不同鉀肥對(duì)烤煙葉片鉀吸收規(guī)律的影響

盧平 曾彥清 馬揚(yáng)揚(yáng) 黃鶴鳴 胡興川 陳思原 吳志高

摘要：為探究在水肥一體化技術(shù)下追施不同鉀肥對(duì)烤煙葉片鉀吸收規(guī)律的影響，為烤煙質(zhì)量調(diào)控提供參考。以云煙99為研究對(duì)象，設(shè)置不同鉀肥為試驗(yàn)因素，以當(dāng)?shù)爻Ｓ免浄剩蛩徕洠┳鳛閷?duì)照（CK），設(shè)置磷酸二氫鉀（T1）、焦磷酸鉀（T2）、黃腐酸鉀（T3）3個(gè)鉀肥處理，研究不同處理對(duì)烤煙生育期葉片鉀含量、葉片鉀積累量與積累速率、鉀通道基因表達(dá)量及烤后煙常規(guī)化學(xué)成分的影響。結(jié)果表明，與移栽后30 d相比，在烤煙移栽后90 d，CK、T1、T2、T3處理葉片鉀含量分別降低了60.19%、52.75%、56.31%、48.54%，降低幅度表現(xiàn)為CK>T2>T1>T3。在烤煙移栽后45～60、75～90 d，T3處理烤煙葉片鉀的積累量、積累速率高于其他處理。在烤煙移栽后50 d，T1處理NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量為CK處理的5.15倍。在烤煙移栽后65 d，T1、T3處理的NtHAK基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的4.27、3.77倍，T3處理NtNHX2基因的相對(duì)表達(dá)量為CK處理的3.46倍。在烤煙移栽后90 d，T3處理NtKC1基因的相對(duì)表達(dá)量為CK處理的7.98倍。在T3處理下，烤后煙上、中部葉鉀含量分別較CK處理提高了10.00%、33.33%，烤后煙中部葉鉀氯比較CK處理提高了107.41%。在水肥一體化技術(shù)下追施黃腐酸鉀可以顯著降低烤煙生育后期葉片鉀的流失量，提高葉片鉀的積累量及積累速率，誘導(dǎo)NtHAK、NtNHX2基因表達(dá)，并提高烤后煙中上部葉鉀含量、中部葉鉀氯比。

關(guān)鍵詞：水肥一體化技術(shù)；鉀肥；吸收；鉀通道基因相對(duì)表達(dá)量

中圖分類(lèi)號(hào)：S572.06? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）08-0080-06

收稿日期：2023-06-08

基金項(xiàng)目：福建中煙工業(yè)有限責(zé)任公司科技計(jì)劃（編號(hào)：2021350000340469）。

作者簡(jiǎn)介：盧 平（1972—），男，福建福州人，農(nóng)藝師，主要從事煙草原料學(xué)研究。E-mail：331222069@qq.com。

通信作者：吳志高，農(nóng)藝師，主要從事煙草生產(chǎn)和管理研究。E-mail：84848383@qq.com。

鉀離子是植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中必需的大量元素之一，其含量約占植物干物質(zhì)量的0.3%～5.0%，植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程和生理代謝過(guò)程的多個(gè)環(huán)節(jié)均有鉀離子的參與和調(diào)控［1］。鉀離子對(duì)煙草品質(zhì)有重要影響，它不僅能改善煙葉的燃燒性、降低焦油含量，并且顯著影響了烤后煙葉的可用性［2］。在低鉀脅迫下，煙堿含量增加，煙葉身份過(guò)厚，細(xì)胞間隙增大，煙株矮小且生長(zhǎng)緩慢，葉尖、葉緣有雜色斑點(diǎn)，嚴(yán)重時(shí)甚至導(dǎo)致煙株死亡［3-4］。王英鋒等的研究結(jié)果表明，鈣濃度為5 mmol/L的水培條件最大限度緩解了低鉀脅迫造成的煙株生長(zhǎng)緩慢及鉀吸收抑制現(xiàn)象［5］。巫彬芳研究證實(shí)，滴灌施肥可以大幅提高煙葉鉀含量［6］，這與席奇亮的研究結(jié)果［7］一致。江文林的研究發(fā)現(xiàn)，環(huán)割、斷根處理及運(yùn)用降堿提鉀制劑、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等方式均達(dá)到了提升煙葉鉀含量、改善煙葉品質(zhì)的效果［8］。胡瓏瀚通過(guò)噴施不同葉面肥和分段式增施鉀肥的方式，也達(dá)到了煙葉提鉀的效果［9］。

