解放動物試毒者

4月24日是世界實驗動物日。在是否該用動物做毒性實驗的問題上，動物福利與科學(xué)博弈的結(jié)果，是動物實驗中應(yīng)當(dāng)遵守的三個基本準(zhǔn)則：減少、優(yōu)化和替代。

室溫20℃， 濕度40%~70%， 籠子里的白鼠似乎對這樣的環(huán)境很滿意。這些白鼠屬于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所藥物安全評價研究中心， 在這里它們的身份是SPF，即無特定病原體實驗動物，不帶任何傳染病，身體健康，生活在屏蔽的環(huán)境下，呼吸的空氣每5 分鐘更新一次，絕對清新。

工作人員取出一根6~8 厘米長的不銹鋼針，針的前端有些弧度，針頭上焊著一個小金屬球。他把這根針安在注射器上，吸足藥液，沿著上顎伸進(jìn)每只白鼠的消化道。一滴，兩滴，白鼠們很配合地重復(fù)著吞咽的動作。這是每天的例行加餐，它們大概已經(jīng)習(xí)慣了。半分鐘后，離開灌胃針，它們奔向凹陷的給食器，開始進(jìn)食真正的食物。

與此同時，白鼠們的一舉一動正被人密切關(guān)注。從它們身上獲得的數(shù)據(jù)將決定一種新藥能否上市。而能否活蹦亂跳到最后，要看它們的運氣。

以身試毒的動物

中心的大門外，一條迷迷糊糊的狗剛從供應(yīng)商手中被工作人員接到懷里，大狗把腦袋耷拉在他的肩頭，仍然昏睡著。這只麻醉后的狗和籠子里的白鼠，統(tǒng)一規(guī)范的稱呼是“實驗動物”（laboratory animals）。它們必須是經(jīng)人工定向培育，在相應(yīng)環(huán)境設(shè)施內(nèi)飼養(yǎng)，用于科學(xué)研究、教學(xué)、生產(chǎn)、檢定以及其他科學(xué)實驗的動物。藥物安全評價研究中心的研究員劉彬（化名）說，這叫“背景明確，來源清楚”。

“我們最常用的有大鼠、小鼠、貓、狗、豬、猴子等等。豚鼠和兔子的皮膚比人類還敏感，經(jīng)常被用來做皮膚刺激實驗。靈長類比如猴子，我們可以測它的心電圖。治療呼吸道的藥物，要用雪貂，因為它的呼吸道跟人接近。”劉彬說。

作為衛(wèi)生部的直屬單位，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院下設(shè)的藥物安全評價研究中心負(fù)責(zé)對新的藥物、保健品進(jìn)行安全性測試。所謂安全性測試，又稱作毒性測試，也即一些人所說的“試毒”。“試毒者”約占實驗動物的十分之一。在食品添加劑進(jìn)入食品之前，化肥、農(nóng)藥灑入土地之前，防曬乳液涂抹上皮膚之前，正是這些“試毒者”為人類健康充當(dāng)著肉盾?！皠游飳嶒?zāi)軌驗槠浜蟮呐R床試驗提供借鑒意義”，劉彬解釋說，動物毒性實驗后一定還要做人體試驗，會招募志愿者進(jìn)行一期、二期、三期臨床試驗，先用健康的人來做，再用患病人群，最后擴(kuò)大，沒有問題后才會頒發(fā)正式批號，“在毒性測試中，如果在動物身上就產(chǎn)生腎衰竭，肝萎縮之類癥狀，自然就不會上報臨床了?！?/p>

而一旦缺少動物實驗的過濾，或者過濾失靈，悲劇就會發(fā)生。

2006 年3 月13 日是現(xiàn)代動物實驗史上黑暗的一天。在倫敦諾斯維克公園醫(yī)院，8 名身體完全健康的志愿者接受新藥實驗。每隔10 分鐘，他們被分別注射一種安慰劑或一種從未經(jīng)過人體試驗的新藥。這種被譽為“超級抗體”的TGN1412藥物曾按照歐盟藥物法的規(guī)定成功經(jīng)過了動物實驗，表明該種新藥對于多發(fā)性硬化癥和不同種類的白血病等自免疫疾病有著顯著療效。然而，在第一位志愿者接受注射后一個半小時內(nèi)，有6 名志愿者險些由于多重器官衰竭喪命。

