高寒地區(qū)牛巴氏桿菌病的綜合有效防控措施總結(jié)分析

牛巴氏桿菌病是由巴氏桿菌感染引發(fā)的一種急性、熱性、敗血性傳染性疾病，具有發(fā)病急，傳播速度快，致死率高的特點(diǎn)，臨床上巴氏桿菌病又被稱為出血性敗血癥，主要表現(xiàn)為急性敗血型、肺炎型、水腫型和其他慢性型等幾種。西藏阿里地區(qū)札達(dá)縣是一個(gè)典型的農(nóng)牧大縣牦牛養(yǎng)殖業(yè)，在當(dāng)?shù)氐男竽琉B(yǎng)殖結(jié)構(gòu)中扮演著重要的角色牦牛養(yǎng)殖數(shù)量眾多，是農(nóng)牧民群眾經(jīng)濟(jì)收益的重要來源。當(dāng)前，隨著牦牛養(yǎng)殖業(yè)不斷向前推進(jìn)和發(fā)展，養(yǎng)殖規(guī)模擴(kuò)大背景之下以巴氏桿菌病為代表的傳染性疾病在牧區(qū)廣泛發(fā)生流行，由于很多農(nóng)牧民群眾對(duì)該類疾病的認(rèn)知不足，不知道該采取哪些措施進(jìn)行有效防控，防治措施不到位，導(dǎo)致了疫情大范圍傳播蔓延，甚至?xí)霈F(xiàn)周期性傳播流行的趨勢(shì)，對(duì)一個(gè)地區(qū)的牛養(yǎng)殖業(yè)造成了毀滅性打擊。

一、札達(dá)縣牛巴氏桿菌病病例探討

近幾年，在西藏阿里地區(qū)的札達(dá)縣一個(gè)中型規(guī)模的牦牛養(yǎng)殖場(chǎng)當(dāng)中出現(xiàn)了一類傳染性疾病，臨床上患病牛主要表現(xiàn)出高熱、呼吸急促，并表現(xiàn)出急性腸胃炎，在發(fā)病兩天內(nèi)出現(xiàn)了一頭病死牛。該類疾病先是在犢牛群體當(dāng)中發(fā)生，隨后向著整個(gè)群體快速傳播蔓延，發(fā)病期間養(yǎng)殖戶嘗試使用了青霉素、鏈霉素等藥物進(jìn)行治療，但病情并沒有得到有效地控制，患病牛的數(shù)量呈現(xiàn)逐漸增加的趨勢(shì)，并且死亡率進(jìn)一步升高。獸醫(yī)接到求助之后，到達(dá)養(yǎng)殖場(chǎng)對(duì)發(fā)病情況進(jìn)行了進(jìn)一步的總結(jié)和分析，可以發(fā)現(xiàn)該養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖較為混亂，在一個(gè)牛舍當(dāng)中往往存在來源不同或者年齡不同的牛群，再加上環(huán)境污染較為嚴(yán)重，地面有大量糞便堆積，污水橫流。養(yǎng)殖戶采用放牧養(yǎng)殖和設(shè)施養(yǎng)殖相結(jié)合的方式，冷季主要補(bǔ)充少量的玉米粉和秸稈飼料，牦牛個(gè)體較為瘦弱生長發(fā)育不良，同時(shí)養(yǎng)殖戶存在僥幸心理，并沒有對(duì)牛群進(jìn)行詳細(xì)的疫苗免疫，只接種了重大傳染性疾病，而牛巴氏桿菌病的免疫接種不到位。隨即對(duì)病死牛進(jìn)行了解剖觀察，可以發(fā)現(xiàn)臟器組織出現(xiàn)不同程度的敗血癥癥狀，然后采集了病料進(jìn)行了進(jìn)一步的病原分離鑒定分離到巴氏桿菌病，由此可以判定巴氏桿菌病感染引發(fā)的傳染性疾病，隨即為養(yǎng)殖戶制定了針對(duì)性緊急的治療方案，短時(shí)間內(nèi)控制了病情，避免損失進(jìn)一步加大挽回了死亡率。

二、巴氏桿菌病的流行病學(xué)

1、巴氏桿菌病的病原學(xué)

