生豬屠宰同步檢疫中旋毛蟲的檢驗檢疫處理

摘要：豬旋毛蟲病是一種人畜共患病，其病原為旋毛蟲，旋毛蟲的成蟲寄生于生豬小腸內(nèi)，幼蟲則寄生于肌肉組織中。該病已被我國列為二類動物疫病，不僅會對生豬的生長發(fā)育產(chǎn)生影響，還會對人類健康和公共衛(wèi)生安全構(gòu)成威脅。在生豬屠宰同步檢疫中及時撿出攜帶有旋毛蟲的肉制品并進(jìn)行無害化處理，對該病的防控工作具有重要意義。文章對生豬屠宰同步檢疫中旋毛蟲的檢驗檢疫方法及處理措施加以探討分析，以供參考。

關(guān)鍵詞：生豬屠宰；檢驗檢疫；旋毛蟲；處理

豬旋毛蟲病已被列入我國生豬屠宰同步檢疫的法定傳染病清單，是屠宰過程中必須檢測的疾病之一[1]。通過嚴(yán)格的檢驗檢疫手段，能夠及時檢測出感染的豬肉，并對病害豬肉進(jìn)行無害化處理，避免其流入市場，從而保障食品安全及生豬養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。

1 豬旋毛蟲病概述

1.1 病原形態(tài)

豬旋毛蟲體形呈細(xì)線狀，顏色乳白，尾端對比頭端更為細(xì)小。雌蟲長度約為3.5 mm，寬度約為0.06 mm，其尾端鈍圓，生殖系統(tǒng)為單管狀結(jié)構(gòu)，包括陰道、子宮、卵巢及輸卵管等器官。卵巢位于蟲體后部，子宮后段充滿大量蟲卵，成熟的幼蟲通過陰門排出，陰門位置靠近蟲體前部，占前1/5長度。雄蟲長約1.5 mm，寬約0.04 mm，尾部有兩片葉狀交配附器，生殖系統(tǒng)同樣為單管結(jié)構(gòu)。旋毛蟲分為有包囊和無包囊兩類。有包囊的旋毛蟲在感染宿主肌肉后，約18～20 d內(nèi)逐漸卷曲，形成橢圓或紡錘形的包囊；包囊壁較厚，內(nèi)部包含1～2條幼蟲。無包囊的旋毛蟲在感染16～17 d內(nèi)呈彎曲或直線狀活動，寄生于宿主肌纖維間，幼蟲體長約為0.5 mm[2]。

1.2 生活史

豬旋毛蟲的成蟲通常寄生于宿主空腸及十二指腸的上段，而內(nèi)含幼蟲的旋毛蟲包囊則主要寄生于宿主橫紋肌細(xì)胞內(nèi)。旋毛蟲無法在外界環(huán)境中獨立完成發(fā)育，需要經(jīng)過宿主完成整個生活周期。因此，旋毛蟲的宿主兼具中間宿主和最終宿主的作用，包括豬、野豬、人類、貓、犬、鼠及其他野生動物均可作為宿主。

1.3 流行特點

人類、大部分哺乳動物及食肉鳥類對旋毛蟲均易感，主要通過消化道傳播，生豬吞食含有旋毛蟲包囊的肉類后感染，人類多因生食或半生食含有旋毛蟲的豬肉或其他肉類而感染。動物排泄出的未被消化的幼蟲也是旋毛蟲病的傳染源，可通過蛆蟲、蒼蠅、昆蟲等進(jìn)行傳播。養(yǎng)殖場內(nèi)未經(jīng)殺蟲、消毒的器械設(shè)備、飼喂工具等也會造成間接感染。此外，妊娠母豬感染該病后也會通過胎盤垂直傳播給胎豬。

2 同步屠宰檢驗檢疫方法

2.1 檢疫準(zhǔn)備

首先需對屠宰場環(huán)境和設(shè)施進(jìn)行詳細(xì)檢查，屠宰場必須配備有符合《食品安全法》要求的相關(guān)設(shè)施設(shè)備，且需通過當(dāng)?shù)匦l(wèi)生檢疫部門的審核。其次，要檢查屠宰場內(nèi)的消毒設(shè)備、專用工具、分區(qū)操作和人員培訓(xùn)。最后還要檢查動物來源是否符合檢疫標(biāo)準(zhǔn)，包括動物是否持有健康證明等。

