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    一款修護(hù)抗皺護(hù)膚精華的功效研究

    2024-12-16 00:00:00溫燕佳吳黎明王長明吳田田
    中國化妝品 2024年6期

    本文通過體外試驗(yàn)和人體功效測試相結(jié)合的方式,研究了一款修護(hù)抗皺護(hù)膚精華的功效。利用3D表皮皮膚模型評(píng)價(jià)了產(chǎn)品對VC刺激性的舒緩效果;采用人體功效測試,通過儀器測試、圖像拍攝分析及受試者自我評(píng)估方法對各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行評(píng)估,綜合評(píng)價(jià)了產(chǎn)品在保濕、修護(hù)、舒緩、抗皺、緊致方面的功效。結(jié)果顯示:①相較于10%VC,添加測試產(chǎn)品可顯著抑制炎癥因子表達(dá);②使用產(chǎn)品4周后,皮膚角質(zhì)層水分含量、經(jīng)皮水分流失率、皮膚紅區(qū)參數(shù)、皮膚彈性(R2、R5、R7)、皮膚緊致度(F4)、外眼角皺紋參數(shù)均有顯著性改善。結(jié)果表明,該精華產(chǎn)品具有良好的保濕、修護(hù)、舒緩、抗皺、緊致的效果。

    關(guān)鍵詞:修護(hù);舒緩;抗皺;人體功效評(píng)價(jià)

    皮膚作為人體免疫系統(tǒng)的第一道防線,直接與外界環(huán)境接觸,更容易受到外部因素的影響而處于敏感狀態(tài)[1]。敏感性皮膚大多表現(xiàn)為自覺性癥狀,如刺痛、灼燒、瘙癢緊繃感等不適感覺,可能伴有紅斑反應(yīng)、鱗屑、毛細(xì)血管擴(kuò)張等客觀體征[2]。目前,敏感性皮膚的生理產(chǎn)生機(jī)制尚不完全明確,有研究認(rèn)為敏感性皮膚病的發(fā)生是一種累積皮膚屏障-神經(jīng)血管-免疫炎癥的復(fù)雜過程,包括:皮膚屏障功能損傷、皮膚感覺神經(jīng)功能失調(diào)、血管反應(yīng)性增高、免疫炎癥反應(yīng)[2]。與此同時(shí),隨著大眾消費(fèi)水平及護(hù)膚意識(shí)的提升,對護(hù)膚品的功效需求越來越多,一定程度上也加重了皮膚的負(fù)擔(dān)。開發(fā)能夠修護(hù)敏感性肌膚同時(shí)具有其他護(hù)膚功效的護(hù)膚品成為化妝品市場的熱門研究方向之一。

    神經(jīng)酰胺是皮膚表皮層細(xì)胞間脂質(zhì)的重要組成部分,對表皮的結(jié)構(gòu)功能有重要的作用[3, 4]。神經(jīng)酰胺可以增強(qiáng)表皮屏障功能,同時(shí)具有抗皺的功效,在敏感肌修護(hù)化妝品中應(yīng)用廣泛[5-7]。蜂毒肽是蜂毒的主要功能物質(zhì),是迄今為止人類所知的強(qiáng)抗炎活性的物質(zhì)之一[8],在化妝品中使用類蜂毒肽物質(zhì),可以起到很好的抑制炎癥和舒緩的作用。多聚脫氧核糖核苷酸(polydeoxyribonucleotide,PDRN)是一種分子量范圍在50-1500kDa的活性多聚核苷酸混合物,主要是從鱒魚和鮭魚的精子細(xì)胞中的DNA經(jīng)嚴(yán)格純化過程提取而來,具有高安全性和穩(wěn)定性[9]。PDRN能夠激活腺苷受體A2A并產(chǎn)生有助于DNA合成的核苷酸,因而具有組織修復(fù)、傷口愈合和抗衰老的作用[9, 10]。它被廣泛應(yīng)用于個(gè)人護(hù)理品、水光產(chǎn)品和皮膚填充劑中。

    本研究以一款含有神經(jīng)酰胺,類蜂毒肽成分及PDRN的修護(hù)抗皺護(hù)膚精華為研究對象,采用體外皮膚模型和人體功效測試相結(jié)合的方式,對該護(hù)膚精華進(jìn)行多維度的功效評(píng)估研究。