牛巴氏桿菌病也稱為牛出血性敗血癥，是由巴氏桿菌引起的一種急性、熱性傳染病。該種細(xì)菌可以分為多個(gè)血清型，目前已知的血清型有A、B、C、D、E、F和G，不同的血清型可能引起不同的疾病，而且他們對(duì)宿主和疫苗的效果也有所不同。從形態(tài)特征來看，巴氏桿菌屬于細(xì)小的球桿狀細(xì)菌，革蘭氏染色為陰性，在使用亞甲藍(lán)或吉姆薩染色時(shí)可以觀察到菌體兩端濃染，中間著色淺，因此也被稱為兩極桿菌。病原可以在包括土壤、水體和動(dòng)物的消化道等多種環(huán)境中生存，在健康牛的上呼吸道和上消化道中可能作為常在菌存在，當(dāng)動(dòng)物受到應(yīng)激，如受冷、過勞、長途運(yùn)輸或饑餓等因素影響，導(dǎo)致動(dòng)物抵抗力下降時(shí)細(xì)菌可能會(huì)大量繁殖產(chǎn)生毒素并引起疾病。巴氏桿菌對(duì)物理和化學(xué)因素的抵抗力相對(duì)較弱，普通消毒藥物常用濃度如1%火堿或2%來蘇兒溶液都能在很短時(shí)間內(nèi)將其殺死。干燥后在2～3d內(nèi)死亡，在血液和糞便中能生存10d，在腐敗的尸體中能生存1～3個(gè)月，在直射日光和高溫下立即死亡。

2、巴氏桿菌病的致病機(jī)理

巴氏桿菌通過其表面的黏附素與宿主細(xì)胞結(jié)合，進(jìn)一步侵入宿主細(xì)胞，繁殖生產(chǎn)過程中能夠產(chǎn)生如磷脂酶、透明質(zhì)酸酶和神經(jīng)氨酸酶等多種侵襲性酶類，有助于細(xì)菌穿透宿主黏膜屏障，進(jìn)入宿主組織。細(xì)菌進(jìn)入宿主細(xì)胞后利用宿主細(xì)胞的營養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)行生長和繁殖，在此過程中，細(xì)菌產(chǎn)生如內(nèi)毒素、外毒素和蛋白毒素等多種毒素對(duì)宿主細(xì)胞造成損傷。同時(shí)大量巴氏桿菌在繁殖生長過程中能夠引起宿主免疫系統(tǒng)的紊亂，細(xì)菌產(chǎn)生的毒素和代謝產(chǎn)物能夠抑制宿主免疫細(xì)胞的活性，降低宿主免疫力，使疾病加重。同時(shí)，細(xì)菌繁殖過程中產(chǎn)生的毒素和酶類可導(dǎo)致宿主組織發(fā)生炎癥、壞死和出血等病理損傷，加劇病情惡化，最終導(dǎo)致宿主死亡。

3、巴氏桿菌病的流行特點(diǎn)

牛巴氏桿菌病的傳染源主要是帶菌的牛、豬、雞以及其他野生動(dòng)物，病牛體內(nèi)的巴氏桿菌可以通過排泄物、分泌物以及咳嗽、打噴嚏等方式釋放到外界環(huán)境中，成為傳染源。細(xì)菌主要通過呼吸道傳播，即通過空氣中的飛沫傳播。此外，巴氏桿菌也可以通過接觸傳播，即健康牛接觸到病牛的分泌物或排泄物，或者接觸到被污染的飼料、飲水、工具等。所有牛都可能感染巴氏桿菌病，尤其是犢牛和免疫力較弱的牛。在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)部環(huán)境擁擠、潮濕、通風(fēng)不良以及不良的飼養(yǎng)管理?xiàng)l件都可能增加牛感染巴氏桿菌的風(fēng)險(xiǎn)。從發(fā)病季節(jié)來看牛巴氏桿菌病在春、夏和秋季較為多發(fā)，這些季節(jié)的溫暖濕潤氣候有利于巴氏桿菌的生存和傳播。

