非洲豬瘟的傳播、蔓延、控制以及在波蘭的流行趨勢

摘 要：非洲豬瘟（African swine fever，ASF）是一種侵襲家豬和野豬的傳染性疾病，對全球養(yǎng)豬業(yè)和許多國家的農(nóng)業(yè)經(jīng)濟構(gòu)成了重大威脅。盡管對該病進行了大量的研究，但尚未研制出有效的疫苗。自2007年以來，非洲豬瘟病毒（African swine fever virus，ASFV）一直在東歐和中歐的豬群中流行，覆蓋范圍越來越大。截至2018年，ASF還在東南亞以前所未有的規(guī)模蔓延，幾乎摧毀了一些國家的養(yǎng)豬業(yè)，造成了巨大的經(jīng)濟損失。ASFV對環(huán)境有高度的耐受性，加上缺乏合法的疫苗，這些因素對ASF的傳播發(fā)揮了關(guān)鍵性作用。因此，豬場的生物安全和消毒是防止ASFV侵入的唯一有效手段。選擇有效的消毒劑并正確使用，同時考慮環(huán)境條件、接觸時間、pH范圍和溫度等因素，對消毒結(jié)果有至關(guān)重要的影響。ASF在家畜流行病中很重要，但關(guān)于不同消毒劑對ASFV殺滅效果的信息很少。在本綜述中，我們利用生物安全原則，特別是消毒原則，總結(jié)了ASF的傳播、蔓延和疫情控制的最新知識，包括基于波蘭對ASF防控方面的經(jīng)驗和觀點。

關(guān)鍵詞：非洲豬瘟；消毒；生物安全

中圖分類號：S858. 文獻標志碼：A 文章編號：1001-0769（2024）05-0001-10

養(yǎng)豬業(yè)是波蘭畜牧業(yè)中重要的分支之一，對該國的糧食經(jīng)濟做出了重大貢獻。2017年，波蘭的豬肉產(chǎn)量占其肉類總產(chǎn)量的35％以上，僅次于禽肉產(chǎn)量（占肉類總產(chǎn)量48％以上）。根據(jù)波蘭中央統(tǒng)計局的數(shù)據(jù)，2021年12月該國生豬存欄量為10 242.4萬頭，比上一年度同期下降了12.7％。存欄量的減少發(fā)生在所有生產(chǎn)階段的豬群上，尤其是母豬群，其減少幅度達20.6％。導致波蘭養(yǎng)豬缺乏盈利能力的主要原因之一是傳染性疾病的發(fā)生，特別是那些依據(jù)職權(quán)控制的疾病，如非洲豬瘟（African swine fever，ASF）。

ASF是影響家豬和野豬最危險的傳染性病毒病之一。雖然ASF的傳播速度較慢，但與經(jīng)典豬瘟（classical swine fever，CSF）不同，ASF會不斷擴大影響范圍。在受感染的豬群中，ASF能夠影響很大比例的個體，但不會影響大多數(shù)動物，這使在感染早期對ASF的診斷研究變得復(fù)雜。在沒有其他人為因素的情況下，在受感染的野豬群中，ASF以每年10～12 km的速度傳播；除其他因素外，在波蘭和其他動物流行病國家中疾病的長距離（長達幾百公里）傳播中起著關(guān)鍵作用。

ASF由世界動物衛(wèi)生組織（world organisation for animal health，WOAH）進行官方控制和通報。ASF會影響全球許多生豬和豬肉出口國的經(jīng)濟，以及當?shù)氐纳i生產(chǎn)。

2014年，波蘭暴發(fā)了ASF疫情，持續(xù)時間長達8年。在靠近白俄羅斯共和國邊境處，野豬暴發(fā)了ASF，隨后ASF在野豬群中傳播，并在豬場中暴發(fā)。為了控制ASF，該國的養(yǎng)豬方式發(fā)生了重大變化。這一變化包括關(guān)閉許多小型和庭院式豬場，因為這些豬場無法引入所需的生物安全措施。值得一提的是，2015年，波蘭大約有25萬家豬場；到2021年，僅剩下約8.47萬家。隨著時間的推移，盡管養(yǎng)豬生產(chǎn)者不斷提高對生物安全的認識，認為這是保護豬群免受ASF侵害的主要措施。但根據(jù)Gobarto S A分析師匯編的數(shù)據(jù)，波蘭的ASF疫情并沒有得到明顯改善。2021年第一季度，波蘭約有23 000個工作崗位被撤銷，占全國養(yǎng)豬業(yè)崗位總數(shù)的20％以上；同時，在2021年的前四個月，生豬存欄量與1月份（2021年）相比減少了10％，約為1.020億頭。據(jù)波蘭農(nóng)業(yè)食品行業(yè)的分析師稱，與ASF相關(guān)的對波蘭豬肉出口的限制，以及由此導致的重要出口市場（如中國、韓國和日本）的丟失，導致豬肉出口量減少了14％。這一減少導致該行業(yè)每年平均損失近6.270億歐元。

