鴨病毒性肝炎并發(fā)漿膜炎的科學(xué)診斷與綜合治療試驗總結(jié)

鴨病毒性肝炎主要危害2周以內(nèi)的幼鴨，該疾病致死率極高，可達 9 0 % 以上。鴨傳染性漿膜炎又叫鴨疫里默氏桿菌病，是一種嚴(yán)重的敗血性傳染病，主要影響家鴨，尤其是1～8周齡的幼鴨，2～3周齡的幼鴨感染此病的比例尤為突出，發(fā)病率通常介于6 0 % ～ 7 0 % ，在某些情況下會升至 9 0 % 。鑒于此，對鴨病毒性肝炎及其并發(fā)的漿膜炎進行及時診斷與治療對降低幼鴨的死亡率極為重要。

一、發(fā)病情況

在近期對某大型養(yǎng)殖場進行流行病調(diào)查中，發(fā)現(xiàn)該場養(yǎng)殖3600只肉鴨中有1655只出現(xiàn)病狀并死亡，死亡率高達 4 5 . 9 % 。經(jīng)詳細(xì)的病理學(xué)檢查和臨床癥狀分析后，初步診斷該群體性死亡事件的主要原因是鴨病毒性肝炎并發(fā)漿膜炎，該病毒性疾病會導(dǎo)致肝臟病變及廣泛的漿膜炎，影響范圍從最小的13日齡至最大的37日齡的雛鴨。該病毒通過糞口途徑傳播，短時間內(nèi)可在養(yǎng)殖環(huán)境中迅速擴散，嚴(yán)重時可導(dǎo)致高死亡率。其病理變化主要表現(xiàn)為肝臟腫大，表面呈現(xiàn)出特有的斑點狀出血，同時伴有脾臟及腎臟的腫大，解剖觀察可見漿膜表面出現(xiàn)纖維素性滲出物，這是漿膜炎的典型病理表現(xiàn)。為確認(rèn)病因，進行高效液相色譜和電子顯微鏡檢測，經(jīng)過初步診斷，肉鴨群體受到鴨病毒性肝炎病毒及其并發(fā)的漿膜炎感染，給養(yǎng)殖場帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟損失，也提醒養(yǎng)殖人員提高對生物安全和疫病防控措施的重視。

二、疾病介紹

鴨病毒性肝炎，又稱背脖病，是一種發(fā)生在鴨中的急性病毒性疾病，由鴨病毒性肝炎病毒引起，具有急性發(fā)病和高致死率的特點。此病主要影響幼鴨，且病情進展迅速，會在短時間內(nèi)造成高死亡率。為預(yù)防和控制該疾病，日常管理中需要嚴(yán)格執(zhí)行衛(wèi)生消毒措施，維護養(yǎng)殖環(huán)境的清潔，定期進行養(yǎng)殖場徹底消毒，以降低病毒的傳播風(fēng)險。同時，加強飼養(yǎng)管理，保證鴨只獲得均衡的營養(yǎng)，并打造適宜的生長環(huán)境，一旦發(fā)現(xiàn)病鴨，應(yīng)立即隔離并進行徹底消毒，防止病毒擴散到健康鴨群。

三、臨床癥狀

感染鴨只通常精神萎頓，活動能力下降，常見的半閉眼昏迷狀態(tài)，反映出其中樞神經(jīng)系統(tǒng)受到影響，眼部和鼻孔分泌物增多，導(dǎo)致鼻孔堵塞并出現(xiàn)呼吸困難，這些癥狀常與呼吸道病變相關(guān)。食欲減退或完全廢絕，出現(xiàn)離群獨處行為，鴨只整體健康狀況嚴(yán)重惡化。病程進展中，病鴨糞便常變?yōu)榫G色稀薄狀態(tài)，與消化系統(tǒng)功能障礙有關(guān)，病程終末階段，病鴨會出現(xiàn)全身抽搐，四肢痙攣，運動失調(diào)，身體呈角弓反張狀，極個別病例會出現(xiàn)左右翻滾或圍繞頭部轉(zhuǎn)圈的極端行為，此時病毒已經(jīng)侵犯到中樞神經(jīng)系統(tǒng)。從病鴨出現(xiàn)初期癥狀到死亡，時間跨度僅為幾分鐘至幾小時，反映了鴨病毒性肝炎并發(fā)漿膜炎的高度致命性。