三、巴氏桿菌病的臨床癥狀

牛巴氏桿菌病的潛伏期一般為2～5d，這意味著感染后大約2～5d內(nèi)牛開始出現(xiàn)癥狀。通過對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的發(fā)病情況進(jìn)行進(jìn)一步的觀察，可以發(fā)現(xiàn)發(fā)病類型主要有急性敗血型、肺炎型、水腫型和慢性型。急性敗血型發(fā)病較急體溫突然升高至40～42℃，脈搏加快，食欲減退或廢絕，短時(shí)間內(nèi)全身衰竭、被毛粗亂、鼻鏡干燥、呼吸困難、黏膜發(fā)紺。從鼻腔當(dāng)中流出帶血泡沫，腹瀉，糞便帶血。發(fā)病牛通常在24h內(nèi)因虛脫而死亡。肺炎型也是比較常見的類型，發(fā)病后主要表現(xiàn)為體溫升高，出現(xiàn)呼吸困難，咽痛性干咳，鼻孔流出無色或帶血泡沫。胸部叩診呈濁音，聽診有支氣管呼吸音或啰音，有時(shí)有胸摩擦音，嚴(yán)重時(shí)，病牛頭頸前伸，張口伸舌，死于窒息。水腫型主要是病牛胸前及頭頸水腫，嚴(yán)重者可能波及下腹，舌、眼高度腫脹，眼紅腫、流淚、流涎。呼吸困難，皮膚和黏膜發(fā)紺，常因窒息或下痢虛脫而死。慢性型較少見通常是由急性型轉(zhuǎn)變而來。病牛長期咳嗽，慢性腹瀉，消瘦無力。

四、巴氏桿菌病的病理學(xué)變化

急性敗血型病死牛解剖之后能夠發(fā)現(xiàn)出現(xiàn)敗血癥的跡象，皮膚和黏膜的廣泛青紫色，血液凝固不良，有時(shí)可見明顯的溶血，實(shí)質(zhì)性器官如肝、脾、腎等常出現(xiàn)腫大，質(zhì)地變硬，表面可能有出血點(diǎn)，心包膜和胸膜可能出現(xiàn)纖維素性炎癥，導(dǎo)致胸腔積液和心包積液。肺炎型主要病變位置集中在肺臟組織和周邊，表現(xiàn)為纖維素性胸膜肺炎。肺葉實(shí)變，呈灰紅色或灰黃色，質(zhì)地變硬，肺泡間隔增寬，充滿細(xì)胞和纖維素滲出物，胸膜表面可見纖維素性滲出物，嚴(yán)重時(shí)胸膜與肺組織粘連。水腫型典型特征性病變?yōu)榻M織水腫，尤其是皮下組織和淋巴結(jié)，水腫部位的皮膚變薄，呈蒼白色或黃褐色，淋巴結(jié)腫大，切面多汁，顏色變淺。慢性型主要表現(xiàn)出慢性肺炎和心內(nèi)膜炎，肺組織出現(xiàn)壞死和纖維化，肺泡結(jié)構(gòu)破壞，有時(shí)還能夠觀察到心瓣膜出現(xiàn)贅生物，導(dǎo)致心臟瓣膜功能異常。

五、巴氏桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷

1、病料涂片染色

從病牛的病變組織（如肺部、血液等）中取出適量樣本，涂抹在載玻片上，并覆蓋一個(gè)蓋玻片，將涂片放入革蘭氏染色劑（結(jié)晶紫）中，浸泡2～3min，用清水沖掉多余的染色劑，涂片放入碘液中，浸泡1～2min，用清水沖掉多余的碘液。然后涂片放入95%酒精中，浸泡10～20s，用清水沖掉多余的酒精，將涂片放入沙黃染色劑中，浸泡2～3min，用清水沖掉多余的染色劑，涂片放在干燥器中干燥，或自然晾干，在顯微鏡下觀察涂片的染色結(jié)果。在顯微鏡下能夠觀察到革蘭氏陰性染色的包裝桿菌兩端呈現(xiàn)卵圓形染色較為明顯。

2、巴氏桿菌病病原分離

在實(shí)驗(yàn)操作之前應(yīng)該采集病變組織或分泌物樣本，準(zhǔn)備好無菌拭子或接種環(huán)、血瓊脂平板、酵母提取物瓊脂平板、培養(yǎng)箱。使用無菌拭子或接種環(huán)采集病變組織或分泌物樣本，將樣本接種到血瓊脂平板和酵母提取物瓊脂平板上，劃線接種，將平板放入培養(yǎng)箱當(dāng)中，37℃條件下培養(yǎng)24～48h。可以觀察到在血瓊脂平板上形成圓形、凸起的菌落，菌落邊緣光滑，呈淡灰色或灰白色，菌落周圍常有β-溶血環(huán)。酵母提取物瓊脂平板形成圓形、光滑、隆起的菌落，菌落呈乳白色或淡黃色，菌落表面常有皺褶或環(huán)狀結(jié)構(gòu)。將分離得到的病原轉(zhuǎn)移到麥康凱瓊脂平板上，細(xì)菌生長不良好，生長瘦弱，由此可以排除大腸桿菌感染引發(fā)的傳染性疾病。隨即將分離得到的病原進(jìn)行了包括糖發(fā)酵試驗(yàn)、氧化酶試驗(yàn)、硫化氫試驗(yàn)等理化檢測(cè)，可以發(fā)現(xiàn)分離得到的細(xì)菌發(fā)酵乳糖，產(chǎn)生硫化氫，氧化酶試驗(yàn)為陽性，凝集試驗(yàn)可觀察到顆粒狀凝集現(xiàn)象，免疫熒光抗體技術(shù)可在細(xì)胞膜上檢測(cè)到特異性熒光。結(jié)合上述理化特征以及病原菌落形態(tài)特征，可以判定病原為巴氏桿菌。