    Part 1實(shí)驗(yàn)部分

    1.1 主要材料、試劑與儀器

    測試樣品:含有神經(jīng)酰胺、類蜂毒肽成分及PDRN的修護(hù)抗皺護(hù)膚精華,西安博鴻生物技術(shù)有限公司提供。

    3D表皮皮膚模型(EpiKutis?)、EpiGrowth培養(yǎng)液,博溪生物;磷酸鹽緩沖液PBS,索萊寶;維生素C(VC)、十二烷基硫酸鈉(sodium lauryl sulfate,SLS),美國Sigma公司;IL-1α ELISA試劑盒,Abcam公司;地塞米松,中檢所;PGE2 ELISA試劑盒,ENZO公司。

    Corneometer CM825型皮膚水分含量測定儀、Tewameter TM Hex型皮膚水分流失測定儀、Cutometer dual MPA580型皮膚彈性測定儀,德國CK;Primos CR型3D皮膚成像系統(tǒng)、VISIA CR型面部圖像分析儀,美國Canfield;150I型CO2培養(yǎng)箱,美國Thermo;SW-CJ-1F型超凈工作臺(tái),蘇凈安泰;Epoch型酶標(biāo)儀,美國BioTek。

    1.2 實(shí)驗(yàn)部分

    1.2.1 3D表皮皮膚模型炎癥因子測試

    將3D表皮皮膚模型轉(zhuǎn)移到添加0.9mL表皮模型溶液的6孔板中,分為空白對照組(BC)、陰性對照組(NC)、陽性對照組(PC)和樣品組。BC組不作處理,其余組別的模型表面添加25μL 0.1%的SLS溶液,孵育30min。孵育結(jié)束后,NC組液下添加相應(yīng)濃度的工作液,PC組和樣品組模型表面分別涂布地塞米松和待測樣品,于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中孵育24h。孵育結(jié)束后,用PBS溶液清洗模型表面殘留的受試物。收集模型培養(yǎng)液于離心管中,將ELISA檢測的樣品置于-80℃冰箱冷凍保存,根據(jù)ELISA試劑盒的操作說明書進(jìn)行IL-1α、PGE2的含量檢測。

    1.2.2人體功效測試

    1.2.2.1 受試者篩選

    按照以下納入排除標(biāo)準(zhǔn),篩選入組32名中國健康敏感皮膚女性受試者。

    納入標(biāo)準(zhǔn):18歲-60歲;自認(rèn)為面部皮膚為敏感肌者,面部皮膚有泛紅、緊繃、灼熱、發(fā)癢、刺痛等不適感;自認(rèn)為面部皮膚松弛、無彈性者;面部泛紅等級(jí)3-6級(jí);隨機(jī)一側(cè)外眼角皺紋等級(jí)3-6級(jí);隨機(jī)一側(cè)臉頰區(qū)域皮膚水分含量<60 a.u.;隨機(jī)一側(cè)臉頰區(qū)域經(jīng)皮水分流失率>15 g/m2/h;自愿參與試驗(yàn)并簽署知情同意書。

    排除標(biāo)準(zhǔn):測試部位患有皮膚疾病者;自述處于懷孕期、哺乳期;在參加測試前3個(gè)月內(nèi)接收過皮膚治療或者免疫抑制劑治療的受試者;其他研究者判斷為不適合參與者。

    1.2.2.2 產(chǎn)品使用及測試要求

    受試者每天早晚潔面后,取適量測試產(chǎn)品均勻涂抹于面部,按摩至吸收,連續(xù)使用4周。測試期間受試者需停用其他同類功效護(hù)膚產(chǎn)品。

    測試當(dāng)天受試者使用實(shí)驗(yàn)室提供潔面產(chǎn)品清潔面部并靜坐30min。測試全程在溫度為(21.0±1.0)℃,相對濕度為50%±10%的恒溫環(huán)境中進(jìn)行。

    1.2.2.3 測試方法

    (1)使用Corneometer CM825和Tewameter TM Hex在使用前、使用后1周、4周分別檢測受試者皮膚角質(zhì)層水分含量和經(jīng)皮水分流失率(TEWL值),評(píng)估產(chǎn)品的保濕、修護(hù)功效。

    (2)使用VISIA-CR在使用前、使用后1周、4周分別采集受試者正面圖像,通過軟件分析測試區(qū)域皮膚紅區(qū)a*值、紅區(qū)面積及占比,評(píng)估產(chǎn)品的舒緩功效。

