豬圓環(huán)病毒2型-豬肺炎支原體二聯(lián)滅活疫苗（圓支優(yōu)）臨床免疫效力試驗和最佳免疫日齡探索

摘要：[目的] 為客觀、科學(xué)地評價圓支優(yōu)（豬圓環(huán)病毒2型-豬支原體肺炎二聯(lián)滅活疫苗）的免疫效力，并探索最佳免疫日齡。[方法] 本試驗選取圓支優(yōu)分別免疫7、14和21日齡仔豬各221頭、216頭和209頭，同類商品疫苗分別免疫7、14和21日齡仔豬各217頭、211頭和202頭，空白對照組為205頭仔豬，不免疫2種疾病的相關(guān)疫苗。各組于相同條件下隔離飼養(yǎng)，觀察并統(tǒng)計免疫應(yīng)激反應(yīng)、豬群健康度、生產(chǎn)性能指標等進行臨床免疫效力評價。各組隨機選擇40頭豬，于40、60、100日齡采集全血和喉拭子分別用于豬圓環(huán)病毒和豬肺炎支原體的病原檢測，并統(tǒng)計豬圓環(huán)病毒感染和豬肺炎支原體排菌情況以進行實驗室評價。[結(jié)果] 圓支優(yōu)免疫后無任何應(yīng)激反應(yīng)，同類商品疫苗7、14日齡免疫后分別有部分豬只出現(xiàn)應(yīng)激現(xiàn)象；圓支優(yōu)7、14和21日齡免疫組的成活率分別為88.24%、89.35%和88.52%，均高于同類商品疫苗（分別為87.56%、87.68%和88.12%），2組均遠高于空白對照組（81.46%）；圓支優(yōu)7、14日齡免疫組的呼吸道疾病發(fā)生率分別為2.71%和2.31%，均低于同類商品疫苗（分別為4.61%和3.79%），21日齡免疫組為3.83%，略高于同類商品疫苗（3.47%），2組均遠低于空白對照組（15.61%）；圓支優(yōu)組和同類商品疫苗組的平均日增重分別為0.47 kg/頭和0.46 kg/頭，均高于空白對照組（0.43 kg/頭），料肉比分別為1.76和1.82，2組差異較為顯著，均遠低于空白對照組（1.93）；圓支優(yōu)7、14日齡免疫組至試驗結(jié)束2種病原檢測結(jié)果均為陰性，21日齡免疫組至60日齡時，2種病原檢測結(jié)果均為陰性，但100日齡檢測時分別有2頭豬圓環(huán)病毒陽性和1頭豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為5%和2.5%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組至60日齡時2種病原檢測結(jié)果均為陰性，至100日齡檢測時各組分別有4、7、6頭為豬圓環(huán)病毒陽性和2、2、3頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白對照組于40、60和100日齡檢測時，分別有9、6、4頭為豬圓環(huán)病毒陽性以及6、7、10頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為22.5%、15%、10%和15%、17.5%、10%。[結(jié)論] 與同類商品疫苗相比，7～14日齡免疫圓支優(yōu)，可更安全、有效和持久的預(yù)防豬圓環(huán)病毒和豬肺炎支原體感染，顯著提高豬群的健康度和生產(chǎn)性能指標，同時有效降低勞動強度、注射應(yīng)激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，是目前養(yǎng)豬生產(chǎn)中防控2種疾病的優(yōu)選疫苗。

關(guān)鍵詞：圓支優(yōu)；同類商品疫苗；臨床免疫效力；最佳免疫日齡

豬圓環(huán)病毒（PCV）有PCV-1、PCV-2、PCV-3和PCV-4型等4個血清型，其中以PCV-2臨床危害最為嚴重，可造成感染豬的嚴重免疫抑制，易繼發(fā)或并發(fā)其他病原體，使病情進一步加劇和復(fù)雜化，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴重的經(jīng)濟損失[1]。豬肺炎支原體（M.hyo）可使支氣管中纖毛凝結(jié)成束、脫落，喪失擺動功能，從而導(dǎo)致支原體肺炎，繼而引發(fā)一系列復(fù)雜的呼吸系統(tǒng)疾病，嚴重影響患豬飼料轉(zhuǎn)化率及生長發(fā)育，堪稱豬場利潤的隱形殺手。目前，疫苗免疫是防控上述2種疾病最經(jīng)濟和最有效的手段[2-3]。鑒于生產(chǎn)實踐中2種疾病混合感染率較高，疫苗接種時間也較為接近，免疫持續(xù)期均要求持久，因此，豬圓環(huán)病毒2型-豬支原體肺炎二聯(lián)滅活疫苗（以下簡稱圓支二聯(lián)疫苗）不僅可互助增效，還可有效降低勞動強度、注射應(yīng)激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染幾率，因此，為越來越多的豬場所關(guān)注和選用。本研究旨在對免疫不同圓支二聯(lián)疫苗的豬群進行跟蹤，通過臨床生產(chǎn)和實驗室檢測數(shù)據(jù)來評估疫苗免疫效果，為臨床選擇疫苗提供參考，同時驗證不同免疫日齡的免疫效力評估，以探索最佳免疫日齡，為其臨床科學(xué)應(yīng)用提供指導(dǎo)依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 疫苗

