健康人體內(nèi)甲磺酸加替沙星對茶堿穩(wěn)態(tài)藥代動力學(xué)的影響*

朱 華，賈玲昌，倪 立，芮建中，孫禮琴，許建國

1蘇北人民醫(yī)院，揚州 225001；2南京軍區(qū)南京總醫(yī)院，南京 210002

加替沙星(gatifloxacin)是新一代氟喹諾酮類廣譜抗菌藥物，它抗菌譜廣，抗菌活性強，對感染性疾病，尤其是呼吸系統(tǒng)感染療效佳。茶堿(theophylline)屬黃嘌呤類藥物，具有松弛支氣管平滑肌的作用，廣泛用于支氣管疾病的治療。因此在臨床上茶堿與加替沙星經(jīng)常聯(lián)合應(yīng)用治療呼吸系統(tǒng)疾病。

國內(nèi)外氟喹諾酮類藥物對茶堿的藥物動力學(xué)影響研究較多，研究表明，依諾沙星[1]、環(huán)丙沙星[2]、培氟沙星[3-4]對茶堿的代謝抑制顯著。但對于加替沙星對茶堿藥代動力學(xué)的影響國內(nèi)報道各異。梁紅云[5]等報道聯(lián)用加替沙星后茶堿的血藥峰濃度、曲線下面積比單用茶堿有顯著升高，提示加替沙星對茶堿的吸收代謝有明顯影響。黃健瑩[6]等報道各時點的茶堿血藥濃度無顯著性差異，說明加替沙星不影響茶堿的血藥濃度變化，兩者合用是安全的。國外Niki等[7]報道了5名健康受試者，采用自身對照，通過比較單獨使用茶堿和聯(lián)用加替沙星后茶堿藥代動力學(xué)參數(shù)，結(jié)果4例峰濃度（Cmax），藥時曲線下面積（AUC0-12），血漿清除率（CL）無顯著性差異，但其中 l例Cmax上升55%，AUC0-12上升44%。

為了進一步了解加替沙星對人體茶堿穩(wěn)態(tài)藥物動力學(xué)是否存在影響，現(xiàn)就茶堿與加替沙星聯(lián)合應(yīng)用時，在健康受試者體內(nèi)藥代動力學(xué)的相互作用作一考察，以期為臨床治療、安全有效地合用茶堿與加替沙星提供依據(jù)。

1 材料與受試者選擇

1.1 材料

安捷倫1100高效液相色譜系統(tǒng) （G1312A泵、G1314A檢測器、G1329A進樣閥、1100工作站）；Sigma1-13離心機（德國）；WH-3漩渦混合器（上海滬西分析儀器廠）。

茶堿對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號:100121-199903）；內(nèi)標對乙酰氨基酚對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號:100018-200408）；茶堿緩釋膠囊（海南普利制藥有限公司，規(guī)格:0.1 g，批號:061001）；甲磺酸加替沙星膠囊（揚州市三藥有限公司，規(guī)格:0.2 g，批號:070116）；水為去離子水；甲醇、乙腈為色譜純；其他試劑為分析純。

1.2 受試者選擇

年齡:（20.2±1.5）歲，體重:（64.9±7.8） kg，身高:（174.1±3.5）cm，試驗前經(jīng)嚴格體檢和血尿常規(guī)檢查，證實心、肝、腎及胃腸功能正?；驘o變化。本實驗經(jīng)我院倫理委員會批準；患者簽署了知情同意書。排除標準:對甲磺酸加替沙星膠囊或茶堿過敏史者；懷孕或哺乳婦女；受試前2周服用其他藥物。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱:Lichorspher ODS(250 mm×4.6 mm，5 μm)；流動相:甲醇-水（22.5∶77.5，V/V）；流速:1.0 mL·min-1；檢測波長:273 nm；柱溫:室溫。

2.2 血漿樣品預(yù)處理

精取待測血漿300μL，加入100μL內(nèi)標對乙酰氨基酚（5μg·mL-1），混勻，加入 20%高氯酸 200μL，混旋 1 min，10000 r·min-1離心 5 min，取上清液20μL 進樣。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 專屬性 將空白血漿、加入茶堿標準溶液及內(nèi)標溶液的空白血漿、給藥后血漿樣品，按“2.2”項下方法操作，分別得到色譜圖（圖1）。結(jié)果表明，血漿中內(nèi)源性物質(zhì)不干擾茶堿的測定，茶堿和內(nèi)標對乙酰氨基酚峰型良好，分離完全，在本實驗所采用的色譜條件下，茶堿出峰時間在10.7 min左右，內(nèi)標對乙酰氨基酚出峰在8.7 min左右，無雜峰干擾測定，基線平穩(wěn)。本方法具有較高的特異性，能準確測定血漿中的藥物濃度，靈敏度較高。

圖1 茶堿、對乙酰氨基酚的色譜圖

2.3.2 標準曲線的制備 取空白血漿0.3 mL，分別加入茶堿標準液，渦旋混勻，制成0.156、0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20μg·mL-1的標準含藥血漿，按“2.2”項下操作，記錄色譜圖，以茶堿與對乙酰氨基酚的峰面積比為縱坐標，血漿藥物濃度為橫坐標，進行線性回歸，得標準曲線。茶堿濃度在0.156～20μg·mL-1范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，標準曲線方程Y=6.929X+0.021，r=0.9999，最低定量限為 0.156μg·mL-1。