ASFV結(jié)構(gòu)復(fù)雜，基因型多樣，環(huán)境適應(yīng)能力強，因此給疫苗開發(fā)帶來了巨大困難，使該病的傳播難以得到有效的控制。由于缺乏安全有效的疫苗及有效的治療方法，ASF不斷使疫區(qū)國家的豬群大量死亡，造成巨大的經(jīng)濟損失。考慮到豬肉在肉類生產(chǎn)中的重要性，保持養(yǎng)豬業(yè)適當?shù)纳a(chǎn)水平是糧食經(jīng)濟的一個戰(zhàn)略目標，而保持豬場擁有足夠高的福利和生物安全水平可以確保這一目標的實現(xiàn)。目前，似乎有必要對豬場進行生物安全和消毒培訓。

1 ASF的歷史概況與流行情況

Eustace Montgomery于1921年首次描述了在肯尼亞發(fā)生的一種高度傳染性、致命性的豬病，該病被稱為ASF。多年來，ASF只在撒哈拉以南的非洲地區(qū)流行，但在1957年，由于人類活動，該病傳入葡萄牙。這是ASF首次傳入歐洲，由基因Ⅰ型ASFV毒株引發(fā)。在接下來的幾年中，其他國家也暴發(fā)了ASF：西班牙（1960年）、法國（1986年）、意大利（1967、1969和1993年）、馬耳他（1978年）、比利時（1985年）和荷蘭（1986年）。伊比利亞半島花了將近40年才根除ASF。自該病首次傳入歐洲以來，ASF一直在撒丁島流行。2021年，撒丁島總統(tǒng)Francesco Pigliaru通過控制放養(yǎng)的布拉多豬場成功根除了基因Ⅰ型ASFV毒株引發(fā)的疾病，宣布該島根除ASF。不幸的是，2022年1月，在意大利西北部皮埃蒙特地區(qū)一頭死亡的野豬中分離到了基因Ⅱ型ASFV毒株。這次疫情暴發(fā)地距離歐洲（德國東部）最近暴發(fā)的疫情暴發(fā)地大約800 km，隨后該地又暴發(fā)過三次疫情。不幸的是，最近的報告已證實，撒丁島上的Dorgali豬場首次暴發(fā)了ASF疫情（基因Ⅱ型）。

歐洲首次發(fā)生ASF疫情后，2007年，格魯吉亞暴發(fā)了ASF疫情（基因Ⅰ型）。ASFV從東非傳入歐洲的原因可能是部分國家接收了被病毒污染的豬或廢棄泔水，這些廢棄泔水在到達格魯吉亞波季港后被喂給豬，ASFV從當?shù)匮杆賯鞑サ狡渌麌遥▉喢滥醽?、阿塞拜疆?007年）、俄羅斯（2008年）、烏克蘭（2012年）和白俄羅斯（2013年）。隨后，2014年，歐盟內(nèi)部證實了ASF的存在，包括立陶宛、拉脫維亞、愛沙尼亞和波蘭。隨后幾年，ASF傳播蔓延至羅馬尼亞（2017年）、捷克共和國（2017年）、摩爾多瓦、比利時、保加利亞（2018年）、斯洛伐克（2019年）、塞爾維亞（2019年）、德國（2020年）、希臘（2020年），最近又傳播至多米尼加共和國和海地（2021年）。2022年，意大利也確診了ASF，在此之前，ASF在該國已消失40年之久。2022年1月，北馬其頓和泰國首次報道發(fā)生了ASF；2022年3月，尼泊爾也首次報道發(fā)生了ASF。目前，在波斯尼亞和黑塞哥維那、克羅地亞和科索沃共和國的豬場以及新加坡的野豬和進口生豬中首次確診ASF。

2018年，亞洲多個國家首次報道了ASF疫情。這導致該病向其他鄰國或地區(qū)傳播蔓延：柬埔寨、中國香港、印度尼西亞、越南、老撾、蒙古、中國臺灣、朝鮮、韓國、緬甸、東帝汶、菲律賓和俄羅斯。

自2005年以來，非洲、歐洲和亞洲已超過74個國家發(fā)生了ASF，美洲和大洋洲再次出現(xiàn)了該病。根據(jù)2021年WOAH發(fā)布的一份報告，ASF在36個國家仍處于流行狀態(tài)，其中歐洲13個、亞洲16個、非洲3個、拉丁美洲2個和大洋洲2個。迄今為止，歐盟只有兩個國家成功根除了野豬群中的ASF。捷克共和國是在2018年4月最后一次發(fā)現(xiàn)野豬感染ASF，而比利時是在2020年3月。根據(jù)WOAH的報告，這兩個國家都重新恢復(fù)到無ASF的狀態(tài)。然而，捷克共和國于2022年12月再次暴發(fā)ASF，迄今為止未能控制該病。

波蘭于2014年2月首次在靠近白俄羅斯共和國邊境的波德拉斯基省東部地區(qū)發(fā)現(xiàn)了ASF，是由位于波德拉斯基省的波蘭國家獸醫(yī)研究所（PIWet PIB）ASF國家參考實驗室人員在一頭野豬尸體中檢測到的。

