品種純度鑒定技術(shù)及其發(fā)展等

李　蓉　煙　彬　邢惠梅　茹　鮮　曉　剛　艾合買提

20世紀(jì)50年代以前，品種純度鑒定技術(shù)發(fā)展到了田間小區(qū)鑒定和田間檢驗(yàn)方法。50年代后，國(guó)際種子檢驗(yàn)協(xié)會(huì)開(kāi)始提出種子檢驗(yàn)室鑒定品種的可能性和價(jià)值。70和80年代發(fā)展了電泳技術(shù)、幼苗鑒定技術(shù)和快速鑒定技術(shù)。90年代開(kāi)始注意計(jì)算機(jī)模擬分析系統(tǒng)和分子技術(shù)的應(yīng)用。

1形態(tài)鑒定技術(shù)

1．1種子形態(tài)鑒定通過(guò)種子形狀、大小、色澤、質(zhì)地、表面的光與毛以及種子外表各部位的特征加以鑒別，以區(qū)分本品種與異品種。如，小麥可根據(jù)種子籽粒形狀和顏色、粒質(zhì)胚部性狀、頂端茸毛的有無(wú)及分布，籽粒皺痕等來(lái)鑒別；玉米種子根據(jù)粒形、粒色、粒質(zhì)、正面的長(zhǎng)寬比及胚的凹陷程度來(lái)鑒別；棉花種子根據(jù)纖維長(zhǎng)度、整齊度、棉籽形狀、大小、顏色、短絨有無(wú)及多少等來(lái)鑒別。隨著現(xiàn)代育種科學(xué)的發(fā)展，不同品種間種子外觀形態(tài)的差異越來(lái)越小，靠區(qū)別種子形態(tài)上的差異來(lái)鑒定種子純度也變得越來(lái)越困難。

1．2幼苗形態(tài)鑒定根據(jù)不同品種幼苗的獨(dú)特性狀進(jìn)行檢驗(yàn)，如幼苗芽鞘顏色、幼苗生長(zhǎng)錐、子葉的形狀、顏色、大小等。

鑒定途徑有兩種，一種是提供給植株以加速發(fā)育的條件(類似于田間小區(qū)鑒定，只是所需時(shí)間較短)，當(dāng)幼苗達(dá)到適宜評(píng)價(jià)的發(fā)育階段時(shí)，對(duì)全部或部分幼苗進(jìn)行鑒定；另一種途徑是讓植株生長(zhǎng)在特殊的逆境條件下，測(cè)定不同品種對(duì)逆境的不同反應(yīng)來(lái)鑒別不同品種。該法簡(jiǎn)便、省時(shí)，比種子形態(tài)法的使用范圍明顯擴(kuò)大，但能用于鑒別的性狀仍不夠多，且受環(huán)境影響較大，因此無(wú)法鑒別性狀差異不明顯的品種。

1．3植株形態(tài)鑒定(田間小區(qū)種植鑒定)該法是將一定量的作物種子在田間種植一個(gè)小區(qū)，單粒播種，不間苗、不定苗。設(shè)有標(biāo)準(zhǔn)樣品作對(duì)照，在檀株的不同發(fā)育時(shí)期與標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)行比較對(duì)照。主要根據(jù)株形、株高片數(shù)、葉色、葉片寬窄、花藥顏色等做出評(píng)判，從而對(duì)不同品種加以鑒別。田間小區(qū)種植鑒定方式多種多樣，可在當(dāng)?shù)赝?、?dāng)?shù)禺惣净虍惖禺惣痉N植鑒定。該方法能夠觀察、比較的性狀較多。結(jié)果準(zhǔn)確、可靠。是目前解決種子質(zhì)量糾紛中最具有法律效力的檢測(cè)方法。缺點(diǎn)是費(fèi)工、費(fèi)時(shí)、鑒定周期長(zhǎng)、費(fèi)用高，而且此法受環(huán)境和人為影響較大，鑒定者的觀察經(jīng)驗(yàn)也制約著鑒定的準(zhǔn)確性。

2快速鑒定技術(shù)

2．1苯酚染色法適用于小麥、大麥、燕麥、水稻等。將種子用苯酚染色，根據(jù)染色程度的差異來(lái)區(qū)分出不同品種。小麥根據(jù)穎果染成的顏色，大麥、燕麥觀察內(nèi)外稃染色深淺，水稻根據(jù)谷粒或米粒染色程度，來(lái)判定是本品種還是異品種。

