丹霞小花苣苔葉片離體培養(yǎng)與植株再生技術研究

摘要：丹霞小花苣苔（Primulinadanxiaensis）為丹霞地貌特有種，隸屬于苦苣苔科，分布狹窄，數量稀少，需要利用植物組織培養(yǎng)技術進行擴繁保育。該文以丹霞小花苣苔葉切片為外植體，通過篩選適宜的 表面消毒時間、不定芽誘導、芽增殖及生根的培養(yǎng)基和組培苗的移栽基質，建立其組培快繁技術體系。結果表明：（1）外植體適宜的消毒條件為 7 5 % 酒精消毒 消毒 6 m i n ，接種存活率達 8 4 . 9 5 % 。（2）不定芽誘導的培養(yǎng)基為 -BA ，芽誘導率達 100 % ，40d后平均葉片芽數達38.35。（3）芽增殖培養(yǎng)基為 -BA 0d后芽增殖系數達7.54。（4）生根培養(yǎng)基為 后生根率達 100 % ，單株生根數達 2 6 . 2 8 。（5）組培苗移栽到喀斯特地貌的腐葉土 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比為 1 ： 1 ： 1 ），泥炭王 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比為 1 ： 1 ： 1 ）和珍珠巖 + 蛭石（體積比為 1 ： 1 ）3種基質上成活率均達 100 % ，生長良好，無明顯差異。該研究可實現丹霞小花苣苔的大量繁殖，有助于其保護和開發(fā)利用。

中圖分類號：Q943.1 文獻標識碼：A 文章編號：1000-3142（2025）04-0667-11

In vitro culture and plant regeneration from the leaves of Primulina danxiaensis

HAN Wei ，CHANG Shengxin'， MAI Guangwei ， ZENG Xiaoyan ，CHEN Zaixiong3，FAN Qiang2*，YU Baiyin1*

（1.GuangdorocalKbatfUildCoeofFddeialosiRoColf andAgriculture，haoguanUniversityhaogua52Oo5，Guangdong，China；2.GuangdongProvincialKeyLaboratoryfan StressBiology，SchoolofLifeSciences，SunYat-Sen University，Guangzhou 510275，China；3.Administrative Commission of Danxiashan National Park，Shaoguan 5123Oo，Guangdong，China）

Abstract：Primulinadanxiaensis，anendemic speciesof the Danxia landform within theGesneriaceae family，exhibitsa narow distribution range anda limited population size，thereby necessitating propagation and conservation via plant tisue culture techniques.Inthis paper，inorder toestablish the tissecultureandrapid propagation technical systemof P. danxiaensis，the leaf segments of P . danxiaensis were used as explants to screen the appropriate surface disinfection time with ，the culture media for adventitious bud induction，bud proliferation and rooting，as wellas the transplanting substrates fortisse-cultured sedlings.The results were as follows：（1）Theoptimal disinfection procedure involved a 30 s immersion in 7 5 % alcohol，followed by a 6 min soak in ，achieving an 8 4 . 9 5 % survival rate of leaf explants.（2）For adventitious bud induction，the most effective medium was found to be1/2MS supplemented with 6-benzyladenine（6-BA） and α -naphthaleneaceticacid（NAA） ，resulting in a 100 % bud inductionrateand an average of 38.35 buds perleaf explant after 40 daysof culture.（3）Bud proliferation medium was optimally achieved on 1/2MS supplemented with 6-BA and NAA ，yielding aproliferation coeffcient of 7.54 after 50 days.（4）Rooting was successfully induced using 1/2MS medium supplemented with NAA （204號 ，leading to a 100 % rooting rate and an average of 26.28 roots per plant after 3O days.（5） The tissuecultured seedlings were successullyaclimatizedand transplanted into threediferent mixed substrates：a mixtureof leaf mould of karst landform，perlite，and vermiculite （ 1 ： 1 ： 1 ，V/V/V），peat soil，perlite，and vermiculite（ 1 ： 1 ： 1 ， V / V / V ），and perliteand vermiculite （ 1 ： 1 ， V/V），all with 100 % survival rates and demonstrating robust growth. This studyis capable of achieving large-scale propagation of P .danxiaensis，aresultthat significantlycontributes to both its resource protection and utilization.

