2021-2024年黔南州禽流感免疫抗體監(jiān)測結(jié)果與分析

中圖分類號：S858.3 文獻標識碼：A文章編號：1673-1085（2025）05-0022-06

禽流感（AvianInfluenza，AI）是由正粘病毒科流感病毒屬病毒引起的急性、高度接觸性傳染病，在家禽中，雞、火雞、鴨和鵝等感染較為常見。該疾病在世界各國和地區(qū)均有流行，不僅會對養(yǎng)殖場造成嚴重的經(jīng)濟損失，還對公共衛(wèi)生安全構(gòu)成威脅。禽流感病毒（Avian InfluenzaVirus，AIV）具有多種亞型，如H5N1、H7N9、H9N2等，各亞型致病力不同，可通過呼吸道、消化道傳播，也能經(jīng)損傷的皮膚和眼結(jié)膜感染，候鳥遷徙還可導(dǎo)致病毒遠距離傳播[1-3]。

黔南州依據(jù)國家強制免疫計劃，持續(xù)開展家禽H5亞型和H7亞型禽流感的免疫工作，力求對區(qū)域內(nèi)飼養(yǎng)的主要家禽做到應(yīng)免盡免，并按照春秋兩季開展集中免疫和免疫效果評估。本文通過對2021一2024年家禽禽流感免疫抗體檢測結(jié)果的統(tǒng)計和分析，評估免疫效果及工作開展的合理性與有效性，為黔南州家禽禽流感防控工作提供決策依據(jù)。

1材料與方法

1.1樣品

樣品均來自黔南州12個縣（市）的家禽規(guī)模養(yǎng)殖場和散養(yǎng)戶。在每年春秋兩季集中免疫完成15d后，開始采集家禽血清。每個養(yǎng)殖場采集禽血清約30份，散養(yǎng)戶采集禽血清約10份／戶。2021—2024年，共采集禽血清樣品25996份，其中規(guī)模場515個，采集樣品16542份；散養(yǎng)戶840個，采集樣品9454份，見表1。

1.2檢測方法

依據(jù)《高致病性禽流感診斷技術(shù)》[4]（GB/T18936-2020）推薦的方法進行檢測。

1.2.1血凝（HA）試驗（微量法） 在96孔V型微量反應(yīng)板中，每孔加入 25μL PBS。于第1孔加入 25μL 抗原，反復(fù)吹打3＼～5次使其充分混勻。隨后，從第1孔吸取 25μL 抗原加入第2孔，依次進行2倍系列稀釋至第11孔，再從第11孔吸取 25μL 棄去。第12孔作為PBS對照孔。之后，每孔先加入 25μL PBS，再加入 雞紅細胞懸液。

1.2.2血凝抑制（HI）試驗（微量法）首先，根據(jù)HA試驗測定的效價配制4個單位（即4HAU）的抗原，并進行驗證。在第1孔 ～ 第11孔中加入 25μL PBS，第12孔加入 50μL PBS作為空白對照。在第1孔加入 25μL 血清，將第1孔血清與PBS充分混勻后，吸取 25μL 于第2孔，依次進行2倍稀釋至第10孔，從第10孔吸取 25μL 棄去，第11孔作為抗原對照。接著，第1孔 ～ 第11孔均加入 25μL 4HAU抗原，室溫下靜置 30min_? 然后，每孔加入 25μL1% 雞紅細胞懸液，震蕩混勻，室溫靜置 40min 。當(dāng)空白對照孔（第12孔）紅細胞呈顯著紐扣狀時判定結(jié)果。

1.3檢測試劑

H5、H7亞型禽流感血凝和血凝抑制試驗抗原及陽性血清由哈爾濱維科生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。1% 雞紅細胞懸液按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》（GB/T18936-2020）推薦的方法制備。

1.4結(jié)果判定

1.4.1血凝（HA）試驗輕扣反應(yīng)板，使混合反應(yīng)物均勻，室溫靜置 40min 。當(dāng)對照孔的紅細胞呈顯著紐扣狀時判定結(jié)果。判定時，將反應(yīng)板傾斜 60^° 左右，觀察紅細胞有無淚珠狀流淌，將完全無淚珠樣流淌且 100% 凝集的最高稀釋倍數(shù)判定為血凝效價。

1.4.2血凝抑制（HI）試驗當(dāng)抗原對照孔（第11孔）完全凝集，且陰性對照血清抗體效價不高于1：4（ 2² 或 2log₂ ），陽性對照血清抗體效價與已知效價誤差不超過1個滴度時，試驗結(jié)果有效。將完全抑制4HAU抗原的最高血清稀釋倍數(shù)判為該血清的HI抗體效價。在檢測雞血清抗體時，HI抗體效價不高于1：8（ 2³ 或 3log₂ ）判為陰性，不低于1：16（ 2⁴ 或 4log₂ ）判為陽性。在檢測抗原時，若能被某亞型禽流感標準血清抗體抑制，且HI效價不低于1：16（ 2⁴ 或 4log₂ ），則判定為該亞型陽性;HI抗體效價不高于1：8（ 2³ 或 3log₂ ）判定為陰性。

1.5統(tǒng)計分析

使用SPSS25對2021—2024年黔南州禽流感免疫抗體結(jié)果，按照不同季節(jié)、不同群體、不同年份、不同亞型分組，對比組間差異，以 Plt;0.05 作為顯著性閾值。