到2016年，ASF在波蘭全國范圍內(nèi)緩慢但持續(xù)地傳播，覆蓋了另外兩個東部地區(qū)——波德拉斯基省和盧貝爾斯基省——以及位于中部的馬佐維亞省。馬佐維亞省出現(xiàn)的ASF很可能是由人類活動造成的，因為該地區(qū)距離最近暴發(fā)ASF疫情的野豬群至少100 km。2018年，ASF越過了瓦米安-馬蘇里安省和次喀爾巴阡省的北部邊界。據(jù)估計，2019年，即首次確診野豬暴發(fā)ASF疫情后的5年，波蘭近25％的地區(qū)處于疫區(qū)。野豬和家豬暴發(fā)ASF的次數(shù)逐漸增加，分別在2020年和2021年達到了最大值，隨后出現(xiàn)了一定程度的減少（圖1）。

2019年，在盧布斯基省（距離最近的ASF疫區(qū)約300 km）發(fā)現(xiàn)首例野豬感染ASF病例后，波蘭加強了被動監(jiān)測（搜索因ASF而死亡的野豬）和主動監(jiān)測，包括在盧布斯基省、大波蘭地區(qū)和下西里西亞省進行獵殺。因此，截至2020年2月底，在“發(fā)現(xiàn)死亡”和“獵殺死亡”的野豬中，確認發(fā)生了878起ASF疫情。波蘭從2014年暴發(fā)ASF到2022年底，共發(fā)現(xiàn)了502例家豬病例，15 307例野豬病例。盡管養(yǎng)豬業(yè)實施了嚴格限制和生物安全措施，但ASF繼續(xù)傳播蔓延，并對豬肉生產(chǎn)構(gòu)成了真正的風險。同樣重要的是，由于人類活動ASFV有可能遠距離傳播，傳入以前沒有發(fā)生過ASF的地區(qū)和國家。

2 病原體

ASFV是一種大型有包膜的DNA病毒，其復(fù)制周期發(fā)生在細胞核和細胞質(zhì)中[核質(zhì)大型DNA病毒（nucleocytoplasmic large DNA viruses，NCLDV）]。ASFV隸屬于ASFV科ASFV屬，病毒粒子呈二十面體，直徑為260～300 nm。病毒粒子的中央是含有遺傳物質(zhì)的核球，其形式為雙鏈DNA（dsDNA），由核蛋白核心、內(nèi)部脂質(zhì)包膜、衣殼和外部脂質(zhì)包膜所裹。病毒粒子最外層的衣殼由2 760個六聚體和12個五聚體蛋白衣殼組成。外部脂質(zhì)包膜是在離開受感染的單核巨噬細胞譜系宿主細胞后形成的。

ASFV基因組是一個長170～193 kb的雙鏈DNA，共有151～167個開放閱讀框（open reading frame，ORF）。基因組的中心部分是中央保守區(qū)（central conservative region，CCR），長約125 kb，其中包含一個400 bp長的可變片段，稱為中央可變區(qū)（central variable region，CVR）。CCR由左可變區(qū)（left variable region，LVR）和右可變區(qū)（right variable region，RVR）組成。它們的特點是遺傳變異性高，可決定基因組的最終長度。

3 宿主范圍和ASFV載體

易感染ASFV的物種隸屬于豬科（Suidae），包括家豬（Sus scrofa f. domestica）、野豬（Sus scrofa）、疣豬（Phacochoerus aethiopicus）、紅河豬（Potamochoerus porcus）和野生灌叢豬（Hylochoerus meinertzhageni）。此外，在亞太地區(qū)的地方性野生物種也被證實感染了ASFV，包括須豬（Sus barbatus）和菲律賓疣豬（Sus philippensis）。

ASFV傳入家豬或野豬群后臨床表現(xiàn)出的特征是高傳染性和高死亡率，但該病也可能從流行病轉(zhuǎn)變?yōu)榈胤讲。缒壳霸诶摼S亞和愛沙尼亞以及20世紀70年代的撒丁島發(fā)生的情況一樣。盡管撒丁島在2018年和2019年分別最后一次報告了家豬和野豬ASF疫情，但其無ASF疫情的地位尚未得到正式確認。在其他動物（疣豬、河豬和野生灌叢豬）中，ASF可能呈亞臨床型，因此，這些物種是環(huán)境中ASFV的宿主。Frant等（2017）證實，ASFV存在于非洲和歐洲南部（葡萄牙、西班牙、意大利和希臘）常見的鈍緣蜱屬（Ornithodoros spp. genus）中的軟蜱中，并能夠復(fù)制。在已證實發(fā)生在非洲的所謂森林循環(huán)中，蜱蟲因攝入受感染疣豬的血液而成為病毒的宿主。蜱蟲也可以是一種生物媒介，通過子宮、卵巢或性途徑在節(jié)肢動物體內(nèi)傳播。在上述節(jié)肢動物中，ASFV的傳染性可持續(xù)數(shù)月到8年，因此軟蜱是環(huán)境中病毒的天然宿主。