2.2 生豬屠宰前健康檢查

檢查生豬體表是否存在皮膚損傷、腫塊或其他異?，F(xiàn)象，檢查生豬健康狀況，包括體溫是否異常、消瘦、乏力等癥狀。對于存在異常情況的生豬，可以采集部分組織樣本進(jìn)行初步檢測，確保其符合檢疫標(biāo)準(zhǔn)。

2.3 標(biāo)本采集

采樣部位可選擇膈肌、肩部肌肉、橫膈膜及舌頭等最常見的旋毛蟲寄生部位，有助于提高檢出率。采樣數(shù)量根據(jù)屠宰規(guī)模而定，大規(guī)模屠宰場通常會采取10%～20%的樣本抽檢比例，每100頭豬至少抽取2～3頭豬進(jìn)行標(biāo)本采集，每批豬至少采集3個部位的樣本。采集樣本時，可用消毒刀具從選定的部位切取適量肌肉組織，通常每頭豬采集50～100 g樣本。

2.4 旋毛蟲檢驗方法

第一，肉眼觀察法。生豬屠宰后，先取出體內(nèi)全部臟器，在其左右兩側(cè)的膈肌部位分別割下一塊膈肌，編號保存作為待檢樣本。對于不同的肉樣，至少割取20個樣本，以提高檢驗準(zhǔn)確率，確保檢驗檢疫工作的科學(xué)性。一般情況下，最容易檢出旋毛蟲體的部位就是接近肝臟的橫膈膜肌和接近肋骨的隔膜肌，可在該部位割取樣本。獲取檢驗肉樣后，將其放在光線充足的操作臺中央，將肉樣肌膜徹底撕開，盡量舒展肌肉，使整塊肌肉保持平整的狀態(tài)，從多個角度肉眼觀察肌肉中是否存在針尖大小的硬質(zhì)白點。如果發(fā)現(xiàn)肌肉內(nèi)部存在細(xì)小白點，則需進(jìn)一步查看其外部包裹情況，觀察是否為半透明水滴狀物質(zhì)，內(nèi)部是否存在鈣化情況。寄生情況較為嚴(yán)重的病死豬，其肌肉內(nèi)小白點多呈乳白色，包囊發(fā)灰、發(fā)黃。

第二，人工消化法。使用鹽酸、胃蛋白酶混合配制消化液，鹽酸濃度控制為0.7%～1%，胃蛋白酶活力為200～300 U/g。切取100 g肌肉樣本放入消化液中，37～42 ℃溫度條件下持續(xù)消化45～60 min[3]。消化完成后，使用紗布或濾紙過濾掉消化液，用二重皿收集過濾液中的殘留物，通過顯微鏡觀察尋找旋毛蟲的幼蟲，體長約為0.5～1.5 mm。

第三，肌肉組織切片法。將采集到的肌肉樣本切割處理成厚度約為1～2 mm的薄片，使用新型免疫熒光染色法染色處理或HE染色（即蘇木精-伊紅染色法）處理，在40倍和100倍顯微鏡下觀察是否存在旋毛蟲的囊蟲。

第四，膠體金免疫層析法。該方法又稱快速紙條檢測法，廣泛用于旋毛蟲的普查、宰前檢疫、產(chǎn)地檢疫、進(jìn)出口檢疫等工作。取1～2 g不帶脂肪的待檢肌肉組織，充分剪碎后放入裝有稀釋緩沖液的瓶中搖晃均勻，靜置10 min左右，膠頭滴管吸取上清液，在檢測卡中滴加2～3滴，10 min內(nèi)觀察結(jié)果。

第五，分子生物學(xué)方法（PCR檢測）。使用商用DNA提取試劑盒提取肌肉樣本中的DNA，針對旋毛蟲特有的基因序列（如18SrRNA基因、ITS1區(qū)域等），設(shè)計引物進(jìn)行實時定量PCR擴(kuò)增。通過對照陽性與陰性樣本，判斷擴(kuò)增產(chǎn)物的大小與特異性。