圓支二聯(lián)疫苗（商品名：圓支優(yōu)）由北京華夏興洋生物科技有限公司提供，同類商品疫苗購自國內(nèi)某生物制品公司。

1.2 試劑和儀器

豬圓環(huán)病毒2型和豬支原體肺炎的熒光定量PCR檢測試劑盒以及熒光定量PCR儀均由河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物疫病診斷中心提供。

1.3 實驗動物

圓支優(yōu)試驗組7、14和21日齡仔豬分別為221頭、216頭和209頭，同類商品疫苗組7、14和21日齡仔豬分別為217頭、211頭和202頭，空白對照組205頭仔豬，共計1 481頭，均由河南省某養(yǎng)殖集團公司提供。

1.4 試驗設(shè)計和免疫

詳見表1。

1.5 臨床生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計

各組于相同條件下隔離飼養(yǎng)。試驗前稱量平均初始重，免疫后觀察、統(tǒng)計仔豬6小時內(nèi)的各種應(yīng)激反應(yīng)。整個試驗期間每日仔細觀察、記錄豬群狀態(tài)及各種生產(chǎn)指標，試驗結(jié)束后全面評估豬群健康狀況并計算平均日增重及料肉比。

1.6 實驗室檢測

各組隨機選擇40頭豬，分別于40、60、100日齡采集全血和喉拭子，送至河南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物疫病檢測中心開展豬圓環(huán)病毒和豬肺炎支原體的病原檢測，統(tǒng)計豬圓環(huán)病毒感染和豬肺炎支原體排菌情況。

1.7 分析與總結(jié)

對圓支優(yōu)進行臨床免疫效果評估，并驗證不同免疫日齡的免疫效力，從而探索最佳免疫日齡。

2 結(jié)果

2.1 臨床生產(chǎn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計

第一，免疫應(yīng)激結(jié)果。結(jié)果見表2。圓支優(yōu)組7、14和21日齡免疫后均無任何應(yīng)激反應(yīng)；同類商品疫苗組于7、14日齡免疫后各有2、1頭試驗豬出現(xiàn)嘔吐和臥地不起，應(yīng)激比例分別為0.92%和0.47%。空白對照組無異常。

第二，豬群健康度。結(jié)果見表3。圓支優(yōu)7、14和21日齡免疫組分別成活195頭、193頭和185頭，成活率分別為88.24%、89.35%和88.52%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組分別成活190頭、185頭和178頭，成活率分別為87.56%、87.68%和88.12%；空白對照組成活167頭，成活率為81.46%；結(jié)果顯示，圓支優(yōu)組成活率明顯高于同類商品疫苗組，二者均遠高于空白對照組。圓支優(yōu)7、14和21日齡免疫組分別有6、5和8頭發(fā)生呼吸道疾病，疾病發(fā)生率分別為2.71%、2.31%和3.83%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組分別有10、8和7頭發(fā)生呼吸道疾病，疾病發(fā)生率分別為4.61%、3.79%和3.47%；空白對照組有32頭發(fā)生呼吸道疾病，疾病發(fā)生率為15.61%。結(jié)果顯示，圓支優(yōu)組7日齡和14日齡呼吸道疾病發(fā)生率明顯低于同類商品疫苗組，21日齡免疫組略高于同類商品疫苗組，但二者均遠低于空白對照組。

第三，生產(chǎn)性能指標結(jié)果。結(jié)果見表4。圓支優(yōu)組和同類商品疫苗組的平均日增重分別為0.47 kg/頭和0.46 kg/頭，2組差異不顯著，均高于空白對照組（0.43 kg/頭）；圓支優(yōu)組和同類商品疫苗組的料肉比分別為1.76和1.82，2組差異較為顯著，均遠低于空白對照組（1.93）。

