基因治療 肝癌患者的福音

一直以來，原發(fā)性肝癌發(fā)展迅速，生存期短，并發(fā)癥多，生活質(zhì)量差，所以被公認(rèn)為“癌之王”。當(dāng)被確診為肝癌后，患者所面對(duì)的心理挑戰(zhàn)是常人所不能想像的。目前肝癌患者最常選擇的治療方法主要有手術(shù)切除、化療和放療，今天我們?yōu)榇蠹医榻B一種最新的治療方法——基因療法。

腫瘤直徑小于3厘米的小肝癌通常以手術(shù)切除為主，對(duì)于不能切除的肝癌可以采用化療、放療、介入的方法進(jìn)行治療。比起手術(shù)來，介入治療屬于微創(chuàng)手術(shù)，其治療過程較為簡單、安全，病人痛苦小，出血少、恢復(fù)快等多種優(yōu)點(diǎn)，因此也受到了患者的認(rèn)可。肝移植雖是肝癌患者獲得根治性治愈的唯一希望，但根據(jù)米蘭標(biāo)準(zhǔn)，如果肝癌患者的單個(gè)腫瘤直徑超過3厘米，多個(gè)腫瘤累積直徑超過5厘米時(shí)，不建議患者實(shí)施肝移植。

手術(shù)、化療、放療、介入和肝移植，這些方法雖有其優(yōu)點(diǎn)，但又存在各自的局限性，不能完全滿足患者的需要。為此，無數(shù)醫(yī)學(xué)專家又開始尋求新的理想的治療方法。

現(xiàn)在已知許多疾病是由于基因結(jié)構(gòu)與功能發(fā)生改變所引起的。癌癥實(shí)際上也是一種與基因有關(guān)的疾病，癌癥的發(fā)生和發(fā)展與基因的改變有著密切的關(guān)系，基因治療針對(duì)的就是腫瘤發(fā)生的根源。因此，基因治療作為腫瘤治療的新方法已逐漸進(jìn)入人們的視野，并且正在逐漸進(jìn)入臨床。但大多數(shù)人對(duì)基因治療的概念還不是十分了解，聽上去好像還有點(diǎn)深?yuàn)W。那么，什么是基因治療，它的作用機(jī)理是什么，能治療哪些疾病，效果如何，與其他治療相比有什么優(yōu)勢(shì)，它今后的發(fā)展趨勢(shì)和臨床應(yīng)用前景會(huì)是什么樣的?

什么是基因治療

基因治療簡單說就是用基因治病。癌癥就是某些基因的突變?cè)斐傻?。?yīng)用正常的或野生型病毒的基因，校正或者替換人體細(xì)胞或組織內(nèi)有缺陷的或致病的基因，使人體細(xì)胞依舊發(fā)揮正常的功能，來達(dá)到防治腫瘤的目的。專業(yè)上將所用的這種正常的或野生型病毒的基因稱為目的基因，把人體內(nèi)的細(xì)胞基因稱為宿主細(xì)胞基因，腫瘤細(xì)胞叫靶細(xì)胞。將目的基因?qū)氚屑?xì)胞以后，目的基因與宿主有缺陷的或致病的基因整合在一起，使目的基因成為宿主細(xì)胞遺傳物質(zhì)的一部分。這種方法又叫病毒載體方法。

腫瘤的基因治療

腫瘤基因治療技術(shù)目前分為兩大類：一類稱之為替代技術(shù)或添加技術(shù)，另一類是基因的封閉技術(shù)。臨床上選用的方法主要有腫瘤自殺基因治療和P53基因治療兩種。

腫瘤自殺基因就是將治療基因用各種方法送入到腫瘤或異常細(xì)胞中，來抑制腫瘤生長或使腫瘤細(xì)胞死亡。治療基因包括抑癌基因和誘使腫瘤死亡的基因?；蚍忾]技術(shù)是通過封閉或降解腫瘤基因達(dá)到治療的目的，如P53腫瘤抑制基因。

