，且低表達(dá)者生存期縮短(p<0.02)。施秀清等[5]用原位分子雜交技術(shù)(ISH)檢測(cè)112例胃癌組織中nm32-H1mRNA表達(dá)，結(jié)果胃癌腫瘤區(qū)、移行區(qū)及癌旁區(qū)的陽性表達(dá)率分別為42.9%、27.6%和18%，呈梯度下降趨勢(shì);無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌的表達(dá)陽性率為87.2%(41/47)，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者為10.8%(7/65);隨訪88例中≥3年生存者中68.6%(24/35)nm23-H1mRNA陽性表達(dá)，<3年生存者為37.9%(11/29)。nm23-H1mRNA陽性表達(dá)在胃癌患者的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、非轉(zhuǎn)移中差異顯著(p<0.01)。結(jié)合臨床資料綜合研究顯示，nm23-H1mRNA表達(dá)率的降低與胃癌患者淋巴結(jié)的高轉(zhuǎn)移、生存期短有關(guān)。反之，nm23-H1mRNA表達(dá)率的升高與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，與患者的生存期呈正相關(guān)，與文獻(xiàn)報(bào)告結(jié)果一致[4，6]。因此檢測(cè)nm23，對(duì)胃癌患者的診療，及術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)有指導(dǎo)意義。

3肝癌

Yamaguchi等[7]報(bào)道，nm23-H1在肝內(nèi)轉(zhuǎn)移HCC患者中的陽性表達(dá)率為26.7%，而陰性者為70%(p<0.05);從生存曲線看，nm23表達(dá)陽性組3年生存率達(dá)62.5%，陰性組無2年以上生存者(p<0.01)。結(jié)果提示nm23與HCC的肝內(nèi)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)，低表達(dá)者生存期短。Lizuka[8]用定量RT-PCR研究30例HCC手術(shù)標(biāo)本，僅發(fā)現(xiàn)nm23-H1與肝內(nèi)轉(zhuǎn)移和TNM分期呈明顯負(fù)相關(guān)，且nm23-H1mRNA含量與其表達(dá)水平一致。Boix發(fā)現(xiàn)腫瘤組織中nm23-H1mRNA的過度表達(dá)與小而獨(dú)立的HCC手術(shù)切除后的低復(fù)發(fā)有關(guān)。張松平等[9]用免疫組化法對(duì)104例HCC進(jìn)行nm23-H1基因檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)HCC陽性率為51.9%，其陽性表達(dá)與癌旁有無肝硬化(44.83%比70.59%)及門靜脈癌栓其nm23陽性組30.43%(14/46)比nm23陰性組72.22%(26/36)。nm23在肝癌切除術(shù)后無瘤生存率大于5-10年以上病例中的陽性率達(dá)80%(24/30)，而術(shù)后12-32個(gè)月復(fù)發(fā)病例中的陽性率僅26.09%。故認(rèn)為nm23-H1在肝癌內(nèi)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)較nm23-H2重要，是一個(gè)獨(dú)立的重要預(yù)后指標(biāo)。

4膽道腫瘤

Lee等[10]報(bào)道，67%低分化膽囊腺癌和50%中等分化腺癌中nm23-H1蛋白表達(dá)缺乏，與慢性膽囊炎組相比差異顯著(p=0.002)，且表達(dá)水平與患者生存期呈正相關(guān)(R分別為0.687，0.652，相應(yīng)P值為0.01，0.016);在膽囊良性病變中未發(fā)現(xiàn)nm23降低。而所有膽總管癌、67%的原位壺腹癌和43%的壺腹癌中，nm23呈中等以上表達(dá)。Fujii等[11]報(bào)道72%(78/107)膽囊癌組織中nm23蛋白呈陽性表達(dá)，而正常膽囊黏膜的nm23免疫活性非常弱。其陽性表達(dá)與腫瘤的組織類型、浸潤(rùn)深度(或腫瘤分期)及轉(zhuǎn)移無明顯關(guān)系。不同作者研究結(jié)果不一致，有待于進(jìn)一步研究。

