婦炎凈顆粒提取工藝的研究

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(1.南京婦幼保健院，江蘇 南京 210029；2.南京中醫(yī)藥大學(xué)，江蘇 南京 210029)

婦炎凈方是我院的臨床驗(yàn)方，主要由三棱、莪術(shù)、蒲黃等多味中藥組成，該方主要用于慢性盆腔炎、盆腔包塊的治療。經(jīng)多年的臨床觀察，其具有獨(dú)特療效，能使患者的炎癥愈合、疼痛緩解、包塊消失。為更好地發(fā)揚(yáng)該方的優(yōu)良療效，更方便地服務(wù)患者，擬研制婦炎凈顆粒，考慮其以合劑長期應(yīng)用于臨床，本制劑提取工藝設(shè)計(jì)為部分藥味提取揮發(fā)油后，再與余下部分合并水提。本文對水提部分的工藝進(jìn)行正交法優(yōu)選，由于水提部分藥材中多味含有黃酮類成分，且黃酮類成分不僅對心血管、消化系統(tǒng)有作用，還具有抗炎、抗病毒等多種作用[1],因此以總黃酮的量作為工藝考察的指標(biāo)，文獻(xiàn)多以甲醇為溶劑在紫外或可見光區(qū)測定其含量[2-3]，本文采用UV法，方法簡便實(shí)用，重復(fù)性好，可操作性強(qiáng)。

1 儀器與試藥

紫外可見分光光度計(jì)Spectrum 754型(上海分析儀器總廠);蘆丁(20080315):中國藥品生物制品檢定所；藥材：均購自南京市藥材公司，經(jīng)鑒定符合《中國藥典》2005版規(guī)定；試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)[4-5]根據(jù)有關(guān)浸提理論及預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，提取工藝與藥材煎煮時(shí)間、煎煮次數(shù)、加水量等因素有較密切的關(guān)系，為選擇最佳水提工藝條件，選用L9(34)正交表，各因素、水平見表1。

根據(jù)專業(yè)知識和實(shí)際經(jīng)驗(yàn)，各試驗(yàn)的提取次數(shù)與提取時(shí)間及加水量的關(guān)系，如表2。

根據(jù)表2，若實(shí)驗(yàn)因素水平為A2B2C2即表示該號實(shí)驗(yàn)提取總時(shí)間為3.0 h，分2次提取，第1次加10倍量水，沸后煎煮1.5 h，第2次加8倍量水，沸后煎煮1.5 h,依次類推，量取體積。依照原處方，各次實(shí)驗(yàn)藥材量為276 g。精密取濾液1.0 mL,置于25 mL容量瓶中，余按標(biāo)線項(xiàng)下操作，測其總黃酮的量。

表1 工藝因素水平

表2 各號試驗(yàn)時(shí)間和加水量的分配關(guān)系

表3 正交試驗(yàn)數(shù)據(jù)及其計(jì)算分析結(jié)果

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密稱取在120℃干燥至恒重的蘆丁對照品10.12 mg,于50 mL容量瓶中，加適量甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻即得對照品貯備液，精密吸取1.0，2.0，3.0,4.0,5.0，6.0 mL,分別置于25 mL容量瓶中，加5%NaNO21 mL,放置6 min,續(xù)加入10%Al(NO3)31 mL，放置6 min,再加入5%NaOH試液10 mL，并加水置刻度，搖勻，放置15 min，以相應(yīng)的試劑作空白對照，以UV-754在500 nm處測定各樣品的吸收度,Y=10.592X+0.011 9(r=0.999 7),蘆丁濃度在0.008 09～0.097 075 mg/mL之間呈良好的線性關(guān)系。

2.3 結(jié)果 根據(jù)正交表，共進(jìn)行9次試驗(yàn)，有關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及其計(jì)算分析結(jié)果，見表3。利用方差分析對表3中各因素的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析,結(jié)果見表4。

表4 方差分析

由表4的方差分析表可以看出，因素A加水量的影響具有顯著性；因素B煎煮時(shí)間和因素C煎煮次數(shù)的影響均不顯著。從表3極差直觀分析，我們確定最佳水提取工藝A1B2C2，即:第1次加水9倍量，煎煮1.5 h，第2次加6倍量水，煎煮1.5 h，濾過，合并煎液。

2.4 工藝驗(yàn)證 根據(jù)正交試驗(yàn)結(jié)果，按此最佳工藝條件放大試驗(yàn),投料3批進(jìn)行工藝驗(yàn)證，結(jié)果表明該工藝提取較好。

3 討論

3.1 從實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，所選擇的3個(gè)因素中加水量的影響具有顯著性，因此在實(shí)際操作中應(yīng)嚴(yán)格控制這個(gè)因素。

3.2 根據(jù)本方中藥材的性質(zhì)，采用水提工藝，可有效地提出其中大部分有效成分，水煎工藝優(yōu)選曾進(jìn)行浸泡試驗(yàn)考察，結(jié)果表明煎前浸泡0.5、1 h，總黃酮的量相差甚小,為節(jié)省工時(shí)，均選擇浸泡0.5 h。

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