熊傳銀,朱秋玲,潘小平
(廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,廣東 廣州 510800)
基質(zhì)效應(yīng)對鉀、鈉、氯比色法測定結(jié)果的影響
熊傳銀,朱秋玲,潘小平
(廣州市花都區(qū)人民醫(yī)院檢驗科,廣東 廣州 510800)
目的:觀察基質(zhì)效應(yīng)對鉀、鈉、氯比色測定結(jié)果的影響。方法:用不同基質(zhì)的校準(zhǔn)品分別對鉀、鈉、氯進(jìn)行校準(zhǔn),再對同一批臨床標(biāo)本分別進(jìn)行測定,對檢測結(jié)果進(jìn)行差異顯著性分析及相關(guān)性分析。結(jié)果:使用人血清基質(zhì)的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)和水溶液校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后和鉀、鈉、氯檢測結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)差異(Plt;0.01);水溶液校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的檢測結(jié)果顯著高于血清基質(zhì)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的檢測結(jié)果,但兩種校準(zhǔn)方法結(jié)果相關(guān)性較好。結(jié)論:用不同基質(zhì)的校準(zhǔn)品校準(zhǔn)儀器,測定電解質(zhì)鉀、鈉、氯具有統(tǒng)計學(xué)差異,存在非常明顯的基質(zhì)效應(yīng)。
比色法;鉀;鈉;氯;基質(zhì)效應(yīng)
目前臨床實驗室測定電解質(zhì)的方法有離子選擇電極法、火焰光度法、電量法和酶法等[1],其中以電極法應(yīng)用最為廣泛。但目前與全自動生化儀配套的電極價格昂貴,而國產(chǎn)電極法電解質(zhì)分析儀多未能與全自動生化儀進(jìn)行模塊連接,大大降低了檢測效率,并且國產(chǎn)電極性能欠佳,因此在全自動生化儀上使用比色法測定電解質(zhì)項目已被越來越多的實驗室所接受。鉀、鈉的酶法測定是一類發(fā)展時間較短的新檢測方法,因其自動化程度高、檢測線性寬、結(jié)果準(zhǔn)確度高,因此近年來被臨床實驗室廣泛應(yīng)用。但比色法檢測更易受到基質(zhì)效應(yīng)的影響,導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)恒定誤差。本文使用不同基質(zhì)的校準(zhǔn)品對K+、Na+、Cl-校準(zhǔn),然后檢測同一批臨床標(biāo)本,通過觀察檢測結(jié)果了解該方法受到基質(zhì)效應(yīng)影響的程度,現(xiàn)報道如下。
1.1材料
1.1.1儀器與試劑 日本日立7600-020全自動生化分析儀。英國朗道(RANDOX)酶法檢測鉀、鈉離子試劑盒,批號分別為:鉀(PT7168)124426,鈉(NA7167)134424;英國朗道(RANDOX)化學(xué)比色法測定氯離子試劑盒,批號為:氯(CL1645)124425。
1.1.2校準(zhǔn)品 水溶液校準(zhǔn)品為RANDOX鉀、鈉、氯檢測試劑盒配套校準(zhǔn)物;血清基質(zhì)校準(zhǔn)品為英國RANDOX公司生產(chǎn)人基質(zhì)復(fù)合校準(zhǔn)品(凍干)CAL2350,批號:500UN。
1.1.3標(biāo)本 采集本院門診及住院病人靜脈血20份,立即分離血清,標(biāo)本均無溶血、黃疸、脂血,并且經(jīng)初步檢測濃度水平包括正常及異常值水平。
1.1.4其他 實驗用去離子水水質(zhì)≤1.0μS/CM;復(fù)溶用量具均經(jīng)過國家計量部門校準(zhǔn)。
1.2方法生化儀實驗參數(shù)均嚴(yán)格按照試劑盒要求設(shè)定。用復(fù)合校準(zhǔn)品分別對K+、Na+、Cl-進(jìn)行項目校準(zhǔn),以1~20號順序測定標(biāo)本,再以20~1順序測定,記錄數(shù)據(jù)。再用水溶液校準(zhǔn)品分別對K+、Na+、Cl-進(jìn)行項目校準(zhǔn),按上述方式重新測定標(biāo)本,記錄數(shù)據(jù)。
1.3統(tǒng)計學(xué)處理使用SPSS13.0統(tǒng)計軟件對以上兩組測定進(jìn)行配對t檢驗及相關(guān)性分析。Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
使用人血清基質(zhì)復(fù)合標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)后測定結(jié)果與水溶液校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后測定經(jīng)配對t檢驗,K+、Na+、Cl-三個檢測項目的t值分別為28.79、94.76、5.01,具有統(tǒng)計學(xué)差異(Plt;0.01),結(jié)果見表1。