KeyWords：Primulina danxiaensis，leaves，in vitro culture，adventitious bud，plant regeneration

丹霞小花苣苔（Primulinadanxiaensis）隸屬于苦苣苔科（Gesneriaceae），原為小花苣苔屬（Chiritopsis），后經分類學修訂，被并入報春苣苔屬（Primulina）（Wanget al.，2O11；Weber et al.，2011），是一種多年生草本植物，其植株高2～10c m ，根狀莖長 ，花白色，花期為5一6月，該物種于2010年首次被報道，對環(huán)境要求較高，一般生長于海拔 1 0 0 ～ 2 5 0 m 大巖石裂縫中，靠近淺池塘、濕坑或陰暗洞穴，常與苦苣苔科旋蒴苣苔、鳳尾蕨科劍葉鳳尾蕨、蕁麻科赤車、鱗始蕨科圓葉鱗始蕨和禾本科淡竹葉等小型植物伴生（Shenetal.，2010）。目前，僅分布于丹霞地貌區(qū)域，在廣東丹霞山存在12個居群，每個居群包含50～70個體，其中包括10～20株幼苗，在湖南永興、江西寧都和興國有3個居群（張貴志和喻勛林，2012；田徑等，2014），植株約800株。Chen等（2021）運用簡化基因組測序（RAD-seq）技術對采自丹霞山12個居群的104個丹霞小花苣苔個體進行了遺傳多樣性分析，研究表明丹霞小花苣苔屬于極小種群物種，具有很強的遺傳結構，應對每個現存種群采取措施進行保護。

報春苣苔屬是我國苦苣苔科最大的屬，在全球范圍內約有230多種，其中我國分布有210多種（馬虎生等，2025），該屬植物有較高的園林開發(fā)應用前景，同時還有很多藥用價值，有消炎止痛、散瘀消腫、解蛇毒等功效（王寧等，2023；羅彭等，2023）。但其分布狹窄，生境特殊，一旦生境被破壞很難生存，因此其種質資源亟待保護（寧祖林，2017）。丹霞小花苣苔作為報春苣苔屬植物之一，其花色艷麗，花朵精致，具有良好的觀賞價值，適合于室內小盆栽培或園林盆景點綴。華南國家植物園寧祖林等人將采自丹霞山的短序唇柱苣苔作為父本，與丹霞小花苣苔為母本進行雜交，成功培育出“紫霞”報春苣苔，并于2014年獲國際新品種登錄。開展丹霞小花苣苔人工繁殖的研究對報春苣苔屬植物種質資源的保護和開發(fā)利用具有重要的現實意義。

在自然條件下，丹霞小花苣苔主要依靠種子進行繁殖，但其種子較小，收集難度大，限制了人工播種繁殖的開展。然而報春苣苔屬植物能夠采用扦插方式進行繁殖，因此針對不同濃度植物生長調節(jié)劑的處理效果、扦插方式及扦插基質等影響扦插的關鍵因素已開展相關研究（戚華沙等，2018；閆海霞等，2019a，2020），但扦插繁殖仍存在繁殖系數低且受季節(jié)影響，需要較多葉片作為材料。植物組織培養(yǎng)技術可不受季節(jié)限制，利用少量植物組織，通過再生能獲得大量植株，這一技術在報春苣苔屬植物保育擴繁方面的研究結果陸續(xù)被報道。但不同植物的再生途徑存在差異。例如，Ma等（2010）和Yang等（2012）以報春苣苔的葉片為外植體，通過誘導體胚和不定芽實現植株再生；付傳明等（2015）以條葉唇柱苣苔的葉片為外植體，通過不定芽誘導途徑獲得了再生植株；閆海霞等（2017）以褐紋報春苣苔的葉片為外植體，通過不定芽和愈傷組織誘導兩種途徑建立了其組培快繁體系；何東平等（2024）通過葉片誘導不定芽，建立了壽城報春苣苔的離體再生技術，需針對不同植物探索其再生條件。截至目前，關于丹霞小花苣苔繁殖技術的研究，尚未見相關報道。