目前，一般認(rèn)為植物對(duì)鉀離子的吸收有2套機(jī)制，即高鉀濃度下的低親和性鉀吸收機(jī)制及低鉀濃度下的高親和性鉀吸收機(jī)制［10］。高親和性鉀吸收為逆濃度梯度運(yùn)輸?shù)闹鲃?dòng)吸收過(guò)程，一般發(fā)生在外界鉀離子濃度為1～200 μmol/L時(shí)，需通過(guò)細(xì)胞質(zhì)膜上的載體協(xié)助完成，其載體被稱(chēng)為“離子泵”，低親和性鉀吸收是順濃度梯度運(yùn)輸?shù)谋粍?dòng)吸收過(guò)程，主要發(fā)生在外界鉀離子濃度為1～10 mmol/L時(shí)，其運(yùn)輸通道被稱(chēng)為“離子通道”［10-12］。植物吸收鉀離子的過(guò)程需要多種蛋白質(zhì)參與，從分子水平上看，KUP/HAK/KT、HKT和CPA家族的鉀轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白是鉀離子主動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程的主要參與者，而Shaker、TPK、Kir-like家族的鉀離子通道蛋白主要參與鉀離子的被動(dòng)運(yùn)輸過(guò)程［13-14］。

Shaker家族是在煙草鉀吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)中研究最早的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，目前已報(bào)道的煙草Shaker鉀通道基因共有12個(gè)，分別為圓錐煙草的NpKT1，普通煙草的NKT1、NKT2、NtKC1、NTORK1、NKT3、NKT4、NKT5、NtKAT3、NtSKOR，林煙草的NKT6和黃花煙草的NKC1［15-23］。其中，NKT1、NKT2、NtKC1為內(nèi)向整流鉀通道基因，與擬南芥的鉀通道基因AKT1、AKT2、AtKC1同源，NTORK1為外向整流鉀通道基因，與擬南芥的鉀通道Group V同源。有研究發(fā)現(xiàn)，高濃度水楊酸和低濃度萘乙酸可以誘導(dǎo)NTORK1表達(dá)，從而促進(jìn)煙草根系鉀離子外流。NKT3、NKT5和擬南芥AtKC1基因同源［16-17，19］。NKT4主要在煙草的根部表達(dá)，與煙草的低鉀、干旱脅迫有關(guān)［18］。NtKAT3基因在煙草的根、莖、葉及花中均有表達(dá)，與煙草的低鉀、高鹽脅迫有關(guān)［20］。與NTORK1一樣，NtSKOR也為外向整流鉀通道基因，可能在調(diào)節(jié)煙草的低鉀、高鹽、干旱、低溫等非生物脅迫中發(fā)揮了重要作用［21］。NKT6與擬南芥KAT1/KAT2同源，主要定位于細(xì)胞膜和核膜附近的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，其在林煙草的莖、腋芽、萼片、葉、花、根中均有表達(dá)，在外源施加脫落酸處理與干旱脅迫下，該基因的表達(dá)量下降，可能與林煙草的氣孔運(yùn)動(dòng)有關(guān)［22］。

目前對(duì)煙草TPK家族基因的研究較少，僅報(bào)道了NtTPK1、NtTPK2這2個(gè)TPK家族的鉀通道基因。其中NtTPK1存在于液泡膜中，對(duì)K+有高度的選擇性，在鹽脅迫、高滲透壓脅迫下，該基因的部分異構(gòu)體表達(dá)量顯著提高［23］。NtTPK2是從普通煙草紅花大金元品種中克隆得到的，在煙草根、莖、葉、花中均有表達(dá)［24］。

鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體主要分為KUP/HAK/KT、HKT和CPA這3個(gè)家族。KUP/HAK/KT家族最早在大腸桿菌中被發(fā)現(xiàn)，在植物中的研究較晚，此類(lèi)鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體廣泛存在于擬南芥、水稻、玉米等植物體內(nèi)［25-28］。2009年Guo等從黃花煙草中克隆得到了煙草中的首個(gè)鉀轉(zhuǎn)運(yùn)基因——NrHAK1，其與煙草根部的鉀吸收過(guò)程相關(guān)［29］。魯黎明等在普通煙草中克隆得到基因NtHAK1，其在煙草K326品種中過(guò)表達(dá)后，煙株的富鉀能力顯著提高［30-31］。除此之外，還有主要在葉、莖、花中表達(dá)的煙草NtPOT10基因及在林煙草盛花期各組織中表達(dá)的HAK11基因等，各基因均在煙草的脅迫響應(yīng)機(jī)制中扮演著重要角色［32-33］。HKT家族主要參與控制K+/Na+的選擇性運(yùn)輸和K+的吸收，陸玉建等將AtHKT1啟動(dòng)子導(dǎo)入到本生煙草細(xì)胞中，其β-D-葡萄糖苷酸酶（β-glucuronidase，GUS）染色結(jié)果顯示，本生煙草的葉片、根部及維管系統(tǒng)染色較深，表明這些區(qū)域AtHKT1表達(dá)量可能較高，有利于提高植物的耐鹽性［34］。

目前已有研究證實(shí)，水肥一體化技術(shù)可以促進(jìn)煙株對(duì)鉀離子的吸收［35］。本研究在水肥一體化技術(shù)的基礎(chǔ)上設(shè)計(jì)追施不同鉀肥的處理，研究不同鉀肥對(duì)烤煙葉片鉀吸收規(guī)律及鉀通道基因表達(dá)量的影響，擬篩選出對(duì)烤煙提鉀效果最佳的鉀肥品種，以提高烤煙葉片鉀含量，提升煙葉品質(zhì)，并將其應(yīng)用在大田生產(chǎn)上，指導(dǎo)大田生產(chǎn)活動(dòng)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2022年在云南省大理白族自治州祥云縣開(kāi)展，土壤類(lèi)型為黃褐土，土壤pH值為6.80，堿解氮含量為51.45 mg/kg，速效磷含量為9.67 mg/kg，速效鉀含量為92.00 mg/kg，氯含量為66.03 mg/kg，有機(jī)質(zhì)含量為11.35 g/kg。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選用當(dāng)?shù)刂髟云贩N云煙99作為供試材料。各處理均在移栽前1周每666.67 m2施入29 kg復(fù)合肥，復(fù)合肥選用當(dāng)?shù)責(zé)煵輰?zhuān)用肥，N、P2O5、K2O的施用比例為12 ∶10 ∶25，采用水肥一體化技術(shù)追肥和灌水。根據(jù)鉀肥品種不同，試驗(yàn)共設(shè)置4個(gè)處理，其中CK追施當(dāng)?shù)爻Ｓ免浄势贩N硫酸鉀，T1處理追施磷酸二氫鉀，T2處理追施焦磷酸鉀，T3處理追施黃腐酸鉀。追肥時(shí)，為了保證各處理在整個(gè)生育期施入的N、P、K總量相同，在移栽后30、45 d，T1、T2、T3處理使用自制液體專(zhuān)用肥。每666.67 m2的具體追肥方案見(jiàn)表1。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目及方法

1.3.1 烤煙生育期葉片鉀含量的測(cè)定 在烤煙移栽后30、45、60、75、90 d，隨機(jī)選取各處理烤煙各3株，分別取上、中、下3個(gè)葉位的新鮮葉片3張，每次采樣時(shí)，每株采摘相同葉位的鮮葉片，鮮葉片在105 ℃殺青30 min后轉(zhuǎn)于60 ℃烘干至恒重，研磨后過(guò)0.25 mm（60目）篩網(wǎng)，用質(zhì)量分?jǐn)?shù)4%的鹽酸浸提-火焰光度計(jì)法測(cè)定鉀含量［36］。

