小鼠缺氧預(yù)處理對(duì)不同因素缺氧耐受性的影響

林　娜　周風(fēng)鈴　王建禮　孫夢(mèng)語(yǔ)

【摘要】 目的 研究缺氧預(yù)處理對(duì)不同因素缺氧耐受性的影響。方法 于室溫下復(fù)制小鼠的急性重復(fù)缺氧模型，給予筒箭毒堿、咖啡因藥物，來觀察記錄小鼠的一般狀態(tài)及存活時(shí)間。結(jié)果 急性缺氧預(yù)處理后，小鼠對(duì)筒箭毒堿、咖啡因的缺氧耐受性與對(duì)照組相比，P<0．05，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；腹腔注射筒箭毒堿與注射生理鹽水相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 急性缺氧預(yù)處理可以提高小鼠對(duì)缺氧的耐受性。

【關(guān)鍵詞】缺氧；急性缺氧預(yù)處理；筒箭毒堿；咖啡因

Influence ofhypoxic precondition to differentfactorsanxic tolerance

LIN Na，ZHOU Feng-ling，WANG Jian-li，et al.

Functional Laboratory,the basis of medicine,Jincing Medical College,Shangdong 272013,China

【Abstract】 Objective The Influence of hypoxic precondition to different factorsanxic tolerance was studied in acute hypoxia pretreated mice.Methods Duplicates mouses acute hypoxic precondition model under the room temperature，recording mouse survival time.Results Dynamic changes were monitored by intraperitoneal injection.Conclusion Hypoxic precondition and tubocurarine can enhance anxic tolerance of mice，and both of them can be used at the same time.

【Key words】Anxic tolerance； Hypoxic precondition； Tubocurarine Caffeine

短時(shí)間內(nèi)的缺氧就可對(duì)機(jī)體器官造成不可逆的損傷，因此如何延長(zhǎng)耐缺氧時(shí)間成為治療伴缺氧癥狀疾病的關(guān)鍵。據(jù)報(bào)道，大鼠預(yù)先經(jīng)過進(jìn)行性缺氧僅3 min即可獲得對(duì)嚴(yán)重缺氧的耐受性。而且急性重復(fù)缺氧可使腦細(xì)胞發(fā)生適應(yīng)性變化。本試驗(yàn)利用急性重復(fù)缺氧模型，觀察給予不同藥物后小鼠缺氧耐受的變化，為尋找可行的耐缺氧治療提供資料。

1 材料與方法

1．1 實(shí)驗(yàn)材料 小白鼠（體質(zhì)量16~22 g）由本院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供；氯化筒箭毒堿(中國(guó)上海天豐藥業(yè)、批號(hào)：9006011)、咖啡因（吉林省舒蘭合成藥業(yè)股份有限公司）。

1．2 急性重復(fù)缺氧預(yù)處理模型 根據(jù)呂國(guó)蔚^[1]等的方法于室溫下進(jìn)行缺氧，將小鼠置于含有新鮮空氣經(jīng)過標(biāo)定的250 ml廣口瓶?jī)?nèi)，瓶蓋涂抹凡士林密封密閉，計(jì)時(shí)。一旦出現(xiàn)喘呼吸立即取出，隨即轉(zhuǎn)移到另一相似體積并含有新鮮空氣的廣口瓶?jī)?nèi)，密閉，計(jì)時(shí)，以此類推至4次。

1．3 試驗(yàn)方案 將小鼠隨機(jī)分為兩大組（每組30只）：（1）急性缺氧預(yù)處理組：又分為三個(gè)亞組：①生理鹽水對(duì)照組：腹腔注射生理鹽水（1 ml/10 g）；②筒箭毒堿對(duì)照組，腹腔注射8×10-5%筒箭毒堿（0．15 ml/g）（嚴(yán)格避光）；③咖啡因?qū)φ战M，腹腔注射1%咖啡因（1 ml/10 g）。（2）對(duì)照組：除不進(jìn)行缺氧預(yù)處理外，實(shí)驗(yàn)操作步驟同急性缺氧預(yù)處理組。每瓶放一只小鼠，廣口瓶以凡士林密封，塞緊瓶塞后開始計(jì)時(shí)，觀察記錄各組小鼠存活時(shí)間。