2 結(jié)果與分析

2021—2024年，黔南州H5亞型和H7亞型禽流感免疫水平每年均保持在 90% 以上，符合國家要求的 70% 以上標準。

2.1禽流感H5亞型抗體檢測情況

2021—2024年，黔南州共檢測H5亞型禽流感免疫抗體25996份。對515個規(guī)模場的16542份樣品進行檢測，檢出抗體陽性16078份，陽性率為 97.19% ；對840戶散養(yǎng)戶的9545份樣 品進行檢測，檢出抗體陽性8706份，陽性率為92.09% 。具體檢測結(jié)果見表2、3。

2.2禽流感H7亞型抗體檢測情況

2021一2024年，黔南州共檢測H7亞型禽流感免疫抗體25996份。從515個規(guī)模場的16542份樣品中，檢測抗體陽性15868份，陽性率為95.93% ；840戶散養(yǎng)戶的9545份樣品中，抗體陽性8764份，陽性率為 92.70% 。具體檢測結(jié)果見表4、5。

2.3統(tǒng)計學(xué)分析

2.3.1不同季節(jié)抗體水平差異動物強制免疫集中在春秋兩季開展，檢測工作也與之同步。使用SPASS25分析2021—2024年不同季節(jié)H5、H7亞型禽流感免疫抗體水平差異。經(jīng)獨立樣本t檢驗，2021一2024年春、秋季兩組H5亞型禽流感免疫抗體陽性率組間差異不顯著（ t=-1.363 ： P=0.222 gt;0.05 ）；2021—2024年春、秋季兩組H7亞型禽流感免疫抗體陽性率組間差異不顯著（ t=-1.327 P=0.233gt;0.05 ）?？贵w合格率結(jié)果見表6、t檢驗結(jié)果見7。

2.3.2不同群體抗體水平差異2021—2024年規(guī)模場和散養(yǎng)戶抗體水平差異，結(jié)果見表8、9。規(guī)模場H5亞型禽流感免疫抗體陽性率顯著高于散養(yǎng)戶（ t=5.53 ， P=0lt;0.05 ）；規(guī)模場H7亞型禽流感免疫抗體陽性率顯著高于散養(yǎng)戶（ 1=2.682 P=0.018lt;0.05 ）。

2.3.3不同亞型免疫抗體水平差異2021—2024年H5、H7亞型禽流感之間免疫抗體陽性率差異，結(jié)果見表10、11。H5、H7亞型禽流感免疫抗體陽性率之間差異不顯著（ 1=0.654 P P=0.532gt;0.05 ）。

3討論

3.1不同群體之間（規(guī)模場、散養(yǎng)戶）免疫抗體陽性率差異顯著

本研究對不同季節(jié)、群體、亞型的禽流感免疫抗體水平差異進行對比分析，結(jié)果表明，規(guī)模場和散養(yǎng)戶之間的免疫抗體陽性率存在顯著差異。具體原因如下：

首先，家禽飼養(yǎng)整齊度存在差異。規(guī)模場通常按批次進出場，嚴格遵循免疫程序開展免疫工作，并依據(jù)動物免疫抗體消長規(guī)律進行采樣檢測，因此抗體水平整體較為整齊且處于較高水平。相比之前，散養(yǎng)家禽的日齡批次各不相同，盡管實施集中免疫，但個體差異明顯，免疫劑量難以統(tǒng)一，不同散養(yǎng)戶的免疫時間也存在較大差異，這些因素共同導(dǎo)致散養(yǎng)戶的免疫抗體水平參差不齊；其次，散養(yǎng)家禽免疫時存在操作困難。散養(yǎng)家禽白天可能不在圈舍，抓捕難度較大，這使得漏免時有發(fā)生，影響整體免疫水平；最后，養(yǎng)殖戶的防疫意識不足和意愿也帶來一定影響。部分養(yǎng)殖戶防疫意識淡薄，免疫意愿不強烈，少數(shù)人認為家禽僅供自食，無需免疫。鑒于上述原因，在后續(xù)工作中，應(yīng)積極推進家禽產(chǎn)業(yè)的規(guī)?；同F(xiàn)代化進程，強化基層防疫工作力度，激發(fā)散養(yǎng)戶的防疫主體意識。同時，要進一步加強動物防疫宣傳培訓(xùn)，尤其是免疫知識的普及，提高散養(yǎng)戶主的防疫覺悟，以保障家禽產(chǎn)業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展[4]。

3.2監(jiān)測結(jié)果的綜合評價存在局限性

監(jiān)測數(shù)據(jù)顯示，禽流感免疫抗體總體陽性率較高，這充分表明黔南州嚴格落實了強制免疫政策，且取得了顯著成效。然而，此次監(jiān)測的數(shù)據(jù)分析存在一定局限性：一方面，采樣時間集中在免疫后 15～45d ，該時段抗體水平相對較高，無法全面代表全年的抗體水平情況；另一方面，采樣過程中存在隨機性不足的問題，場點和動物的選擇主觀性較強，導(dǎo)致監(jiān)測結(jié)果對群體的代表性不夠全面。

3.3疫苗防控禽流感面臨多重局限性

一方面，疫苗無法 100% 阻止禽流感病毒感染，禽免疫后仍存在排毒風(fēng)險，需結(jié)合生物安全措施做好飼養(yǎng)管理。當(dāng)前，常用的禽流感疫苗為 三價疫苗。在免疫抗體合格的情況下，該疫苗對其他株型的交叉保護效果尚不明確；另一方面，病毒持續(xù)變異可能導(dǎo)致疫苗保護力下降，需動態(tài)調(diào)整疫苗株。因此，養(yǎng)殖業(yè)主需密切關(guān)注禽流感流行態(tài)勢，結(jié)合實際情況科學(xué)制定免疫程序，嚴格按照規(guī)定使用疫苗，動態(tài)調(diào)整疫苗株型，從而有效提升疫病防控能力[5-6]。

參考文獻：

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