    (3)使用Primos CR在使用前、使用后4周分別采集受試者隨機(jī)一側(cè)外眼角區(qū)域圖像,并分析皺紋體積、皺紋面積、皺紋長度、皺紋深度,評(píng)估產(chǎn)品的抗皺功效。

    (4)使用Cutometer MPA580在使用前、使用后4周分別檢測受試者皮膚彈性參數(shù)R2、R5、R7和皮膚緊致參數(shù)F4,評(píng)估產(chǎn)品的緊致功效。

    (5)受試者在初次使用產(chǎn)品30s、4周分別填寫自評(píng)問卷,對使用產(chǎn)品后的各項(xiàng)效果進(jìn)行5分制滿意度評(píng)價(jià),以輔助評(píng)估產(chǎn)品的保濕、修護(hù)、舒緩、抗皺、緊致功效。

    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

    數(shù)據(jù)使用SPSS 28.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差形式表示。統(tǒng)計(jì)分析前對各參數(shù)進(jìn)行正態(tài)分布檢驗(yàn),若測試數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布,則采用配對T檢驗(yàn)方法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,否則采用兩個(gè)相關(guān)樣本秩和檢驗(yàn)。顯著性水平為p<0.05。

    Part 2結(jié)果與討論

    2.1基于3D表皮皮膚模型的舒緩VC刺激性測試結(jié)果

    隨著“早C晚A”“刷酸煥膚”等護(hù)膚理念的盛行,消費(fèi)者在使用了VC、VA等刺激性比較大的強(qiáng)功效性護(hù)膚產(chǎn)品后難免會(huì)出現(xiàn)刺痛、泛紅、脫皮等“猛藥翻車”問題。本測試采用表皮皮膚模型,對比10%VC+測試產(chǎn)品的樣品組與10%VC對炎癥因子表達(dá)的影響,來評(píng)價(jià)測試產(chǎn)品對VC刺激性的舒緩效果。

    如圖1所示,10%VC組的IL-1α含量相較NC組有顯著上升(p<0.001),PGE2含量同樣超過了NC組,說明單獨(dú)使用10%VC會(huì)促進(jìn)炎癥因子的分泌,對皮膚具有明顯的刺激性。而添加了測試產(chǎn)品的樣品組的IL-1α含量相較10%VC組有顯著下降(p<0.001),PGE2含量同樣有顯著下降(p<0.01),說明測試產(chǎn)品能夠顯著抑制VC引起的炎癥因子的分泌,從而舒緩VC對皮膚帶來的刺激問題。

    2.2人體功效測試結(jié)果

    本次試驗(yàn)共31例完成所有回訪,年齡在20歲至59歲,平均年齡為(36.87±12.52)歲。

    2.2.1 角質(zhì)層水分含量、TEWL值測試結(jié)果

    TEWL值是表征皮膚屏障功能的關(guān)鍵指標(biāo),TEWL值越低,皮膚屏障功能越好。角質(zhì)層水分減少,會(huì)使局部對刺激的敏感性增強(qiáng),所以通過檢測皮膚角質(zhì)層水分的變化,可間接反映皮膚屏障功能[11]。受試者使用產(chǎn)品前后各時(shí)間點(diǎn)的皮膚角質(zhì)層水分含量和TEWL值測試結(jié)果如表1所示。與0周相比,皮膚角質(zhì)層水分含量在1周和4周后均有顯著升高(p<0.001),說明產(chǎn)品具有良好的保濕效果。與0周相比,TEWL值在1周和4周后均有顯著下降(p<0.001)。以上結(jié)果說明產(chǎn)品具有修護(hù)皮膚屏障功能的作用。

    2.2.2 皮膚紅區(qū)測試結(jié)果

    皮膚紅區(qū)相關(guān)參數(shù)直接反映了真皮乳頭層的血紅素情況,從而間接反映皮膚的炎癥狀態(tài)[11,12]。紅區(qū)相關(guān)參數(shù)數(shù)值越低,產(chǎn)品抑制皮膚炎癥、改善皮膚泛紅、舒緩肌膚刺激狀態(tài)的效果越好。受試者使用產(chǎn)品前后各時(shí)間點(diǎn)的皮膚紅區(qū)a*值、紅區(qū)面積及占比的測試結(jié)果如表2所示。與0周相比,紅區(qū)a*值在1周后有顯著降低(p<0.05),在4周后有更顯著的降低(p<0.001)。與0周相比,紅區(qū)面積和紅區(qū)面積占比在1周、4周均有顯著降低(p<0.001)。以上客觀測量結(jié)果說明產(chǎn)品具有良好的舒緩?fù)思t效果。