在歐洲，ASFV的主要宿主是歐亞野豬，可通過兩種方式傳播：一是感染動物之間的直接接觸，二是接觸野豬的尸體或感染動物的其他肉品來源，如垃圾箱。ASFV還可以通過氣溶膠進行短距離的傳播。由于種豬的感染存在季節(jié)性，最近Fila等（2020）和Olesen等（2018）分別研究了昆蟲在ASF傳播中所起的作用。迄今為止，ASFV通過在波蘭和中歐國家中發(fā)現(xiàn)的硬蜱（蓖麻硬蜱和網(wǎng)狀革蜱）傳播的可能性尚未得到證實，但在采血后8周內(nèi)仍可在這些硬蜱中檢測到ASFV的遺傳物質(zhì)。同樣，對于歐洲自然界中常見的蒼蠅和蚊子，例如穩(wěn)定蒼蠅（Stomoxys calcitrans）、家蠅（Musca domestica）、果蠅屬的蒼蠅和蚊子（Culicidae），盡管在這些昆蟲體表檢測到了ASFV的遺傳物質(zhì)，但豬要感染ASFV只能通過采食在12 h內(nèi)吸食了含有ASFV血液的昆蟲才發(fā)生。因此，可以得出結(jié)論，在溫帶氣候中，蒼蠅和蚊子不是ASFV傳播的重要媒介。人的因素在疾病的傳播中可能發(fā)揮著重要作用，如以前無ASF疫區(qū)的野豬暴發(fā)ASFV的病例所證明的那樣，距離最近的野豬或家豬ASF暴發(fā)地數(shù)百千米（馬佐維亞和盧布斯基），因此，可以合理地推斷導致ASF在如此遠的距離上傳播的原因是，例如，運輸動物卡車的車輪受污染或殘留在森林中的肉類受污染，野豬曾以這些肉類為食。根據(jù)與這些動物的行為和活動相關(guān)的數(shù)據(jù)，可以知道它們遷移到20 km或更遠的地區(qū)是不現(xiàn)實的。

4 ASFV對物理和化學試劑的敏感性

多年來，許多科學家一直在研究ASFV的易感性和穩(wěn)定性。研究證明，ASFV對環(huán)境條件具有很高的抵抗力，在低于0 ℃的溫度下仍能長時間保持傳染性。同樣，在－70 ℃條件下，ASFV能夠存活數(shù)年，且滴度和傳染性不會顯著下降。當ASFV污染的肉類保存在－20 ℃時，觀察到ASFV滴度系統(tǒng)性降低，但仍至少可保持2年的傳染性。此外，ASFV還可以在多次凍融循環(huán)條件下存活，并且在pH 4～13的范圍內(nèi)保持穩(wěn)定，在56 ℃下數(shù)小時內(nèi)仍具有傳染性。將ASFV污染的肉類腌制或晾干（類似于帕爾馬、伊比利亞或塞拉諾火腿所經(jīng)歷的過程），病毒仍可存活一年以上。ASFV具有高度的穩(wěn)定性，能夠在肉類或泔水中長期存活，因此這些物質(zhì)在ASF的長距離傳播中發(fā)揮載體作用。這是ASFV進入非疫區(qū)的常見途徑之一。例如，2007年在格魯吉亞暴發(fā)的ASF疫情就是由從非洲運來受污染的食物泔水飼喂豬引起的。ASFV在感染野豬尸體中持續(xù)存在是一個值得討論的主題。然而，由于野豬尸體中的病毒載量很高，其在ASF傳播中的作用不容忽視。由于需要積極尋找野豬尸體等因素，控制該病的傳播極為困難。此外，研究證明，一年四季的溫度對野豬尸體的腐爛速度有相當大的影響。隨著環(huán)境溫度的升高，殘骸分解的時間會變短，從夏季的8 d到冬季的37 d。這可能會影響野豬發(fā)生ASF的季節(jié)性，其中冬季的暴發(fā)次數(shù)最多。ASFV高存活率也是影響豬場豬群的一個重要因素。研究證明，排出的ASFV仍保持傳染性，4 ℃下，糞便中病毒的傳染性可保持8 d，37 ℃下可保持3～4 d；尿液中的病毒，在4 ℃下可保持15 d，在21 ℃下可保持5 d，在37 ℃下可保持2～3 d。

此外，Olesen等通過一項研究證實，移除病死豬一天后，新進入豬圈的豬仍可能會感染ASFV。在這種情況下，豬接觸被含ASFV的排泄物污染的環(huán)境可能是間接感染的原因。例如，在西班牙，Pejsak等（2017）在4個月前撲殺過患病豬的豬舍中檢測到了ASFV。Mazur-Panasiuk等（2019）指出，含有ASFV的排泄物應(yīng)該是病毒傳播的一個重要因素，特別是在豬群和豬場內(nèi)。

Cycle（2013）證明，通過高溫（60 ℃ 20 min或56 ℃ 70 min）、改變pH（小于3.9或大于11.5）或使用已被證明有效的消毒劑，可有效滅活A(yù)SFV。

