維生素C對(duì)黃鱔生長(zhǎng)和非特異性免疫機(jī)能的影響

曹志華，羅靜波，余文斌

(長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434025)

維生素C對(duì)黃鱔生長(zhǎng)和非特異性免疫機(jī)能的影響

曹志華，羅靜波，余文斌

(長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，湖北 荊州 434025)

以VC磷酸酯為VC源，將平均體重為21.3 g的黃鱔(MonopterusalbusZuiew)投以VC添加量分別為0.0、50.0、100.0、200.0、400.0、600.0、800.0 mg/kg的試驗(yàn)飼料， 在(22.0±3.0) ℃ 水溫下飼養(yǎng)60 d，以探討不同VC添加水平對(duì)黃鱔生長(zhǎng)和抗病力的影響。結(jié)果顯示，飼料中的VC添加量為50.0 mg/kg時(shí)，其4周和8周的存活率與對(duì)照組相比有顯著的差異，但與其它各組間沒有明顯差異。雖然從飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率看，各組間都沒有明顯的差異，但黃鱔肝胰臟中VC的含量隨著飼料中VC添加量的增加而增加。而從其對(duì)非特異性免疫因子的影響看，飼料中VC最佳添加量在150.0～200.0 mg/kg之間。

黃鱔(MonopterusalbusZuiew)；維生素C；生長(zhǎng)率;存活率;非特異性免疫

VC是魚蝦生長(zhǎng)發(fā)育和維持正常生理功能所不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì),而且還具有提高抗應(yīng)激能力和抗病力的作用[1～4]。但魚體對(duì)VC的合成量有限，必須依靠飼料中的添加來滿足需要。目前，有關(guān)魚類VC需要量的研究較多，但由于魚的種類、研究者所用的VC劑型以及試驗(yàn)條件等的不同,得出的結(jié)果存在一定的差異[4～7]。魚蝦生長(zhǎng)的VC的需要量為一般為50～200 mg/kg，但使VC發(fā)揮抗病和抗應(yīng)激作用的添加量卻遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于生長(zhǎng)需要量[8，9]。黃鱔(MonopterusalbusZuiew)作為重要的經(jīng)濟(jì)魚類，在生產(chǎn)中被廣泛養(yǎng)殖，但有關(guān)其營養(yǎng)需要的研究資料并不全面也不系統(tǒng)，關(guān)于黃鱔對(duì)VC需要量的研究也未見報(bào)道。本研究以VC磷酸酯為VC源, 探討了不同VC添加水平對(duì)黃鱔生長(zhǎng)和抗病力的影響,為獲得黃鱔商業(yè)飼料中VC的適宜添加量提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

受試黃鱔來源于長(zhǎng)江大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院水產(chǎn)基地，體重16.8～24.3 g(平均21.3 g)，暫養(yǎng)1周后，挑選體色正常、體質(zhì)健壯、健康無病的個(gè)體用于試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)共分7組，每組3個(gè)平行，共計(jì)21個(gè)水箱(規(guī)格為55 cm×35 cm×45 cm，箱中放入黑色塑料袋以供黃鱔藏身，水深15 cm左右)，每箱放魚30尾。各組試驗(yàn)魚分別飼喂在基礎(chǔ)飼料中添加不同比例維生素C磷酸酯(羅氏公司生產(chǎn),有效含量為35%)的飼料(其中VC添加量分別為0.0(I ，對(duì)照)、50.0(Ⅱ)、100.0(Ⅲ)、200.0(Ⅳ)、400.0(Ⅴ)、600.0(Ⅵ)、800.0 mg/kg(Ⅶ))，各組試驗(yàn)飼料原料組成和營養(yǎng)成分含量詳見表1。各組試驗(yàn)魚每天分別按其體重的2～3%投喂對(duì)應(yīng)組別飼料1次，1 h后清除箱中的污物，并換掉箱中2/3的水。試驗(yàn)用水為充分曝氣的自來水，飼養(yǎng)期間水溫控制在23～25 ℃ ，充氣泵間歇增氧(每隔45 min增氧10 min)。連續(xù)飼養(yǎng)60 d。

1.3 指標(biāo)的測(cè)定與計(jì)算

試驗(yàn)進(jìn)行到第4周和第8周時(shí)，各進(jìn)行1次稱重和計(jì)數(shù)。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定和計(jì)算。

增重率(%)=[(終末體重-初始體重)/初始體重]×100

成活率(%)=(實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)蝦尾數(shù)÷實(shí)驗(yàn)開始時(shí)尾數(shù))×100

