諾氟沙星膠囊含量測定的不確定度評定

王 玉 孫 麗

[摘要]目的 對高效液相色譜法測定諾氟沙星膠囊中諾氟沙星含量的測量不確定度進行分析,找出影響不確定度的因素,為檢測報告提供科學依據(jù)。方法 通過分析測量過程,確定并簡化不確定度來源;利用高效液相法測定諾氟沙星膠囊中諾氟沙星含量的方法驗證數(shù)據(jù)及經(jīng)驗數(shù)據(jù),通過統(tǒng)計學方法,量化不確定度分量;計算合成不確定度和擴展不確定度。結(jié)果 用HGLC法測定諾氟沙星膠囊中諾氟沙星的擴展不確定度為1.2%×Q%。結(jié)論 測量不確定度可用于諾氟沙星的液相方法評價;測量不確定度的評定方法的確立對于藥品質(zhì)量標準的研究具有重要意義。

[關(guān)鍵詞] 測量不確定度;諾氟沙星;高效液相色譜法

[中圖分類號] R927.2[文獻標識碼] A[文章編號] 1004-8650(2009)06-112-02

Evaluation of Measurement Uncertainty in the HPLC determinatain of Norfloxacin Capsules

WANG Yu , SUN Li

(Suqian Institute for Durg Control ,suqian 223800)

[Abstract] Obiective Find out the effective factors of uncertainty by analyzing the uncertainty of measurement in determination of salviol by HPLC and provide the evidence to evaluate the measurement. Methods To facilitate the identification and analysis of the uncertainty sources arisng from the procedure of analysis,a cause and effect diagram was constructed and simplified.Each uncertainty component,whether associated with individual sources or with the combined effects of several sources, was evaluated with respect to significance of its contribution to the overall measurement uncertainty and was expressed as standard uncertainty.All the standard uncertainties were then combined according to the appropriate rules to give a combined standard uncertaintyand an expanded uncertainty. Results The expanded standard uncertainties the HPLC determination of ribavirin in Norfloxacin Capsules is 1.2%×Q%. Conclusion Measurement uncertainty is applicable to set the limit of the ribavirin in Capsules.The establishment of the methodology for the evaluation of measurement uncertainty is important to the studies of Chinese medical standards.

[Key words] measurement uncertainty;norfloxacin;HPLC

測量不確定度是“表征合理地賦予被測量值的分散性,與測量結(jié)果相關(guān)聯(lián)的參數(shù)”,它是被測量客觀值在某一量值范圍內(nèi)的一個評定,其大小決定了測量結(jié)果的實用價值。不確定度越小,測量結(jié)果的質(zhì)量越高,使用價值越大。目前,測量不確定度的概念在國家計量基準、標準物質(zhì)的研究及藥品檢驗中廣泛應(yīng)用,因此,正確表達和評定測量不確定度正逐步成為國際通行的要求。

1試驗部分

1.1 儀器與試藥

儀器名稱:高效液相色譜儀, Agilent 1100(紫外檢測器,自動進樣器)電子天平型號AL-204, 電子天平,諾氟沙星膠囊:成都錦華藥業(yè)有限責任公司( 批號:080307 ),諾氟沙星對照品:中國藥品生物制品檢定所(批號:130450-200304)含量:97.8%。

1.2色譜條件

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以0.025mol/L磷酸溶液(三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0)-乙腈(87:13)為流動相;流速為1.0ml/min;檢測波長為278nm;進樣量:20 ul溫度:25℃,相對濕度:52%。

1.3不確定度分析

2不確定度分量計算

2.1C對

對照品溶液的制備:取對照品24.81mg置100ml量瓶中,加0.1mol/L的鹽酸2ml使溶解,用水稀釋至刻度,搖勻。精密量取5ml置50ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,制成對照溶液1。另取對照品25.95mg,同法制成對照溶液2。

2.1.1天平稱量引入的不確定度:稱量主要有兩個不確定度來源:重復性和由于天平校準產(chǎn)生的不確定度

①天平線性:±0.01mg(天平參數(shù)),按均勻分布,u(m1)=0.01/ =0.0058mg。

② 天平重復性0.02mg, 用減量法稱量兩次,urel,c(m1)=0.029/24.81=0.0011 ,urel,c(m2)=0.029/25.95=0.0011,urel,c(m)=(0.00112+0.00112)1/2=0.0016。

2.1.2玻璃量器:玻璃儀器的不確定度來源還有三個方面:第一,校準,按矩形分布(k= ),50ml量瓶(經(jīng)檢定為A級),允差為±0.05ml, U(V1)=0.05/ =0.020ml。第二,重復性:0.04ml(以實驗求得標準偏差) U(V2)=0.04ml。第三,溫度效應(yīng): △V=(2.1×10-4-1.5×10-5)×50×(25-20)=0.049ml。

按正態(tài)分布u(v)=0.049/2=0.024ml則uc(v1)=(0.022+0.042+0.0242)1/2=0.05075,5ml移液管(A級)。

允差為0.015ml,中間分布, Uv3=0.015/=0.0061,

100ml量瓶(A級),允差±0.10ml,中間分布,U(V1)=0.10/ =0.041ml

2.2 D:精密量取樣品0.2148g置500ml量瓶中,加0.1mol/L的鹽酸10ml使溶解溶解,用水稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續(xù)濾液5ml置50ml量瓶中,加流動相稀釋至刻度,制成供試品溶液1。另取樣品0.2119g,同法制成供試品溶液2。

2.2.1天平稱量引入的不確定度:①天平線性:±0.1mg(天平參數(shù)),按均勻分布,u(m1)=0.1/ =0.058mg。②天平重復性0.02mg, 用減量法稱量兩次,

urel,c(m)=(0.0004052+0.0004102)1/2=0.000576

2.2.2玻璃量器:100ml量瓶(A級),同上urel,c(v1)=0.0010 ;500ml量瓶(A級),允差±0.25ml,中間分布,U(V1)=0.0.25/ =0.612ml,urel,c(v1)=0.2598/500=0.0005;5ml移液管,同上urel,c(v3)=0.00132,

urel,c(D)==0.0018

2.3

取本品20粒,精密稱定,重4.6768g,殼總重1.2571g,內(nèi)容物平均片重:0.1710g。

①天平線性:±0.1mg(天平參數(shù)),按均勻分布,u(m1)=0.1/ =0.058mg

②天平重復性0.02mg, 用減量法稱量兩次,

uc(m)=[2×(0.0582+0.022)] 1/2 =0.087

urel,c(m1)=0.087/4676.8=0.0000186

urel,c(m2)=0.087/1257.1=0.0000692

urel,c(m)=(0.00001862+0.00006922)1/2=0.00007

2.4重復性(rep)

2.4.1平均校正因子6.4365×10-6 ,U(X)=5.675×10-8,

2.4.2測定結(jié)果平均:樣=0.993u(x樣)=0.00481

2.5 合成標準不確定度的計算

2.6擴展不確定度計算和報告

測量不確定度報告:諾氟沙星膠囊標示百分含量為(0.9930±0.012)×100%, K=2

3討論

從表1可知:重復性引起的不確定度分量所占比重較大,其次就是樣品和對照品的配制過程由天平稱量、溫度效應(yīng)、玻璃量器等引起的不確定度,樣品稱量的平均重量引起的不確定度可或略;因此,實驗過程中應(yīng)加強控制,加強儀器的保養(yǎng),加強基本操作、標準操作訓練,以減少隨即和認為因素對實驗結(jié)果的影響。

參考文獻:

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(收稿日期2009-06-03)