六、巴氏桿菌病的治療措施

牦牛巴氏桿菌病具有發(fā)病的條件性，一旦出現(xiàn)患病病例，預(yù)示著養(yǎng)殖管理不到位，并且病原能夠迅速順著多種渠道向著整個(gè)群體快速傳播蔓延，再加上該種疾病發(fā)病較為嚴(yán)重，傳播速度相對(duì)較快，如果不能夠及時(shí)采取措施進(jìn)行治療，短時(shí)間內(nèi)會(huì)造成嚴(yán)重的死亡。所以在臨床用藥過程中應(yīng)該做到規(guī)范用藥，合理用藥，首次用藥加倍，確保有效抑制病原的繁殖生長緩和患病牛的臨床癥狀。在臨床用藥過程中可以使用磺胺類藥物進(jìn)行肌肉注射，推薦使用磺胺間甲氧嘧啶鈉注射液，使用劑量為0.33mL/kg·bw，每天2次，連續(xù)使用3d。在藥物使用過程中要注意磺胺或者其代謝產(chǎn)物能夠在尿液當(dāng)中產(chǎn)生沉淀，首次用藥加倍會(huì)導(dǎo)致尿酸鹽沉積形成結(jié)晶，引發(fā)血尿或者腎小管堵塞，所以在臨床用藥過程中，可以搭配使用5%的碳酸氫鈉注射液進(jìn)行靜脈注射，使用劑量為200～300mL，并且在用藥期間讓患病牛大量飲水。在使用抗生素進(jìn)行治療的同時(shí)，也需要聯(lián)合患病牛的外在癥狀實(shí)施對(duì)癥治療，搭配使用5%的葡萄糖氯化鈉注射液500mL，維生素C注射液80mL、20%的安鈉咖注射液20mL，混合之后靜脈注射，每天使用一次，連續(xù)使用3～5d。按照上述治療方案對(duì)患病牛進(jìn)行了為期9d的治療，有90%的患病牛恢復(fù)健康，剩余患病牛因?yàn)椴∏閲?yán)重治療無效死亡，養(yǎng)殖場(chǎng)病情得到了很好控制。

七、牛巴氏桿菌病的預(yù)防措施

1、及時(shí)清除糞污等污染物，嚴(yán)格無害化處理

牛舍糞污等污染物的清理和無害化處置是預(yù)防牛巴氏桿菌病的重要措施之一，糞污等污染物的清理方案的制定需要考慮牛舍的大小、養(yǎng)殖密度、糞便積累的速度等因素。根據(jù)實(shí)際情況，制定合理的清理頻率和清理方法。規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)推薦采用機(jī)械清糞，中小規(guī)模養(yǎng)殖場(chǎng)主要采用人工清糞或者結(jié)合使用的方式，要確保清理工具的清潔和消毒，避免交叉污染，一般堅(jiān)持每天對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的糞污進(jìn)行清理。清理出的糞便等污染物，需要進(jìn)行無害化處置。無害化處置的方法包括堆肥、發(fā)酵、焚燒等。其中堆肥化是一種常見的無害化處置方法，通過在一定溫度和濕度條件下，利用微生物的作用將糞便等污染物分解轉(zhuǎn)化為有機(jī)肥料。在進(jìn)行堆肥過程中，要注意控制溫度、濕度和通氣條件，以確保微生物的正常生長和分解效果。

