灰樹花多糖抗腫瘤作用的免疫學(xué)研究

張　巍　張　昆　邵明亮

灰樹花是擔(dān)子菌綱、多孔菌科的一種食用菌。本研究用荷瘤鼠模型觀察灰樹花對(duì)移植性腫瘤的抑制作用，并對(duì)抗腫瘤作用的免疫機(jī)制進(jìn)行初步探討。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物 昆明小鼠體質(zhì)量為18～22 g，3～ 4周齡，雌性90只購(gòu)自佳木斯大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。

1.1.2 試劑 灰樹花多糖針劑，含量>50％ ，由南京百盛生物工程有限公司提供。注射用環(huán)磷酰胺(CTX)，由江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司生產(chǎn)?？筎細(xì)胞單克隆抗體L3T4、Lyt-2以及FITC兔抗鼠IgG，購(gòu)自北京醫(yī)科大學(xué)；小鼠肝腹水瘤細(xì)胞系(H22 )，由佳木斯大學(xué)病理教研室保存。

1.2 方法

1.2.1 建立模型 本研究設(shè)實(shí)驗(yàn)組（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ劑量組）和荷瘤模型對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(CTX)，以及正常組，每組15只。灌胃3周后接種，制成模型。

1.2.2 對(duì)小鼠H22 的抑制作用 實(shí)驗(yàn)組按分別按照100、200、400 mg/kg灌胃給藥1次/d，陽(yáng)性對(duì)照組給環(huán)磷酰胺100 mg/kg，荷瘤模型對(duì)照組給生理鹽水0.4 ml。計(jì)算抑瘤率。

1.2.3 脾臟T細(xì)胞亞群的檢測(cè) 分離脾細(xì)胞，然后調(diào)整細(xì)胞濃度為1×106個(gè)/ml，按照操作說(shuō)明完成后滴片，求出熒光細(xì)胞百分率。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)小鼠H22 的抑制 由表1可見，灰樹花多糖Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組荷瘤動(dòng)物的瘤重與荷瘤模型組相比均有明顯的抑制作用，陽(yáng)性對(duì)照組亦有明顯的抑制作用 (P＜0.05) 。

2.2 T細(xì)胞亞群的檢測(cè)荷瘤鼠的輔助性T細(xì)胞L3T4水平明顯下降，抑制性T細(xì)胞Lyt-2水平亦顯著下降， L3T4/Lyt-2比值極顯著下降。而灰樹花多糖Ⅱ、Ⅲ組恢復(fù)到正常小鼠水平。

3 討論

本研究通過(guò)灰樹花多糖對(duì)荷瘤鼠瘤重等影響的分析，從瘤體比的統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果更能清楚地說(shuō)明灰樹花糖組的作用效果明顯優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照組。本研究發(fā)現(xiàn)荷瘤鼠的L3T4和Lyt-2百分率均明顯下降，因此，L3T4/Lyt-2比值亦明顯下降。給予灰樹花多糖后L3T4和Lyt-2百分率均有明顯升高。L3T4百分率恢復(fù)到正常小鼠水平，L3T4/Lyt-2比值明顯升高?；覙?/p>

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作者單位：154002佳木斯大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院（張?。?；佳木斯大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（張昆）；佳木斯大學(xué)第五臨床醫(yī)院（邵明亮）

花多糖Ⅱ、Ⅲ組的L3T4/Lyt-2比值恢復(fù)到正常小鼠水平，表明灰樹花多糖具有改善荷瘤鼠免疫功能的作用。因此，給予灰樹花多糖升高的Lyt-2或許是TCS表型，佐證L3T4在腫瘤免疫中是最為關(guān)鍵的效應(yīng)細(xì)胞。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 鄭建仙.β（1-3）葡聚糖的構(gòu)效關(guān)系.天津中醫(yī)藥,2004,21(1)：53-57.

［2］ 劉春輝，陳體強(qiáng)，林躍鑫．藥用真菌桑黃的研究進(jìn)展．菌物研究，2004,2(2)：53-59.