口腔鱗狀細(xì)胞癌嗜神經(jīng)侵襲的研究進展

[關(guān)鍵詞] 口腔鱗狀細(xì)胞癌； 嗜神經(jīng)侵襲； 預(yù)后； 分子機制

[中圖分類號] R781 [文獻標(biāo)志碼] A [doi] 10.7518/gjkq.2024043

文獻報道90%以上的頭頸癌是鱗狀細(xì)胞癌，其中以口腔鱗狀細(xì)胞癌（oral squamous cell carcinoma，OSCC） 最為常見，嗜神經(jīng)侵襲（perineuralinvasion，PNI） 是OSCC常見的病理特征之一，其發(fā)病隱匿，發(fā)生率為8%～82%，文獻報告的發(fā)生率差異與檢測方法、腫瘤類型等相關(guān)[1-3]，有學(xué)者[4]復(fù)查OSCC患者病理切片檢出PNI陽性率從30%提高至62%，輔之以免疫組化染色則陽性率為82%。PNI的發(fā)生與患者5年生存率降低相關(guān)[5]，但臨床上對PNI臨床意義與機制的認(rèn)知有限，目前仍未有針對PNI陽性（PNI+） 的OSCC患者的治療指南和個性化治療方案。本文從OSCC中PNI的分子機制、PNI對OSCC患者的預(yù)后影響和PNI陽性患者的臨床治療方案進行了總結(jié)，旨在為OSCC患者中PNI的治療和研究提供理論依據(jù)。

1 PNI概述

PNI較為廣泛接受的定義是：腫瘤細(xì)胞侵犯神經(jīng)內(nèi)膜、神經(jīng)束膜和神經(jīng)外膜任何一層或者腫瘤細(xì)胞緊鄰神經(jīng)并包繞神經(jīng)周長33%以上[6]。PNI較常見于舌及口底癌，其發(fā)生與淋巴結(jié)分期、腫瘤深度及腫瘤原發(fā)位置有關(guān)[7]。Schmitd等[8]研究發(fā)現(xiàn)靠近腫瘤的神經(jīng)表現(xiàn)出獨特的轉(zhuǎn)錄組特征，軸突生長和應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因表達上調(diào)，證實神經(jīng)與腫瘤直接接觸之前已經(jīng)產(chǎn)生了交流，且兩者的距離對預(yù)后有較好的預(yù)測性，因此建議將靠近腫瘤的神經(jīng)即視為PNI陽性。

2 PNI 的分子病理機制

近年研究發(fā)現(xiàn)PNI可能是一個依賴腫瘤和神經(jīng)成分之間的雙向信號傳導(dǎo)的復(fù)雜動態(tài)過程。OSCC細(xì)胞可能分泌神經(jīng)營養(yǎng)因子，在周圍微環(huán)境中被施萬細(xì)胞（Schwann cell，SC） 和神經(jīng)元識別接收，開啟進一步的信號傳導(dǎo)促進癌細(xì)胞侵襲和神經(jīng)軸突生長等，神經(jīng)的損傷和修復(fù)再生反應(yīng)也是其中重要的一環(huán)[2，9]，這些過程中的信號分子有望成為未來的治療靶點。

靠近腫瘤的神經(jīng)上調(diào)了多個軸突生長及應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)基因的表達，包括骨架排列相關(guān)基因如Cofilin1 （CFL1）、MARCKS，參與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的ATF4， 細(xì)胞解毒相關(guān)的FABP5、GSTP1 等[8]。CELSR3基因編碼的非典型鈣黏蛋白是非經(jīng)典Wnt/平面細(xì)胞極化通路（noncanonical Wnt/planar cellpolarity pathway，Wnt/PCP） 通路組分，主要發(fā)揮胚胎發(fā)育與神經(jīng)發(fā)生相關(guān)功能。CELSR3在OSCC中與PNI發(fā)生和不良預(yù)后有關(guān)，生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)CELSR3高表達組上調(diào)了軸突生長、神經(jīng)元遷移和細(xì)胞凋亡、細(xì)胞黏附相關(guān)的基因表達，尤其是CB1和GHRH表達顯著增高，但CELSER3參與PNI的具體機制仍有待探索[10]。