本研究以野生丹霞小花苣苔的葉片為材料，比較 不同消毒時間對葉片表面消毒效果的影響；研究不同濃度的植物生長調節(jié)劑配比對不定芽誘導和增殖的影響，篩選適宜不定芽誘導和增殖的培養(yǎng)基；觀察和統計不同的生根培養(yǎng)基及不同移栽基質分別對組培苗生根和移栽馴化成活的影響，以篩選最佳生根培養(yǎng)基和移栽馴化栽培基質。旨在建立其組培快繁技術體系，實現其種質資源的保護、種群擴大及開發(fā)利用，為其他報春苣苔屬植物的繁殖提供技術參考。

1材料與方法

1.1材料

經丹霞山管理委員會批準，在原生地韶關仁化丹霞山（海拔 9 5 m ， ）采集丹霞小花苣苔（Primulinadanxiaensis）野生植株（圖1：A），后種植于韶關學院藥用植物資源圃中（圖1：B）。待植株生長一段時間后，進行后續(xù)研究。

1.2方法

1.2.1材料的表面消毒從韶關學院藥用植物資源圃中剪取丹霞小花苣苔的葉片帶回實驗室，先將剪取的葉片用洗衣粉浸泡 1 0 m i n ，再用清水輕輕洗滌干凈，最后進行表面消毒。消毒過程為先用 7 5 % 酒精消毒 3 0 s ，無菌水洗3次，再用 分別浸泡消毒 ，無菌水洗4次。將消毒后的葉片切成長 x 寬約為 0 . 8 c m× 0 . 8 c m 的小塊（圖1：C）。接人 -BA ， 培養(yǎng)基中，15d后統計葉切片外植體褐化率、污染率和成活率，比較 不同消毒時間對葉片生長的影響。每個處理接種至少30個葉切片，重復3次。其中，褐化率 （ % ） = 褐化外植體數/接種外植體數 × 1 0 0 （褐化外值體以接種葉切片褐化面積等于或小于1/3的計數），污染率 （ % ） = 污染外植體數/接種外植體數 Φ× 1 0 0 ，外植體成活率 （ % ） = 成活外植體數/接種外植體數 × 1 0 0 。

1.2.2不定芽的誘導采用 7 5 % 酒精 對葉片消毒后，以葉切片為外植體，參考歐明燭（2023）的方法，以 1 / 2 M S 為基本培養(yǎng)基，設置不同植物生長調節(jié)劑組合，以下同此。分別為 和NAA（0.1、0.2、0.5 ）組合的9種不定芽誘導培養(yǎng)基。 4 0 d 后統計不定芽誘導率和每個葉片芽數。每個處理接種至少30個葉切片，重復3次。其中，不定芽誘導率 （ % ） = 誘導出芽的外植體數/成活的外植體數 × 100，平均每片葉片的芽數 Σ= Σ 誘導出的芽數/有芽的葉片數。

1.2.3不定芽的增殖將誘導的不定芽（3～5個為一叢）接入6-BA ）與NAA ）組合的12種芽增殖培養(yǎng)基上（基本培養(yǎng)基為 1 / 2 M S ），40d后統計不定芽的增殖情況，計算增殖系數。每個處理接種至少30叢芽，重復3次。其中，芽增殖系數 Σ= Σ 增殖后的總芽數/接種的芽數。

