薩米特甜櫻桃離體快繁技術(shù)研究

摘 要：以薩米特甜櫻桃1年生枝休眠芽為外植體，進(jìn)行離體快繁技術(shù)研究。結(jié)果表明，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA 1.0mg/L+GA 0.5mg/L；最佳增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA 1.0mg/L+IBA 0.25mg/L；最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA 0.5mg/L。

關(guān)鍵詞：甜櫻桃；薩米特；離體快繁

中圖分類號(hào)：S662.5

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1002-2910(2007)04-0005-02

甜櫻桃品種薩米特(Summit)，是先鋒(Van)和薩姆(Sam)做親本雜交育成的中晚熟紫色大果型品種。1984年引入我國(guó)，表現(xiàn)極豐產(chǎn)，果實(shí)色澤亮麗，風(fēng)味濃厚，品質(zhì)優(yōu)良且抗裂果、抗寒和抗旱力較強(qiáng)，發(fā)展?jié)摿艽?sup>[1]。為加快繁殖苗木，進(jìn)行了離體快繁技術(shù)研究。

1 材料與方法

2006年12月取薩米特的1年生枝條，剪切成長(zhǎng)5cm左右的單芽莖段，用洗衣粉溶液浸泡30分鐘，然后用自來(lái)水流水沖洗1～2小時(shí)，在超凈工作臺(tái)上用70%的酒精浸1～2分鐘，無(wú)菌水沖洗2次，再用0.1%的氯化汞浸10分鐘，無(wú)菌水沖洗3次。將芽外面幾層鱗片剝?nèi)?，?.1%氯化汞消毒5分鐘，無(wú)菌水清洗5次。取芽放入培養(yǎng)皿中，用無(wú)菌刀切取嫩芽接種^[2～3]。

誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA+GA+糖30mg/L+瓊脂6mg/L。6-BA濃度分別為0.5、1.0和2.0mg/L，GA濃度分別為0.1、0.5和1.0mg/L。共9個(gè)組合，每個(gè)組合重復(fù)3次，研究不同濃度6-BA和GA組合對(duì)外植體生長(zhǎng)分化的影響。

不定芽增殖培養(yǎng)基以MS、F14和改良MS為基本培養(yǎng)基，分別添加0.05、1.0、2.0mg/L 6-BA和0.10、0.25、0.50mg/L IBA，每個(gè)組合重復(fù)3次，每重復(fù)10瓶。研究基本培養(yǎng)基及6-BA和IBA組合對(duì)不定芽分化增殖的影響。

生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA+糖30mg/L+瓊脂6mg/L。IBA濃度分別為0.1、0.2、0.5和1.0mg/L，每處理重復(fù)10次，研究不同濃度IBA促進(jìn)生根的效果。培養(yǎng)基pH值為5.5～5.8，培養(yǎng)溫度25±2℃，光照下培養(yǎng)16小時(shí)、黑暗下8小時(shí)，光照強(qiáng)度1500～2000lx^[4]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度6-BA和GA對(duì)薩米特甜櫻桃外植體生長(zhǎng)和分化的影響

接種7～11天后芽開(kāi)始萌動(dòng)，15天后基部有愈傷組織產(chǎn)生。35天后統(tǒng)計(jì)誘導(dǎo)分化情況，結(jié)果見(jiàn)表1。從表1看出，誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中添加的6-BA為1.0mg/L、GA為0.5mg/L時(shí)，誘導(dǎo)率最高，芽苗健壯。6-BA和GA濃度增加或降低，芽的誘導(dǎo)分化率均降低，且芽苗生長(zhǎng)細(xì)弱。高濃度6-BA會(huì)引起芽苗的玻璃化。芽苗玻璃化程度與GA濃度關(guān)系不明顯。6-BA濃度一定時(shí)，GA濃度增高，芽苗高度增加；當(dāng)GA濃度超過(guò)0.5mg/L時(shí)，芽增高不明顯，甚至有所降低。

2.2 不同培養(yǎng)基和激素組合對(duì)薩米特甜櫻桃試管苗分化增殖的影響

接種35天后調(diào)查，MS、F14和改良MS培養(yǎng)基中添加不同濃度6-BA和IBA的芽分化增殖情況，結(jié)果見(jiàn)表2。

從表2看出，不同培養(yǎng)基和添加不同濃度的激素對(duì)芽分化增殖生長(zhǎng)影響十分顯著。3種培養(yǎng)基差異顯著，以改良MS芽增殖系數(shù)最高，其次為MS，F(xiàn)14較低。芽增殖系數(shù)大小與6-BA濃度關(guān)系密切，生長(zhǎng)情況差異也較大。當(dāng)6-BA濃度為1.0mg/L時(shí)，芽增殖系數(shù)大，且生長(zhǎng)狀況最佳；隨著6-BA濃度增高，增殖系數(shù)下降，苗生長(zhǎng)也差，葉片變黃呈現(xiàn)水漬狀，并且隨著IBA濃度的降低，苗的長(zhǎng)勢(shì)減弱。表2表明，不同基本培養(yǎng)基均以添加1.0mg/L 6-BA和0.25mg/L IBA的芽增殖系數(shù)高，苗生長(zhǎng)健壯，葉色濃綠。對(duì)薩米特甜櫻桃來(lái)說(shuō)，最佳分化增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.25 mg/L。

2.3 IBA對(duì)薩米特甜櫻桃試管苗生根的影響

將高2cm以上、生長(zhǎng)健壯的小苗轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，30天后調(diào)查生根狀況，結(jié)果見(jiàn)表3。

從表3看出，生根培養(yǎng)基中添加的IBA濃度在0～1.0mg/L范圍內(nèi)，隨IBA濃度增高，生根率、平均根粗和根長(zhǎng)增加，但濃度為1.0mg/L時(shí)，生長(zhǎng)表現(xiàn)差，會(huì)抑制芽苗生長(zhǎng)。生根培養(yǎng)基以1/2MS+ IBA0.5mg/L效果最好，生根率高，根系生長(zhǎng)健壯，芽苗生長(zhǎng)粗壯而較高。

3 小結(jié)

以薩米特甜櫻桃1年生枝休眠芽為外植體進(jìn)行離體快繁，最佳誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+6-BA1.0mg/L+GA0.5mg/L；最佳增殖培養(yǎng)基為改良MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.25mg/L；最佳生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0.5mg/L。

參考文獻(xiàn)：

[1] 劉慶忠.加拿大甜櫻桃品種薩米特的引種初報(bào)[J].落葉果樹(shù)，2005(5)：22～24.

[2] 閆國(guó)華，張開(kāi)春，周宇，等.中國(guó)櫻桃“對(duì)櫻桃”不定根離體再生植株的研究[J].園藝學(xué)報(bào)，2003，30(5)：583～585.

[3] 李文金，賈匯紅，王均華，等.歐洲甜櫻桃矮化砧木Rus-25的組織培養(yǎng)與植株再生[J].植物生理學(xué)通訊，2004(6)：718.

[4] 代紅艷.甜櫻桃品種微繁體系的建立及優(yōu)化[J].果樹(shù)學(xué)報(bào)，2004，21(3)：216～219.