在腫瘤與神經(jīng)周圍微環(huán)境中研究最多的分子是神經(jīng)生長因子（nerve growth factor，NGF） 及其受體，多個研究發(fā)現(xiàn)NGF在PNI+的OSCC細(xì)胞中表達明顯上調(diào)[11-13]，并與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、淋巴-血管浸潤以及預(yù)后相關(guān)[5，13-14]。NGF可以通過磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B （phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B，PI3K/Akt） 通路開啟下游信號傳導(dǎo)[11]，該通路可以促進上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化從而提高癌細(xì)胞的運動能力和侵襲性[2]。同樣可能通過PI3K/Akt通路發(fā)揮作用的還有ICAM-5，它是一種僅在端腦神經(jīng)元中表達的細(xì)胞間黏附分子，但有研究[15]發(fā)現(xiàn)其在多種癌細(xì)胞系中表達上調(diào)， 且ICAM-5高表達與OSCC中PNI發(fā)生相關(guān)，可能在腫瘤發(fā)生和神經(jīng)侵襲中發(fā)揮作用。

微小RNA（MicroRNA） 參與了腫瘤增殖、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移、血管生成等多種生物學(xué)行為調(diào)控，在PNI的進展中也起到了一定作用。位于染色體17q23.2上的MIR21基因編碼的MicroRNA-21可以通過調(diào)節(jié)生長信號加速軸突生長和抑制神經(jīng)元凋亡[16]。MicroRNA-21 高表達預(yù)示著OSCC患者PNI+的可能性及不良預(yù)后，其促進PNI的發(fā)生可能是通過下調(diào)抑癌基因PTEN的表達來實現(xiàn)的[17]。此外，MicroRNA-370是腫瘤抑制因子，在PNI+的OSCC中MicroRNA-370表達下降，MicroRNA-370可通過下調(diào)IRS-1 和靶向調(diào)控RAF-1 和PIK3CD（MAPK/AKT通路的核心成分） 發(fā)揮抑制腫瘤遷移、生長的作用[18-19]。

神經(jīng)和周圍微環(huán)境中的細(xì)胞在PNI中的角色同樣不可忽視。Deborde等[20]揭示了SC通過與腫瘤細(xì)胞直接接觸引導(dǎo)PNI的關(guān)鍵機制——SC與腫瘤細(xì)胞直接接觸后會引導(dǎo)腫瘤細(xì)胞形成突起并向SC方向遷移，SC也能通過自身細(xì)胞突起阻斷腫瘤細(xì)胞之間的聯(lián)系導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞的分散，NCAM1是SC與腫瘤細(xì)胞接觸中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子之一。Santi等[21]研究將SC與人OSCC細(xì)胞系共同培養(yǎng)后進行RNA測序分析，證實SC能誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞改變細(xì)胞表型，轉(zhuǎn)化代謝方式，促進侵襲和增殖等。腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子和其受體可能會促進SC與癌細(xì)胞之間的相互作用[22]，激活A(yù)kt信號，誘導(dǎo)上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，增強OSCC的侵襲性[2]。除了SC外，Tassone等[23]的研究發(fā)現(xiàn)PNI+神經(jīng)周圍的成纖維細(xì)胞會過表達基質(zhì)金屬蛋白酶-2，這是促進PNI可能的機制之一。

Lin 等[24] 研究證實程序性死亡受體配體1 在PNI+的頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞中表達顯著增高，且與膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子表達呈正相關(guān)。Fu等[25]檢測了PNI+患者中各種免疫細(xì)胞的數(shù)量，發(fā)現(xiàn)總T細(xì)胞、細(xì)胞毒性T細(xì)胞、B細(xì)胞數(shù)目都顯著減少，說明免疫功能下降可能也是促進PNI發(fā)展的原因之一。