1.2.4生根培養(yǎng)將增殖的不定芽切分成單芽后分別轉入 1 / 2 M S 含有 （的3種培養(yǎng)基中。30d后觀察芽的生根情況，統計生根率和平均根數。每個處理接種至少30個芽苗，重復3次。其中，苗成活率 （ % ） = 成活的苗/接種的苗 × 1 0 0 ，生根率 （ % ） = 有根的苗/成活的苗× 1 0 0 ，平均根數=生根總條數/成活的苗。

1.2.5煉苗和移栽將生根的組培苗移到正常室溫下經過7d煉苗，后移栽到3種不同的基質上，分別是喀斯特地貌的腐葉土 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比 1 ： 1 ： 1 ），泥炭土 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比1 ： 1 ： 1 ），珍珠巖 + 蛭石（體積比 1 ： 1 ）。統計移栽成活率和新葉長出率，比較不同的基質對組培苗移栽成活的影響。其中，移栽成活率 （ % ） = 成活的植株/移栽的植株 × 1 0 0 ，新葉長出率 （ % ） = 長出新葉的植株/成活的植株 × 1 0 0 。

1.2.6培養(yǎng)基的制備和培養(yǎng)條件

1.2.6.1培養(yǎng)基的制備使用分析純化學試劑配制MS培養(yǎng)基母液后再配制培養(yǎng)基。培養(yǎng)基中蔗糖為 ，瓊脂粉為 。在1 2 1 ‰ 下滅菌 2 0 m i n 后備用。

1.2.6.2培養(yǎng)條件不定芽誘導先暗處 1 0 d 后再移入光照培養(yǎng)。芽增殖、生根、移栽馴化階段均在光照下培養(yǎng)，培養(yǎng)溫度（ 、光照強度 光照時間 。

1.3數據統計分析

數據采用Excel2021軟件整理，后輸入到南京農業(yè)大學農學院王紹華編制的STST方差分析軟件，采用單因素隨機區(qū)組方法對結果進行方差分析（李春喜等，2023）。

2 結果與分析

消毒時間對丹霞小花苣苔葉片表面消毒效果的影響

以不同的 消毒時間對葉片進行表面消毒，將葉片接種到培養(yǎng)基上10d后，觀察到葉片存在輕度褐化和重度褐化情況。由表1可知，葉片的污染率、褐化率及成活率差異明顯，其中污染率為 1 . 3 6 % ～ 7 . 5 3 % ，褐化率為 9 . 6 8 % ～ 3 4 . 2 6 % ，成活率為 6 8 . 4 7 % ～ 8 4 . 9 5 % 。葉片消毒時間為 8 ～ 1 0 m i n 時污染率下降，但褐化率升高，成活率降低，說明消毒時間大于 8 m i n 時，對外植體傷害較大。當 消毒時間為 6 m i n 時，褐化率最低，為 9 . 6 8 % ，成活率最高，為 8 4 . 9 5 % ，視為丹霞小花苣苔葉片表面消毒適宜的時間。

2.26-BA與NAA組合對丹霞小花苣苔葉片不定 芽誘導的影響

將丹霞小花苣苔的葉片接人到芽誘導培養(yǎng)基上（圖1：C）， 2 0 d 后發(fā)現葉片開始膨大，變厚，卷起（圖1：D），葉片的邊緣或表面先產生芽點并有愈傷組織產生（圖2：A），30d后分化的不定芽逐漸長大（圖2：B）。由表2可知，9種培養(yǎng)基上葉片不定芽誘導率無明顯差異且均能達 100 % ，但葉片誘導的芽數有差異，平均為 2 1 . 3 4 ～ 3 8 . 3 5 。當NAA濃度一定、6-BA濃度范圍為 時，葉片誘導的平均芽數有隨著6-BA濃度的升高而升高的趨勢。其中，當6-BA濃度為 時不定芽誘導效果最好，每葉片誘導的平均芽數為 3 2 . 2 3 ～ 38.35，顯著高于其他處理且芽生長良好，無明顯玻璃化現象。在6-BA 組合的培養(yǎng)基上，葉片誘導的平均芽數最多，達到38.35，為適宜的丹霞小花苣苔葉片誘導不定芽的培養(yǎng)基。