    圖2是19號(hào)和25號(hào)兩位受試者在使用產(chǎn)品前后的面部皮膚紅區(qū)圖像。從圖中可直觀看出,兩位受試者在使用產(chǎn)品1周和4周皮膚紅區(qū)情況有明顯的緩解現(xiàn)象。

    2.2.3外眼角皮膚皺紋參數(shù)測試結(jié)果

    受試者使用產(chǎn)品前后的外眼角皮膚皺紋參數(shù)測試結(jié)果如表3所示。與0周相比,皺紋體積、皺紋面積、皺紋長度在4周有顯著減少(p<0.001),皺紋深度在4周也有顯著減少(p<0.05)。以上客觀測量結(jié)果說明測試產(chǎn)品能夠改善皺紋問題,具有抗皺效果。

    圖3是7號(hào)和11號(hào)兩位受試者在使用產(chǎn)品前后的一側(cè)外眼角皺紋的Primos圖像。從圖中可直觀看出,兩位受試者一側(cè)外眼角的皺紋程度有一定改善。

    2.2.4皮膚彈性及緊致度測試結(jié)果

    受試者使用產(chǎn)品前后的皮膚彈性及緊致度測試結(jié)果如表4所示。參數(shù)R2、R5、R7表征皮膚彈性,數(shù)值越大,皮膚彈性越好[13];參數(shù)F4表征皮膚緊致度,數(shù)值越小,皮膚越緊致[14]。與0周相比,皮膚彈性參數(shù)R2、R5、R7在4周后均有顯著提升(p<0.001),緊致度參數(shù)F4在4周后有顯著降低(p<0.001)。以上客觀測量結(jié)果說明產(chǎn)品可以提升皮膚的彈性和緊致度,具有緊致功效。

    2.2.5 受試者產(chǎn)品使用自我評(píng)價(jià)結(jié)果

    在單次使用產(chǎn)品30s 后,100% 的受試者認(rèn)同皮膚緊繃/ 灼熱/ 刺痛/ 發(fā)癢等問題得到即刻改善與舒緩,87% 的受試者認(rèn)同皮膚即刻退紅,表明測試產(chǎn)品具有較好的即刻舒緩皮膚不適的效果。具體結(jié)果見表5。

    Part 3結(jié)論

    本研究采用體外皮膚模型和人體功效測試相結(jié)合的方式,對一款含有神經(jīng)酰胺,類蜂毒肽和PDRN 等功效成分的修護(hù)抗皺護(hù)膚精華進(jìn)行了一系列功效評(píng)估研究。

    體外試驗(yàn)結(jié)果表明:基于3D 表皮皮膚模型,測試產(chǎn)品能夠抑制炎癥因子(IL-1α、PGE2) 的表達(dá),舒緩VC 對皮膚的刺激性。

    人體功效測試結(jié)果表明,31 名敏感肌受試者在初次使用產(chǎn)品30s 后,100% 的受試者認(rèn)同皮膚緊繃/ 灼熱/ 刺痛/發(fā)癢等問題得到即刻改善,87% 的受試者認(rèn)同皮膚即刻退紅;使用產(chǎn)品4 周后,皮膚角質(zhì)層水分含量、TEWL 值、皮膚紅區(qū)參數(shù)(a* 值、紅區(qū)面積及占比) 有顯著性改善,表明產(chǎn)品具有很好的保濕、修護(hù)皮膚屏障、舒緩皮膚刺激、改善退紅的效果。同時(shí),受試者皮膚彈性(R2、R5、R7)、皮膚緊致度(F4)、外眼角皺紋( 深度、體積、長度、面積) 均有顯著性改善,表明產(chǎn)品具有很好的緊致、抗皺效果。受試者在使用產(chǎn)品4 周后,對產(chǎn)品保濕、強(qiáng)韌屏障、減少敏感、舒緩、緊致和抗皺效果的滿意度均達(dá)到97% 及以上。

    綜上所述,該精華產(chǎn)品具有良好的保濕、修護(hù)、舒緩、抗皺、緊致的效果。

    作者介紹

    溫燕佳,王長明:供職于博鴻生物技術(shù)( 蘇州) 有限公司

    吳黎明:供職于西安博和醫(yī)療科技有限公司

    吳田田:供職于陜西佰傲再生醫(yī)學(xué)有限公司

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