動物保護(hù)主義的挑戰(zhàn)

藥物安全評價研究中心的工作人員多是獸醫(yī)、臨床醫(yī)學(xué)、毒理、藥理專業(yè)出身，工作上，分為技術(shù)系列和研究系列，分別負(fù)責(zé)喂藥操作和實驗設(shè)計。劉彬?qū)儆谘芯肯盗小Ｓ袝r，她在實驗的設(shè)計過程中會受到一些阻力。最常聽到藥廠方面的異議，是針對實驗動物的數(shù)量。“我們提交的實驗方案寫明需要30 只猴子，可他們?nèi)绻私鈬獾那闆r就會有疑問，說不對啊，國外20 只就足夠了！這時我們就需要拿出國家標(biāo)準(zhǔn)跟人家解釋，我們的實驗設(shè)計是合理合法的。國外那種做法其實是受到了動物保護(hù)主義的干擾?！?/p>

安全性動物實驗叫動物保護(hù)力量盯上，一點都不令人意外。

LD50（半數(shù)致死量）是毒理學(xué)中用于表示化學(xué)物毒性的指標(biāo)，簡單來說即指一群受試對象50% 個體死亡所需的劑量。LD50 測定起始于20 世紀(jì)20 年代末對毛地黃、胰島素、白喉類毒素的毒性測試。自此被奉為經(jīng)典。測定通常會讓6~7 組動物服用不同劑量的化學(xué)物質(zhì)，然后判定殺死一半動物所需的平均劑量，這往往需要用到140 只動物。LD50的單位為mg/kg，LD50 的數(shù)值越小，表示毒性越強。

通常，死亡數(shù)目達(dá)一半之前，動物的身體就已經(jīng)呈現(xiàn)出各種嚴(yán)重的癥狀。如果證明物質(zhì)毒性不強，則還要找出何種濃縮度才可以使動物死亡50%，這就必須繼續(xù)大量強迫喂食。由于這種測定旨在搞清多少量足以使半數(shù)動物致死，因此它們的痛苦不能用任何方式去緩解，以免結(jié)果不夠正確，盡管人類也許不可能這樣大量或高濃縮地使用該種物質(zhì)。

LD50 測定是動物實驗殘酷性的代表。正是因為有這樣的殘酷性，對于這道由實驗動物構(gòu)筑的活體關(guān)卡，并不是所有人都覺得有必要存在。劉彬所在的藥品、保健品檢測領(lǐng)域不過偶爾會面臨這樣的質(zhì)疑，總體來說還算風(fēng)平浪靜。但化妝品方面的動物實驗卻由于底氣不足，成為了眾矢之的：只為一個光鮮的外表而扼殺動物，人類是不是太過分了？

“要美麗，不要殘忍”、“這樣的美麗一點都不美麗”、“每三秒鐘就有一只動物為化妝品捐軀”、“你的紅唇上滴著動物的血”#8943;#8943;此類情緒色彩濃重的標(biāo)題在愛美人士的博客、論壇當(dāng)中頻頻出現(xiàn)。進(jìn)行簡單的搜索，相關(guān)的索引多指向國際著名動物保護(hù)組織PETA（人道動物保護(hù)協(xié)會）的網(wǎng)站。

作為全球最大的動物權(quán)利組織，PETA 擁有超過180 萬名成員及支持者，他們奉行的原則是：動物不是供我們食用、穿戴、實驗，以及娛樂的。PETA 所定義的“ 免于殘酷” 美容產(chǎn)品，必須不論原料、材料、制作流程或成品都未經(jīng)過動物實驗，也未委托其他機(jī)構(gòu)做。他們在主頁上列出了長長的化妝品商家名單。名單中的公司分成兩類：做動物實驗的（companies do test）與不做動物實驗的（companies don't test）。這兩份名單每兩個月進(jìn)行一次更新，上面有公司的詳細(xì)聯(lián)系方式。