2、嚴(yán)格防疫期間的衛(wèi)生消毒

牛巴氏桿菌病預(yù)防期間的環(huán)境清理與衛(wèi)生消毒目標(biāo)是消除或減少牛巴氏桿菌病病原體在環(huán)境中的存在，防止疾病傳播。消毒之前應(yīng)該結(jié)合養(yǎng)殖規(guī)模和疫病發(fā)生流行趨勢(shì)，制定合理的消毒方案，使用有效的消毒劑（如過氧化氫、季銨鹽）對(duì)牛舍、牛欄、飼槽、飲水器等設(shè)施進(jìn)行定期消毒。消毒期間眼睛認(rèn)識(shí)的老鼠、蒼蠅等害蟲可以攜帶牛巴氏桿菌病病原體，因此需要采取措施控制害蟲。養(yǎng)殖場(chǎng)的患病牛應(yīng)立即隔離，并對(duì)接觸過的牛和環(huán)境進(jìn)行消毒，每天消毒1次，連續(xù)使用7d，推薦使用2%的氫氧化鈉溶液。病死牛應(yīng)妥善處理，焚燒或深埋，并對(duì)處理區(qū)域進(jìn)行消毒，工作人員在接觸?；蚺Ｉ岷螅瑧?yīng)徹底洗手消毒。非必要人員和車輛應(yīng)限制進(jìn)出牛舍，以減少病原體引入的風(fēng)險(xiǎn)。一般情況下養(yǎng)殖場(chǎng)常規(guī)消毒，每周進(jìn)行一次，每批次的牛群出欄之后進(jìn)行一次大清理和大消毒，疫情發(fā)病期間應(yīng)該堅(jiān)持消毒1～2次/d，連續(xù)使用1周。消毒期間常用的消毒劑主要包括，過氧乙酸、次氯酸鈉、氫氧化鈉、生石灰、碘酊。其中過氧乙酸主要用于空氣消毒物體表面消毒，空氣消毒時(shí)通常按照1∶100的比例稀釋過氧乙酸原液，將過氧乙酸原液放入耐熱容器中加熱，產(chǎn)生氣體進(jìn)行熏蒸，作用時(shí)間為1h。物體表面消毒使用0.2%～0.5%的濃度，通過噴霧、浸泡或擦拭的方式對(duì)牛舍內(nèi)墻壁、地面、飼料槽等進(jìn)行消毒，作用時(shí)間需30min以上。次氯酸鈉和氫氧化鈉主要用于物體和地面消毒，使用濃度通常為1%、2%～5%，生石灰主要用于地面干燥吸水處理，然后通過吸水之后產(chǎn)生的生石灰乳消滅環(huán)境當(dāng)中的病原，達(dá)到很好的消毒效果，使用濃度一般控制在5%～10%。碘酊主要用于皮膚消毒，直接涂抹于皮膚表面對(duì)皮膚進(jìn)行消毒。衛(wèi)生消毒過程中應(yīng)該確保使用的安全規(guī)范，消毒劑的使用濃度、作用時(shí)間和使用頻率應(yīng)根據(jù)具體產(chǎn)品和現(xiàn)場(chǎng)情況按照說明書或?qū)I(yè)指導(dǎo)進(jìn)行調(diào)整，消毒劑使用后徹底沖洗干凈，避免對(duì)牛只和環(huán)境造成傷害。

3、牛巴氏桿菌病疫苗免疫接種

疫苗免疫接種是防范牛巴氏桿菌病發(fā)生流行的最有效措施，目前在市場(chǎng)中的疫苗種類多種多樣，常見的是牛巴氏桿菌病滅活疫苗，在疫苗免疫接種過程中，一定要小心仔細(xì)做到科學(xué)選擇，對(duì)于正在發(fā)生疫情的養(yǎng)殖場(chǎng)，通過對(duì)疫情進(jìn)行嚴(yán)格的處理，病死牛嚴(yán)格無害化淘汰之后，未發(fā)病的牛群推薦使用巴氏桿菌病滅活疫苗免疫接種每100kg以下的牛使用4mL，100kg以上的牛使用6mL，皮下或者肌肉注射，免疫期9個(gè)月。同時(shí)也需要嚴(yán)格落實(shí)每年春秋兩季的集中免疫接種制度，通常選擇在每年的3～4月份和10～11月份分別進(jìn)行一次額外的免疫接種。在疫苗免疫接種過程中，一定要小心仔細(xì)使用之前恢復(fù)到室溫，充分搖勻，并做局部消毒處理，每頭牛使用一個(gè)滅菌針頭。

（作者單位：859600西藏阿里地區(qū)札達(dá)縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村和科技水利局（農(nóng)牧業(yè)綜合服務(wù)管理中心））