治療基因是怎樣進(jìn)入癌細(xì)胞的

將目的基因?qū)氲桨屑?xì)胞中的方法很多，大體上可分為物理學(xué)方法、化學(xué)方法，融合方法以及病毒載體方法四大類。目前絕大多數(shù)基因治療采用的是病毒載體方法，因?yàn)椴《据d體方法的基因轉(zhuǎn)移效率很高，在合適條件下可達(dá)到100％，因而更受重視。

基因的導(dǎo)入方法有點(diǎn)像火箭發(fā)射，用一種經(jīng)過改造的病毒作為火箭，把治療基因“發(fā)射”到戒備森嚴(yán)的癌細(xì)胞內(nèi)部，干擾其DNA的復(fù)制，從而讓癌細(xì)胞自殺?；蛩幬飳?duì)癌細(xì)胞有一種特殊的親和力，進(jìn)入人體后直接奔向癌細(xì)胞，與癌細(xì)胞親密結(jié)合，把癌細(xì)胞殺死在萌芽狀態(tài)。

下面我們通過腫瘤自殺基因的導(dǎo)入過程來了解病毒載體方法就更容易懂了。

腫瘤自殺基因

腫瘤自殺基因又稱為TK基因。目前，經(jīng)美國食品與藥品管理局(FDA)批準(zhǔn)的類似TK基因制劑臨床試驗(yàn)在全球已經(jīng)超過60個(gè)，用于多種腫瘤的治療。自殺基因有很多種，北京佑安醫(yī)院采用的是重組腺病毒一胸苷激酶基因制劑聯(lián)合更昔洛韋的方法。重組腺病毒～胸苷激酶基因簡稱ADV-TK基因(這是一個(gè)專業(yè)術(shù)語，念起來有點(diǎn)繞口，知道就行了，下面還會(huì)多次提到，慢慢就熟悉了。)，胸苷激酶基因是從經(jīng)過基因工程改造的單純皰疹病毒里面抽出一個(gè)基因片段，經(jīng)過改造后成為專門攻擊癌癥細(xì)胞的基因，這是要?dú)⑦M(jìn)腫瘤的炮彈，由“火箭”重組腺病毒將其運(yùn)送到癌細(xì)胞中，有目標(biāo)地直接插入到癌細(xì)胞的DNA中，破壞癌細(xì)胞的DNA，破壞后癌細(xì)胞的DNA是不完整的，不但不能再繼續(xù)生長，而且會(huì)自殺死亡。

ADV-TK對(duì)肝癌、肺癌、胃癌、食管癌、上皮癌等14種腫瘤細(xì)胞均有明顯的殺傷作用，抑瘤率可高達(dá)80％～90％。

基因治療肝癌的給藥途徑

臨床采用的給藥途徑主要有三種方法：瘤內(nèi)注射、肝動(dòng)脈灌注、門靜脈注射。

瘤內(nèi)注射是在B超的引導(dǎo)下，通過經(jīng)皮穿刺將基因制品直接導(dǎo)入腫瘤局部。這種方法目的性強(qiáng)、操作簡便、直觀的優(yōu)點(diǎn)，注射針頭與身體的接觸面積小，治療所引起的免疫反應(yīng)也很小。

肝動(dòng)脈灌注，通過介入的方式進(jìn)行動(dòng)脈插管，將基因治療藥物直接注入腫瘤的供血?jiǎng)用}，藥物隨血流分布在整個(gè)腫瘤區(qū)域，使腫瘤區(qū)域和整個(gè)肝臟中的基因藥物濃度增高，增加了腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)染率。還可以用介入法經(jīng)血管留置藥盒，為基因治療藥物的多次導(dǎo)入提供了條件。

門靜脈注射，由于胃腸道腫瘤主要通過門脈循環(huán)轉(zhuǎn)移至肝臟，門靜脈對(duì)少血供的肝癌、小肝癌、門靜脈癌栓、轉(zhuǎn)移瘤、衛(wèi)星結(jié)節(jié)、大肝癌的周邊包膜的供血起重要作用，因此經(jīng)門靜脈途徑注射基因治療藥物也作為一種有效的給藥途徑。