一種被稱為“德萊塞(Drauze)實驗”的眼刺激實驗在這上面可謂“臭名昭著”。眼刺激性是指由于眼前部直接暴露于化學(xué)物質(zhì)而引起眼及其周圍粘膜的可逆性炎癥改變。眼用藥物、可能接觸到眼的化學(xué)物質(zhì)均應(yīng)考慮進(jìn)行眼刺激性試驗?；瘖y品首當(dāng)其沖，而最常用的就是“德萊塞實驗”。

在很多動物保護(hù)網(wǎng)站上都有這樣幾張令人感到惡心的兔子照片。

照片上，兔子的眼睛腫脹、潰爛、鮮血滴流，染紅了潔白的皮毛，虹膜、瞳仁和角膜潰爛成一團(tuán)?！秳游锝夥拧芬粫幸昧藙游飳嶒炑芯空叩母醒?，“由于角膜或眼內(nèi)結(jié)構(gòu)的嚴(yán)重內(nèi)傷，使動物完全失明。動物急迫地閉上眼睛，嘶叫、抓眼、跳，試圖逃脫。”這個實驗始于40 年代，發(fā)明人德萊塞是美國食品與藥物管理局（FDA）的工作人員，他用這種方法來測定毒物的刺激度。實驗中，受試物被置于成年白兔的眼結(jié)膜囊中，人工強行閉合數(shù)秒鐘，在給藥后適當(dāng)時間，對角膜渾濁度、虹膜充血程度、結(jié)膜水腫以及結(jié)膜分泌物進(jìn)行打分。由于兔子沒有淚水，不會將測試物質(zhì)沖洗掉，所以被選來測試發(fā)膠、指甲油等化妝品。而且，由于簡單易行，不需要特殊儀器設(shè)備，被廣泛使用。

它們可以得到的幸福

1992 年剛?cè)胄袝r，劉彬沒覺得動物在實驗中的痛苦有何不妥。事實上，從有些動物臉上，想看出什么來也實在很難。一次給猴子取血，她發(fā)現(xiàn)這只靈長類動物竟然眼神游移，緊張不安，劉彬嚇了一跳。她當(dāng)時的師傅不明白自己的徒弟怎么會如此膽小，不準(zhǔn)她躲避，“就當(dāng)著動物，殺雞給猴看，讓它們老實點”。但接下來，劉彬仿佛開始能從各種動物臉上讀出更多恐懼。只要有機(jī)會，不得不處死動物，她會選擇去另一間屋子。第一次參加國際會議回來，她才發(fā)現(xiàn)，原來國外早就已經(jīng)在這么做了！

早在19 世紀(jì)初期，1809 年，一位英國勛爵就試圖通過立法阻止虐待動物現(xiàn)象的發(fā)生，并在國會上提出議案。當(dāng)時的人們覺得荒唐可笑。13 年后，禁止虐待動物的議案“馬丁法令”獲得上下兩院通過，成為世界上第一部有關(guān)動物福利的法令?！斑@（人類給動物造成的痛苦）是最難思考清楚的問題之一，它涉及某些混合了與動物福利相關(guān)的人類道德?！笨剂帧?斯伯丁通過他的書《動物福利》號召大家思考，減輕人類痛苦是否應(yīng)該以其他個體—— 無論是人還是動物——的痛苦為代價。導(dǎo)言中，他引用了范· 威芬的話：一個社會的文明水平?jīng)Q定于人們對待生命的態(tài)度以及生命被尊重的程度。斯伯丁進(jìn)一步說，“即使能夠證明拔掉蒼蠅的翅膀并不會使蒼蠅感覺到痛苦，那么這樣做就是對的或是可以接受的嗎？”