PNI的發(fā)生是一個復(fù)雜的動態(tài)過程，涉及了腫瘤和神經(jīng)及周圍成分的雙向信號交互、神經(jīng)營養(yǎng)因子及其受體、MicroRNA的調(diào)控、免疫系統(tǒng)的失衡等。

3 PNI 對OSCC 患者預(yù)后的影響

現(xiàn)有的研究已基本達成一個共識，即OSCC患者PNI+提示預(yù)后較差，PNI+會降低患者5年總體生存率（overall survival，OS）、5年疾病特異性生存率（disease-specific survival，DSS） 和5年無病生存率（disease-free survival， DFS）[5，8，17，26-27]， 且PNI 可以作為5 年OS、DSS、DFS 的獨立預(yù)測因素[28-30]。

PNI+患者更常出現(xiàn)頸部淋巴轉(zhuǎn)移、血管浸潤、淋巴-血管浸潤[8，26，31-33]，但PNI能否獨立預(yù)測頸部淋巴轉(zhuǎn)移和遠處轉(zhuǎn)移風(fēng)險尚有爭議[30，34]。Quintana等[3]分析得出PNI+的局部區(qū)域復(fù)發(fā)相對風(fēng)險比為2.09（95% CI為1.86～2.35），說明PNI陽性與局部區(qū)域復(fù)發(fā)風(fēng)險呈正相關(guān)；另一項Meta分析[35]認(rèn)為PNI對于早期舌癌的局部區(qū)域復(fù)發(fā)率有影響。

對PNI進行分類將有助于更精準(zhǔn)地預(yù)測預(yù)后，依據(jù)PNI發(fā)生的位置可將PNI分為腫瘤外PNI與腫瘤內(nèi)PNI。出現(xiàn)腫瘤內(nèi)PNI的患者可能有更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移風(fēng)險[31]，而出現(xiàn)腫瘤外PNI的患者5年OS及5年DFS均低于發(fā)生腫瘤內(nèi)PNI的患者，發(fā)生腫瘤外PNI指向更差的預(yù)后，需要更積極的治療干預(yù)[32]。根據(jù)PNI的病灶數(shù)目可分為單灶性和多灶性PNI。Hasmat等[36]研究發(fā)現(xiàn)多灶性PNI比腫瘤浸潤深度（depth of invasion，DOI） 在5～10 mm或gt;10 mm對5年DSS影響更大，其對預(yù)后的影響與腫瘤出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移但未發(fā)生淋巴結(jié)包膜外侵犯相近。

PNI的發(fā)生與OSCC患者的遠期生存率降低相關(guān)，PNI陽性患者有更高的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、局部區(qū)域復(fù)發(fā)風(fēng)險，可作為篩選風(fēng)險人群的指征之一。依據(jù)PNI發(fā)生的位置和灶區(qū)數(shù)目進一步分類，可以為治療方式的選擇提供參考。

4 OSCC 中PNI 的臨床治療

4.1 選擇性頸淋巴清掃術(shù)（elective neck dissection，END）

PNI+對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有一定預(yù)測性，對于cN0/pN0但PNI+的早期OSCC患者是否采取END仍存在爭議。

Chatzistefanou 等[37] 與Hatten 等[38] 認(rèn)為PNI+ 的OSCC早期患者行END可能降低區(qū)域復(fù)發(fā)率，改善生存率。Tai等[39]的研究發(fā)現(xiàn)行END顯著改善了臨床分期為cN0，合并PNI+的患者（n=62） 的5年DSS （82.1% vs 36%，P=0.007 1），并降低了其頸部復(fù)發(fā)率（18% vs 83.3%，Plt;0.001）。