四、剖檢變化

1、第一次剖檢

第一次剖檢中，肝臟明顯腫大，其質(zhì)地變脆，表面分布有類似大米粒大小的出血斑點，肝臟邊緣部分可見白色變性區(qū)域，這些變性區(qū)與細(xì)胞壞死及纖維素沉積有關(guān)。膽囊也呈現(xiàn)腫大現(xiàn)象，并且膽汁充盈，顏色呈墨綠色，說明膽汁分泌和排泄過程受到嚴(yán)重影響。脾臟質(zhì)地變硬且形態(tài)改變，說明其免疫功能已受到疾病影響。腎臟腫大且出血嚴(yán)重，存在急性腎臟損傷。腦膜及腦實質(zhì)出血，是病毒對中樞神經(jīng)系統(tǒng)侵襲導(dǎo)致的并發(fā)癥。在胸腺也觀察到出血現(xiàn)象，這與免疫系統(tǒng)的嚴(yán)重?fù)p傷有關(guān)。腹氣囊的狀況也表明疾病的嚴(yán)重性，其內(nèi)壁增厚且渾濁，表面附著斑狀和絮狀的纖維素性物質(zhì)，是典型的炎癥反應(yīng)。該剖檢結(jié)果印證了鴨病毒性肝炎并發(fā)漿膜炎的致病機理。

2、第二次剖檢

第二次剖檢共解剖10只鴨，細(xì)致觀察與第一次剖檢結(jié)果相比較，存在一些病理變化的細(xì)微差異。在這10只鴨中，6只的肝臟仍然呈現(xiàn)出典型的病毒性肝炎特征，肝臟腫大，質(zhì)地脆弱，表面有類似大米粒大小的出血斑點。另外3只鴨的肝臟出血斑點有所減小，呈現(xiàn)出彌漫狀分布，使得出血斑點不易與周圍組織區(qū)分，存在病毒侵襲導(dǎo)致的持續(xù)性炎癥反應(yīng)。最后1只鴨的肝臟則表現(xiàn)出完全的白色變性，肝臟組織廣泛損傷，細(xì)胞死亡。與此同時，膽囊、脾臟、腎臟和氣囊的病理變化與第一次剖檢相比并無明顯差異，說明這些器官的病變已在初次剖檢時達到一定的穩(wěn)定狀態(tài)。

3、第三次剖檢

第三次剖檢對10只鴨的內(nèi)臟器官進行詳細(xì)觀察，發(fā)現(xiàn)一系列進展性的病理變化，為了解疾病的嚴(yán)重性提供重要信息。所有解剖的鴨只均表現(xiàn)出肝臟出血點，是由病毒直接損害肝細(xì)胞引起的病理現(xiàn)象，顯示病毒性肝炎對肝臟功能的威脅。心包積液的出現(xiàn)則說明心臟受到周圍炎癥介質(zhì)的影響，積液由心包膜的炎癥反應(yīng)引起，導(dǎo)致心臟功能受限，影響循環(huán)系統(tǒng)的效率。腎臟的病變更為嚴(yán)重，出血并變黑，說明發(fā)生了廣泛的血管損傷。一只鴨的心包膜表面附著纖維素物質(zhì)，通常與嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)相關(guān)，是病毒感染引起的系統(tǒng)性炎癥。胸腹氣囊中的干酪物質(zhì)形成進一步證實了病毒感染引起炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重性，干酪性變是一種免疫應(yīng)答過程，與長期的炎癥反應(yīng)相關(guān)。