2.36-BA與NAA組合對丹霞小花苣苔不定芽增殖的影響

將葉片誘導的不定芽（每叢3～5個芽）接入到12種芽增殖培養(yǎng)基后， 1 0 d 內觀察到芽生長較慢，之后芽生長速度加快， 2 0 d 后在芽的周圍增殖出較多的不定芽（圖2：C）。由表3可知，12種培養(yǎng)基上不定芽的增殖系數不同，芽增殖系數為 1 . 7 7 ～ 7.54。當低濃度NAA 與低濃度6-BA（ ）組合時，芽增殖系數低且差異不明顯；而當低濃度 NAA（ 0 . 0 5 ～ 0 . 2 m g ）與較高濃度6-BA（ ）組合時，芽增殖系數提高至 3 . 3 5 ～ 7 . 5 4 ，與其他培養(yǎng)基相比，差異明顯。其中，以6-B （20 的培養(yǎng)基中芽增殖系數最高，為7.54，并且芽生長良好，無明顯玻璃化現象，為適宜丹霞小花苣苔不定芽增殖的培養(yǎng)基。綜合得出，當NAA濃度為 ，6-BA濃度為1～3 時，芽的增殖系數會隨著6-BA濃度的升高而升高。

2.4不同的生根培養(yǎng)基及栽培基質分別對組培苗生根和移栽成活的影響

將增殖的健壯不定芽接人到生根培養(yǎng)基上后，發(fā)現不定芽生長良好，20d左右觀察到不定芽基部有不定根出現。由表4可知，3種生根培養(yǎng)基上苗成活率和生根率差異不明顯，均能達 100 % 。但苗的平均根數隨著NAA濃度的升高而明顯升高，范圍為 2 2 . 4 1 ～ 2 6 . 2 8 ，根的外觀纖細，長度范圍為 0 . 5 ～ 2 . 0 c m 。綜合對比， ， 為適宜生根培養(yǎng)基（圖2：D）。

選取生根狀況良好的組培苗，經過煉苗處理后，將其移栽至基質上進行馴化（圖2：E）。從30d后統計移栽成活率可看出，生根的組培苗移栽到3種基質后，組培苗成活率均可達 100 % ， 9 7 . 7 8 % 以上的植株長出了新葉，生長良好（表5）。移栽到3種基質中的組培苗外觀無明顯差異，說明喀斯特地貌的腐葉土 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比為 ，泥炭土 + 珍珠巖 + 蛭石（體積比為1 ： 1 ： 1 和珍珠巖 + 蛭石（體積比為 1 ： 1 ）3種基質均適合丹霞小花苣苔組培苗的移栽。

表1不同 消毒時間對葉片表面消毒效果的影響

注：同列數據后不同小寫字母表示存在統計學差異（ ，下同。以葉片褐化面積小于或等于1/3為輕度褐化計入褐化率，葉片褐化面積大于2/3為重度褐化按致死計算。

Note：Diffrent lowercase letters after the same column of data indicate statistical differences （ P lt; 0 . 0 5 ） ，the same below.The degree of leafrowningiPrimulinadanxiaensiscanbdividedintoildandsevere，theildbowingwithleafbrowingarealestanorqualto 1/3 is included inthe browningrate，and severe browning withleaf browning area greaterthan 2/3iscalculatedaslethal.