表1 各組試驗(yàn)飼料原料組成和營養(yǎng)成分含量Table 1 Ingredients and proximate compositions of the experimental diets

注：各組飼料原料粉碎過60目篩,微量成分采取逐級(jí)擴(kuò)大法添加與大原料混合均勻后,用螺桿制粒機(jī)擠壓成型,風(fēng)干后放冰箱中冷凍備用。

飼料系數(shù)(FCR,%)=[攝食量÷(終末體重-初始體重)]×100

蛋白質(zhì)效率(PER,%)=[(終末體重-初始體重)÷(餌料攝食量×蛋白質(zhì)含量)]×100

黃鱔肝胰臟中VC含量的測(cè)定采用2,4 二硝基苯肼法[10];白細(xì)胞吞噬活性和抗菌活力及溶菌酶活力的測(cè)定方法參見文獻(xiàn)[7]。

1.4 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2003對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料中VC添加水平對(duì)黃鱔生長(zhǎng)、存活率的影響

表2 各試驗(yàn)組黃鱔的生長(zhǎng)和存活情況Table 2 Growth and survival of field rice eel of different experimental groups

注：表中數(shù)據(jù)為平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(n=3);同列數(shù)據(jù)后不同字母表明組間差異顯著(Plt;0.05 )，表3、表4同。

從表2結(jié)果可以看出，試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，在試驗(yàn)前期(4 周)，不同的VC添加水平對(duì)黃鱔的增重率產(chǎn)生顯著影響(Plt;0.05),但各試驗(yàn)組之間沒有明顯差異，而在試驗(yàn)后期(8 周)，影響并不顯著。 但VC對(duì)黃鱔的存活率無論在試驗(yàn)前期和試驗(yàn)后期都產(chǎn)生顯著影響(Plt;0.05)。

2.2飼料中VC添加水平對(duì)黃鱔飼料利用及肝胰臟中VC含量的影響

飼料中添加VC磷酸酯在試驗(yàn)前期和后期對(duì)黃鱔飼料利用和肝胰臟中VC含量的影響結(jié)果見表3。從表3可以看出,在整個(gè)試驗(yàn)期間, VC添加水平對(duì)飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率沒有影響(Pgt;0.05)。而VC在黃鱔肝胰臟中的含量隨著飼料中VC添加水平的提高而明顯增加 (Plt;0.05), 對(duì)照組的黃鱔肝胰臟中VC含量最低, Ⅶ組的肝胰臟VC含量最高。

表3 各試驗(yàn)組黃鱔飼料利用率及肝胰臟VC含量Table 3 Feed utilization and hepatopancreas ascorbic acid concentration of field rice eel of different experimental groups

2.3 飼料中VC添加水平對(duì)黃鱔白細(xì)胞吞噬活性、血清溶菌酶活性和抗菌活性的影響

表4 各試驗(yàn)組黃鱔的白細(xì)胞吞噬活性、血清溶菌酶活性和抗菌活性Table 4 The phagocytic activity of leucocytes,serum lysozyme activityand antibacterial activity of field rice eel of different experimental groups

采用不同VC添加水平的飼料飼喂后，各試驗(yàn)組黃鱔白細(xì)胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性和抗菌活性的測(cè)定結(jié)果見表4。由表4可知,當(dāng)飼料中VC的添加量在50.0～400.0 mg/kg 時(shí),隨著VC添加量的增加，黃鱔血液白細(xì)胞的吞噬活性有逐步提高的趨勢(shì),但沒有顯著差異;當(dāng)飼料中VC添加量在400. 0～600.0 mg/kg 時(shí)，白細(xì)胞的吞噬百分比和吞噬指數(shù)也無顯著差異，但與前3 組相比有顯著差異(Plt;0.05) ,而Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ 3 組間沒有顯著差異。溶菌酶活性在VC添加量為0.0、50.0、100.0 mg/kg的3組間沒有顯著差異，在VC添加量為400.0、600.0 mg/kg的組間也沒有顯著差異,但與Ⅰ、Ⅱ組差異顯著(Plt;0.05) 。黃鱔血清抗菌活性隨著VC的增加而呈現(xiàn)上升趨勢(shì)。當(dāng)添加量為400.0～800.0 mg/kg時(shí)，抗菌活性最大。