2.3.3 定量下限 按“2.3.2”方法制備一系列低濃度樣品進行分析，以信噪比S/N≥3時相應(yīng)的濃度為最低檢測濃度，最低檢測限為 0.1μg·mL-1。

2.3.4 精密度試驗和相對回收率試驗 取空白血漿，按“2.3.2”項下方法，制備低、中、高3個濃度血漿樣品，每一濃度進行5樣本分析，連續(xù)測定5天，以1天內(nèi)測得的茶堿濃度計算日內(nèi)精密度，以5天內(nèi)測定的濃度計算日間精密度。并計算相對回收率。結(jié)果見表1。

表1 精密度試驗和相對回收率試驗結(jié)果（，n=5）

表1 精密度試驗和相對回收率試驗結(jié)果（，n=5）

2.3.5 穩(wěn)定性試驗 配制血漿樣品高、中、低3個濃度各9份，分別考察1天內(nèi)室溫放置的穩(wěn)定性，3個周期反復(fù)凍融的穩(wěn)定性，以及置-20℃下冰凍20天的穩(wěn)定性。結(jié)果表明:低、中、高3個樣品測定的RSD分別為:3.85%、1.60%和1.23%，穩(wěn)定性良好。

2.4 藥動學(xué)試驗

健康男性志愿者 14名， 于 8∶00、20∶00空腹口服茶堿緩釋片200 mg，bid。如此連續(xù)服用3天，于第4天清晨8∶00空腹口服茶堿緩釋片200 mg，分別于0、0.5、1、2、3、5、7、9、12 h 取靜脈血 3.0 mL，于離心管中離心后取血清，置-20℃冰箱中保存，待測。于第5天清晨8:00茶堿用法不變的情況下，同時加服甲磺酸加替沙星膠囊400 mg，每天1次，如此連續(xù)服用4天，于用藥后的第9天清晨8∶00空腹口服兩藥，分別在 0、0.5、1、2、3、5、7、9、12 h 取靜脈血 3.0 mL，于離心管中離心后取血清，置-20℃冰箱中保存。

2.5 數(shù)據(jù)處理

2.5.1 平均血藥濃度-時間曲線 根據(jù)14名受試者單獨口服茶堿和聯(lián)用加替沙星的血藥濃度-時間數(shù)據(jù)，繪制平均血藥濃度-時間曲線。見圖2。

圖2 14名受試者單用與合用加替沙星后茶堿的平均血藥濃度-時間曲線

2.5.2 健康受試者單用與合用加替沙星后茶堿的藥動學(xué)參數(shù) 采用3p97程序進行統(tǒng)計分析，選用非參數(shù)法計算藥動學(xué)參數(shù)，Cmax和Tmax為實測值，AUC采用梯形法計算曲線下積分面積。主要藥動學(xué)參數(shù)采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行配對t檢驗。單用和合用加替沙星后，茶堿的藥動學(xué)參數(shù)Cmax、t1/2、CL、AUC0-12、AUC0-∞之間有顯著性差異（P＜0.01）。 見表 2。

表2 健康人體內(nèi)加替沙星膠囊對穩(wěn)態(tài)茶堿藥動學(xué)參數(shù)的影響(，n=14)

表2 健康人體內(nèi)加替沙星膠囊對穩(wěn)態(tài)茶堿藥動學(xué)參數(shù)的影響(，n=14)

注:與單用茶堿組比較，*P＜0.01

3 討 論

本實驗結(jié)果表明，單用和合用甲磺酸加替沙星后， 茶堿的藥動學(xué)參數(shù) Cmax、t1/2、CL、AUC0-12、AUC0-∞之間有顯著性差異(P＜0.01)。Cmax明顯下降，t1/2明顯減小，AUC0-12與AUC0-∞明顯下降。甲磺酸加替沙星對健康人體內(nèi)茶堿穩(wěn)態(tài)藥動學(xué)有影響，由于試驗未設(shè)計茶堿加服甲磺酸加替沙星膠囊后的當天測定茶堿的血藥濃度，無法比較合用后茶堿的血藥濃度的變化情況。兩藥合用茶堿濃度降低可能是加替沙星對肝藥酶的誘導(dǎo)作用，合用可能降低茶堿療效。提示兩藥合用應(yīng)監(jiān)測茶堿的血藥濃度。

在考察加替沙星對茶堿穩(wěn)態(tài)藥動學(xué)有影響的同時，也測定了合用茶堿后加替沙星的血藥濃度。利用文獻報道的健康志愿者的加替沙星的藥代動力學(xué)參數(shù)與實驗中健康志愿者的藥代動力學(xué)參數(shù)比較，加替沙星的藥動學(xué)參數(shù) tmax、Cmax、t1/2、AUC0-12、AUC0-∞與文獻報道的藥動學(xué)參數(shù)比較,兩者之間無顯著性差異（P＞0.05）。在健康人體內(nèi)茶堿對加替沙星的藥代動力學(xué)影響不大。

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