使用水溶液校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的K+、Na+、Cl-檢測結(jié)果(Y1、Y2、Y3)顯著高于血清基質(zhì)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的檢測結(jié)果(X1、X2、X3),經(jīng)相關(guān)性分析:
項目n復(fù)合標(biāo)準(zhǔn)液水溶液標(biāo)準(zhǔn)液t值PK+403.17±0.653.72±0.7728.79lt;0.01Na+40137.82±8.24150.81±8.8194.76lt;0.01Cl-40101.53±4.45104.36±7.065.01lt;0.01
基質(zhì)效應(yīng)是指樣本中除分析物以外,所有其他成分所介導(dǎo)的分析誤差,影響分析物定量測定的準(zhǔn)確性[2]。因基質(zhì)效應(yīng)而導(dǎo)致的檢測結(jié)果的偏差稱為基質(zhì)偏差。國際標(biāo)準(zhǔn)化組織對基質(zhì)效應(yīng)所作的定義是:“除被測定物質(zhì)以外樣本的物質(zhì),它可以影響到被測物的檢測一測定結(jié)果”(ISO15189)。隨著比色法測定電解質(zhì)的越來越廣泛的應(yīng)用,基質(zhì)效應(yīng)對電解質(zhì)酶法測定的影響也越來越被人們重視。由于基質(zhì)效應(yīng)與檢測的方法及校準(zhǔn)品選擇有關(guān)[3],因此也直接導(dǎo)致定標(biāo)后測定結(jié)果出現(xiàn)偏差[4]。本實驗結(jié)果表明,在比色法測定電解質(zhì)時使用不同基質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)液進(jìn)行項目校準(zhǔn)后,其檢測結(jié)果均有統(tǒng)計學(xué)差異(Plt;0.01),雖然兩種校準(zhǔn)方式的測定相關(guān)性較好,但水溶液校準(zhǔn)品校準(zhǔn)后的檢測結(jié)果顯著高于血清基質(zhì)校準(zhǔn)品校準(zhǔn)的結(jié)果。目前市售的試劑配套校準(zhǔn)品(除免疫比濁法試劑盒外)通常是水基質(zhì)校準(zhǔn)品,與室內(nèi)質(zhì)控及被測定的人血清標(biāo)本的基質(zhì)相差較大。而水溶性標(biāo)準(zhǔn)品與血清校準(zhǔn)品相比較而言,后者的基質(zhì)更接近于新鮮人血清(臨床標(biāo)本)。雖然血清校準(zhǔn)液在制備過程中經(jīng)過過濾、透析或離子交換、添加劑等預(yù)處理后,其基質(zhì)與新鮮人血清基質(zhì)也略有差異,但相比于水溶性基質(zhì)更令人滿意。值得注意的問題是,離子檢測較其他實驗項目更為特殊,目前市售的血清基質(zhì)校準(zhǔn)品多為凍干狀態(tài),而臨床實驗室在對此類校準(zhǔn)品復(fù)溶時所用的純凈水的水質(zhì)也會對檢測結(jié)果有一定的影響,未達(dá)標(biāo)的實驗用水中含有較多外源性離子,此部分離子參與到反應(yīng)體系中將對實驗結(jié)果產(chǎn)生干擾。同時校準(zhǔn)品中各項目的量值會受到復(fù)溶時操作的影響,因此使用精密校正過的量具和保持嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牟僮鞑襟E,對于提高檢測結(jié)果的準(zhǔn)確程度至關(guān)重要。水基質(zhì)校準(zhǔn)品多由廠家直接配制,均一性及含量誤差較小,對于保證量值的溯源性具有一定的優(yōu)點。
本實驗中在復(fù)溶血清基質(zhì)校準(zhǔn)品時使用水質(zhì)、量具及復(fù)溶過程均經(jīng)過嚴(yán)格控制,以減少偶然誤差對實驗準(zhǔn)確性的影響。筆者認(rèn)為,從減少基質(zhì)效應(yīng)對比色法影響的角度上來說,合理謹(jǐn)慎地使用血清基質(zhì)校準(zhǔn)品對電解質(zhì)比色法項目進(jìn)行校準(zhǔn)更有利于減小實驗誤差。
[1]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M]. 第3版. 南京:東南大學(xué)出版社,2006:559-563.
[2]湛玉良,井新輝,李靜.校準(zhǔn)基質(zhì)對測定結(jié)果的影響[J].陜西醫(yī)學(xué)檢驗,2002,17(1):18-19.
[3]葉解民.基質(zhì)效應(yīng)及定標(biāo)方式對氯電極測定的影響[J]. 上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2002,17(1):16-18.
[4]王毓三.基質(zhì)效應(yīng)[J]. 臨床檢驗雜志,2002,20(增):112-115.
[編輯] 一 凡
R446.1
A
1673-1409(2009)02-R057-02
10.3969/j.issn.1673-1409(R).2009.02.023
2009-04-12
熊傳銀(1970-),男,湖北公安人,副主任檢驗師,碩士,從事醫(yī)學(xué)臨床檢驗工作。