低氧脅迫對(duì)綠鰭馬面鲀鰓組織抗氧化酶、呼吸相關(guān)酶及磷酸酶活性的影響

摘 要：為研究低氧脅迫下綠鰭馬面鲀（Thamnaconus septentrionalis）鰓組織的應(yīng)激響應(yīng)機(jī)制，進(jìn)行了溶解氧水平分別為8、5、2 mg/L的低氧脅迫試驗(yàn)（其中8 mg/L組為對(duì)照組，其余2組為低氧組），分析不同溶解氧條件下其鰓組織中酶活性的變化。試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著溶解氧水平的降低，綠鰭馬面鲀鰓組織中過氧化氫酶（CAT）和超氧化物歧化酶（SOD）活性和總抗氧化能力（T-AOC）均呈現(xiàn)上升趨勢(shì)；丙二醛（MDA）含量與對(duì)照組相比降低；乳酸脫氫酶（LDH）活性隨著溶解氧的降低而升高；酸性磷酸酶（ACP）活性隨著溶解氧的下降呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，堿性磷酸酶（AKP）活性則呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)。試驗(yàn)結(jié)果表明，低氧脅迫能夠影響綠鰭馬面鲀鰓組織內(nèi)抗氧化酶、呼吸相關(guān)酶及磷酸酶的活性，在低氧脅迫過程中，綠鰭馬面鲀會(huì)通過調(diào)節(jié)抗氧化酶的活性來激活體內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)，從而保護(hù)機(jī)體免受缺氧導(dǎo)致的氧化損傷。

關(guān)鍵詞：綠鰭馬面鲀；低氧脅迫；鰓；抗氧化酶；呼吸相關(guān)酶；磷酸酶

溶解氧（DO）是水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中的重要環(huán)境因子，對(duì)魚類的攝食、生長、代謝和繁育等生命活動(dòng)具有重要影響［1-2］。在魚類養(yǎng)殖過程中，水體溶解氧容易受到各種自然或人為因素的影響，天氣變化、水質(zhì)的改變以及運(yùn)輸時(shí)間過長等因素都會(huì)造成水體溶解氧降低，使魚類處在低氧環(huán)境條件下［3］。魚類在低溶解氧的水體中容易產(chǎn)生氧化應(yīng)激反應(yīng)，其正常的呼吸和代謝發(fā)生紊亂，產(chǎn)生大量氧自由基，從而導(dǎo)致氧化損傷［4-5］。為了降低活性氧自由基對(duì)機(jī)體造成的損傷，機(jī)體會(huì)啟動(dòng)抗氧化防御系統(tǒng)。研究發(fā)現(xiàn)，鯽（Carassius auratus）［6］在面對(duì)低氧脅迫時(shí)，其血清、鰓及肌肉組織中超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）活性，總抗氧化能力（T-AOC）及丙二醛（MDA）含量均出現(xiàn)顯著升高現(xiàn)象。西伯利亞鱘（Acipenser baerii）在面對(duì)低氧脅迫時(shí)，其肝臟中超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）的活性顯著降低［7］。卵形鯧鲹（Trachinotus ovatus）在慢性低氧脅迫下，其肝臟組織中的丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽還原酶（GSH）的活性顯著上調(diào)，過氧化氫酶（CAT）活性則顯著下調(diào)［8］。

綠鰭馬面鲀（Thamnaconus septentrionalis）俗稱面包魚、剝皮魚、馬面魚等，隸屬于鲀形目（Tetraodontiformes）、單角鲀科（Monacanthidae）、馬面鲀屬（Thamnaconus） ［9-10］，廣泛分布于我國沿海海域、朝鮮半島沿海和日本海海域［11］，屬大洋洄游性暖水外海近底層魚類［12］。該魚具有肉味鮮美、蛋白質(zhì)含量高、營養(yǎng)豐富等特點(diǎn)，因而深受大眾喜愛，市場消費(fèi)量大，經(jīng)濟(jì)價(jià)值較高［10］。近年來，已有關(guān)于養(yǎng)殖綠鰭馬面鲀耗氧率和窒息點(diǎn)的研究和分析［13］，但尚未發(fā)現(xiàn)有關(guān)綠鰭馬面鲀面對(duì)低氧環(huán)境時(shí)鰓組織呼吸相關(guān)酶、磷酸酶及抗氧化酶活性變化的研究報(bào)道。本研究以綠鰭馬面鲀?yōu)樵囼?yàn)對(duì)象，探討在低氧脅迫下其鰓組織中過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脫氫酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）、堿性磷酸酶（AKP）活性的變化情況，以及丙二醛（MDA）含量和總抗氧化能力（T-AOC）的變化規(guī)律，以期豐富基礎(chǔ)研究數(shù)據(jù)，為進(jìn)一步研究綠鰭馬面鲀的低氧適應(yīng)機(jī)制及養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 試驗(yàn)材料