2．2愈傷木酚專門(mén)用于大豆品種鑒別的方法。大豆種皮內(nèi)具有過(guò)氧化物酶，不同品種由于遺傳基礎(chǔ)不同，過(guò)氧化物酶的活性不同，在一定條件下，溶液染色的深淺不同，依此區(qū)分不同品種。

2．3高粱種子氫氧化鉀一漂白粉測(cè)定法根據(jù)高粱種皮或種皮下黑色素(單寧酸)有無(wú)的差異，區(qū)分高粱品種的方法。

2．4小麥種子的氫氧化鈉測(cè)定法當(dāng)紅白皮不易區(qū)分(尤其是經(jīng)殺菌劑處理的種子)時(shí)，可用氫氧化鈉處理，根據(jù)種子淺色和深色加以區(qū)別。

2．5燕麥種子氯化氫測(cè)定法將燕麥種子放入氯化氫溶液浸泡，根據(jù)棕褐色(熒光種子)或黃色(非熒光種子)來(lái)鑒別不同品種的種子。

2．6燕麥種子熒光測(cè)定法應(yīng)用波長(zhǎng)360A紫外光照射，根據(jù)內(nèi)外稃有無(wú)熒光或強(qiáng)弱進(jìn)行鑒定。

3生化鑒定技術(shù)

目前，生化鑒定技術(shù)有蛋白質(zhì)電泳法、色譜法鑒定、免疫鑒定技術(shù)等。其中，電泳法是品種純度測(cè)定中較為快速準(zhǔn)確的方法，是指利用電泳技術(shù)對(duì)供檢樣品的種子或幼苗的蛋白質(zhì)進(jìn)行分離、染色。形成電泳譜帶的差異，并與標(biāo)準(zhǔn)品種相比較，從而鑒定品種純度的一種方法。該法快速、穩(wěn)定、重演性好，具有一定的使用價(jià)值，特別是作為種子營(yíng)銷過(guò)程的品種純度快速驗(yàn)證方法。但對(duì)于某些遺傳組成非常接近的品種，不易找到特異蛋白，采用蛋白質(zhì)電泳難以發(fā)現(xiàn)特征帶，不容易鑒別。

3．1同工酶電泳技術(shù)酶是生物代謝申的一種特殊蛋白質(zhì)．同工酶是指同一生物體或同一組織中催化相同化學(xué)反應(yīng)，結(jié)構(gòu)不同的一類酶。其結(jié)構(gòu)的差異來(lái)源于基因型的差異。在作物種子純度鑒定中，常用的是多態(tài)性較強(qiáng)的脂酶和過(guò)氧化物酶，所用方法多為聚丙烯酰胺凝膠電泳法。該方法的缺點(diǎn)是，同工酶往往具有組織或器官特異性，即同一時(shí)期不同器官內(nèi)同工酶的數(shù)目不同，某些同工酶在種子貯藏和萌發(fā)過(guò)程中，種類數(shù)目易隨生活力和發(fā)育進(jìn)程的變化而變化，加之種子萌發(fā)速度不一致，所以對(duì)品種純度鑒定不利。此外，酶的提取和電泳條件較蛋白質(zhì)要求嚴(yán)格，需在低溫下進(jìn)行。

3．2種子貯藏蛋白電泳技術(shù)種子中所含的貯藏蛋白質(zhì)可分為清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白、谷蛋白等。目前鑒定品種的常用電泳方法有：鑒定小麥和大麥品種醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)程序；鑒定小麥谷蛋白、豌豆屬和黑麥草屬的SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)方法等。我國(guó)GB/T3543“農(nóng)作物種子檢驗(yàn)規(guī)程”已將“國(guó)際種子檢驗(yàn)規(guī)程”的鑒定小麥和大麥品種的聚丙烯酰胺凝膠電泳標(biāo)準(zhǔn)參照方法列入應(yīng)用。2001年農(nóng)業(yè)部頒布了“玉米種子純度鹽溶蛋白電泳鑒定方法”(NY/T449－2001)。

4DNA分子標(biāo)記鑒定技術(shù)

通過(guò)對(duì)品種DNA的多態(tài)性即DNA堿基序列的差異進(jìn)行分析，從而鑒別不同品種。其檢測(cè)對(duì)象是種子的DNA片段(基因)，沒(méi)有器官的特異性，在植物體的各個(gè)組織、各個(gè)發(fā)育時(shí)期均可檢測(cè)；不受環(huán)境的影響，不存在表達(dá)與否的問(wèn)題；數(shù)量極多，遍及整個(gè)基因組，多態(tài)性豐富；準(zhǔn)確性高；重復(fù)性好；分離出的樣品DNA在適宜條件下可長(zhǎng)期保存，這對(duì)進(jìn)行追溯性或仲裁性鑒定是非常有利的。但DNA分子標(biāo)記技術(shù)因所需儀器精密、藥品昂貴，程序復(fù)雜等，還沒(méi)有大規(guī)模的應(yīng)用于品種純度鑒定。

