枸杞中烯啶蟲胺的殘留檢測(cè)方法及穩(wěn)定性研究

摘 要：以枸杞為研究對(duì)象，建立了烯啶蟲胺在枸杞上的殘留檢測(cè)方法。采用甲醇對(duì)樣品中的烯啶蟲胺進(jìn)行提取，經(jīng)PSA和C18凈化后，采用高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀進(jìn)行檢測(cè)，并用外標(biāo)法定量。結(jié)果表明，在0.01～1.00 mg·L-1的范圍內(nèi)，農(nóng)藥的線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)大于0.999。在0.01、0.10、1.00 mg·kg-1 3個(gè)添加水平下，烯啶蟲胺在枸杞中的平均回收率為73.1%～86.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%～6.7%，方法定量限為0.01 mg·kg-1。在-18 ℃、儲(chǔ)藏時(shí)間為11個(gè)月的試驗(yàn)期間，烯啶蟲胺在枸杞基質(zhì)中的降解率均小于30%。該方法精確度高、精密度好，是一種較為實(shí)用的分析方法。

關(guān)鍵詞：烯啶蟲胺; 枸杞; 農(nóng)藥殘留; 檢測(cè)方法; 穩(wěn)定性

中圖分類號(hào)：TS207.53 " " "文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A " " 文章編號(hào)：1002-204X（2024）01-0064-05

doi：10.3969/j.issn.1002-204x.2024.01.014

Study on the Determination Method and Stability of Nitenpyram Residue

in Lycium barbarum

Yang Jing， Ji Li， Ma Xiaolong， Zhang Fengfeng， Gou Chunlin*

（Ningxia Institute of Quality Standards and Testing Technology for Agricultural Products/ Ningxia Key Laoratory of Agriculutral Product Quality Safety Standard Research and Evaluation， Yinchuan， Ningxia 750002）

Abstract In this paper， a method was established for the determination of the residues of nitenpyram in Lycium barbarum. The samples were extracted with methanol， purified by PSA and C18， detected by ultra performance liquid chromatography-mass spectrometry （HPLC）， and quantified by external standard method. The results showed that there was a good linear relationship in the range of 0.01～1.00 mg·L-1， and the correlation coefficient was greater than 0.999. The average recoveries were 73.1%～86.1% and the relative standard deviations were 2.6%～6.7% at three supplemental levels（0.01，0.10 and 1.00 mg·kg-1）. The limit of quantitation was 0.01 mg·kg-1. At -18 ℃ and storage time of 11 months， the degradation rate of nitenpyram in Lycium barbarum was less than 30%. This method has high accuracy and precision， which is a practical analysis method.

Key words Nitenpyram; Lycium barbarum; Pesticide residues; Detection method; Stability

枸杞作為寧夏特色優(yōu)勢(shì)農(nóng)產(chǎn)品，因其含有多糖、黃酮、甜菜堿等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[1-2]，深受大眾喜愛，但在生長(zhǎng)過程中易受到病蟲害威脅[3-5]。烯啶蟲胺是第2代新煙堿類殺蟲劑，具有獨(dú)特的化學(xué)與生物性質(zhì)[6-8]，主要作用于昆蟲神經(jīng)，對(duì)害蟲突觸受體具有神經(jīng)阻斷作用[9]。烯啶蟲胺具有高效、低毒、內(nèi)吸和無交互抗四大優(yōu)點(diǎn)[10]。目前，烯啶蟲胺主要用于水稻、蔬菜等作物的病蟲害防治，關(guān)于其在農(nóng)作物上的殘留檢測(cè)方法已有相關(guān)報(bào)道。潘金菊等[11]測(cè)定了烯啶蟲胺在甘藍(lán)和土壤中的殘留及消解動(dòng)態(tài)，結(jié)果顯示，其在甘藍(lán)和土壤中的殘留量處于安全水平。侯少巖等[12]開展了金銀花中烯啶蟲胺測(cè)定方法的研究。黃勇平等[13]采用氣相色譜法測(cè)定豇豆和土壤中烯啶蟲胺的殘留。趙方方等[14]測(cè)定了農(nóng)田土壤和水中烯啶蟲胺的殘留。但目前關(guān)于枸杞中烯啶蟲胺殘留分析方法的研究還未見報(bào)道。本文建立了枸杞中烯啶蟲胺的高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方法，為制定枸杞中烯啶蟲胺的殘留限量標(biāo)準(zhǔn)及烯啶蟲胺的合理使用提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 儀器

液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀（Ultimate 3000 TSQ Quantum Access）由美國(guó)Thermo公司生產(chǎn)，低速臺(tái)式大容量離心機(jī)（TDL-40C）由上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)，高速分散機(jī)（T25型）由德國(guó)IKA公司生產(chǎn)，渦旋混合器（MS3 digital型）由德國(guó)IKA公司生產(chǎn)，電子天平（PL202-L型、XS205型）由瑞士梅特勒-托利多儀器有限公司生產(chǎn)。

1.2 試劑

烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品（純度為99.11%）由德國(guó)DR公司生產(chǎn)，甲醇（色譜純）由德國(guó)默克公司生產(chǎn)，PSA和C18均購(gòu)自上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司。

1.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制

稱取適量的烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇溶解，配制成質(zhì)量濃度為1 000 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再用甲醇稀釋成10 mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于-18 ℃避光保存。上機(jī)時(shí)，用基質(zhì)空白溶液分別稀釋成0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg·L-1系列的標(biāo)準(zhǔn)溶液，現(xiàn)用現(xiàn)配。