1.3.2 烤煙葉片鉀積累量及積累速率的測(cè)定 分別計(jì)算在烤煙移栽后30～45、45～60、60～75、75～90 d烤煙葉片鉀的積累量及積累速率，其中，鉀離子積累量=相鄰2次取樣時(shí)間間隔鉀離子含量之差，鉀離子積累速率=鉀離子積累量/相鄰2次取樣時(shí)間間隔。

1.3.3 鉀通道基因相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定 在煙葉移栽后50、65、90 d，各個(gè)處理選取具有代表性的煙株３株，每株選取自下而上第3、10、15葉位的3 g葉片并混合，在-80 ℃超低溫條件下保存，用熒光定量PCR法測(cè)定鉀通道基因的相對(duì)表達(dá)量。

1.3.4 烤后煙常規(guī)化學(xué)成分的測(cè)定 分別選取各處理上、中部葉烤后樣1 kg，用近紅外法檢測(cè)葉片的常規(guī)化學(xué)成分含量。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

數(shù)據(jù)用Excel 2013、SPSS 26.0進(jìn)行處理分析，繪圖用Excel 2013。

2 結(jié)果與分析

2.1 追施不同鉀肥對(duì)烤煙生育期葉片鉀含量的影響

由圖1可知，在烤煙移栽后45 d，T3處理葉片鉀含量顯著低于CK處理；施入鉀肥后，在烤煙移栽后的60、75 d，各處理葉片鉀含量無(wú)顯著差異；在烤煙移栽后的90 d，T1、T3處理烤煙葉片鉀含量顯著高于CK處理；與移栽后30 d相比，在烤煙移栽后90 d，各處理烤煙葉片鉀含量分別降低了60.19%、52.75%、56.31%和48.54%，其中T1、T3處理葉片鉀的損失量顯著低于CK處理。上述結(jié)果表明，追施磷酸二氫鉀、黃腐酸鉀顯著降低了烤煙葉片鉀的損失量。

2.2 追施不同鉀肥對(duì)烤煙生育期葉片鉀積累量及積累速率的影響

由圖2可知，葉片鉀積累速率的變化規(guī)律與葉片鉀積累量的變化規(guī)律一致。在烤煙移栽后 45～60 d，各處理烤煙葉片中鉀的積累量及積累速率均達(dá)到最低值，在這一時(shí)期各處理烤煙葉片中鉀的積累量及積累速率表現(xiàn)為T(mén)3>T2>CK>T1；T1、T3處理烤煙葉片中鉀的積累量及積累速率在烤煙移栽后75～90 d達(dá)到高峰，CK、T2處理烤煙葉片中鉀的積累量及積累速率在烤煙移栽后60～75 d達(dá)到高峰。因此可見(jiàn)，追施黃腐酸鉀可能促進(jìn)了烤煙移栽后45～60、75～90 d葉片中鉀的積累量及積累速率的提高，從而促進(jìn)了烤煙葉片對(duì)鉀離子的吸收。

2.3 追施不同鉀肥對(duì)烤煙葉片鉀通道基因表達(dá)量的影響

追施不同鉀肥對(duì)烤煙葉片鉀通道基因表達(dá)量的影響見(jiàn)圖3至圖6。NtHAK基因是KUP/HAK/KT

家族中調(diào)節(jié)鉀素吸收的鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白基因。由圖3可知，在烤煙移栽后的65 d，T1、T2、T3處理NtHAK基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，分別為CK處理的4.27、2.25、3.77倍，表明在水肥一體化技術(shù)下，追施不同鉀肥均促進(jìn)了烤煙移栽后65 d NtHAK基因的表達(dá)，其中磷酸二氫鉀、黃腐酸鉀的效果顯著優(yōu)于焦磷酸鉀。

CPKs基因在植物中廣泛存在，已有研究證實(shí)，CPKs家族的NtCPK4、NtCPK5基因?yàn)殁}依賴(lài)型的蛋白激酶基因［37］。由圖4可知，在烤煙移栽后50 d，T1、T2、T3處理的NtCPK基因相對(duì)表達(dá)量顯著低于CK處理，但在烤煙移栽后65、90 d，T1、T2處理葉片NtCPK基因相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，在移栽后65 d分別為CK處理的1.92、1.73倍，在移栽后90 d分別為CK處理的2.15、1.77倍。這表明水肥一體化技術(shù)下追施不同鉀肥均促進(jìn)了烤煙移栽后65、90 d NtCPK基因的表達(dá)。