試驗(yàn)用綠鰭馬面鲀來自大連天正實(shí)業(yè)有限公司。選取體表無損傷、體質(zhì)量（49.68±10.20）g、體長（16.26±1.03）cm的健康個(gè)體進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)魚暫養(yǎng)于室內(nèi)容積約200 L（養(yǎng)殖水體約150 L）的水槽中。暫養(yǎng)期間，每天投飼1次，換水1次，保持水溫在15 ℃左右，水體pH 在7～8。暫養(yǎng)1周后進(jìn)行低氧脅迫試驗(yàn)。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

正式試驗(yàn)開始前24 h停止投喂。試驗(yàn)設(shè)置水體溶解氧分別為8、5、2 mg/L 的3個(gè)不同質(zhì)量濃度組，其中8 mg/L為對(duì)照組，5 mg/L和2 mg/L為低氧組，每組設(shè)3個(gè)平行。試驗(yàn)共采用9口200 L（養(yǎng)殖水體約150 L）的養(yǎng)殖水槽，水溫保持在15 ℃。試驗(yàn)時(shí)，通過向水體中添加Na2SO3來降低水體中溶解氧的質(zhì)量濃度，并通過調(diào)節(jié)空氣注入量來控制水體中溶解氧的質(zhì)量濃度，待對(duì)照組與低氧組的溶解氧達(dá)到預(yù)設(shè)值并保持穩(wěn)定時(shí)，將暫養(yǎng)后的72尾綠鰭馬面鲀隨機(jī)放入9口養(yǎng)殖水槽中（每口水槽8尾）。試驗(yàn)期間，嚴(yán)格監(jiān)控水體溶解氧質(zhì)量濃度，每10 min使用YSI溶氧儀測(cè)量并調(diào)整水體溶解氧，低氧脅迫處理6 h后，將各口水槽內(nèi)的試驗(yàn)魚全部取樣。

1.3 樣品采集及保存

每個(gè)試驗(yàn)平行組取樣8尾魚。采樣前將試驗(yàn)魚放入質(zhì)量濃度為200 mg/L的MS-222麻醉劑溶液中快速麻醉，以降低其應(yīng)激反應(yīng)。取樣前擦干魚體表面水分。取樣全程在冰上進(jìn)行，迅速解剖取出魚體的鰓組織，剪去鰓耙，將鰓絲放入1.5 mL干凈無菌的離心管中，使用液氮進(jìn)行速凍，放入-80 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.4 相關(guān)指標(biāo)測(cè)定

過氧化氫酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、乳酸脫氫酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（AKP）的活性、丙二醛（MDA）含量以及總抗氧化能力（T-AOC）均使用南京建成生物工程研究所有限公司的試劑盒進(jìn)行測(cè)定。將試驗(yàn)魚的鰓組織樣本與質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.9%的預(yù)冷生理鹽水按照質(zhì)量體積比為1∶9混勻，通過研磨將其制成10 %的組織勻漿液，上離心機(jī)2 500 r/min離心10 min，收集上清液作為待測(cè)溶液，按照試劑盒說明書進(jìn)行操作。使用多功能酶標(biāo)儀（Thermo Scientific MultiskanTM FC，美國）檢測(cè)吸光度。

1.5 數(shù)據(jù)處理

所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)以（平均值±標(biāo)準(zhǔn)差）表示。采用SPSS 26.0 軟件進(jìn)行單因素方差分析（one-way ANOVA），對(duì)不同處理組綠鰭馬面鲀的酶活性變化用Duncan’s方法進(jìn)行多重比較，設(shè)顯著性水平為0.05。采用EXCEL軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和繪圖。

2 結(jié)果

2.1 過氧化氫酶（CAT）活性的變化

低氧脅迫下綠鰭馬面鲀鰓組織CAT的活性變化見圖1。由圖1可見，綠鰭馬面鲀鰓組織中CAT的活性隨著溶解氧質(zhì)量濃度的降低呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，溶解氧5 mg/L組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05），而2 mg/L組與對(duì)照組具有顯著性差異（P＜0.05）。