辣椒的貯藏保鮮技術(shù)

張彥生

由于辣椒生產(chǎn)的季節(jié)性，使得淡旺季矛盾較為突出，因此，搞好辣椒貯藏不僅可以調(diào)節(jié)市場(chǎng)的產(chǎn)銷矛盾，也可增加經(jīng)濟(jì)收入。

1貯藏特性

1．1對(duì)低溫的敏感性辣椒果實(shí)對(duì)低溫比較敏感，當(dāng)環(huán)境溫度低于6℃時(shí)，若長(zhǎng)期貯藏就可能產(chǎn)生冷害。辣椒受到冷害后，種子和花萼發(fā)生褐變，果皮色澤變暗，產(chǎn)生不規(guī)則的凹陷斑點(diǎn)，不能正常后熟，繼而感染病菌，造成腐爛。

1．2對(duì)二氧化碳的敏感性一定濃度的二氧化碳對(duì)辣椒有保鮮、保綠作用，當(dāng)二氧化碳濃度超過(guò)一定濃度時(shí)就會(huì)引起傷害，造成萼片褐變和果肉腐爛。不同品種以及不同產(chǎn)地的辣椒對(duì)二氧化碳的忍耐力不同，在實(shí)際操作中應(yīng)掌握在2％以下為安全范圍。

1．3易失水收獲后的辣椒極易失水，使得果梗變干，果皮皺縮，所以要求貯藏過(guò)程中采取保濕措施。但是如果貯藏環(huán)境中濕度過(guò)大，特別是結(jié)露水過(guò)多，極易引起辣椒腐爛變質(zhì)。

1．4易轉(zhuǎn)紅辣椒采收后有后熟過(guò)程，即山青綠色轉(zhuǎn)為紅色和黃色，由硬變軟?？刂妻D(zhuǎn)紅的關(guān)鍵措施是控制溫度。

2對(duì)貯藏條件的要求

2．1溫度溫暖潮濕地區(qū)種植的辣椒比寒冷干燥地區(qū)的辣椒對(duì)低溫更敏感，同樣晚秋季節(jié)采收的辣椒比夏季采收的辣椒耐低溫能力強(qiáng)。晚熟品種比早熟品種耐低溫。貯藏溫度可根據(jù)不同地區(qū)而定，寒冷、干燥和晚熟品種一般可控制在7－8℃，夏季和潮濕地區(qū)采收的辣椒貯藏一般不低于9℃。相對(duì)濕度90－95％，過(guò)低果實(shí)易失水、萎蔫、果皮皺縮；過(guò)高又易引起腐爛。

2．2氣體成分在實(shí)際貯藏中，可通過(guò)選擇透氣性好的保鮮膜和控制裝果數(shù)量，來(lái)控制氧和二氧化碳的濃度，一般維持氧2－5％，二氧化碳1－2％，過(guò)量的二氧化碳可用消石灰來(lái)吸收。

3影響辣椒耐貯性的因素

3．1品種選擇辣椒品種間耐貯性差異較大。果皮厚、表皮光亮、褶皺少、果實(shí)干物質(zhì)含量較高、色澤濃綠的晚熟品種較耐貯藏，如茄門(mén)、世界冠軍、巴彥、中椒4號(hào)等，早中熟尖椒類不耐貯藏。

3．2栽培管理果實(shí)采收后的生理狀態(tài)，包括耐貯性和抗病性，是在田間生長(zhǎng)條件下形成的。果實(shí)的生育特性、地區(qū)氣候、土壤條件和管理措施等，都會(huì)對(duì)果實(shí)的品質(zhì)及貯藏特性產(chǎn)生直接或間接的影響。因此，辣椒防腐必須從田間種植開(kāi)始，在采收前的10－15天可噴施適當(dāng)?shù)臍⒕鷦?，如甲基托布津、克菌丹、乙磷鋁、代森錳鋅等，盡可能地消除從田間帶來(lái)的病菌。