Feng等[40]對臨床TNM分期為cT1N0M0的OSCC患者進行的一項多中心、雙向性隊列研究結(jié)果顯示，患者2年淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率與DOI相關(guān)性強于PNI，PNI對于END的決策價值存疑。Alzahrani等[41]同樣指出采用DOI作為臨床分期分級依據(jù)后，PNI陽性與否對患者的臨床分期分級沒有太大的參考價值，但該研究局限之處在于僅有8例PNI+患者。Nguyen等[42]研究中，術(shù)后發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險因素包括DOI、PNI和腫瘤分化程度，END能使局部復(fù)發(fā)率降低12.6%，5年DFS提高6.2%。因此建議對所有臨床TNM分期為T1N0M0，DOI≥3 mm的患者都進行END，DOIlt;3 mm進行原發(fā)灶清除，在最終病理結(jié)果中上存在PNI+或組織分化不良的患者考慮第二階段行頸部清掃術(shù)。

綜上，對早期臨床分期為N0的PNI+患者可考慮行END，有一定降低頸部復(fù)發(fā)風(fēng)險的作用，臨床上建議將PNI與DOI、腫瘤分化程度等指標(biāo)相結(jié)合作為手術(shù)決策的依據(jù)。

4.2 輔助放射和化學(xué)治療

輔助放射治療對于PNI+的OSCC治療效果目前還不確切。Hasmat等[36]的研究表明輔助放射治療對PNI+的OSCC患者局部控制情況和5年DSS沒有明顯改善作用。Vonk等[43]認(rèn)為現(xiàn)有的研究證據(jù)不能支持對單獨存在PNI+的OSCC患者進行術(shù)后放射治療。Nair等[28]在一項研究中對DOI≥10 mm或腫瘤分化差的OSCC患者進行輔助化學(xué)治療，結(jié)果顯示對于臨床分期為N0的PNI+患者，輔助放射治療可以提高患者的5年OS。Rajappa等[44]在一項回顧性分析中納入了169名N0 PNI+的OSCC患者，研究顯示術(shù)后放射治療對患者5年OS無明顯影響（P=0.54），但提高了患者的5年DFS （P=0.047），學(xué)者建議對于PNI+的早期OSCC患者也應(yīng)考慮行術(shù)后放射治療。

PNI與化學(xué)治療的研究較為有限。Fan等[45]的研究將PNI 與其他風(fēng)險因素包括病理分期pT4、pN1、切緣≤4 mm、腫瘤低分化、腫瘤侵犯淋巴管和DOI≥11 mm共同考慮，當(dāng)PNI陽性合并有上述風(fēng)險因素多于2項時，建議對患者進行術(shù)后放射和化學(xué)治療?；瘜W(xué)治療的加入可以提高患者的5年OS和無復(fù)發(fā)生存率。

目前的研究建議對于單獨存在PNI+的患者無需進行輔助放射和化學(xué)治療，對于PNI+同時存在其他高危因素比如DOI≥10 mm或腫瘤分化較差的患者建議行術(shù)后放射和化學(xué)治療。目前放射和化學(xué)治療對于腫瘤PNI的作用研究仍較為有限，主要的限制在于PNI臨床檢出率有限，臨床上仍缺乏對PNI統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)化的組織病理學(xué)定義。未來要想明確放射和化學(xué)治療對于PNI的作用，仍需從機制著手，進一步探索PNI的發(fā)生發(fā)展機制。

5"總結(jié)與展望

作為OSCC常見的病理特征之一，PNI+可預(yù)測OSCC的不良預(yù)后，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、局部區(qū)域復(fù)發(fā)存在一定相關(guān)性。對于PNI+的早期OSCC患者，建議結(jié)合DOI和組織病理學(xué)結(jié)果等考慮是否行END，術(shù)后放射和化學(xué)治療的指征和效果尚未明確。PNI的發(fā)生是一個腫瘤和神經(jīng)成分雙向進行誘導(dǎo)及信號傳導(dǎo)的動態(tài)過程，在此過程中，SC可能通過直接接觸腫瘤細(xì)胞而誘導(dǎo)PNI，腫瘤-神經(jīng)微環(huán)境中的神經(jīng)生長因子、MicroRNA等作為促進PNI的信號分子，免疫功能的抑制進一步促進PNI進展。隨著PNI研究的深入，上述細(xì)胞及信號分子未來有機會成為PNI的特異性治療靶點。

利益沖突聲明：作者聲明本文無利益沖突。