3 討論

研究表明，不同養(yǎng)殖魚類對(duì)飼料中VC的最適免疫需要量不同[1]。VC需要量分別為60 mg/kg和1 000 mg/kg時(shí)，能促進(jìn)斑點(diǎn)叉尾鮰和虹鱒傷口愈合，高劑量VC能顯著提高虹鱒溶菌酶活性，增強(qiáng)對(duì)病毒、細(xì)菌、寄生蟲的抵抗力，促進(jìn)虹鱒抗體的產(chǎn)生，且感染弧菌的虹鱒死亡率隨VC添加量增加而降低[8，11，12]。本研究結(jié)果表明,VC對(duì)黃鱔生長(zhǎng)前期的生長(zhǎng)作用顯著,而對(duì)生長(zhǎng)后期的作用不顯著。VC對(duì)黃鱔不同階段生長(zhǎng)添加的影響結(jié)果表明,黃鱔生長(zhǎng)前期對(duì)VC的需要表現(xiàn)在生長(zhǎng)發(fā)育上,在黃鱔早期階段需要更多的VC以滿足快速生長(zhǎng)及機(jī)體代謝的需要,而到后期VC的作用主要表現(xiàn)在提高黃鱔抗應(yīng)激和抗病力方面[7]。飼料中VC添加50.0 mg/kg時(shí)增重率與VC水平進(jìn)一步提高時(shí)增重率沒有明顯差異, 這一結(jié)果表明，就增重率而言，飼料中添加50.0 mg/kg VC可以滿足黃鱔對(duì)生長(zhǎng)的要求。無論在生長(zhǎng)前期和生長(zhǎng)后期VC都能顯著提高黃鱔的成活率, 用缺乏VC的飼料喂黃鱔2.5周表現(xiàn)出較高的死亡率，而隨著飼料中VC水平的提高，各組間成活率沒有顯著差異。就生長(zhǎng)而言，最合適的VC的需要量在50.0 mg/kg。而考慮到VC對(duì)抗病表現(xiàn)出來的一定的作用，其合適的添加量為50.0～200.0 mg/kg。

[1]艾慶輝，麥康森，王正麗，等．VC對(duì)魚類營養(yǎng)生理和免疫作用的研究進(jìn)展[J]．水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2005，29(6)：857～892.

[2]李桂峰，錢沛鋒， 孫際佳，等．VC對(duì)胡子鯰血清免疫相關(guān)酶活性的影響[J]．大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，(4)：112～115.

[3]王吉橋,王文輝,李文寬.飼料蛋白質(zhì)和維生素C含量對(duì)黃顙魚生長(zhǎng)和免疫力的影響[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2005，29(4):512～518.

[4]宋學(xué)宏，蔡春芳，潘新法,等.用生長(zhǎng)和非特異性免疫力評(píng)定異育銀鯽VC需要量[J].水產(chǎn)學(xué)報(bào)，2002，26(4)：351～357.

[5]李桂峰，錢沛鋒，孫際佳,等.VC對(duì)胡子鯰血清免疫相關(guān)酶活性的影響[J].中國水產(chǎn)科學(xué)，2001，5(1)：43～45.

[6]周立斌,張 偉,王安利,等.飼料VC對(duì)花鱸(Lateolabraxjaponicus)幼魚生長(zhǎng)和免疫的影響[J]. 海洋與湖沼, 2008, (6) ：671～676.

[7]曹志華,文 華,溫小波,等. VC對(duì)黃鱔非特異性免疫機(jī)能的影響[J]. 長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版)農(nóng)學(xué)卷, 2008, (4):41～44.

[8]姜 俊,周小秋. VC營養(yǎng)與魚類免疫[J]. 飼料工業(yè), 2003, 24(2):40～45.

[9]文 華,嚴(yán)安生,雍文岳,等. 飼料VC水平對(duì)草魚的免疫功能和抵抗病菌感染的影響[J]. 飼料工業(yè), 2005, 26(18) : 56～59.

[10]《生物化學(xué)》編審小組.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)[M].北京：人民衛(wèi)生出版社,1987.111～112.

[11]謝一榮,吳銳全,謝 駿，等.VC對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)與非特異性免疫的影響[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào), 2007, (4) :249～254.

[12]李志華,王軍霞,謝 松.虹鱒的營養(yǎng)研究與進(jìn)展[J].水產(chǎn)科學(xué)2004,23(2):41～43.

2009-05-22

國家科技部資助項(xiàng)目(2003EG134172)

曹志華(1966-)，女，湖北監(jiān)利人，農(nóng)學(xué)碩士，副教授，主要從事動(dòng)物營養(yǎng)研究.

10.3969/j.issn.1673-1409(S).2009.03.008

S963.73+1;Q959.482

A

1673-1409(2009)03-S027-03