3．3采收期的確定和采收技術(shù)采收期對(duì)辣椒的耐貯性有較大影響，9月下旬(霜前一周)采收的果實(shí)較耐貯藏，可貯兩個(gè)月以上。而8月份正值高溫多雨季節(jié)，田間帶病較多，這時(shí)采收的果實(shí)只能貯一個(gè)月左右。長(zhǎng)期貯藏的辣椒要選果實(shí)充分膨大、果肉厚而堅(jiān)硬、光亮而未轉(zhuǎn)紅的綠熟果。采收應(yīng)在晴天早晨氣溫較低對(duì)進(jìn)行，戴絨線手套握住果梗采摘，防止果實(shí)和果柄受傷，也可用平頭鋒利的剪刀采摘。輕拿輕放，盡量避免機(jī)械傷的產(chǎn)生。

4貯藏技術(shù)

4．1貯前準(zhǔn)備及預(yù)冷

貯前準(zhǔn)備包括貯藏架及塑料箱、紙箱和保鮮膜袋等。架子可選用平架或立架兩種。平架要離開(kāi)地面20cm，立架則要分層搭起，搭架材料最好選用角鐵，架寬為60em－1.2m，層高40－50cm，長(zhǎng)和高視庫(kù)位而定，架與架之間要留50－70cm，架子要保持堅(jiān)固平穩(wěn)。搭架后，選用庫(kù)房專用煙霧消毒劑或硫磺點(diǎn)燃密閉24小時(shí)，打開(kāi)庫(kù)門(mén)窗排出庫(kù)內(nèi)殘留霧。貯藏用具包括塑筐、紙箱等，要進(jìn)行消毒處理。在辣椒入貯前應(yīng)開(kāi)機(jī)降溫。采收后的辣椒，在低于貯藏溫度1℃的條件下預(yù)冷1－2天，以減少呼吸消耗，保持新鮮，同時(shí)還可避免裝袋后結(jié)露，減少腐爛。剔除紅果、病果、蟲(chóng)果及傷果。

4．2保鮮庫(kù)貯藏法

4．2．1大帳貯藏將預(yù)冷好的辣椒裝入消過(guò)毒的箱內(nèi)，每箱5－10kg,放入架上。在上架前將備好的2.3－3nma透氣性好的塑料膜將架底鋪好，辣椒上架冷透后要迅速扣帳密封，并在帳的四周開(kāi)幾個(gè)8－10cm的小窗，便于通風(fēng)補(bǔ)氧，降低二氧化碳濃度。一般貯藏前期15－20天補(bǔ)氧一次，后期7－10天補(bǔ)氧一次(每1次補(bǔ)氧5－10分鐘)。為防止下部二氧化碳積聚，引起傷害，可在帳內(nèi)撒一些消石灰，來(lái)吸收多余的二氧化碳。

4．2．2小包裝平架貯藏將預(yù)冷好的辣椒裝入箱內(nèi)，每箱不超過(guò)5kg，把透氣性好的保鮮袋套在箱子的外圍，注意裝箱易少不易多，過(guò)多會(huì)引起二氧化碳積聚，造成腐爛。碼垛時(shí)，垛與垛之間要留5-10cm的空隙，庫(kù)頂要留50－70cm，架底要撒一層消石灰。在貯藏時(shí)最好使用辣椒防瘋劑，嚴(yán)格把關(guān)，可貯60－70天。

4．3民間土藏法

4．3．1溝藏在背陰處挖寬和深各1m，長(zhǎng)依地形而定。將采收后的辣椒直接放人溝內(nèi)，厚度不超過(guò)50cm，在溝底鋪一層沙子，將辣椒散放于上，上面蓋一層稻殼或沙子，頂上要蓋草簾等保溫防寒物。此法可貯40－50天。

4．3．2窯洞貯藏采用筐裝的形式，每筐容量以10－15kg為宜。先在筐內(nèi)襯一層薄紙，裝滿辣椒后上面蓋一層紙，加蓋，成“晶”字形堆碼，這種方法容易失水，要注意保持窯洞內(nèi)的濕度，10天左右檢查一次，挑出紅果和腐爛果。夜間氣溫低時(shí)打開(kāi)窯洞門(mén)通風(fēng)降溫，要保持濕度注意加濕。

4．3．8帶秸稈民宅貯藏晚秋辣椒基本成熟后，將帶秸稈的辣椒用鐮刀從根部割起。運(yùn)輸時(shí)輕裝、輕拿。先用0.5％的漂白粉水噴灑房?jī)?nèi)的墻壁和地面進(jìn)行消毒，然后將帶秸稈的辣椒整齊地碼在房?jī)?nèi)，最好垛與垛之間留50－70cm人行道。等外界氣溫過(guò)低時(shí)要堵好門(mén)窗，注意保溫加濕(加濕可用濕草簾覆蓋)，這樣也可貯藏40－50天。