2.2 超氧化物歧化酶（SOD）活性的變化

由圖2可見，綠鰭馬面鲀鰓組織SOD的活性隨著溶解氧質(zhì)量濃度的降低呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，溶解氧質(zhì)量濃度5 mg/L組與對(duì)照組SOD的活性沒有顯著性差異（P＞0.05），但2 mg/L組與對(duì)照組相比SOD活性顯著升高（P＜0.05）。

2.3 總抗氧化能力（T-AOC）的變化

由圖3可見，綠鰭馬面鲀鰓組織的總抗氧化能力（T-AOC）隨著水體溶解氧質(zhì)量濃度的降低而升高，當(dāng)水體溶解氧質(zhì)量濃度由8 mg/L降至5 mg/L時(shí)，試驗(yàn)魚鰓組織的T-AOC有所升高，但與對(duì)照組沒有顯著性差異（P＞0.05），而溶解氧2 mg/L組的T-AOC顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。

2.4 丙二醛（MDA）含量的變化

由圖4可見，綠鰭馬面鲀鰓組織MDA的含量隨著水體溶解氧質(zhì)量濃度的下降呈現(xiàn)明顯的下降趨勢(shì)，溶解氧質(zhì)量濃度5 mg/L組MDA的含量與對(duì)照組沒有顯著性差異（P＞0.05），但2 mg/L組與對(duì)照組相比MDA含量顯著降低（P＜0.05）。

2.5 乳酸脫氫酶（LDH）活性的變化

由圖5可見，綠鰭馬面鲀鰓組織中LDH的活性隨著水體溶解氧質(zhì)量濃度的下降而上升，溶解氧為2 mg/L的低氧組的LDH活性顯著高于對(duì)照組（P＜0.05），但溶解氧為5 mg/L組與對(duì)照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

2.6 酸性磷酸酶（ACP）活性的變化

由圖6可見，綠鰭馬面鲀鰓組織中ACP的活性隨著水體溶解氧質(zhì)量濃度的下降呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，當(dāng)溶解氧質(zhì)量濃度為5 mg/L時(shí)，該組的ACP活性與對(duì)照組相比顯著上升（P＜0.05），而當(dāng)溶解氧質(zhì)量濃度降低至2 mg/L時(shí)， 該組ACP活性雖與對(duì)照組相比有所升高，但與5 mg/L組相比有所下降，與二組間無顯著性差異（P＞0.05）。

2.7 堿性磷酸酶（AKP）活性的變化

由圖7可見，綠鰭馬面鲀鰓組織中AKP的活性隨著水體溶解氧質(zhì)量濃度的下降呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，且各組之間均具有顯著性差異（P＜0.05）。

3 討論

3.1 低氧脅迫對(duì)綠鰭馬面鲀鰓組抗氧化酶的影響

當(dāng)魚類面對(duì)低氧環(huán)境時(shí)，其有氧呼吸速率下降，體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生大量活性氧自由基（ROS），而過量的ROS在體內(nèi)積累會(huì)出現(xiàn)攻擊體內(nèi)生物膜中不飽和脂肪酸的現(xiàn)象，導(dǎo)致細(xì)胞膜脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，造成機(jī)體氧化損傷［14］。魚體為了在氧化與還原的反應(yīng)中維持平衡，其體內(nèi)具有一整套的抗氧化系統(tǒng)，包含酶促系統(tǒng)和非酶促系統(tǒng)，該系統(tǒng)不斷作用，清除過多的氧自由基，調(diào)節(jié)機(jī)體內(nèi)活性氧水平，使魚體免受氧化損傷［15-16］。