五、實驗室診斷

1、細(xì)菌的分離鑒定

從病死鴨的肝臟病變組織及心血中進行無菌采集，然后使用鉑餌技術(shù)接種到巧克力培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基以及鮮血營養(yǎng)瓊脂上，將培養(yǎng)基放置于 3.7 % 的恒溫箱中，同時維持 3 % 的二氧化碳環(huán)境以優(yōu)化生長條件。實驗結(jié)果顯示，在麥康凱培養(yǎng)基上沒有觀察到細(xì)菌生長，而巧克力培養(yǎng)基和鮮血瓊脂培養(yǎng)基上則生長了非溶血性的菌落，菌落表面圓滑、凸起，具有整齊的邊緣，外觀呈奶油狀，非常細(xì)小。使用光學(xué)顯微鏡檢查，該細(xì)菌為革蘭氏陰性的細(xì)小桿菌，并利用特殊染色技術(shù)進行觀察，細(xì)菌在兩極有膿染現(xiàn)象。為確認(rèn)細(xì)菌種類，將其接種到生化發(fā)酵鑒定試劑盒中進行系列生化測試，具體方法是測定細(xì)菌對特定生化底物的代謝能力來確定其種類，從而為后續(xù)的抗生素敏感性測試提供指導(dǎo)。

2、病毒分離

從病鴨肝臟中無菌采集樣本，然后將樣本進行勻漿處理，稀釋比例設(shè)置為1：5。為釋放病毒顆粒，樣本需經(jīng)過3次凍融循環(huán)，之后進行離心操作以分離上清，在上清液中加入 1 0 0 0I U / m L 的青霉素及鏈霉素，以抑制細(xì)菌生長，確保病毒分離的純度。將處理好的樣本取 0 . 2 m L 接種到9、10日齡的鴨胚中，放入 3 7 % 的恒溫箱進行培養(yǎng)。為確保結(jié)果的準(zhǔn)確性，將在24小時內(nèi)死亡的鴨胚剔除，以排除非病毒性死亡的干擾，繼續(xù)觀察并收集在24～72小時內(nèi)死亡的鴨胚尿囊液，該階段的鴨胚死亡通常與接種的病毒有關(guān)。分析這些鴨胚的尿囊液，觀察其病變情況，如出血、充血或其他典型的病理改變，以評估病毒致病能力。同時，測定尿囊液的血凝性，以識別病毒種類。

3、鴨胚中和試驗

取自死亡鴨胚的尿囊液，將其與針對DHV-1型病毒的高免血清按1：1的比例混合，混合物在 的水浴中孵化1小時，使抗體與病毒充分結(jié)合，從而中和病毒的感染能力。隨后，將經(jīng)過預(yù)處理的尿囊液以每胚 0 . 1 m L 的劑量接種到8、9日齡的鴨胚中，為評估抗體的中和效果，設(shè)置2組對照：一組添加抗體的尿囊液，另一組則未添加抗體，所有鴨胚在 下培養(yǎng)72小時。在此期間，所有24小時內(nèi)死亡的鴨胚被剔除，以排除非特異性死亡因素的干擾。培養(yǎng)結(jié)束后，對各組鴨胚的存活情況進行觀察記錄，注意接種經(jīng)抗體處理的尿囊液的鴨胚與對照組反應(yīng)差異。比較兩組間的成活率差異，可以判斷抗體對該病毒株的中和能力，從而驗證病原體的感染性。

4、動物回歸試驗

選擇40只健康的15日齡雛鴨，隨機均等分為4組，每組10只。在此實驗中，甲組鴨只接受從 5 % 牛血清肉湯培養(yǎng)液中分離得到的純培養(yǎng)細(xì)菌液皮下接種，細(xì)菌液的濃度調(diào)整至105CFU/mL，每只鴨皮下接種 0 . 3 m L ；乙組接種含病毒的尿囊液0 . 2 m L ，以評估單一病毒感染的效果；丙組在15日齡時先接受同乙組相同劑量的病毒尿囊液皮下接種，隨后在17日齡時再接受細(xì)菌液 0 . 5 m L 的皮下接種，模擬鴨只遭受的連續(xù)感染情況；丁組接受等量的生理鹽水作為參照，以排除其他非特異性影響。所有組別在相同條件下隔離飼養(yǎng)20天，其間密切監(jiān)測并記錄每組鴨的成活率與健康狀況，以此對比分析不同處理組間的病理反應(yīng)差異。該實驗可以觀察到細(xì)菌與病毒感染的協(xié)同效應(yīng)及其對雛鴨生存率的具體影響，進而評估并發(fā)感染的嚴(yán)重性，提高治療方案的有效性。

