食品中罌粟殼殘留檢測的研究現(xiàn)狀

汪芳芳　咼　亮　曾愛明　楊　勇　江小明

摘 要：全面綜述了食品摻偽嬰粟殼的各種檢驗(yàn)方法， 展示了近幾年來國內(nèi)在這方面的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展。在多種檢測方法中，液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法，不僅可以對罌粟殼食物中生物堿的殘留進(jìn)行準(zhǔn)確定性，而且檢出限低，適用范圍廣，隨著研究的深入和儀器的普及，可望成為檢測食品中罌粟殼殘留的重要方法。

關(guān)鍵詞：食品；罌粟殼殘留；檢測

中圖分類號：X836 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-3198（2009）03-0279-02

罌粟殼（ Pericarpium Papaveris） 為罌粟科植物罌粟采完鴉片后的干燥成熟果殼，含有20 多種生物堿，其中以嗎啡（Morphine） 、可待因（Codeine） 、那可?。∟arcotine） 、罌粟堿（Papavarine） 等為主要成分。罌粟殼中的生物堿會使人嗜睡和性格改變，引起某種程度的愜意和欣快感，可造成人注意力、思維和記憶性能的衰退，長期食用會引起精神失常，出現(xiàn)幻覺，嚴(yán)重時(shí)甚至?xí)?dǎo)致呼吸停止而死亡。添加了罌粟殼的食物易使消費(fèi)者成癮，長期食用者無論從身體上還是心理上都會對其產(chǎn)生嚴(yán)重的依賴性，造成嚴(yán)重的毒物癖。然而一些不法商家和飯店為了牟取暴利，在火鍋、麻辣燙、牛肉粉、烤禽類等的湯料和輔料中添加罌粟殼及其水浸物等違禁原料，使食物味道鮮美，吸引更多的食客。

食品中罌粟殼及其水浸物殘留的對人體的危害逐漸引起了大家的關(guān)注，近幾年來對食品調(diào)料中摻人罌粟殼及其水浸物殘留的檢驗(yàn)建立了示波極譜法、比色法、薄層色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法等許多方法。

1 檢測原理

罌粟殼的各種生物堿多數(shù)以醋的形式存在， 經(jīng)酸化水解后成為強(qiáng)弱不同的生物堿鹽溶于水， 在堿性條件下溶于有機(jī)溶劑，摻入食品中的嬰粟殼及其水浸物加熱酸化水解， 濾除雜質(zhì)， 用有機(jī)溶劑提取除去脂溶性物質(zhì)， 再堿化用有機(jī)溶劑提取濃縮， 用不同方法定性定量測定。

2 分光光度法（UV-Vis）

罌粟殼樣品處理殘?jiān)名}酸溶解， 可與碘化鉍鉀生成橙紅色沉淀， 與碘化汞鉀生成灰白色沉淀。罌粟殼乙醇提取液對波長283nm或波長286-288nm有最大吸收， 樣品處理后可直接在紫外分光光度計(jì)上定性測定。由于嗎啡是罌粟殼的主要成分， 利用嗎啡酚羥基在酸性水溶液中與NaNO₂生成亞硝基嗎啡， 在氨堿性條件下顯黃棕色， 與標(biāo)準(zhǔn)系列比較或于波長420nm處用分光光度計(jì)比色測定。酚羥基化合物是該法的主要干擾物， 可用丁醇—苯混合液在酸性條件下萃取嗎啡除去干擾， 同時(shí)除去脂溶性雜質(zhì)和色素。該法檢出限嗎啡0.1mg/100mL， 罌粟殼1g/100mL。線性范圍：嗎啡0.1-10 mg/100mL， 瞿粟殼1-5 g/100mL。該法簡單快速， 但因嗎啡含量受多因素影響， 只能定性和半定量測定。

張忠會等采用溴甲酚綠顯色，可見分光光度法測定罌粟殼中總生物堿的含量。樣品用水浸泡后過濾，在濾液中加入溴甲酚綠顯色，在417nm下進(jìn)行比色測定。方法線性范圍1.8-19ug/mL，回收率98.3%~102.7%。

3 薄層色譜法（LC）

該法靈敏準(zhǔn)確， 不需特殊設(shè)備， 操作簡單，是目前研究最活躍最普遍采用的方法。所用參比物有瞿粟殼及其生物堿嗎啡、罌粟堿、可待因和那可因。以涂曉明所用參比物最多， 能全部檢出前述四種生物堿。根據(jù)操作過程可大致分為樣品提取， 點(diǎn)樣展開， 顯色及結(jié)果觀察三步。樣品提取過程大概有加熱酸化水解一脫脂和過濾堿化一萃取一脫水揮干一定容等步驟。一般用酒石酸作酸化劑。煮沸或低溫回流水解生物堿，水堿化無水脫水，水浴或氮?dú)鉁p壓濃縮揮至近干。涂曉明和衛(wèi)生部衛(wèi)生監(jiān)督司用酒石酸對樣品處理殘?jiān)M(jìn)行純化處理，使得結(jié)果更好。硅膠展開劑常用甲醇、乙醇，可用石油醚除去脂肪和無水預(yù)展后再正式展開。結(jié)果觀察方法有直接在254nm或365nm紫外燈下觀察綠色熒斑，噴灑顯色劑改良碘化鉍鉀， NaNO2乙醇液觀察橙紅色斑，先看熒斑再顯色后觀察色斑或淬滅點(diǎn)。本法主要適用于火鍋湯料、底料及羊肉湯等樣品測定。