3討論與結論

3.1外植體的處理和表面消毒

外植體表面處理和消毒能否成功是建立快繁技術體系的第一步。苦苣苔科植物葉片通常采用7 5 % 酒精 + 0 . 1 % （204號 組合進行表面消毒，但不同植物消毒的技術流程不同。楊晨星（2020）使用7 5 % 酒精消毒 3 0 s 及 浸泡 1 0 m i n 對大巖桐葉片消毒效果最好；張雪蓮（2018）則發(fā)現短莖半蒴苣苔葉片用 消毒 9 m i n 效果最好。本研究使用 對丹霞小花苣苔葉片進行 的表面消毒，通過綜合考量污染率、褐化率及成活率之間的平衡關系，得出 6 m i n 為葉片合適的表面消毒時間，表明丹霞小花苣苔葉片的消毒無需太長時間。這與歐明燭（2023）對輻花苣苔的葉片使用 7 5 % 酒精消毒 2 0 s 及 0 . 1 % 消毒 5 m i n 的成活率較高的研究結果相似，但需要注意的是，輻花苣苔的葉片在消毒前需用流水沖洗""，而丹霞小花苣苔的葉片則不能用流水沖洗，僅用清水輕輕洗滌 1 0 m i n 左右即可。若用流水沖洗丹霞小花苣苔的葉片，會導致接種的葉片發(fā)白或變褐，進而影響外植體的正常生長，這可能與丹霞小花苣苔葉片較嫩且薄，流水沖洗會損傷其葉肉細胞有關，這一點可為苦苣苔植物葉片前期清洗處理提供借鑒。本研究發(fā)現，隨著"消毒時間的延長，污染率并不總是呈現下降趨勢，如有時會出現消毒 1 0 m i n 的葉片污染率高于消毒 8 m i n 的情況，這可能與葉片的內生菌和不同批次取材的葉片有關。

3.2葉片的分化與不定芽誘導

植物生長調節(jié)劑種類和濃度對苣苔科植物的葉片分化和植株再生有重要影響。Chen等（2016）發(fā)現，鐘冠唇柱苣苔的葉片在單獨使用6BA的培養(yǎng)基上能直接再生出不定芽，而在 NAA兩者組合的培養(yǎng)基上則產生愈傷組織。Ouyang等（2016）發(fā)現，單座苣苔葉片在單獨使用（2號 或6-BA 培養(yǎng)基上能同時產生不定芽和體胚。與上述結果不同的是，本研究發(fā)現丹霞小花苣苔的葉片在 NAA兩者組合的培養(yǎng)基上直接再生不定芽，這與閆海霞等（2019b）發(fā)現貴港報春苣苔葉片在 IAA組合的培養(yǎng)基上能直接再生的結果相似，二者均需適宜的細胞分裂素和生長素配合調控葉片直接再生。由此可見，不同種苦苣苔科植物的葉片再生對植物生長調節(jié)劑需求不同，不同的植物生長調節(jié)劑可調控葉片產生不同的再生途徑，出現這些差異的原因除了與葉片自身的差異有關外，可能與植物內源激素的含量和種類有關（陳勁楓和張俊蓮，2022）。本研究發(fā)現不同在濃度6- 組合的培養(yǎng)基上，丹霞小花苣苔每個葉片的芽數存在明顯差異，以較高濃度6 組合的培養(yǎng)基芽數最多，閆海霞等（2018，2019b）同樣發(fā)現在較高濃度6-BA 組合的培養(yǎng)基上黃花牛耳朵葉片誘導的芽數最多，4 組合的培養(yǎng)基上貴港報春苣苔葉片誘導的芽數最多。由此可見，一定范圍內較高濃度的細胞分裂素和生長素組合，提高了葉片誘導的芽數，可能是較高濃度6-BA與適當濃度的生長素組合提高了苦苣苔科植物葉片不定芽分化的能力。

3.3不定芽的增殖

苦苣苔科植物不定芽的增殖能力是決定其能否實現大規(guī)模繁殖及有效開發(fā)利用的關鍵因素，為促進芽的增殖，培養(yǎng)基中常添加不同濃度和種類的細胞分裂素與生長素配比。Wang等（2018）

