學(xué)生在顯微鏡實(shí)驗(yàn)教學(xué)中存在問題分析及對(duì)策

摘要：顯微鏡的正確使用直接關(guān)系到觀察對(duì)象的準(zhǔn)確指認(rèn)。文章結(jié)合實(shí)驗(yàn)教學(xué)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，分析了實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生使用顯微鏡存在的問題及產(chǎn)生的原因，對(duì)相關(guān)問題提出了相應(yīng)對(duì)策。

關(guān)鍵詞：臨床檢驗(yàn)學(xué)；實(shí)驗(yàn)教學(xué)；顯微鏡

臨床檢驗(yàn)學(xué)（以下簡(jiǎn)稱臨檢）實(shí)驗(yàn)中對(duì)有形成分的形態(tài)觀察，顯微鏡是必需的工具。顯微鏡的種類繁多，最常使用的是普通光學(xué)顯微鏡（以下簡(jiǎn)稱顯微鏡）。實(shí)驗(yàn)時(shí)，是否正確和規(guī)范地使用顯微鏡關(guān)系到能否準(zhǔn)確指認(rèn)觀察對(duì)象。如何通過實(shí)驗(yàn)教學(xué)，讓學(xué)生很好地掌握顯微鏡的使用方法，促進(jìn)學(xué)生提高使用顯微鏡的能力，提高實(shí)驗(yàn)教學(xué)

質(zhì)量，滿足臨床實(shí)驗(yàn)對(duì)學(xué)生素質(zhì)的要求，是教學(xué)工作者應(yīng)該認(rèn)真思考、積極探索并致力解決的問題。筆者認(rèn)為，

目前實(shí)驗(yàn)教學(xué)中學(xué)生使用顯微鏡存在以下問題。

不了解顯微鏡的結(jié)構(gòu)

在臨檢實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，通過對(duì)幾個(gè)年級(jí)學(xué)生的書面問卷調(diào)查，筆者發(fā)現(xiàn)很多學(xué)生對(duì)顯微鏡結(jié)構(gòu)知道得不是很全面，如調(diào)焦系統(tǒng)的粗動(dòng)調(diào)焦（以下稱粗調(diào)）與微動(dòng)調(diào)焦（以下稱微調(diào)），反光鏡、聚光器及光圈等。不熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)，學(xué)生便很難正確和規(guī)范地使用顯微鏡，更談不上把握使用要領(lǐng)和使用能力的提高，使相關(guān)的形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)很被動(dòng)。針對(duì)這一問題，筆者在教學(xué)計(jì)劃中專門安排具體的實(shí)驗(yàn)課，詳細(xì)講解顯微鏡的結(jié)構(gòu)及其作用，同時(shí)充分利用課余時(shí)間讓學(xué)生熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)，把顯微鏡的使用作為技能考核內(nèi)容，同時(shí)也把顯微鏡的一些重要結(jié)構(gòu)及其作用的內(nèi)容在理論考試中體現(xiàn)出來。通過觀察、練習(xí)和不斷強(qiáng)化，學(xué)生能較快地熟悉顯微鏡的結(jié)構(gòu)特征，并能準(zhǔn)確地說出其相應(yīng)部件的作用，為正確、規(guī)范使用顯微鏡奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

不能正確認(rèn)識(shí)光線強(qiáng)弱對(duì)標(biāo)本觀察效果的影響

很多學(xué)生片面認(rèn)為：觀察標(biāo)本時(shí)，視野（通過顯微鏡所能看到的標(biāo)本所在的空間范圍）的光線越強(qiáng)，視野會(huì)越清楚，標(biāo)本會(huì)越清晰。其實(shí)不然。辨別和指認(rèn)標(biāo)本，主要是利用不同有形成分或同一成分不同結(jié)構(gòu)在觀察視野中的顏色或（和）亮度反差。這種反差愈大，結(jié)構(gòu)的典型特征愈突出、愈明顯、愈容易辨認(rèn)。如果視野光線太強(qiáng)，血涂片中染色的有形成分（如白細(xì)胞）各部位亮度和顏色對(duì)比反差減低，細(xì)微結(jié)構(gòu)模糊不清，不同成分的典型特征（如白細(xì)胞核染色質(zhì)、胞漿中的顆粒）不明顯，造成錯(cuò)誤的指認(rèn)；液體中有形成分（如尿液中的管型、細(xì)胞）與液體環(huán)境的亮度反差本來就小，如果光線太強(qiáng)，則很難找到要被觀察的對(duì)象，即使找到，也很難鑒別。另外，視野光線太強(qiáng)容易造成視覺疲勞。因此，觀察標(biāo)本時(shí)，視野的光線要明暗適宜。要有理想的明暗適宜的光線，需要把調(diào)節(jié)反光鏡、聚光器的位置及光圈的大小有機(jī)地結(jié)合起來。實(shí)驗(yàn)教學(xué)中除了用講解和演示的方法教會(huì)學(xué)生怎樣調(diào)節(jié)光線之外，還應(yīng)該有意識(shí)地讓學(xué)生比較視野中強(qiáng)光線和明暗適宜的光線，比較兩種光線條件下有形成分的觀察效果。