5 疾病控制：通過行政手段防治ASF

ASF被認為是最危險的豬病之一，會嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)，因此被列入WOAH的疾病清單；歐盟和歐洲以外的多個國家對其控制進行了嚴格的規(guī)定。所采取的措施包括監(jiān)測、流行病學調(diào)查和控制豬群的流動（家豬和野豬），以撲殺野豬和受ASF疫情影響的家豬。嚴格落實檢疫和遵守生物安全原則，以及使用經(jīng)過證實有效的消毒劑是必不可少的。由于發(fā)現(xiàn)因ASF而死亡的豬尸體的地方不同（野豬往往死于森林或豬場中，家豬常病死于豬場），對發(fā)現(xiàn)疫情的區(qū)域（環(huán)境）采用的消毒方法沒有通用的方案。如果豬場確診暴發(fā)了ASF，則要對所有豬進行撲殺和處理，同時對飼養(yǎng)動物的設(shè)施進行清洗和消毒，使用對ASFV具有殺滅作用的消毒劑。獸醫(yī)檢查后應(yīng)采取相應(yīng)的措施，以減少將疾病傳播到更多豬場或其他實體（如肉類加工廠和飼料公司）的可能性。還應(yīng)核實每個案例是否遵循了生物安全原則，因為這是獲得賠償金所必需的。根據(jù)歐盟委員會的指導方針，已經(jīng)出臺了一些與ASF區(qū)域標識有關(guān)的規(guī)定。目前，與控制疾病暴發(fā)有關(guān)的條例沒有改變，Ⅰ區(qū)以藍色標示，Ⅱ區(qū)以粉色標示，Ⅲ區(qū)以紅色標示。在ASF暴發(fā)周圍劃定紅色區(qū)域（最小半徑為3 km）和粉色區(qū)域（在紅色區(qū)域外至少7 km）（圖2）。這些地區(qū)內(nèi)的豬場分別被禁止在40 d和30 d內(nèi)運送豬，在此之后，只有在獲得當?shù)孬F醫(yī)的許可后，才能將豬群從豬場中轉(zhuǎn)運出去。此外，在限制區(qū)域，必須在計劃移動豬群前15 d內(nèi)對豬群進行實驗室檢測，并在屠宰前24 h進行臨床檢查（針對藍區(qū)和紅區(qū)內(nèi)的豬群）；粉色區(qū)豬群在轉(zhuǎn)出和屠宰前進行檢測即可。在完成消毒程序40 d后，可以重新安置之前確診暴發(fā)ASF的豬場，但在重新安置后，新入的豬群必須進行血清學檢測，以檢測ASFV抗體。

6 野豬群中ASF的預(yù)防、監(jiān)測和調(diào)控

行政行動必須得到項目支持，以監(jiān)測家豬和野豬群的流行病學情況。檢測ASF的經(jīng)驗表明，被動監(jiān)測，即尋找和檢查野豬尸體，是最有效的。在紅色區(qū)（限制區(qū)Ⅲ），ASFV遺傳物質(zhì)陽性的胴體比例超過60.0％，而主動監(jiān)測（檢查被射殺的野豬）在同一區(qū)域顯示的陽性結(jié)果約0.8％，證明這種方法對確定野豬群中與ASF相關(guān)的當前流行狀況的用處并不大。然而，主動監(jiān)測是ASF全面監(jiān)測計劃的重要組成部分，因為在沒有臨床體征的野豬體內(nèi)檢測到病毒，可以及早發(fā)現(xiàn)疾病，隨后進行快速干預(yù)，從而降低病毒傳播到其他地方的風險。對被射殺的野豬進行血清學監(jiān)測也很重要，以確定ASF在豬群中的病程特征（例如，從流行病到地方性疾病的轉(zhuǎn)變）。在出現(xiàn)ASF超過8年的國家（愛沙尼亞和拉脫維亞），野豬血清陽性的比例超過20.0％，這與波蘭的情況不同，波蘭的血清陽性保持在1.5％～2.0％。

野豬是環(huán)境中ASFV的主要儲存庫，野豬數(shù)量的不斷增長增加了病毒傳播到新的地理區(qū)域的機會，也增加了ASF在野外長期持續(xù)存在的可能性，從而增加了引入家豬群中的風險。捷克共和國的例子表明，通過有針對性地減少疫區(qū)周圍的野豬數(shù)量，疫區(qū)很快恢復(fù)無ASF狀態(tài)（自2018年以來），這說明對野豬進行密集撲殺能夠迅速消滅ASF。不幸的是，2022年12月，ASF重返捷克共和國，在野豬群中再次檢測到了ASFV。因此，這些措施只有在病原體“定點”引入野豬群的情況下才有效。比利時（自2020年起成為無ASF國家）實施的組合式控制措施，包括圍欄、狙擊射擊和誘捕野豬，以及最重要的尋找和處理野豬尸體，其強度與流行病學情況相適應(yīng)，目前被認為是控制ASF的有效措施。盡管對野豬進行徹底射殺存在爭議，但這是歐洲食品安全局（European Food Safety Authority，EFSA）等機構(gòu)推薦的從野生動物種群中根除ASF的有效措施之一。然而，考慮到受ASF影響的國家的經(jīng)驗，不可能采用完全有效的野豬滅絕策略。