1．4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析用方差分析，P<0．05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

急性低氧預(yù)處理后小白鼠缺氧存活時(shí)間比正常對(duì)照組顯著延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05），即急性缺氧預(yù)處理可以提高小白鼠對(duì)缺氧的耐受性；小白鼠腹腔注射筒箭毒箭的缺氧存活時(shí)間比注射生理鹽水的顯著延長(zhǎng)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）；小白鼠腹腔注射咖啡因的缺氧存活時(shí)間比注射生理鹽水的顯著縮短，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。見表1。

3 討論

缺血缺氧預(yù)處理是經(jīng)過一次或多次的適度缺血缺氧刺激后^[2]，給予再灌注的處理方法。實(shí)驗(yàn)證明，經(jīng)預(yù)處理后機(jī)體對(duì)缺血缺氧可形成一定的耐受機(jī)制。近年有研究報(bào)道，急性重復(fù)缺氧可使腦細(xì)胞發(fā)生適應(yīng)性變化，還可以減低心臟缺血早期的能量代謝并促進(jìn)其功能恢復(fù)，增強(qiáng)其抵抗缺血再灌注的能力，從而使細(xì)胞在低氧條件下生存乃至恢復(fù)正常水平。

箭毒競(jìng)爭(zhēng)性阻斷遞質(zhì)ACh的作用，即肌細(xì)胞對(duì)神經(jīng)肌肉沖動(dòng)釋放的ACh不敏感，這可減少肌組織的耗能，從而使基礎(chǔ)代謝率降低，從而減少氧的消耗。預(yù)試驗(yàn)過程中，在應(yīng)用0．3 mg/kg的箭毒劑量時(shí)，未做缺氧試驗(yàn)的小鼠無呼吸肌受累的表現(xiàn)。劑量加大到0．5 mg/kg時(shí)，仍可正常呼吸。但在試驗(yàn)中，0．3 mg/kg劑量的小鼠缺氧耐受時(shí)間與對(duì)照組相比無明顯差別或降低，當(dāng)將劑量稀釋至8×10^-5%，0．15 ml/g(0．12 mg/kg)時(shí)，缺氧耐受性增強(qiáng)才表現(xiàn)得較為明顯。說明低劑量的箭毒在缺氧狀況下使用會(huì)降低耐受能力，適當(dāng)?shù)臏p量才能達(dá)到提高缺氧耐受能力的目的。

急性缺氧預(yù)處理是從增強(qiáng)呼吸能力、增強(qiáng)無氧代謝等方面，適應(yīng)機(jī)體的缺血-再灌注損傷；而箭毒則是以主要作用機(jī)制是與運(yùn)動(dòng)終板膜上的N₂受體結(jié)合，因無內(nèi)在活性，不激動(dòng)受體產(chǎn)生去極化反應(yīng)，從而阻斷ACh與N₂受體結(jié)合而使終板膜不產(chǎn)生終板電位，故肌細(xì)胞不能產(chǎn)生動(dòng)作電位而使骨骼肌松弛,從而減少氧的消耗^[3]。進(jìn)而共同抵抗缺氧缺血的不利環(huán)境延長(zhǎng)小鼠缺氧耐受時(shí)間。

綜上所述，本試驗(yàn)利用急性重復(fù)缺氧模型，在常壓低氧條件下分別觀察不同藥物對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響，發(fā)現(xiàn)給予適量劑量的箭毒可使小鼠的缺氧耐受顯著增強(qiáng)。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 呂國(guó)蔚.急性重復(fù)缺氧對(duì)小鼠缺氧耐受性的影響及其機(jī)制的初步探討.中國(guó)病理生理學(xué)雜志，1992,8(4):124-125.

［2］ Semenza GL.HIF-1:mediator ofphysiological and pathophysiological responses to hypoxia.J Appl Physio,2000,88(4):1474-1476.

［3］ 張鳳杰.對(duì)“ 新斯的明對(duì)筒箭毒堿肌松作用的影響”實(shí)驗(yàn)的改進(jìn).農(nóng)墾醫(yī)學(xué)， 2005，27(5):361-362.