動物福利與科學(xué)博弈的結(jié)果，體現(xiàn)在實驗動物身

上就是“3R” 原則。1959 年，動物學(xué)家威廉· 拉塞爾和微生物學(xué)家雷克斯· 伯奇共同出版了《人道實驗方法準(zhǔn)則》一書，其中提出了在動物實驗中應(yīng)當(dāng)遵守的三個基本準(zhǔn)則：減少、優(yōu)化和替代。減少（reduction），即將實驗加以設(shè)計，用最少的動物，得到適當(dāng)?shù)馁Y訊。LD50 測定雖然經(jīng)典，但這種牛刀殺雞的做法越來越不能被忍受。1989 年之后，人們就利用統(tǒng)計方法上的改進(jìn)，使LD50 測定所需的動物數(shù)目可以降低到45只。優(yōu)化（refinement）原則針對的是動物的痛苦，比如為動物實施安樂死。替代（replacement）原則，則是對實驗動物徹底的解放。

三年前， 劉彬所在的中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所通過了AAALAC 認(rèn)證。AAALAC，即國際實驗動物評估和認(rèn)可管理委員會是一個私營的、非政府組織。它通過自愿評估和認(rèn)證計劃促進(jìn)在科學(xué)領(lǐng)域人道地對待動物。AAALAC 認(rèn)證的國際聲譽很高，世界500 強醫(yī)藥巨頭曾聯(lián)合申明，它們醫(yī)藥產(chǎn)品的動物實驗都將在AAALAC 認(rèn)證單位完成，目前，全球已有700 多家制藥和生物技術(shù)公司、大學(xué)、醫(yī)院和其他研究機(jī)構(gòu)獲得了AAALAC 的國際認(rèn)證。中國經(jīng)過AAALAC 認(rèn)證的機(jī)構(gòu)一共有15 家，中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所是首家，劉彬說，這表明所里的實驗動物研究已經(jīng)同國際接軌了。加入之后，籠具、設(shè)施、衛(wèi)生條件，方方面面都有更高標(biāo)準(zhǔn)。“4 千克左右的猴子，要1 個立方米；現(xiàn)在80 千克的活人恐怕都沒有20立方米的空間吧，”劉彬笑說，按照規(guī)定，每一年半她們都將迎接一次AAALAC 方面的審查，今年10 月份就有一次，“最大的好處是，國際認(rèn)可我們，會有更多外國人愿意把實驗放在中國來做?！?/p>

技術(shù)替代動物

“科學(xué)發(fā)展意味著實驗，實驗則需要實驗動物?！薄犊茖W(xué)》雜志前主編唐納德·肯尼迪說出了一個事實。但在做了“數(shù)不清”的動物實驗后，有17 年的動物實驗經(jīng)驗的劉彬依然感嘆，“如果不是為了人類，這些接受毒性測試的實驗動物也就不需要受罪了。”或許對于實驗動物，科學(xué)和人道并不是不可得兼。像劉彬這樣的研究人員、動物保護(hù)者，以及那些不能直接發(fā)言的實驗動物愿意將未來寄于3R 當(dāng)中的最末一個R——“替代”。

曾遭人質(zhì)疑的“德萊塞眼部刺激實驗”已經(jīng)有了公認(rèn)的替代方法：用受精雞卵尿囊絨膜(CAM) 代替兔子。這層膜分割蛋黃與蛋白，由尿囊、絨毛膜結(jié)合而成，它上面血管豐富，同眼結(jié)膜相似，但比眼結(jié)膜還薄。在雞胚胎發(fā)育到10 天的時候，使受精雞卵尿囊絨膜接觸受試物，研究人員通過觀察充血、出血、凝血3種反應(yīng)的時間，就能判斷出刺激水平。這是一種離體器官替代方法。雖然生雞蛋換下了活生生的小兔子，但有些人仍覺得，畢竟用到了動物，不能算完全意義上的替代。