7 開發(fā)ASF疫苗的前景

盡管針對ASF的疫苗已經(jīng)研究了幾十年，但尚未成功研制出一種安全的商業(yè)化疫苗。難以開發(fā)出有效的疫苗與ASFV擁有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)、能夠逃避宿主的免疫應(yīng)答以及受感染或接種疫苗的豬缺乏誘導產(chǎn)生完全中和病毒的抗體有關(guān)。另一項挑戰(zhàn)是通過開發(fā)出一套策略，基于兼容的診斷測試（分子學和血清學），可靠地區(qū)分接種疫苗的動物和自然感染的動物（DIVA策略，區(qū)分自然感染的動物和接種疫苗的動物）。如使用感染ASFV的細胞培養(yǎng)物的勻漿、含有被感染的外周血白細胞的上清液、純化的滅活A(yù)SFV病毒顆粒、含或不含佐劑的滅活毒株。在實驗接種和自然感染豬中，減毒株和基于肽結(jié)構(gòu)的疫苗未能使豬獲得針對ASF的充分保護。最有希望的結(jié)果是利用經(jīng)過基因修飾的減毒株獲得，因為它們可誘導動物產(chǎn)生細胞介導的免疫應(yīng)答。

2020年，ASF疫苗的研發(fā)取得了突破性進展。來自美國普拉姆島的研究團隊發(fā)表了基于177L基因缺失的病毒株疫苗（ASFV-G-DⅠ177L）的研究結(jié)果。目前，這種ASFV基因缺失株是開發(fā)ASF疫苗最有希望的候選株，因為它可誘導動物產(chǎn)生對ASFV亞洲和歐洲變異株的免疫力。在研究期間，觀察到三分之一的受試豬在接種ASF疫苗后的第2周表現(xiàn)出對ASFV的免疫力，而在應(yīng)用實驗疫苗后的第4周，所有的豬都達到了完全免疫。2021年，該研究團隊還進行了一項通過口-鼻途徑接種實驗性疫苗的研究。結(jié)果證明，通過這種途徑接種疫苗的豬對ASFV感染具有免疫力，為未來開發(fā)有效的野豬用疫苗帶來了希望。另外，至少還有兩種重要的候選疫苗株。第一種候選疫苗“ASFV-G-DMGF”被用于野豬的口服接種和家豬的肌內(nèi)免疫。然而，在家豬中，候選疫苗在接種兩次后可誘導動物產(chǎn)生完全免疫；在口服的野豬中，50％的野豬出現(xiàn)了血清轉(zhuǎn)換；在剩余的一組野豬中，2頭發(fā)生了急性致死性感染，2頭出現(xiàn)了輕度和短暫的病程。另一種原型疫苗ASFV HLJ/18-7GD是通過敲除7個基因獲得的，接種后可對致死性ASF感染產(chǎn)生完全免疫力。此外，在家豬上沒有觀察到候選疫苗株毒力可能恢復(fù)的跡象，但該原型疫苗株仍需在野豬上進行測試，因為野豬是ASF在歐洲豬群中傳播的一個主要問題。盡管結(jié)果令人興奮，但開發(fā)出來的候選疫苗株仍需通過一系列安全性、副作用、潛在的穩(wěn)定性測試，最重要的是在田間條件下的功效測試，然后才能上市。此外，要將疫苗推向市場，必須修改歐盟禁止治療和接種ASF疫苗的現(xiàn)行立法。然而，最近有新聞報道稱，越南政府已將兩種國產(chǎn)ASF疫苗商業(yè)化：基于ASFV-G-ΔⅠ177L株的NAVET-ASFVAC疫苗和基于ASFV-G-Δ-MGF株的AVAC ASF LIVE疫苗。遺憾的是，發(fā)現(xiàn)三種新的基因Ⅰ型和Ⅱ型ASFV重組體的報道并不令人樂觀，因為它們可能會對疫苗的效力造成額外的重大問題。因此，目前，疾病的早期識別、可靠和快速的實驗室診斷、對感染ASFV的豬群進行行政撲殺，以及采用官方根除方法所規(guī)定的生物安全措施，在控制ASF方面發(fā)揮了關(guān)鍵作用。