4 示波極譜法（oscillopolarography）

根據(jù)嬰粟殼中嗎啡亞硝基化后在堿性條件下產(chǎn)生一吸附催化波原理而建立了示波極譜法。該法簡便快速， 可準(zhǔn)確定量嗎啡含量， 檢出限可達(dá)0.05ug嗎啡。王河川認(rèn)為無需除干擾可直接檢測樣品，陶銳等則認(rèn)為各種香料對峰電位有明顯干擾作用， 動(dòng)物膠、聚乙烯醇能使峰電位劇減甚至消失， 因而必需進(jìn)行樣品處理。目前該法只限于嗎啡定量測定。

5 氣相色譜法（GC）

氣相色譜法以裝有的50+50的OV-17和SE-30混合物的螺旋玻璃柱作固定相，以He氣作流動(dòng)相， 流速30mL/min， 柱溫280℃ ， 汽化室310℃ ， 檢測器270℃同時(shí)定量測定罌粟殼中可待因、嗎啡、蒂巴因、罌粟堿和那可因的含量。該法標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.15%~0.18%。

6 高校液相色譜法（HPLC）

郝紅艷建立中藥罌粟殼中嗎啡、可待因和罌粟堿3 種生物活性生物堿的含量測定法。用HPLC 及HPCE 法測定了罌粟殼12 個(gè)樣品中3 種生物堿含量，并根據(jù)樣品測定結(jié)果提出其質(zhì)量評價(jià)的建議。王越等以嗎啡為重點(diǎn)，采用高效液相色譜法檢測了火鍋底料中的罌粟殼殘留。樣品先用醋酸酸化處理后，將濾液用氨水調(diào)節(jié)批pH值為8.5-9.4，用氯仿/異丙醇（v/v=90/10）提取，揮干溶劑后用甲醇溶解以備檢測用。王建新等建立了用高效液相色譜法檢測火鍋湯料中罌粟殼成分的方法。含罌粟殼樣品的制備是將罌粟殼煮沸20分鐘，取該湯汁加入火鍋湯料樣品中。將樣品先酸化，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1.8-2.0，用石油醚去除脂肪后的樣品用20%的三氯乙酸沉降蛋白質(zhì)，離心后取上清液。將沉淀用氨水完全溶解后，轉(zhuǎn)移溶液至分液漏斗中，乙醚萃取后將乙醚揮干。甲醇溶解殘?jiān)?，進(jìn)樣分析。可以同時(shí)檢出罌粟堿，嗎啡，可待因，那可因和蒂巴因五種組分。

7 氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法（GC-MS）

王玫采用GC-MS法，結(jié)合選擇離子檢測（SIM）技術(shù)，對燉肉湯中的罌粟殼殘留進(jìn)行檢測，結(jié)果罌粟殼中的罌粟堿，嗎啡，可待因，那可因和蒂巴因等五種組分均被檢出。方法回收率大于70%，對嗎啡的檢出限為0.1ng。

劉奮等建立了GC/MS 法測定摻入食品中罌粟殼殘留的方法。用GC/MS 法對摻入食品中罌粟殼中殘留的可待因、嗎啡、罌粟堿等阿片生物堿進(jìn)行定性測定，選取其中的響應(yīng)值的最高可待因作為檢出罌粟殼的指標(biāo)。研究結(jié)果表明，用質(zhì)譜對各種阿片生物堿定性準(zhǔn)確，用可待因作為檢出指標(biāo)靈敏度高，檢出限低（1mg/ kg） 。該方法準(zhǔn)確、快速、靈敏，適用于測定摻入食品中罌粟殼殘留。

8 液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS）

張虹等采用液相色譜電噴霧串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法定量檢測摻罌粟殼食物中生物堿的殘留。文中對食物中生物堿的提取、樣品預(yù)處理及液質(zhì)聯(lián)用分析方法進(jìn)行了研究。采用三重四極桿的ESI + 離子源，對嗎啡、可待因、罌粟堿和那可丁分別確定M + 1 為母離子和2 個(gè)子離子，經(jīng)碰撞能量優(yōu)化，使用MRM 方式檢測，方法檢出定量限（LOQ） 分別是0.24 、0.08 、0.01 、0.003μg/L ，使嗎啡、可待因、罌粟堿和那可因獲得極高的檢測靈敏度，滿足了低含量樣品的測定。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，在低濃度范圍內(nèi)玶=0.999，回收率在95%～110%之間，日內(nèi)精密度與日間精密度RSD<10% ，實(shí)際樣品測定結(jié)果表明，可適用于食品中生物堿的測定。該方法具有準(zhǔn)確、靈敏度高、適用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)。

9 結(jié)語

本文全面綜述了食品摻嬰粟殼的各種檢驗(yàn)方法， 展示了近幾年來國內(nèi)的研究現(xiàn)狀與進(jìn)展。綜上所述，比色法簡單快速， 樣品處理液可直接在紫外光度計(jì)上測定或顯色后于分光光度計(jì)上測定。薄層法分離效果好， 技術(shù)要求不高，通過樣品處理、純化濃縮、預(yù)展， 多種方法綜合定性， 能較好排除干擾。但是由于干擾大，上述來年各種方法只能用于定性或半定量。氣相色譜法和高效液相色譜法可測多種生物堿， 因其靈敏準(zhǔn)確、分離效果好而成為測定食品摻偽瞿粟殼的參考方法 ，但是檢出限較高，并且干擾物質(zhì)多。液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，不僅可以對罌粟殼食物中生物堿的殘留進(jìn)行準(zhǔn)確定性，而且檢出限低，適用范圍廣，隨著研究的深入和儀器的普及，可望成為檢測食品中罌粟殼殘留的重要方法。

參考文獻(xiàn)

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