另外，學(xué)生在轉(zhuǎn)換物鏡時(shí)不注意調(diào)節(jié)光線。不同倍數(shù)的物鏡在同樣的光線下通過通光孔時(shí)，視野中的光線強(qiáng)弱會(huì)不同。高倍鏡轉(zhuǎn)低倍鏡時(shí)，視野光線變強(qiáng)；低倍鏡轉(zhuǎn)高倍鏡時(shí)，光線又變?nèi)?。因此，在轉(zhuǎn)換物鏡時(shí)要及時(shí)調(diào)節(jié)光線，才能觀察到良好的物像。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，教師要詳細(xì)講解和規(guī)范示教，更應(yīng)讓學(xué)生對(duì)比光線的變化對(duì)物像觀察的影響。通過對(duì)比，印象鮮明、深刻、持久，真正起到事半功倍的效果。

不了解調(diào)焦系統(tǒng)，盲目調(diào)節(jié)

（一）不熟悉粗調(diào)與微調(diào)的作用方向，盲目調(diào)節(jié)

顯微鏡焦距的調(diào)節(jié)需要通過粗調(diào)或微調(diào)來實(shí)現(xiàn)。粗調(diào)與微調(diào)的作用方向是一致的，只是調(diào)節(jié)的幅度大小不同而已。它們的作用方向是：使物鏡頭與標(biāo)本分離、靠攏。

熟悉和掌握粗調(diào)和微調(diào)的兩種作用的方向，對(duì)于觀察標(biāo)本時(shí)顯微鏡的調(diào)焦非常有用，特別是物鏡頭轉(zhuǎn)換（如高倍鏡轉(zhuǎn)換到低倍鏡、低倍鏡直接轉(zhuǎn)換到油鏡頭等）后，如何快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確地調(diào)節(jié)焦距獲得清晰的物象，尤其重要。在實(shí)驗(yàn)教學(xué)中，對(duì)顯微鏡的使用方法，教師應(yīng)充分利用教學(xué)資源進(jìn)行分析講解。通過示范操作，使學(xué)生了解粗調(diào)和微調(diào)的兩種作用方向；通過分組指導(dǎo)，使用教學(xué)標(biāo)本（如血涂片），讓學(xué)生實(shí)際操作，使學(xué)生熟悉并掌握粗調(diào)和微調(diào)的作用方向。學(xué)生通過反復(fù)調(diào)節(jié)、細(xì)心體會(huì)，使用顯微鏡的能力有了長(zhǎng)足的進(jìn)步，很快便能準(zhǔn)確地完成焦距調(diào)節(jié)。

另外，多數(shù)學(xué)生在剛開始使用顯微鏡觀察有形成分時(shí)，沒有很好地使用微調(diào)。其實(shí)，微調(diào)的作用不僅在于調(diào)節(jié)焦距。當(dāng)調(diào)節(jié)到觀察標(biāo)本所需的焦距而辨別和指認(rèn)有形成分時(shí)，再次使用微調(diào)非常重要。觀察標(biāo)本時(shí)，明暗適宜的光線能形成標(biāo)本的顏色、亮度反差，對(duì)微調(diào)來回地進(jìn)行小幅度的順時(shí)針和反時(shí)針調(diào)節(jié)，可以增加這種反差。因此，觀察標(biāo)本時(shí)，應(yīng)該充分利用微調(diào)，才能獲得較好的觀察效果。

（二）把物鏡頭置于離載玻片很近的位置來調(diào)節(jié)焦距

物鏡頭轉(zhuǎn)換和調(diào)焦是應(yīng)用顯微鏡時(shí)非常重要的步驟，它可以直接影響標(biāo)本的觀察效果。部分學(xué)生錯(cuò)誤地認(rèn)為，物鏡離載玻片（標(biāo)本）越近，越容易調(diào)到焦距，越方便找到物象。其實(shí)，這樣容易壓壞蓋玻片或載玻片，弄臟和損壞物鏡頭。導(dǎo)致這種錯(cuò)誤認(rèn)識(shí)的原因是學(xué)生不了解物鏡放大倍數(shù)、焦距、工作距離、長(zhǎng)度的相互關(guān)系。