治療中的兩個(gè)關(guān)鍵問題

高效性和靶向性是腫瘤基因治療中存在的兩個(gè)關(guān)鍵性問題。

問題一：國際上70％的抗腫瘤基因制劑采用了腺病毒負(fù)載的腫瘤自殺基因。實(shí)際上就是把重組的腺病毒和所攜帶的胸苷激酶基因片段打到癌細(xì)胞中。那么，打入多少病毒才夠呢?多了，有可能使正常細(xì)胞也攜帶該基因制劑，其結(jié)果不但殺滅腫瘤細(xì)胞，也會(huì)殺死正常細(xì)胞，嚴(yán)重時(shí)可能導(dǎo)致患者死亡。少了，就不能殺滅腫瘤細(xì)胞。因此，每次治療中使用的病毒量要根據(jù)腫瘤的大小來確定打入的基因量，過去規(guī)定基因治療中每次使用劑量最大不得超過2×10¹³病毒顆粒。另外，一次基因治療的有效時(shí)間約為20～30天，在此之后，未能殺滅的腫瘤細(xì)胞仍將繼續(xù)生長，且人體還將對(duì)基因制劑產(chǎn)生抗體，每注射一次基因，其作用可能衰減25％，幾次之后基因治療就將無效。因此，劑量和療程的準(zhǔn)確關(guān)系到治療的效果。

問題二：怎樣做到既不影響正常的人體細(xì)胞，又要準(zhǔn)確殺死腫瘤細(xì)胞。

就肝癌的基因治療來說，肝癌自殺基因療法采用的重組腺病毒載體較好地解決了這一問題，用重組腺病毒作為載體是經(jīng)過多次試驗(yàn)和和多種病毒載體的選擇后確認(rèn)的。重組腺病毒載體能攜帶外源基因(如上面提到的胸苷激酶基因片段)靶向性地整合到靶細(xì)胞基因(肝癌的基因)組中，實(shí)現(xiàn)目的基因的持久穩(wěn)定表達(dá)。

基因治療的好處

經(jīng)過腫瘤自殺基因瘤內(nèi)治療后，腫瘤的生長明顯地受到了抑制，而且正常的肝臟組織不受影響?；蛑委煂儆谖?chuàng)治療病人痛苦小，治療過程用時(shí)短，治療后臥床6～8小時(shí)后即可下床活動(dòng)。一般說來，兩個(gè)療程即可見到療效。就目前的治療效果看來，基因治療沒有什么壞處，不會(huì)使注入基因的腫瘤細(xì)胞擴(kuò)散，也不會(huì)影響肝臟的正常功能。由于腺病毒DNA不整合入宿主細(xì)胞基因組，所以對(duì)人體沒有遺傳性影響，而且作為基因載體，重組后的腺病毒具有感染效率高和安全的特點(diǎn)，成為藥物敏感基因轉(zhuǎn)導(dǎo)肝癌細(xì)胞的有效載體。

另外，它所特有的“旁觀者效應(yīng)”在治療中也起到了非常好的作用。

基因治療的應(yīng)用前景

雖然基因治療還沒有完全應(yīng)用于臨床，但在臨床的試驗(yàn)觀察中，已讓肝癌患者看到了希望，有些小肝癌患者，經(jīng)過兩個(gè)療程的基因治療后，經(jīng)手術(shù)證實(shí)癌細(xì)胞完全壞死。雖然還有些弱點(diǎn)需要克服，但基因療法與其他療法、手術(shù)治療，介入治療、化療，放療以及肝移植的聯(lián)合應(yīng)用，可以互補(bǔ)其缺點(diǎn)，相互協(xié)調(diào)，增加抗腫瘤效果，這將成為今后肝癌治療的發(fā)展方向。

基因治療，一抹絢麗的彩虹將展現(xiàn)在腫瘤患者的面前，它不僅用在肝癌的治療上，不久的將來，會(huì)用于各種癌癥的治療，將造福于更多的病人。我們期待著。