1.4 樣品的制備與保存

將田間枸杞鮮果樣本除去果梗、葉子、爛果等雜質(zhì)充分混勻后分成2份。一份用四分法縮分，分取300 g樣品，直接裝入樣品容器中，貼好標(biāo)簽，于-18 ℃冰柜冷凍保存，室內(nèi)檢測(cè)時(shí)解凍后打成漿狀，待測(cè)。另一份制成枸杞干果，制備方法：向每千克新鮮枸杞中加入10～20 g食用級(jí)碳酸鈉或碳酸氫鈉，混勻，在封閉容器內(nèi)放置20～30 min進(jìn)行脫蠟，再晾曬制干，貼好標(biāo)簽，于-18 ℃冰柜冷凍保存，室內(nèi)檢測(cè)時(shí)加液氮粉碎成粉末狀，待測(cè)。

1.5 樣品前處理

1.5.1 枸杞鮮果

稱取枸杞鮮果10.00 g置于50 mL離心管中，加入20 mL甲醇，勻漿提取2 min，吸取1 mL上清液置于盛有50.00 mg C18和50.00 mg PSA的離心管中，渦旋1 min，于4 000 r·min-1離心5 min，上清液過0.22 μm濾膜，待測(cè)。

1.5.2 枸杞干果

稱取枸杞干果5.00 g置于50 mL離心管中，加入10 mL水浸泡30 min，加入20 mL甲醇，勻漿提取2 min，吸取1 mL上清液置于盛有50.00 mg C18和50.00 mg PSA的離心管中，渦旋1 min，于4 000 r·min-1離心5 min，上清液過0.22 μm濾膜，待測(cè)。

1.6 添加回收試驗(yàn)

分別在枸杞鮮果和干果空白樣品中添加0.01、0.10、1.00 mg·kg-1 3個(gè)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照所建立的方法進(jìn)行測(cè)定。

1.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

稱取枸杞鮮果空白樣品10.00 g、枸杞干果空白樣品5.00 g分別置于50 mL離心管中，按照0.50 mg·kg-1的添加水平直接在儲(chǔ)存穩(wěn)定試驗(yàn)所需數(shù)量的空白樣品中添加烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液，將所有離心管進(jìn)行密封，放入低于-18 ℃冰箱中保存。

1.8 儀器條件

1.8.1 液相色譜條件

色譜柱Symmetry C18（100 mm×2.1 mm，3.5 μm），柱溫：45 ℃，流動(dòng)相：甲醇-水;流速：0.30 mL·min-1，進(jìn)樣量：2.00 μL。洗脫方式為梯度洗脫，洗脫條件見表1。

1.8.2 質(zhì)譜條件

離子源：ESI+，噴霧電壓：3.5 kV，毛細(xì)管傳輸溫度：300 ℃，鞘氣：30 arb，輔氣：10 arb，碰撞壓力：1.5 mTorr，掃描模式：選擇離子監(jiān)測(cè)（SRM）。質(zhì)譜條件見表2。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)工作曲線

準(zhǔn)確吸取質(zhì)量濃度分別為0.01、0.02、0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg·L-1的烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)溶液。在1.8中的檢測(cè)條件下進(jìn)行測(cè)定（圖1）。以烯啶蟲胺的色譜峰面積為縱坐標(biāo)（y）、對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（x），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到線性方程：y=2×107 x+151 608，r為0.999 1。烯啶蟲胺在0.01～1.00 mg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)在0.999以上。

2.2 回收率和精密度

分別添加0.01、0.10、1.00 mg·kg-1 3個(gè)質(zhì)量分?jǐn)?shù)水平的烯啶蟲胺標(biāo)準(zhǔn)品于枸杞空白試樣中，按1.5中的處理方法對(duì)樣品進(jìn)行處理和測(cè)定，計(jì)算回收率和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。枸杞鮮果和干果的空白和添加色譜圖見圖2。由表3可知，烯啶蟲胺在枸杞鮮果的平均回收率為73.1%～75.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.0%～4.9%;枸杞干果平均回收率為77.6%～86.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%～6.7%?；厥章屎途芏染軌驖M足枸杞中烯啶蟲胺的檢測(cè)要求，符合農(nóng)藥殘留分析的要求[15-16]。

2.3 烯啶蟲胺在枸杞上的穩(wěn)定性

以0 d、30 d、61 d、184 d、275 d、337 d為取樣間隔對(duì)枸杞中添加的烯啶蟲胺進(jìn)行測(cè)定。由表4可知，烯啶蟲胺在枸杞鮮果中的降解率為17%～24%，干果中的降解率為2%～20%。每個(gè)取樣間隔的儲(chǔ)藏試驗(yàn)樣品中烯啶蟲胺的降解率均小于30%，表明在儲(chǔ)藏溫度低于-18 ℃、儲(chǔ)藏時(shí)間為337 d的試驗(yàn)期間，烯啶蟲胺在枸杞鮮果、枸杞干果基質(zhì)中均比較穩(wěn)定。

3 結(jié)論

烯啶蟲胺在枸杞上的平均回收率為73.1%～86.1%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.6%～6.7%，方法定量限為0.01 mg·kg-1，表明該方法的回收率和精密度能滿足枸杞中烯啶蟲胺的測(cè)定。在-18 ℃、儲(chǔ)藏時(shí)間為337 d的試驗(yàn)期間，烯啶蟲胺在枸杞基質(zhì)中比較穩(wěn)定。本方法的建立可用于枸杞中烯啶蟲胺的檢測(cè)，也為其他農(nóng)作物中烯啶蟲胺的殘留檢測(cè)提供參考依據(jù)。

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責(zé)任編輯：周慧