8 豬群的生物安全

在缺乏有效的商業(yè)疫苗的情況下，生物安全極為重要，事實上，這是防止ASFV感染傳播的唯一有效措施。除了限制疾病在環(huán)境中的傳播外，遵守生物安全原則，可以加強對豬場的保護，防止豬群感染。多年的觀察以及先前開發(fā)的生物安全模型表明，即使是基本的生物安全標準應(yīng)用也可顯著減少和限制ASFV的傳播。生物安全不僅廣義地定義為與建筑物、設(shè)施內(nèi)的移動規(guī)則和農(nóng)業(yè)設(shè)備有關(guān)的生物安全，而且更重要的是，還定義為人們和公眾對與傳染性疾病發(fā)生相關(guān)的威脅規(guī)模和可能后果的認識。準確、易理解的指南、培訓和支持是正確應(yīng)用生物安全原則和規(guī)則的基礎(chǔ)。在豬場保護方面，有兩種類型的生物安全，即外部生物安全和內(nèi)部生物安全。外部生物安全是指旨在確保豬場不從外部環(huán)境引入病原體的措施，其中包括用柵欄圍住豬場，豬場與豬場之間保持適當?shù)木嚯x，在有針對性地將新動物引入畜群之前進行必要的檢疫，最大限度地減少未經(jīng)許可的人進入豬場，清洗和消毒每輛進入豬場的車輛，防止動物進入飼料，保護窗戶，防止野生動物、嚙齒動物、家禽甚至昆蟲進入，這些動物偶爾會成為疾病傳播的媒介。內(nèi)部生物安全包括旨在限制疾病在豬場區(qū)域內(nèi)傳播的管理，包括對設(shè)施進行消毒，根據(jù)“全進全出”原則管理動物的流動，將臟區(qū)和凈區(qū)分開，更換防護服，凈區(qū)和臟區(qū)使用單獨的設(shè)備，以及實施預(yù)防計劃對豬群進行預(yù)防性接種和管理。有效的生物安全的關(guān)鍵原則之一是使用有效的消毒技術(shù)，豬場工作人員和豬場訪客（包括獸醫(yī)）遵守既定的消毒規(guī)程。

9 消毒

在機械清洗的支持下，消毒是滅活豬病原體、防止傳染性疾病傳播的基礎(chǔ)，也是疫情暴發(fā)后豬場重新飼養(yǎng)前所必需的。完整的消毒過程應(yīng)包括徹底的機械清洗和正確的消毒兩步。應(yīng)清除和處理可能受到污染的物質(zhì)，如糞便、墊料、稻草和飼料，用洗滌劑徹底清洗豬舍的地板和墻壁表面，然后干燥和消毒。最佳的消毒劑應(yīng)具有作用快速、穩(wěn)定、無毒性和耐環(huán)境的特點，重要的是，它應(yīng)具有盡可能廣泛的殺菌和殺毒譜，可以對抗細菌、病毒和真菌。消毒時使用的參數(shù)選擇不當（如濃度、接觸時間和應(yīng)用范圍），可能會導致消毒無效和失敗。應(yīng)根據(jù)制造商的說明書，使用經(jīng)過驗證對ASFV有效的授權(quán)消毒產(chǎn)品。

由于缺乏有關(guān)抗ASFV消毒劑的準確描述和詳細數(shù)據(jù)，難以推薦理想的消毒劑。不過，一些歐盟成員國已制定了一份對ASFV有效的授權(quán)消毒劑清單。這一分類是基于使用消毒劑對付包膜病毒，如馬動脈炎病毒（equine arteritis virus，EVAV）、偽狂犬病病毒（pseudorabies virus，PRV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV）和經(jīng)典豬瘟病毒（classical swine fever virus，CSFV）的常識和經(jīng)驗。迄今為止，被認為可有效滅活A(yù)SFV的化合物包括：

-1％甲醛；

-次氯酸鈉（0.007 5％～0.03％）；

-2％燒堿溶液（最強的消毒劑）；

-戊二醛、甲醛；

-1％氫氧化鈉或氫氧化鈣（在4 ℃懸浮液中滅活病毒）；

-酚類，如來蘇兒和克勒奧林；

-基于脂質(zhì)溶劑的化學品；

-多組分化合物，如衛(wèi)可（1∶100）、溶雙胍、德素芳（Desoform）和OD 20—表面活性劑、活性物質(zhì)、有機酸、糖醛等。

雖然以前從未測試過上述化合物對ASFV的殺滅功效，但仍被推薦為有效的化合物，通常用于生產(chǎn)市售的消毒劑。根據(jù)對其他病毒的殺滅經(jīng)驗來假定某種消毒劑對ASFV的殺滅功效，可能會出現(xiàn)錯誤，導致災(zāi)難性后果，是因為關(guān)鍵的生物安全消毒過程無效，從而增加ASF傳播的風險。盡管它們在控制疾病傳播方面具有重要意義，但直到最近，關(guān)于化合物對殺滅ASFV有效性的信息仍然很少。多年來發(fā)表的相關(guān)研究結(jié)果主要涉及所選活性物質(zhì)對不同類型物體表面上的ASFV的效力。為了澄清對迄今為止使用的消毒劑有效性的疑問，并確認它們對ASFV的殺毒活性，Juszkiewicz等（2020）、Juszkiewicz等（2019）、Pan等（2021）、Pan等 （2021）、Paliy等（2020）分別開展了相關(guān)研究。Juszkiewicz等（2020）、Juszkiewicz等（2019）發(fā)現(xiàn)，次氯酸鈉對ASFV的殺滅效果最高，即使在濃度為0.3％和高污染條件下也有效。事實證明，氯在其組成中起關(guān)鍵作用，必須在0.5％的范圍內(nèi)，如果長期儲存會降低活性氯的含量，從而降低次氯酸鈉的消毒效果。對ASFV有同樣高的滅活作用的化合物是燒堿，據(jù)Juszkiewicz等（2020）的研究報告，燒堿能使ASFV滅活的最終濃度為1％、2％和3％，但在高污染條件下的最低濃度除外。然而，氫氧化鈣對ASFV的滅活功效與消毒過程中的溫度范圍有關(guān)。在22 ℃下，0.2％、0.5％和1.0％的氫氧化鈣對ASFV的殺滅效果都很好；而在4 ℃下，只有0.5％和1.0％的氫氧化鈣才有效。在相同濃度（0.5％、1.0％和2.0％）下測試過氧硫酸鉀、苯酚和苯扎氯銨，不論污染水平如何，這3種化合物在濃度為1.0％時均有效，但苯扎氯銨在檢測的最高濃度（1.0％）時僅在低污染水平下才顯示出殺滅病毒的活性。在所有測試濃度下，戊二醛對ASFV具有很強的殺毒作用。Juszkiewicz等 （2019）、Pan等（2021）證明，ASFV能被基于碘、次氯酸鈉和過氧硫酸鉀的商用消毒劑滅活。消毒領(lǐng)域的一項重大創(chuàng)新是研究植物提取物及其對ASFV的殺滅能力。Juszkiewicz等（2021）證實了薄荷對ASFV有良好的滅活效果。未來，天然植物提取物的抗病毒活性可能有助于開發(fā)出生態(tài)友好型的消毒劑。