放大倍數(shù)是指顯微鏡經(jīng)多次成像最終所成的像大小相對(duì)于原物體大小的比值。放大倍數(shù)由接目鏡（簡(jiǎn)稱目鏡）和物鏡共同放大而成。工作距離是指物鏡前表面中心到被觀察標(biāo)本之間滿足工作要求的距離范圍。工作距離通常可以近似地測(cè)出。物鏡焦距（mm）等于相當(dāng)光學(xué)筒長(zhǎng)與放大倍數(shù)的比值。相當(dāng)光學(xué)筒長(zhǎng)是物鏡上焦平面到目鏡下焦平面的距離，一般為160mm。通過實(shí)際測(cè)定近似值和計(jì)算，可獲得如表1中物鏡放大倍數(shù)與焦距及工作距離的數(shù)據(jù)。

從上面表中的數(shù)據(jù)不難看到，物鏡的放大倍數(shù)增加，焦距和工作距離反而變小。反之亦然。另外，我們通過觀察顯微鏡的物鏡頭長(zhǎng)度，不難發(fā)現(xiàn)顯微鏡配套的物鏡頭長(zhǎng)度與放大倍數(shù)的關(guān)系是：放大倍數(shù)增加，物鏡頭長(zhǎng)度也增加。因此，轉(zhuǎn)換物鏡頭時(shí)要注意到焦距、工作距離和物鏡頭長(zhǎng)度的變化，而不是盲目地把物鏡頭置于離標(biāo)本很近的距離，心中毫無把握地調(diào)節(jié)。

另外，筆者發(fā)現(xiàn)一種非常有用也切實(shí)可行的轉(zhuǎn)換物鏡及調(diào)焦的方法。對(duì)于配套的物鏡頭，低倍鏡轉(zhuǎn)換到高倍鏡時(shí)，低倍鏡找到清晰的物象后，觀察標(biāo)本需要轉(zhuǎn)換到高倍鏡或油鏡頭，可利用低倍鏡的調(diào)焦結(jié)果直接轉(zhuǎn)換到高倍鏡或油鏡頭，觀察者的眼睛不必離開觀察視野，然后調(diào)節(jié)微調(diào)便可找到清晰的物象，微調(diào)的作用方向應(yīng)使物鏡和標(biāo)本分離；高倍鏡或油鏡頭轉(zhuǎn)換到低倍鏡時(shí)，則與上面步驟剛好相反。當(dāng)然，不管如何轉(zhuǎn)換物鏡，都要同時(shí)調(diào)節(jié)光線，才能獲得清晰的物象。

使用物鏡觀察標(biāo)本時(shí)不按先低倍鏡后高倍鏡的順序

部分學(xué)生剛開始使用物鏡觀察標(biāo)本時(shí)，直接用所需放大倍數(shù)的物鏡，而不按先低倍鏡后高倍鏡的順序。不同放大倍數(shù)的物鏡，能觀察到的視野范圍不同，倍數(shù)越高，觀察到的視野范圍越小，反之亦然。不管用何種放大倍數(shù)的高倍鏡或油鏡觀察標(biāo)本，先用低倍鏡觀察都是實(shí)驗(yàn)中不可或缺的重要步驟。如染色血片細(xì)胞的分類計(jì)數(shù)，先使用低倍鏡可以觀察細(xì)胞的染色情況、細(xì)胞的分布情況以及是否有染料雜質(zhì)覆蓋在細(xì)胞上，這些均可以為準(zhǔn)確指認(rèn)細(xì)胞及觀察細(xì)胞的質(zhì)和量的變化提供有力的依據(jù)。

觀察液體標(biāo)本中的有形成分（如細(xì)胞、管型），先使用低倍鏡同樣重要。這些標(biāo)本中不同特征的成分可能分布在不同的液層。適宜的視野光線條件下，用高倍鏡觀察同一種成分可獲得內(nèi)容物（如胞漿中的顆粒）較清晰的物象效果。但是，在使用高倍鏡觀察不同液層的有形成分時(shí)，調(diào)節(jié)焦距時(shí)可移動(dòng)的距離比低倍鏡要小。對(duì)于剛接觸顯微鏡的學(xué)生來說，容易把物鏡頭浸泡到液體中壓壞載玻片或蓋玻片。使用低倍鏡觀察調(diào)節(jié)焦距時(shí)，由于可移動(dòng)的距離較大，方便查找、觀察不同的有形成分。

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作者簡(jiǎn)介：

曾順良（1972—），男，湖南益陽人，廣東省潮州衛(wèi)生學(xué)校講師，主要從事《臨床檢驗(yàn)學(xué)》、《生物化學(xué)》等課程教學(xué)。

（本文責(zé)任編輯：楊在良）