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    膽囊癌組織星形膠質細胞上調基因1異常表達與臨床病理及預后的關系

    2021-08-25 02:53:14崔大鵬張迎春宋文麗張鵬娟張星月劉振顯連晶晶劉博
    實用醫(yī)學雜志 2021年15期
    關鍵詞:膽囊癌鱗癌病理

    崔大鵬 張迎春 宋文麗 張鵬娟 張星月 劉振顯 連晶晶 劉博

    河北北方學院附屬第一醫(yī)院1肝膽外科,2普通外科,3護理部,4檢驗科,5病理科(河北張家口075000)

    膽囊癌發(fā)病率居消化系統(tǒng)腫瘤的第6 位,占膽道腫瘤的80%~95%,多數患者起病隱匿,早期多缺乏典型表現,使得早期診斷較難,確診時已進入晚期或出現轉移[1]。目前膽囊癌疾病生物學機制研究尚不充分,缺少特異性預后標志物[2-3]。癌胚抗原等消化道腫瘤常用腫瘤標記物的特異性較低,對病情和預后的評估價值有限[4]。星形膠質細胞上調基因1(astrocyte elevated gene?1,AEG?1)是近年發(fā)現的與腫瘤侵襲和轉移相關的癌基因,已被發(fā)現在乳腺癌、食管癌等多種惡性腫瘤中表達[5-6],但有關其與膽囊癌患者臨床病理及預后關系的研究仍較為缺乏。本研究以128 例膽囊癌患者為例,探討膽囊癌組織AEG?1 表達與臨床病理及預后的關系,以期填補研究空白,現報告如下。

    1 資料與方法

    1.1 臨床資料 選取2016年1月至2018年6月本院收治的128例膽囊癌患者,其中男49例、女79例;年齡31~82 歲,平均(53.61 ± 7.11)歲;臨床癥狀:右季肋區(qū)疼痛77 例、納差45 例、腹脹16 例。

    納入標準:(1)采取手術治療,經術后病理確診為膽囊癌;(2)術前無相關治療史;(3)簽署知情同意書。

    排除標準:(1)有癌癥家族史者;(2)伴其他系統(tǒng)惡性腫瘤者;(3)非原發(fā)性膽囊癌患者;(4)隨訪資料不完善或失訪者。

    1.2 方法

    1.2.1 癌組織AEG?1表達的檢測 128例患者均根據TNM分期接受相應治療,其中42例采取根治術,包括單純膽囊切除術、根治性切除等;45 例接受姑息性手術,包括單純膽囊切除或胃腸吻合;41 例患者接受剖腹活檢術。術中均保留癌組織標本進行癌組織AEG?1 檢測:組織石蠟包埋、切片及脫蠟,修復抗原后牛血清白蛋白封閉。37 ℃下溫育一抗90 min(兔抗人AEG?1,北京中杉金橋),磷酸緩沖鹽溶液沖洗。二抗孵育20 min,使用二氨基聯苯胺試劑盒顯色。AEG?1 主要在細胞質中表達,陽性細胞呈黃色或棕色,顯微鏡下取不同視野確定AEG?1 陽性染色細胞占比和染色程度。(1)AEG?1陽性染色比例:陽性細胞百分比<5%,0 分;5%~20%,1分;26%~50%,2分;>50%,3分。(2)AEG?1陽性染色強度:無染色,0 分;淡黃色,1 分;棕黃色,2 分;棕黃色,3 分。AEG?1 染色評分=染色比例評分×染色強度評分,≤1 分,陰性;1~3 分,弱陽性;>3 分,陽性。根據癌組織AEG?1 表達分為AEG?1 陽性(92 例)和AEG?1 陰性(36 例)。

    1.2.2 隨訪結果 術后隨訪2年,記錄生存時間。隨訪結束時存活患者生存時間為隨訪時間,死亡患者生存時間為隨訪開始至死亡的時間。

    1.3 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 19.0 進行統(tǒng)計學分析,計數資料用例(%)表示,比較采取χ2檢驗,以P< 0.05 為差異有統(tǒng)計學意義。采用多因素COX回歸分析確定膽囊癌患者生存影響因素,繪制Kaplan?Meier 生存曲線。

    2 結果

    2.1 膽囊癌組織AEG?1 表達情況及組織病理學切片觀察 128 例膽囊癌患者中,癌組織AEG?1 陽性表達率71.87%(92/128)。AEG?1 主要表達于細胞質,呈黃色或棕色。AEG?1 在組織中典型陽性表達見圖1A),典型陰性表達見圖1B。

    圖1 AEG?1膽囊癌組織中陽性表達(A)和陰性表達(B)Fig.1 Positive expression(A)and negative expression(B)of AEG?1 in gallbladder carcinoma tissue

    2.2 膽囊癌組織AEG?1表達與臨床病理的關系不同腫瘤最大徑、病理分型、分化程度、TNM 分期、膽總管浸潤、肝臟侵襲和淋巴結轉移患者的AEG?1 陽性例數的占比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

    表1 不同臨床病理特征的膽囊癌患者的AEG?1 表達比較Tab.1 Comparison of AEG?1 expression in gallbladder cancer patients with different clinicopathological characteristics例

    2.3 膽囊癌的生存影響因素 以患者隨訪2年的生存情況(存活=1、死亡=0)為因變量進行多因素Cox 回歸分析,結果顯示手術方式、腫瘤最大徑、分化程度、TNM 分期、膽總管浸潤、淋巴結轉移、AEG?1表達是膽囊癌患者生存的影響因素(P<0.05)。見表2。