WOAH推薦了一系列滅活A(yù)SFV的消毒劑： 0.8％氫氧化鈉（30 min）、2.3％次氯酸鹽（3 min）、0.3％福爾馬林（30 min）、3％ n-苯基酚和碘化合物（30 min）。盡管WOAH提出了建議，但Juszkiewicz等（2020）的研究未能評估甲醛對ASFV的有效性，原因是甲醛對細胞培養(yǎng)物具有較高的細胞毒性。

除化學消毒外，在60 ℃下30 min、在pH＜ 3.9或＞11.5的無血清培養(yǎng)基中，ASFV可被滅活。Zhang等（2020）在一項研究中發(fā)現(xiàn)，臭氧水對ASFV也有殺滅作用。然而，只有5 mg/L的臭氧水能夠?qū)⒉《镜味冉档偷剿璧南緲藴?log10。

10 小結(jié)

由于ASF的持續(xù)蔓延，截至2023年7月底，波蘭共確診523例家豬病例和17 391 502例野豬病例，造成的經(jīng)濟損失難以估計。缺乏商業(yè)化的ASF疫苗，通過行政手段控制ASF傳播的能力受到了限制，即對發(fā)病豬的撲殺和處理。目前，預(yù)防ASF的唯一措施包括執(zhí)行和遵守嚴格的生物安全措施，正確實施生物安全的關(guān)鍵要素之一是有效消毒。雖然一些國家已經(jīng)列出了一份可用于預(yù)防ASF的殺毒產(chǎn)品清單，但它們的有效性大多是間接估計獲得的，僅基于它們對其他包膜病毒的測試結(jié)果。到目前為止，由于缺乏消毒劑對ASFV殺滅效果評估的數(shù)據(jù)，導致人們普遍使用對ASFV的殺滅功效未經(jīng)證實的消毒劑，這可能會導致ASF失控傳播。不過，近年來，一些研究試圖解決這一問題。根據(jù)現(xiàn)有的研究，甲醛、次氯酸鈉、燒堿、戊二醛、苯酚、苯扎氯銨、過氧硫酸鉀、乙酸這8種物質(zhì)對ASFV具有殺滅效果。這些化學試劑中的大多數(shù)在WOAH推薦的濃度下可以使ASFV失活，其中次氯酸鈉、戊二醛、燒堿和過氧硫酸鉀的殺毒效果最高。對ASFV最無效的消毒劑為苯扎氯銨。此外，在實際消毒之前，預(yù)清潔步驟對于去除污染物的重要性已得到證實。長期接觸化學消毒劑可能會對人和動物的健康造成嚴重的后果，因此需要進一步研究植物提取物在殺滅病毒上的有效性，以找到一種安全有效的植物替代品。Juszkiewicz等（2021）選取了14種植物提取物，研究它們對ASFV的滅活效果，結(jié)果表明只有薄荷提取物對ASFV具有較高的殺病毒活性。

上述研究首次確定了最有效的化學物質(zhì)和消毒條件，以確保消毒過程對ASFV的有效性。這一創(chuàng)新的另一個要素是確定了天然植物提取物的殺病毒活性，這些提取物將來可能成為生態(tài)消毒劑的成分之一。

在針對ASF的安全疫苗獲得批準之前，生物安全和有效消毒是防止ASF傳播的重要措施。培訓豬場工作人員嚴格遵守生物安全規(guī)則，并指導他們有效使用消毒劑是至關(guān)重要的。為飼養(yǎng)人員提供這方面的知識，可以加強對ASF等疾病的控制，保障相關(guān)動物的健康和福利。實施正確的生物安全措施和使用有效的消毒劑，可顯著降低疾病傳播的風險，確保養(yǎng)豬業(yè)的穩(wěn)定和可持續(xù)發(fā)展。

原題名：African swine fever： transmission，spread，and control through biosecurity and disinfection，including Polish trends（英文）

原作者：Ma?gorzata Juszkiewicz，Marek Walczak，Grzegorz Wo?niakowski和Katarzyna Podgórska