研究發(fā)現，彌勒苣苔的不定芽在低濃度6-BA1 組合的培養(yǎng)基上增殖較好；Li等（2013）研究發(fā)現含低濃度6-BA 0 . 5 m g ? （20 或含低濃度6-BA 的培養(yǎng)基較適合齒葉吊石苣苔不定芽的增殖。與上述研究結果不同的是，本研究發(fā)現丹霞小花苣苔不定芽在低濃度6-BA（ ）與NAA組合芽增殖系數較低，較高濃度6-BA（ （20 ）與NAA組合促進了芽的增殖，具體為6-BA3 組合的培養(yǎng)基較適合丹霞小花苣苔不定芽的增殖。這一發(fā)現與劉偉和黃勇（2010）關于吊石苣苔不定芽增殖的研究結果相一致，同樣發(fā)現使用較高濃度6-BA NAA 組合的培養(yǎng)基能促進不定芽增殖。上述結果表明，在不定芽增殖階段，不同苦苣苔科植物所需的細胞分裂素和生長素的比例不同，產生這種差異的原因除了與植物種類和基因型有關外，還與對植物生長調節(jié)劑的敏感度不同有關（逯錦春等，2022；武曉云等，2024）。

3.4生根

在苦苣苔科植物組培苗的生根階段，通常選擇MS或1/2MS為基礎培養(yǎng)基，并添加不同濃度和種類的NAA、IBA或IAA以優(yōu)化生根效果。Li等（2013）研究發(fā)現，齒葉吊石苣苔不定芽在含有 或NAA的MS培養(yǎng)基上生根最好，而本研究發(fā)現單獨使用低濃度NAA就可使丹霞小花苣苔組培苗生根，其中不定芽在含有 的 1 / 2 M S 培養(yǎng)基上生根率無明顯差異，均能達 100 % ，這為簡化苦苣苔科植物組培苗生根提供參考，但隨著生長素NAA濃度的升高其生根條數明顯增加，這一結果與閆海霞等（2018）在黃花牛耳朵不定芽生根以及楊晨星（2020）在非洲紫羅蘭不定芽生根培養(yǎng)上的研究結果相似，這說明一定范圍內生長素NAA濃度的升高有顯著促進苦苣苔科植物組培苗生根的作用，原因可能是適宜濃度的生長素促進了根原基細胞分裂和伸長，表現為生根條數增加（江玲和周燮，2000）。

3.5栽培基質

栽培基質的選擇對于組培苗的成活率至關重要。張琳娜等（2018）研究表明，當珍珠巖、蛭石與

表5生根的組培苗移栽

腐殖質草炭混合時，彌勒苣苔組培苗移栽成活率可達 100 % 。然而，李謙盛等（2016）的研究發(fā)現，珍珠巖和蛭石是否添加腐殖質草炭，牛耳朵的組培苗移栽成活率均能達 100 % 。本研究中，丹霞小花苣苔組培苗在珍珠巖 + 蛭石是否添加有腐殖質喀斯特地貌的腐葉土或泥炭土基質上均表現出良好的生長狀態(tài)，移栽成活率均達 100 % ，這一結果與李謙盛等（2016）的研究結果有相似之處，可能與丹霞小花苣苔的生境有關。該植物生長在巖石的裂縫中，土層較薄，可能更依賴于土壤的濕度和透氣性，而對土壤有機質的含量要求相對較低。因此，在移栽丹霞小花苣苔組培苗時，可選擇上述3種基質中的任一種。

綜上所述，本研究以丹霞小花苣苔的葉切片作為外植體，探究了 表面消毒時間及植物生長調節(jié)劑對其不定芽誘導、芽增殖及生根培養(yǎng)的具體影響，對比了組培苗在不同移栽基質中的生長表現，并據此成功建立了丹霞小花苣苔的離體培養(yǎng)和植株再生體系。這一技術體系為丹霞小花苣苔提供了一種有效的無性繁殖方法，能夠大量繁殖該物種，從而為丹霞小花苣苔的開發(fā)與利用提供了技術支撐。

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（責任編輯 周翠鳴）