NHX常作為抗鹽方面的基因被研究，但相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，該基因也可以促進(jìn)植物大量吸收、積累鉀離子［38］。由圖5可知，在烤煙移栽后50 d，T1處理NtNHX2基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，為CK處理的1.69倍；在烤煙移栽后65 d， T1、 T3處理NtNHX2基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，

分別為CK處理的1.67、3.46倍。上述結(jié)果表明，在水肥一體化技術(shù)下追施的磷酸二氫鉀、黃腐酸鉀誘導(dǎo)了烤煙移栽后65 d葉片中NtNHX2基因的表達(dá)，對(duì)烤煙葉片中鉀的積累產(chǎn)生有利影響。

NtKC1基因是Shaker家族的一種內(nèi)向整流型鉀離子通道基因。由圖6可知，在烤煙移栽后的 50 d，T1、T2處理烤煙中NtKC1基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，分別為CK處理的5.15、3.09倍；在烤煙移栽后的65 d，T3處理烤煙中NtKC1基因的相對(duì)表達(dá)量為CK處理的2.56倍，顯著高于CK處理；在烤煙移栽后的90 d，T2、T3處理烤煙中NtKC1基因的相對(duì)表達(dá)量顯著高于CK處理，分別為CK處理的7.98、2.15倍。上述結(jié)果表明，在水肥

一體化技術(shù)下追施黃腐酸鉀促進(jìn)了烤煙移栽后65、90 d NtKC1基因的表達(dá)，追施焦磷酸鉀促進(jìn)了烤煙移栽后90 d NtKC1基因的表達(dá)，對(duì)烤煙葉片鉀的積累產(chǎn)生有利影響。

2.4 追施不同鉀肥對(duì)烤后煙常規(guī)化學(xué)成分的影響

由表2可知，追施不同鉀肥后，各處理烤煙各葉位的化學(xué)成分含量均表現(xiàn)為總植物堿含量偏低、兩糖含量適宜、 總氮含量為最適范圍。在T1、T3處理下，上部烤煙葉片中的鉀含量分別較CK高6.00%、10.00%，T1、T2、T3處理烤煙中部葉的鉀含量分別較CK高25.49%、20.59%、33.33%；T2處理烤煙上部葉的氯含量較CK低20.00%，T2、T3處理烤煙中部葉的氯含量分別較CK低21.43%、35.71%；T2處理烤煙上部葉的鉀氯比較CK高25.00%，T1、T2、T3處理烤煙中部葉鉀氯比分別較CK高3.29%、53.50%、107.41%。除T2處理上部葉外，與CK處理相比，追施不同鉀肥均提高了烤后煙上、中部葉的鉀含量，效果表現(xiàn)為黃腐酸鉀>磷酸二氫鉀>焦磷酸鉀，追施不同鉀肥均提高了烤后煙中部葉的鉀氯比，效果表現(xiàn)為黃腐酸鉀>焦磷酸鉀>磷酸二氫鉀。

3 討論與結(jié)論

鉀離子是煙草生長(zhǎng)及品質(zhì)形成的關(guān)鍵物質(zhì)。本研究在水肥一體化技術(shù)下追施不同鉀肥，研究烤煙生育期葉片鉀離子的變化規(guī)律，鉀離子的積累規(guī)律以及鉀通道基因相對(duì)表達(dá)量的變化規(guī)律，并檢測(cè)了烤后煙的常規(guī)化學(xué)成分。研究結(jié)果表明，追施磷酸二氫鉀和黃腐酸鉀可以顯著降低烤煙生長(zhǎng)發(fā)育期間葉片鉀的損失量，與移栽后30 d相比，在烤煙移栽后90 d，CK、T1、T2和T3處理葉片鉀含量分別降低了60.19%、52.75%、56.31%和48.54%，降低幅度表現(xiàn)為CK>T2>T1>T3；在烤煙移栽后45～60 d，各處理葉片鉀的積累量及積累速率均達(dá)到最低峰，在這一時(shí)期T3處理鉀積累量及積累速率明顯高于其他處理，在烤煙移栽75 d后，CK、T2處理葉片鉀積累量及積累速率開(kāi)始下降，但T1、T3處理仍保持上升趨勢(shì)，且T3處理升高更為明顯，追施黃腐酸鉀可能提高了烤煙移栽后45～60、75～90 d葉片鉀的積累量及積累速率。