細(xì)胞與組織培養(yǎng)是一種取之于人用之于人的替代方式。從人體提取細(xì)胞，體外培養(yǎng)，研究人員可以獲得皮膚、肺臟、眼睛、肌肉、黏膜等器官的細(xì)胞和組織。在試管里，化學(xué)品的生物作用機(jī)制明白可見——這是利用整只動物無法辦到的；更重要的是，試驗結(jié)果可以直接外推到人。重組人皮替代物的研究就是其中之一，皮膚材料來源完全可以從新生兒包皮、成年人皮膚或者整形手術(shù)當(dāng)中獲得，之后置于培養(yǎng)液和空氣交界面進(jìn)行培養(yǎng)。利用這種方法，國外很多人工皮膚產(chǎn)品的知名企業(yè)（Episkin、SkinEthic、EpiDenn 等）都可以為化妝品公司提供檢測急性和慢性皮膚刺激的產(chǎn)品。歐萊雅公司在接受本刊記者采訪時說，他們正在采用的就是這樣一種人造皮膚替代法。

另一種設(shè)想是：或許最終代替動物試毒的會是電腦。國外制藥業(yè)正在研發(fā)各種計算機(jī)模型，模擬器官互動的方式，來研究藥物的作用。這些模型可以在藥物分子到達(dá)人體細(xì)胞之前預(yù)測其效果，供科學(xué)家在藥物投產(chǎn)前檢測該藥物分子是否會產(chǎn)生毒性。

從3R 原則被提出至今已有半個世紀(jì)，國外關(guān)于動物實驗替代方法的研究已相當(dāng)成熟，有不少頗具影響的替代法研究中心： 美國霍普金斯動物實驗替代法研究中心(CAAT)、荷蘭動物應(yīng)用替代方法研究中心(NCA)、歐洲替代法驗證中心(ECVAM) 等。相比而言，中國還在蹣跚學(xué)步。作為國內(nèi)動物實驗替代技術(shù)研究的專家，中國藥物生物制品鑒定所的賀爭鳴研究員用一項“內(nèi)毒素檢查法替代家兔熱源質(zhì)檢查”方法舉例說，這類檢查法在美國第23 版(1995 年) 藥典中，已收載了500 個品種，而在我國的藥典(1995 年) 中，僅13 個品種。

在替代技術(shù)和動物保護(hù)主義的雙重督促下，歐盟決定“從2009 年起禁止使用動物進(jìn)行化妝品毒性和過敏實驗，2013 年禁止使用動物進(jìn)行化妝品原料的安全性評價；逐步不允許成員國從外國進(jìn)口和銷售進(jìn)行動物實驗的化妝品”。這似乎標(biāo)志著貿(mào)易壁壘即將形成，為安全性評估動物實驗提出了除科學(xué)、道德層面以外的另一個問題。

● 誰該做動物安全性檢測？

是不是某些材料毒性太強，所以必須做動物安全性檢測？按我國的標(biāo)準(zhǔn)，化妝品一般分為兩類，一種是普通化妝品，只需要檢測金屬含量和細(xì)菌是否超標(biāo)，一般不需要動物實驗；另一種是特殊化妝品，需要分成不同類別，如祛斑、防曬、防脫、減肥、生發(fā)、增白等進(jìn)行檢測，這里面將會用到動物實驗。而當(dāng)一種新的化合物要加入化妝品時必須按照《化妝品安全性評價程序和方法》進(jìn)行安全性檢測，不僅需要動物實驗，還要經(jīng)過人體試驗。

尾聲

在中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物研究所藥物安全評價研究中心的院子里，有一小塊為實驗動物而設(shè)的慰靈石，就在一顆青松樹蔭之下。劉彬告訴記者，研究人員逢年過節(jié)會時不時在那里放些水果和鮮花。

實驗動物的尸體，定期被專門的生物垃圾回收公司運走，燒成灰。焚燒尸體的高溫同樣分解著它們身上殘留的化學(xué)藥物。塵歸塵、土歸土，完成了它們?yōu)閷嶒灦囊饬x與使命。