本試驗(yàn)中，綠鰭馬面鲀?cè)趹?yīng)對(duì)低氧脅迫時(shí)，其鰓組織內(nèi)CAT和SOD的活性與對(duì)照組相比顯著升高（P＜0.05），表明此時(shí)由于低氧脅迫，魚體內(nèi)產(chǎn)生大量的ROS，鰓組織啟動(dòng)抗氧化系統(tǒng)，誘導(dǎo)CAT和SOD活性升高，用以消除過量的ROS，從而降低氧化應(yīng)激造成的損害，保護(hù)魚體免受氧化損傷。這與對(duì)鰱（Hypophthalmichthys molitrix）［5］、卵形鯧鲹［8］、青田田魚（Cyprinus carpio var. qingtianensis）［17］在低氧脅迫下抗氧化酶的研究結(jié)果一致。MDA是體內(nèi)ROS含量增多導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化過程的標(biāo)志性產(chǎn)物，可以間接反映細(xì)胞受自由基攻擊的受損程度［18］。在本試驗(yàn)中，綠鰭馬面鲀的MDA含量隨著溶解氧的下降呈降低的趨勢(shì)，這可能是在缺氧環(huán)境下，綠鰭馬面鲀有氧呼吸受到抑制，產(chǎn)生的氧自由基相對(duì)減少，其鰓組織細(xì)胞受到的氧化損傷也相應(yīng)減少。這與團(tuán)頭魴（Megalobrama amblycephala）［19］、珍珠龍膽石斑魚（Epinephelus fuscoguttatus♀×E. lanceolatus♂）［15］等的相關(guān)研究結(jié)果相似。T-AOC是各種抗氧化物質(zhì)及抗氧化酶構(gòu)成的總抗氧化水平，其能夠用來評(píng)價(jià)抗氧化系統(tǒng)的能力變化，對(duì)全面評(píng)價(jià)機(jī)體抗氧化系統(tǒng)具有重要意義［6］。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，綠鰭馬面鲀?cè)诘脱趺{迫下，其鰓組織中的T-AOC與對(duì)照組相比有所升高，且2 mg/L低氧組顯著高于對(duì)照組（P＜0.05）。這與在不同溶解氧水平下鯔（Mugil cephalus）［20］幼魚鰓組織氧化應(yīng)激影響的研究結(jié)果相一致。綜上所述，在低氧環(huán)境下，綠鰭馬面鲀的鰓組織具有較高的抗氧化能力，其抗氧化機(jī)制能發(fā)揮作用，激活抗氧化防御系統(tǒng)，消除機(jī)體內(nèi)過多的氧自由基，保護(hù)機(jī)體免受氧化損傷。

3.2 低氧脅迫對(duì)綠鰭馬面鲀鰓組織呼吸相關(guān)酶及磷酸酶活性的影響

當(dāng)水體中的溶解氧水平低于魚類維持正常代謝功能的閾值時(shí)，魚類可以通過減少代謝或改變代謝途徑、代謝方式來維持其生理活動(dòng)，以滿足其能量需求［21］。LDH是無氧呼吸的指示劑，其活性能夠反映無氧呼吸的水平，LDH可以將丙酮酸催化為乳酸，增加無氧呼吸來彌補(bǔ)有氧呼吸活動(dòng)抑制導(dǎo)致的能量缺失，因此常被用作反映無氧代謝水平高低的重要指標(biāo)［22］。在本試驗(yàn)中，LDH活性隨著水體溶解氧的下降呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，表明溶解氧的降低使綠鰭馬面鲀體內(nèi)攝取氧氣和運(yùn)輸氧氣的能力降低，導(dǎo)致有氧呼吸減弱，需增強(qiáng)無氧呼吸來彌補(bǔ)因有氧呼吸減弱帶來的能量缺失，以此保護(hù)機(jī)體在低氧脅迫下免受氧化損傷。這與團(tuán)頭魴［19］、翹嘴鱖（Siniperca chuatsi）［23］的相關(guān)研究結(jié)果相吻合。

酸性磷酸酶（ACP）和堿性磷酸酶（AKP）都是魚體內(nèi)重要的非特異性免疫酶，其活性變化可反映出魚類自身免疫系統(tǒng)的變化情況［24］。在本試驗(yàn)中，隨著溶解氧的降低，綠鰭馬面鲀?nèi)M織ACP活性呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，AKP活性呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，顯示在低氧脅迫下，魚類會(huì)通過提高體內(nèi)ACP和AKP的活性來增強(qiáng)自身的非特異性免疫力，同時(shí)，由有氧代謝轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧代謝，改變代謝通路和轉(zhuǎn)運(yùn)途徑，因而ACP和AKP活性出現(xiàn)了上升趨勢(shì)。低氧脅迫下中華烏塘鱧（Bostrychus sinensis）［25］磷酸酶的研究結(jié)果及鯽［26］在低氧脅迫下生理狀態(tài)的研究結(jié)果與本研究結(jié)果相符。

