５２例乙型肝炎患者血清５羥色胺變化分析

殷海燕　王合群　周雍軍　石貴福

【摘要】 目的 本研究檢測5-TH在慢性HBV感染者血清的水平，分析其與ALT、HBV-DNA的相關性。方法 收集2008年2月至10月就診于本院的慢性HBV感染者及健康志愿者共62例，檢測其5-TH的含量。結果 慢性乙型肝炎組為5-TH的水平高于正常對照組，結果有顯著性差異（P<0.05）。HBV DNA、5-TH和ALT三者之間相關性分析：5-TH與HBV DNA呈負相關；5-TH與ALT之間成正相關。結論5-TH也許可以作為一個新指標與ALT共同評價慢性HBV感染者。

【關鍵詞】 乙型肝炎;5羥色胺;免疫

本研究檢驗健康人及慢性HBV感染者血清中5-TH的水平，觀察其與ALT、HBV-DNA等臨床常用指標的相關性，以了解機體免疫功能，探索準確全面地評價慢性HBV感染者免疫功能的方案及在抗病毒治療中的應用前景。以期能對抗病毒治療前免疫功能的評價及抗病毒治療有所幫助。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2008年2月~10月期間本院消化內科就診的患者52例，男35例，女17例，年齡22~68歲，平均年齡（45.3±17.6）歲，均為慢性乙型肝炎患者。健康志愿者10例，男7例，女3例，年齡20~59歲，平均（36.1±14.5）歲，對位對照組。診斷和臨床分型符合2005年中華醫(yī)學會肝病學及感染病學分會聯(lián)合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。納入標準：年齡18~80，性別不限；乙肝五項中HBsAg為陽性，其它項不限；HBV DNA為陽性；半年內未用過免疫調節(jié)劑。排除標準：合并除乙肝外其它各型肝炎病毒感染；存在肝炎病毒以外其它病毒、細菌、真菌感；有非感染性炎癥；患有自身免疫性疾病。

1.2 標本采集與方法 5-HT樣本的制備：于清晨醒后平臥30 min，取血5 m，l置于含5%EDTA-Na20. 1 ml的聚丙烯塑料管中，混勻，500 r/min離心10 min，取血漿2 ml10 000 r/min離心30 min，去除上清液，剩下沉淀，加入1 ml稀釋液，混勻，取20μl測量血小板值，剩余液體10 000 r/min離心20 min，去除稀釋液，加入0. 8 ml重蒸水，混勻，立即放-40℃冰箱保存。

5-HT含量測定：將樣本于-40℃和4℃反復凍融2次，取200μl液體，加入10μl高氯酸，混勻， 10 000 r/min離心20 min，取上清液150μ，l加入內標1 ng/μlDHBA30μ，l取100μl進樣。Water's雙泵，電化學檢測器檢測分析。其余血樣用于HBV DNA、ALT、乙肝五項等指標的檢測。

1.3 統(tǒng)計學處理 實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±sD)表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。各指標間相關關系采用直線相關分析。所有數(shù)據(jù)均運用SPSS(11.5)統(tǒng)計軟件處理。

2 結果

2.1 5羥色胺兩組情況 對照組為（161.45±31.3）ng/ml，慢性乙型肝炎組為（219.15±55.57）ng/ml，水平高于正常對照組，兩組比較均有顯著性差異（P<0.05）。

2.2 慢性乙型肝炎組HBV DNA、5羥色胺和ALT三者之間相關性分析 5-TH與HBV-DNA呈負相關（r=-0.769，P<0.05），5-TH與ALT之間成正相關（r=0.724，P<0.05），ALT與HBV-DNA呈負相關（r=-0.705，P<0.05）。

3 討論

HBV感染已經成為一個全球性健康問題，對人類的健康和生命造成了嚴重危害。但并非所有被感染者的健康都會受到損害。受病毒和宿主免疫功能等因素影響，HBV感染后可出現(xiàn)不同的結局或臨床類型，宿主的免疫功能是決定HBV感染后病情發(fā)展和轉歸的重要因素。以5-TH為代表的細胞因子，可增強細胞免疫應答^［1］。為了解慢性HBV感染者的免疫功能，張英劍等檢測了105例慢性乙型肝炎患者5-TH的水平，結果與正常對照組相比水平均顯著升高，本實驗檢測了5-TH的水平結果顯示在慢性HBV感染者中5-TH水平較正常對照組高，該結果與與張英劍等的結論一致。當沒有致病性的細菌、病毒等有害微生物侵犯人體時，機體的免疫系統(tǒng)處于相對靜息狀態(tài)。T細胞、B細胞和吞噬細胞等免疫細胞及其分泌的細胞因子的數(shù)量都處于一個較低的水平。當有害微生物作用于人體免疫系統(tǒng)被激活后，上述免疫細胞分泌的細胞因子也隨之增多。對于HBV等病毒感染來說，5-TH型細胞因子增多使機體的免疫功能增強，才有利于病毒的清除而使機體恢復健康^［2］。

5-TH是執(zhí)行非細胞溶解機制的主要細胞因子，同時具有免疫調節(jié)和直接抑制病毒復制的雙重作用：一方面，5-TH是Th1型細胞因子中的一員，有助于Th0向Th1分化，進而促進CTL的增殖、分化、成熟。因此可以促進細胞介導的免疫應答，有利于病毒的清除；另一方面，5-TH可以通過清除病毒的衣殼顆粒及其內含有的復制性病毒基因組、使病毒RNA失穩(wěn)等途徑發(fā)揮直接抑制HBV復制的作用^［3］。為了探討5-TH在慢性乙型肝炎患者的水平及臨床意義，我們觀察了5-TH、HBV DNA和ALT之間的相關性。結果在慢性乙型肝炎組，5-TH和ALT都與HBV DNA呈負相關，5-TH與ALT之間呈正相關關系。根據(jù)以上結果推測在慢性乙型肝炎組，5-TH通過非細胞溶解機制抑制了HBV的復制，而溶細胞機制并未起明顯的作用^［4］。5-TH可能較ALT更適合于評價該組患者的免疫功能。慢性乙型肝炎組中兩種機制都發(fā)揮了作用，并且兩機制的抗病毒作用強度之間呈正相關關系。5-TH也許可以作為一個新指標與ALT共同評價慢性乙型肝炎患者的免疫狀態(tài)。但是否有臨床價值還有待進一步證實。

參考文獻

［1］ Mosmann TR,Cherwinski H,Bond MW,et al.Two ypes of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted pro teins.J Immunol, 1986, 136(7):2348-2357.

［2］ Nakamura T,Lee RK,Nam SY,et al.Roles of IL-4 and IFN-gamma in stabilizing the T helper cell type 1 and 2 phenotype.J Immunol,1997,158(6):2648-2653.

［3］ 姜榮龍,盧橋生,駱抗先,等.慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T輔助細胞1、2型因子的水平.中華傳染病雜志,2000，18（1）：26-28.

［4］ Penna A,Del PG,Cavalli A,et al.Predominant T-helper 1 cytokine profile of hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limited hepatitis B.Hepatology,1997,25(4):1022-1027.