六、結(jié)果與分析

1、細(xì)菌的分離鑒定結(jié)果

對從病鴨中分離出的6株菌進行詳細(xì)的生化試驗分析，以確定其生化特性并鑒別菌種。這些細(xì)菌株均未能發(fā)酵乳糖、麥芽糖、葡萄糖等常見糖類，反映出非發(fā)酵性的生理特征。使用明膠作為底物時，觀察到明膠的液化現(xiàn)象，表明這些細(xì)菌具備明膠酶活性，能夠分解明膠蛋白。在進行過氧化物酶及氧化酶試驗時，結(jié)果均呈陽性，表明這些細(xì)菌株能夠利用氧化還原反應(yīng)生成能量，并具有一定的抗氧化能力。尿素試驗結(jié)果為陰性，說明這些菌株無法將尿素分解為氨和二氧化碳，吲哚和硫化氫的生成試驗也均為陰性，說明這些細(xì)菌無法通過代謝色氨酸產(chǎn)生吲哚，或通過分解含硫氨基酸產(chǎn)生硫化氫。上述生化特性說明這些細(xì)菌株符合鴨疫里默氏桿菌的典型生化行為，該菌是鴨群中常見的致病菌，能夠引起多種病理狀態(tài)，如肝炎和漿膜炎。

2、病毒分離結(jié)果

病毒的分離和傳代試驗結(jié)果顯示，接種后48～72小時內(nèi)，鴨胚的死亡率高達 8 1 % ，反映了病毒的高致病性。死亡的鴨胚主要表現(xiàn)為肝臟呈現(xiàn)土黃色、體表出血廣泛以及體型矮小等癥狀，這些特征突顯病毒感染后對鴨胚器官及外觀的嚴(yán)重影響。為驗證病毒的致病機理，實驗中將從死亡鴨胚中提取的1代尿囊液進行連續(xù)3代的傳遞實驗，結(jié)果表明，每一代的接種均能有效引起鴨胚的死亡，且病理表現(xiàn)與初代接種相一致，證明病毒的傳染性與病原性較為穩(wěn)定。盡管病毒引發(fā)明顯的病理變化，但在進行血凝試驗時并未顯示出血凝性，說明該病毒雖然具有高度的致病能力，但其機制與典型的血凝活性病毒不同，是通過不同機制引起宿主的病變。

3、鴨胚中和試驗結(jié)果

對病毒感染的鴨胚進行抗體中和處理，觀察其對病毒致死效果的影響。在72小時后的觀察結(jié)果顯示，所有接受含抗體血清處理的鴨胚均能存活并表現(xiàn)出良好的健康狀況，沒有一例死亡，說明加入的抗體能有效中和病毒，防止病毒對鴨胚的致命影響。相反，未加血清的對照組中大部分鴨胚發(fā)生死亡，表明病毒的高致病性及中和試驗中抗體的保護作用。未出現(xiàn)死亡的事實強調(diào)抗體在預(yù)防病毒性疾病中的潛在應(yīng)用價值，該結(jié)果驗證了抗體對特定病毒的中和能力，展示了免疫干預(yù)在預(yù)防鴨病毒性肝炎及其并發(fā)漿膜炎中的效果。

4、動物回歸試驗結(jié)果

試驗中，除作為對照的丁組外，甲、乙、丙三組均顯示了不同程度的雛鴨發(fā)病死亡現(xiàn)象。甲組在接種后第3天開始出現(xiàn)死亡，死亡鴨主要表現(xiàn)有肝周炎和氣囊炎，至第6天累計死亡4只，病死率達到 4 0 % ，表明細(xì)菌的致病性以及對雛鴨肝臟和氣囊的影響。乙組雛鴨在接種第4天開始發(fā)病，第5天有3只死亡，病死率為 3 0 % ，死亡鴨的肝臟表面呈現(xiàn)土黃色，并觀察到針尖大小的出血點，說明病毒感染導(dǎo)致的肝臟病變。丙組雛鴨接種后的反應(yīng)更為劇烈，首次接種后3天內(nèi)開始發(fā)病，死亡數(shù)量在第7天達到高峰，共8只死亡，病死率高達 8 0 % ，反映連續(xù)接種細(xì)菌和病毒的協(xié)同致病效應(yīng)。這些數(shù)據(jù)展示了病原體的高度致病性，也反映了感染后的病理變化與自然感染狀況的相似性，強調(diào)實驗?zāi)Ｐ驮谘芯恐虏C理中的價值。