    表2 膽囊癌患者生存的多因素Cox 回歸分析Tab.2 Multivariate Cox regression analysis of the survival of patients with gallbladder cancer

    2.4 不同AEG?1 表達患者的生存分析 AEG?1 陽性患者的生存率3.26%(3/92),陰性患者36.11%(13/36),Kaplan?Meier 生存曲線經Log?rank 檢驗差異有統(tǒng)計學意義(P=0.009)。見圖2。

    圖2 AEG?1 陽性和AEG?1 陰性患者的Kaplan?Meier 生存曲線Fig.2 Kaplan?Meier survival curve of AEG?1 positive and AEG?1 negative patients

    3 討論

    3.1 膽囊癌患者AEG?1 表達與臨床病理特征的關系 既往實體瘤研究中發(fā)現AEG?1 在非小細胞肺癌患者中異常高表達,且與腫瘤分期、轉移等有密切關系[7]。同時體外研究顯示子宮頸癌患者AEG?1 過表達對宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展起重要作用[8]。本研究發(fā)現,128 例膽囊癌患者中AEG?1 陽性率高達71.87%,高于楊安等[9]報道的胃癌患者中AEG?1 陽性率50.65%和毛英等[10]報道的葡萄膜黑色素瘤患者中AEG?1 陽性率的58%。國外研究認為[11],腫瘤的發(fā)生和進展均離不開腫瘤血管生成,而AEG?1 高表達可增加微血管密度,促進血管生成,增加腫瘤體積。膽囊癌的病理分型以腺癌為主,腺鱗癌、鱗癌較少見,通常只占10%~20%。有研究發(fā)現[12],腺鱗癌、鱗癌常表現為腫瘤體積相對較大、腫瘤分期晚,預后相對較差,而AEG?1 陽性會強化腫瘤的增殖和侵襲能力,這是造成本研究中鱗癌和腺鱗癌患者的AEG?1 陽性率相對腺癌患者更高(87.50%vs.66.67%)的主要原因。常亮研究表明[13],下調乳腺癌細胞AEG?1 表達后腫瘤細胞凋亡加快,提示AEG?1 可影響細胞周期阻滯,通過調控腫瘤細胞凋亡對患者臨床分期產生影響。AEG?1 陽性可誘導細胞生長,阻滯細胞凋亡和細胞分化。因此AEG?1 陽性的低分化占比更高。動物實驗發(fā)現[14],AEG?1 可通過增加低氧誘導因子?1α 表達的途徑間接提高血管內皮生長因子水平,從而促進腫瘤進展,增加TNM 分期。此外,AEG?1 過表達會促進乳腺癌細胞的上皮間充質細胞轉化,使腫瘤的侵襲能力加強,因此更易發(fā)生膽總管浸潤、肝臟侵襲和淋巴結轉移[15]。

    3.2 AEG?1與膽囊癌患者預后 國外研究發(fā)現[16],AEG?1 是核轉錄因子κB 的正調控蛋白,可增強核轉錄因子κB 啟動子活性,促使其與DNA 的結合能力,進而調控腫瘤細胞生長、侵襲及血管新生。AEG?1 可激活磷酯酰肌醇?3 激酶/蛋白激酶B 信號通路及其下游基因,強化腫瘤的抗凋亡能力和侵襲能力[17]。本研究結果證實AEG?1 高表達參與腫瘤發(fā)生和進展,可通過抑制腫瘤細胞凋亡、強化腫瘤細胞侵襲和轉移等多種途徑影響生存情況[18]。研究發(fā)現[19],AEG?1 高表達會上調雙氫嘧啶脫氫酶等耐藥基因,影響腫瘤耐藥。國外實驗發(fā)現[20],小干擾RNA 沉默AEG?1 后,肝癌細胞對5?FU 敏感性提高。也有研究表明[21],AEG?1 可通過對多藥耐藥基因表達的調控介導對阿霉素的耐藥。本研究COX 多因素回歸結果顯示,在校正混雜因素后,AEG?1 陽性表達與不良預后相關,提示靶向干預AEG?1 蛋白或其相關信號通路,有可能改善膽囊癌患者的預后,AEG?1 也可作為膽囊癌的治療潛在靶點。最近在消化道腫瘤體外研究中發(fā)現,AEG?1 與腫瘤增生和轉移存在密切聯系。在胰腺細胞系中采用RNA 干擾AEG?1 基因表達后,可顯著抑制胰腺癌細胞的侵襲轉移能力[22]。而在胃癌組織中,AEG?1 可以通過eIF4E/cyclin D1 信號通路促使胃癌細胞增殖[23]。上述體外研究初步指明AEG?1 在消化道腫瘤中的潛在價值,而本文數據顯示膽囊癌患者中,AEG?1 陽性表達是患者預后的危險因素。本研究隨訪時間較短,僅觀察了患者隨訪2年的生存情況,未能統(tǒng)計患者的遠期生存,為研究不足之處,有待后續(xù)補充。

    綜上所述,膽囊癌組織AEG?1 表達與患者腫瘤最大徑、病理分型、分化程度、TNM 分期、周圍組織侵犯等臨床病理特征有較大關聯,且AEG?1 陽性是預后影響因素。

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