4 結(jié)論

綠鰭馬面鲀?yōu)榱诉m應(yīng)低氧環(huán)境，其鰓組織中CAT和SOD的活性升高，說明魚體通過提高抗氧化酶活性來消除體內(nèi)積累過多的活性氧自由基，從而防止鰓組織細(xì)胞出現(xiàn)氧化損傷；MDA含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，說明對(duì)抗氧化系統(tǒng)的抑制減弱，從而避免氧化損傷；通過LDH活性的升高，來促進(jìn)無氧呼吸的進(jìn)行，轉(zhuǎn)換獲取能量的途徑并以此應(yīng)對(duì)低氧脅迫；低氧脅迫下，綠鰭馬面鲀?nèi)M織ACP和AKP的活性呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，但當(dāng)溶解氧質(zhì)量濃度由5 mg/L降至2 mg/L時(shí)，ACP活性又有所降低，活性變化說明魚體的非特異性免疫對(duì)外界低氧環(huán)境產(chǎn)生了一系列的反應(yīng)和應(yīng)答現(xiàn)象。這些指標(biāo)對(duì)研究綠鰭馬面鲀的低氧適應(yīng)機(jī)制具有一定的意義，也可為后續(xù)相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。

參考文獻(xiàn)

［1］ABDEL-TAWWAB M，MONIER M N，HOSEINIFAR S H，et al.Fish response to hypoxia stress：growth，physiological，and immunological biomarkers［J］.Fish Physiology and Biochemistry，2019，45（3）：997-1013.

［2］胡國宏，孫廣華，朱世成，等.低溶氧量對(duì)懷頭鲇呼吸代謝耗氧率的影響［J］.動(dòng)物學(xué)雜志，2002，37（2）：46-48.

［3］區(qū)又君，陳世喜，王鵬飛，等.低氧環(huán)境下卵形鯧鲹的氧化應(yīng)激響應(yīng)與生理代謝相關(guān)指標(biāo)的研究［J］.南方水產(chǎn)科學(xué)，2017，13（3）：120-124.

［4］WILHELM FILHO D，TORRES M A，ZANIBONI-FILHO E，et al.Effect of different oxygen tensions on weight gain，feed conversion，and antioxidant status in piapara，Leporinus elongatus （Valen-ciennes，1847）［J］.Aquaculture，2005，244（1/2/3/4）：349-357.

［5］凌晨，張美東，沙航，等.低氧脅迫對(duì)鰱抗氧化酶活性及SODs基因表達(dá)的影響［J］.淡水漁業(yè)，2021，51（3）：53-59.

［6］張倩，黃進(jìn)強(qiáng)，權(quán)金強(qiáng)，等.急性低氧脅迫和復(fù)氧對(duì)鯽魚氧化應(yīng)激的影響［J］.水產(chǎn)科學(xué)，2020，39（5）：649-656.

［7］王曉雯，朱華，胡紅霞，等.低氧脅迫對(duì)西伯利亞鱘幼魚生理狀態(tài)的影響［J］.水產(chǎn)科學(xué)，2016，35（5）：459-465.

［8］陳世喜，王鵬飛，區(qū)又君，等.急性和慢性低氧脅迫對(duì)卵形鯧鲹幼魚肝組織損傷和抗氧化的影響［J］.動(dòng)物學(xué)雜志，2016，51（6）：1049-1058.

［9］秦憶芹.東海外海綠鰭馬面鲀攝食習(xí)性的研究［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1981，5（3）：245-251.

［10］徐大鳳，劉琨，王鵬飛，等.綠鰭馬面鲀肌肉營養(yǎng)成分分析和營養(yǎng)評(píng)價(jià)［J］.海洋科學(xué)，2018，42（5）：122-129.

［11］丁民權(quán).東海綠鰭馬面鲀?nèi)后w及其分布［J］.水產(chǎn)學(xué)報(bào)，1994，18（1）：45-56.

［12］劉琨.綠鰭馬面鲀形態(tài)、生長與核型分析［D］.上海：上海海洋大學(xué)，2018.

［13］黨保成，邊力，李雪梅，等.4個(gè)溫度下綠鰭馬面鲀幼魚耗氧率和窒息點(diǎn)的研究［J］.水產(chǎn)科學(xué)，2023，42（6）：1025-1031.

［14］BAO J，LI X D，XING Y N，et al.Effects of hypoxia on immune responses and carbohydrate metabolism in the Chinese mitten crab，Eriocheir sinensis［J］.Aquaculture Research，2020，51（7）：2735-2744.

［15］陸澤峰，黃和，黃湘湄，等.低氧脅迫對(duì)珍珠龍膽石斑魚氧化應(yīng)激及能量代謝的影響［J］.廣東海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2022，42（1）：13-19.

［16］李曉美，鮑枳月，吳立新，等.還原型谷胱甘肽對(duì)大菱鲆生長及抗氧化能力的影響［J］.水產(chǎn)科學(xué)，2019，38（3）：289-295.