5胰腺癌

Nanamori等[12]用免疫組化法檢測(cè)31例根治性胰腺癌手術(shù)標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)nm23/NDPK陽性表達(dá)中77%的有遠(yuǎn)方轉(zhuǎn)移，與陰性組相比差異非常顯著(p<0.02)。47例浸潤(rùn)性胰腺導(dǎo)管細(xì)胞癌中66%呈強(qiáng)陽性，而12例良性或非浸潤(rùn)性胰腺外分泌瘤中僅17%陽性(p<0.01);陽性組生存期短(p<0.03)，且與組織分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(p<0.05)及核仁形成區(qū)嗜銀細(xì)胞計(jì)數(shù)(p<0.01)呈正相關(guān)。李玉軍等[13]報(bào)道，47例胰腺癌組織中nm23基因產(chǎn)物NDPK的表達(dá)率為59.6%(28/47)，組織學(xué)為Ⅰ級(jí)病例NDPK的陽性率(73.3%)明顯高于Ⅲ級(jí)者(41.7%，P<0.05);無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者的陽性率(80.8%)顯著高于有轉(zhuǎn)移者(33.3%，p<0.01);NDPK表達(dá)陽性者術(shù)后1年生存率(25.0%)明顯高于陰性者(0%，p<0.05);NDPK陽性率與胰腺癌病理類型無關(guān)。結(jié)果表明，nm23基因?qū)σ认侔┺D(zhuǎn)移具有抑制作用，NDPK表達(dá)情況有助于了解胰腺癌的生物學(xué)行為，并可作為判斷患者預(yù)后的生物學(xué)指標(biāo)。

6大腸癌

Wang等用Southern印跡法及RT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)，20例大腸癌患者中，8例有淋巴結(jié)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移者中4例有等位基因丟失或突變，12例無轉(zhuǎn)移者無上述變化。nm23-H1等位基因缺失與低分化程度密切相關(guān)，且生存期短。劉勇等[14]報(bào)道大腸癌組織中nm23陽性率為71.6%，其低表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)，在Ⅳ型膠原表達(dá)不同的腸癌中nm23-H1的表達(dá)無明顯差異。齊秀恒等[15]用流式細(xì)胞術(shù)(FCM)測(cè)定64例大腸癌患者nm23和CD44基因蛋白，以熒光指數(shù)(FI)表示，結(jié)果大腸癌細(xì)胞nm23FI值顯著低于正常大腸黏膜(P<0.001)，說明大腸癌的發(fā)生與nm23基因的低表達(dá)有關(guān);Dukes'C、D期FI值(0.80±0.08)低于Dukes'A、B期FI值(0.89±0.10，P<0.05);臨床上浸潤(rùn)型和潰瘍型大腸癌均較隆起型的浸潤(rùn)性強(qiáng)，轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)率高，其FI值前者(0.80±0.08)明顯低于后者(0.88±0.10，P<0.05)，表明nm23在大腸癌局部發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移中起負(fù)調(diào)控作用，CD44基因蛋白起正調(diào)控作用。nm23基因蛋白低表達(dá)和CD44基因蛋白高表達(dá)的大腸癌預(yù)后差。趙川等[16]報(bào)道nm23在結(jié)直腸癌淋巴結(jié)無轉(zhuǎn)移組顯著高于有轉(zhuǎn)移組(P<0.05)，與結(jié)直腸癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。還顯示在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的結(jié)直腸癌中，nm23與c-erbB-2的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)，提示c-erbB-2和nm23基因蛋白異常表達(dá)在結(jié)直腸癌的發(fā)生發(fā)展和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起重要作用，聯(lián)合檢測(cè)對(duì)判斷結(jié)直腸癌的預(yù)后和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1] 陳宇霞，王一飛.nm23基因與肺癌的研究進(jìn)展的影響[J].中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2004.

[2] 陳峰，蔣耀光，高奉尋.食管癌組織中nm23-H1蛋白表達(dá)及其臨床意義[J].實(shí)用癌癥雜志，1998.

[3] 施秀清，李功，倪燦榮，等.胃癌抗轉(zhuǎn)移癌基因nm23-H1mRNA的表達(dá)意義[J].新消化病學(xué)雜志，1997.