七、科學(xué)有效的治療措施

1、第一次治療

每只鴨子注射 1 m L 的鴨肝抗體，增強鴨只自身對肝炎病毒的免疫反應(yīng)。為對抗細(xì)菌感染并減輕并發(fā)癥，可使用頭孢曲松這種廣譜抗生素，按 3 0 g 的劑量兌入 2 5 0 k g 水中供鴨只集中飲用，要求在3小時內(nèi)飲完，確保所有鴨只都能獲得足夠的藥物量。由于病毒性和細(xì)菌性疾病會導(dǎo)致電解質(zhì)失衡，還需并用黃氏多糖和電解多維，幫助恢復(fù)鴨只的電解質(zhì)平衡，提升免疫功能?？咕委煶掷m(xù)每天1次，連續(xù)3天，以確保細(xì)菌性感染得到有效控制。

2、第二次治療

第二次治療主要著重于增強鴨只的免疫反應(yīng)以及持續(xù)的抗菌防御，在第5天給予每只鴨子注射 1 . 5 m L 的鴨肝抗體，此劑量較初次治療增加，以加強免疫系統(tǒng)對病毒的清除能力。鴨肝抗體的使用能夠提供針對病毒的特異性免疫支持，幫助鴨只有效抵御病毒引起的肝臟病變及其并發(fā)癥。為防正繼發(fā)的細(xì)菌感染，繼續(xù)使用抗菌藥物進行飲水治療，保證所有鴨只均能獲得持續(xù)的抗生素保護。抗菌藥物的連續(xù)使用能夠抑制由于病毒感染引起的細(xì)菌生長，防止感染進一步擴散。此階段的治療還需密切監(jiān)測鴨只的健康狀態(tài)，及時調(diào)整治療方案以應(yīng)對不斷變化的病情，觀察鴨只的活動力、食欲，確保治療效果最大化且副作用最小化。

3、第三次治療

使用丁胺卡那霉素和強力霉素，二者各 5 0 g 溶于 3 5 0 k g 水中，讓鴨只集中飲用并在4小時內(nèi)飲完，確保每只鴨子都能均勻攝取到足夠的抗生素以對抗細(xì)菌感染，從而減少并發(fā)癥的發(fā)生。為增強鴨只的整體抵抗力，加速恢復(fù)，本次治療引入中藥處方，茵陳蒿 3 0 0 g 大黃 6 0 g 梔子 1 0 0 g 板藍(lán)根 2 5 0 g 、白茅根 3 0 0 g 黃芪 3 0 0 g 柴胡 3 0 0 g 茯苓 3 0 0 g 甘草 1 5 0 g ，這些中藥材按比例混合后煎煮提取藥汁，藥汁供飲用，藥渣則拌入飼料中，以確保藥效的全面吸收。中藥的使用能夠調(diào)節(jié)鴨只的體質(zhì)，清除體內(nèi)濕熱毒素，增強肝臟功能，提高機體的免疫力。治療方案要求每日1次，連續(xù)使用3天，以保持藥物濃度，對抗病毒和細(xì)菌的持續(xù)侵襲。結(jié)合抗生素的直接抗菌作用和中藥的整體調(diào)理作用，能夠有效控制鴨病毒性肝炎并發(fā)漿膜炎的發(fā)展，減輕病鴨的病癥，加速恢復(fù)過程。

綜上所述，鴨病毒性肝炎是一種傳播速度快且致死率極高的傳染病，主要由鴨肝炎病毒引發(fā)。養(yǎng)鴨業(yè)規(guī)模擴展的同時，未能及時治療該病及其常見并發(fā)癥漿膜炎會引起雛鴨大規(guī)模死亡，對養(yǎng)殖效益造成重創(chuàng)。為防止此類事件，加強疾病管理與預(yù)防至關(guān)重要，應(yīng)提升養(yǎng)殖場的日常管理，執(zhí)行嚴(yán)格的消毒程序，并排除一切可能誘發(fā)疾病的因素，從而保障雛鴨的健康與養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟利益。

（作者單位：545400廣西柳州市融安縣長安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心）