2.2 實驗室檢測結(jié)果

結(jié)果見表5和表6。圓支優(yōu)7、14日齡免疫組至試驗結(jié)束豬圓環(huán)病毒陽性和豬肺炎支原體的病原檢測結(jié)果均為陰性，21日齡免疫組至60日齡時，2種病原檢測結(jié)果均為陰性，但100日齡檢測時分別有2頭豬圓環(huán)病毒陽性和1頭豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為5%和2.5%；同類商品疫苗7、14和21日齡免疫組至60日齡時2種病原檢測結(jié)果均為陰性，至100日齡檢測時各組分別有4、7、6頭為豬圓環(huán)病毒陽性和2、2、3頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為10%、17.5%、15%和5%、5%、7.5%；空白對照組于40、60和100日齡檢測時，分別有9、6、4頭為豬圓環(huán)病毒陽性以及6、7、10頭為豬肺炎支原體陽性，陽性率分別為22.5%、15%、10%和15%、17.5%、25%。結(jié)果顯示，與空白對照組相比，接種圓支二聯(lián)疫苗，均在60日齡內(nèi)有效抵抗感染豬圓環(huán)病毒陽性和豬肺炎支原體感染；與同類商品疫苗相比，圓支優(yōu)免疫效果更好，保護期更長，尤其是7、14日齡免疫組至100日齡時仍未感染2種病原，免疫效果極佳，而21日齡免疫組則存在極個別感染。

3 討論

本研究中，整個試驗周期內(nèi)各組試驗豬被分別飼養(yǎng)于完全獨立的不同豬舍內(nèi)，試驗過程嚴格按照豬場正常養(yǎng)殖流程進行，未發(fā)生重大烈性傳染性疾病，因此，可最大程度排除其他因素對本研究結(jié)果的干擾。

近年來圓支二聯(lián)疫苗逐漸得到市場認可，但免疫效果和安全性嚴重參差不齊。當前生產(chǎn)實踐中以“豬群健康度+生產(chǎn)性能指標+抗原檢測”相結(jié)合作為主導(dǎo)來進行2種疫苗的免疫效果評估[4-5]。本試驗選用的圓支優(yōu)免疫豬只后，成活率明顯高于同類商品疫苗，免疫保護期則更為持久，呼吸道疾病發(fā)生率和料肉比則明顯低于同類商品疫苗，效果顯著。另外，在疫苗評估過程中，同樣需要關(guān)注安全性，圓支優(yōu)在不同日齡接種后無任何免疫應(yīng)激，安全性很高，而同類商品疫苗7、14日齡接種后均有部分豬只出現(xiàn)應(yīng)激現(xiàn)象。

通常情況下，豬肺炎支原體感染可加重豬圓環(huán)病毒相關(guān)的肺部及淋巴結(jié)病變，增加PMWS的發(fā)病概率，而豬圓環(huán)病毒感染則不會加重豬肺炎支原體鼻腔排毒及其引起的肺部病變，因此在聯(lián)合免疫時，應(yīng)首先重點關(guān)注豬肺炎支原體的免疫效力和免疫日齡。豬肺炎支原體的母源抗體僅能保護10日齡內(nèi)仔豬，而感染最早可發(fā)生于2～3周齡仔豬，加之滅活苗免疫2周后才可發(fā)揮保護作用，因此免疫日齡應(yīng)越早越好，本研究結(jié)果有力地證實了這一觀點。7、14日齡組免疫圓支優(yōu)至試驗結(jié)束均未感染豬肺炎支原體，21日齡免疫組至60日齡時檢測結(jié)果仍為陰性，但100日齡時已有個別豬只感染，同類商品疫苗7、14日齡組僅能保護至60日齡，21日齡免疫組的感染率則上升至3倍。豬圓環(huán)病毒抗原檢測結(jié)果與豬肺炎支原體抗原檢測結(jié)果基本一致。因此，生產(chǎn)實踐中圓支優(yōu)的免疫時間應(yīng)以7～14日齡最為合適，盡量不要選擇21日齡時免疫，易造成極個別豬只免疫效果不佳。

綜上，圓支優(yōu)7～14日齡免疫時，可有效預(yù)防豬肺炎支原體和豬圓環(huán)病毒感染，并可有效降低勞動強度、注射應(yīng)激以及非瘟等直接接觸性疾病的感染概率，是目前養(yǎng)豬生產(chǎn)中防控2種疾病的優(yōu)選疫苗?！?/p>

參考文獻：

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收稿日期：2024-11-22

作者簡介：常洪濤（1978.7.17—），男，博士，副教授。研究方向：豬病快速診斷技術(shù)及新型疫苗研發(fā)。

通訊作者：劉慧敏（1984.2.6—），女，博士，副教授。研究方向：免疫與代謝、病毒與宿主相互作用的機制研究。