［17］齊明，侯懿玲，劉韜，等.急性低氧脅迫和復(fù)氧恢復(fù)對(duì)青田田魚幼魚氧化應(yīng)激和能量代謝的影響［J］.淡水漁業(yè)，2020，50（6）：92-98.

［18］吳鑫杰，陳楠，黃春筱，等.低氧對(duì)團(tuán)頭魴心肌細(xì)胞凋亡及抗氧化酶活性的影響［J］.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，35（3）：108-113.

［19］錢辰穎，鄭國棟，陳杰，等.溶解氧對(duì)團(tuán)頭魴耐低氧新品系F5代的鰓組織形態(tài)及各組織酶活性的影響［J］.漁業(yè)科學(xué)進(jìn)展，2021，42（4）：73-81.

［20］劉旭佳，黃國強(qiáng)，彭銀輝.不同溶解氧水平對(duì)鯔生長、能量代謝和氧化應(yīng)激的影響［J］.南方水產(chǎn)科學(xué)，2015，11（4）：88-94.

［21］COHEN E B，GECK R C，TOKER A.Metabolic pathway alterations in microvascular endothelial cells in response to hypoxia［J］.PLoS One，2020，15（7）：e0232072.

［22］RUTTER J，WINGE D R，SCHIFFMAN J D.Succinate dehydrogenase - Assembly，regulation and role in human disease［J］.Mitochondrion，2010，10（4）：393-401.

［23］徐暢，丁煒東，曹哲明，等.急性低氧脅迫對(duì)翹嘴鱖抗氧化酶、呼吸相關(guān)酶活性及相關(guān)基因表達(dá)的影響［J］.南方農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2020，51（3）：686-694.

［24］曹新宇，高銘鴻，楊旭，等.急性低氧脅迫對(duì)黃條鰤抗氧化酶和磷酸酶活性的影響［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2022，50（3）：88-91.

［25］馬粒雅，王聞，遲雯丹，等.溶解氧變化對(duì)中華烏塘鱧酶活的影響及其低氧耐受力研究［J］.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2020，48（3）：91-94.

［26］蔡超，尤宏?duì)?，匡友誼，等.低氧脅迫對(duì)鯽生理狀態(tài)的影響［J］.經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2021，25（3）：167-172.

Effects of hypoxia stress on the activities of antioxidant enzymes，

respiration- related enzymes， and phosphatase in gill tissues of Thamnaconus septentrionalis

MENG Yansha， YANG Zhe， LI Xinyang， GAO Jujie， HALIFU Ailizhati， JIANG Chen

（College of Fisheries and Life Science， Dalian Ocean University， Key

Laboratory of Mariculture and Stock Enhancement in North China’s Sea，

Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Dalian 116023， China）

Abstract： To study the stress response mechanisms in the gill tissues of Thamnaconus septentrionalis under hypoxic stress， treatments on fish were conducted under varying levels of dissolved oxygen concentration （8 mg/L， 5 mg/L， and 2 mg/L），the 8 mg/L group is the control group，and the other 2 groups are hypoxia group. and the changes of enzyme activities in the gill tissues were analyzed.The results indicated that the activities of catalase （CAT）， superoxide dismutase （SOD）， and the total antioxidant capacity （T-AOC） in the gill tissues of T. septentrionalis increased in response to the decrease of dissolved oxygen， while the content of malondialdehyde （MDA） was lower compared to the control.The activity of lactate dehydrogenase （LDH）" increased with the decrease of" dissolved oxygen concentration.The activity of acid phosphatase （ACP） initially increased and then decreased with the decline in dissolved oxygen concentration， while the alkaline phosphatase （AKP） activity exhibited an upward trend.The results indicated that hypoxia-induced stress was found to have an impact on the activities of antioxidant enzymes， respiration-related enzymes， and phosphatase in the gill tissues of T. septentrionalis. During hypoxia stress， T. septentrionalis demonstrates the ability to activate its internal antioxidant defense system through the regulation of antioxidant enzyme activity，so as to protect the body from oxidative damage caused by hypoxia，which provides a certain theoretical basis for further investigation of T. septentrionalis' hypoxia adaptation mechanism and the determination of optimal dissolved oxygen levels in the culture process.

Key words： Thamnaconus septentrionalis; hypoxia stress; gill; antioxidant enzymes; respiration-related enzymes; phosphatase

doi：10.16446/j.fsti.20220700107