第六，酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。從生豬耳靜脈采集血液5mL，常規(guī)分離血清，采用特異性抗旋毛蟲抗體的ELISA試劑盒進(jìn)行ELISA檢測。具體操作時，在酶標(biāo)包被板待測樣品孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔和空白對照孔內(nèi)滴入不同濃度的待測樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100 μL，晃勻后封板，37 ℃條件下培育3 0min。倒掉孔內(nèi)液體后加滿洗滌液，30 s后倒掉洗滌液，重復(fù)洗滌5次后拍干。除空白對照孔外的所有孔內(nèi)各注入酶標(biāo)結(jié)合物100 μL，封板后37 ℃條件下培育30min，同樣洗滌5次。之后，每孔倒入顯色劑A和顯色劑B各50 μL，震勻后37 ℃條件下避光保存15 min。加入終止液50 μL終止反應(yīng)，以450 nm波長依次測量各孔吸光度（OD值）。陽性結(jié)果：P/N值（待測樣品吸光度與陰性對照吸光度的比值）＞2.1；陰性結(jié)果：P/N值≤2.1。

2.5 結(jié)果判定

陽性結(jié)果：若人工消化法/肌肉組織切片法檢出旋毛蟲幼蟲，或膠體金免疫層析法/PCR/ELISA檢測結(jié)果呈陽性，則可判定豬旋毛蟲感染，應(yīng)立即將相關(guān)病豬隔離，并對陽性樣本進(jìn)行進(jìn)一步確認(rèn)，避免誤檢。

陰性結(jié)果：若人工消化法/肌肉組織切片法未檢出旋毛蟲幼蟲，或膠體金免疫層析法/PCR/ELISA檢測未能檢出相關(guān)基因或抗體，則可判定該批次生豬符合檢疫標(biāo)準(zhǔn)，可以進(jìn)入屠宰、加工流程。

3 科學(xué)處理

符合旋毛蟲檢疫標(biāo)準(zhǔn)的合格豬，報送相關(guān)主管部門備案，進(jìn)入市場銷售。旋毛蟲檢出率達(dá)到一定標(biāo)準(zhǔn)（如1%以上），可判定為不合格豬，需進(jìn)行銷毀或特殊處理（如高溫蒸煮或腌制）后加工。詳細(xì)記錄每個批次的檢驗數(shù)據(jù)，包括樣本來源、檢驗方法、檢驗結(jié)果、處理方法等。將每頭豬的檢驗結(jié)果詳細(xì)歸檔，供監(jiān)管部門隨時查閱，并及時向相關(guān)衛(wèi)生監(jiān)管部門提交檢驗報告，報告內(nèi)容包括檢驗方法、結(jié)果、處置措施等。

所有使用過的采樣工具、消化液、實驗室器皿等都需經(jīng)嚴(yán)格消毒。屠宰后需對屠宰場進(jìn)行全方位清潔，尤其是旋毛蟲檢測區(qū)域，更需要徹底的清潔與消毒，確保無交叉污染。

做好后續(xù)監(jiān)督與管理工作，定期對屠宰場、實驗室、檢驗人員進(jìn)行審查，確保旋毛蟲檢驗工作得到有效執(zhí)行。定期進(jìn)行能力驗證和質(zhì)量控制，確保檢驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。

結(jié)語

豬旋毛蟲病是一種人畜共患寄生蟲病，也是生豬屠宰檢疫工作中重點檢測的傳染性寄生蟲病之一，危害性極大。因此，在生豬同步屠宰檢疫過程中，應(yīng)綜合運用肉眼觀察法、人工消化法、肌肉組織切片法、膠體金免疫層析法、PCR檢測及 ELISA法等檢疫方式，規(guī)范化和精準(zhǔn)化旋毛蟲的檢驗檢疫工作，并采取科學(xué)處理措施，確保豬肉產(chǎn)品的安全，降低旋毛蟲傳染給消費者的風(fēng)險?！?/p>

參考文獻(xiàn)：

[1] 顏廷陸.生豬屠宰同步檢疫中旋毛蟲的檢驗檢疫及處理[J].當(dāng)代畜牧.2022，（01）：90-91.

[2] 王紅軍.畜禽屠宰檢疫工作常見問題與優(yōu)化建議[J].北方牧業(yè).2024，（01）：12.

[3] 李建云.生豬屠宰檢疫中旋毛蟲病的檢驗方法[J].云南農(nóng)業(yè).2019，（07）：59-60.

收稿日期：2024-12-26

作者簡介：徐佳佳（1995—），女，本科，助理獸醫(yī)師。研究方向：動物疫病診斷和檢測。