對(duì)鉀通道基因表達(dá)量的研究結(jié)果顯示，追施不同鉀肥在烤煙移栽后的50、65、90 d均對(duì)烤煙葉片鉀通道基因表達(dá)量產(chǎn)生了不同程度的影響，其中T1處理在烤煙移栽后50 d NtNHX2基因和NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的1.69、5.15倍，在烤煙移栽后65 d，NtHAK、NtCPK、NtNHX2基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的4.27、1.92、1.67倍，在移栽后90 d，NtCPK基因相對(duì)表達(dá)量為CK處理的2.15倍；T2處理在烤煙移栽后50 d，NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量為CK處理的3.09倍，在烤煙移栽后65 d，NtHAK、NtCPK基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的2.25、1.73倍，在烤煙移栽后90 d NtCPK、NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的1.77、7.98倍；T3處理在烤煙移栽后65 d NtHAK、NtNHX2和NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量分別為CK處理的3.77、3.46、2.56倍，在烤煙移栽后90 d NtKC1基因相對(duì)表達(dá)量為CK處理的2.15倍。其中NtHAK、NtNHX2基因主要在移栽后65 d起作用，NtCPK基因主要在移栽后65、90 d起作用，NtKC1基因主要在移栽后50、90 d起作用。

對(duì)烤后煙常規(guī)化學(xué)成分的研究結(jié)果顯示，除T2處理上部葉外，與CK處理相比，追施不同鉀肥均提高了烤后煙上、中部葉的鉀含量，其中追施黃腐酸鉀提鉀效果最佳，烤后煙上、中部葉的鉀含量分別較CK處理提高了10.00%、33.33%，追施不同鉀肥均提高了烤后煙中部葉的鉀氯比，其中T3處理烤后煙中部葉鉀氯比較CK處理提高了107.41%。

參考文獻(xiàn)：

［1］夏 穎，姜存?zhèn)}，陳 防，等. 棉花鉀營(yíng)養(yǎng)與鉀肥施用的研究進(jìn)展［J］. 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，29（5）：658-663.

［2］王 勇，李廷軒，陳光登，等. 不同鉀基因型煙草鉀吸收和生理生化特性研究［J］. 中國(guó)煙草科學(xué)，2017，38（5）：56-61.

［3］李榮春，李佛琳，徐瓊?cè)A. 鉀對(duì)烤煙葉片解剖結(jié)構(gòu)的效應(yīng)及其品種差異［J］. 中國(guó)煙草科學(xué)，2001（2）：41-43.

［4］譚 軍，蔣美紅，李卓璘，等. 鉀素對(duì)烤煙產(chǎn)質(zhì)量影響及提鉀措施的研究進(jìn)展［J］. 安徽農(nóng)學(xué)通報(bào)，2013，19（6）：44-47.

［5］王英鋒，徐高強(qiáng)，代卓毅，等. 低鉀脅迫下不同鈣濃度對(duì)煙草鉀吸收的影響［J］. 中國(guó)煙草科學(xué)，2021，42（2）：15-21.

［6］巫彬芳. 滴灌施用鉀肥對(duì)煙草生長(zhǎng)和品質(zhì)的影響［D］. 廣州：華南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2017.

［7］席奇亮. 基于水肥一體化技術(shù)的烤煙增產(chǎn)提質(zhì)效應(yīng)分析［D］. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.

［8］江文林. 烤煙中上部葉降堿提鉀技術(shù)及其生理機(jī)制［D］. 福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2008.

［9］胡瓏瀚. 武隆烤煙鉀素及煙堿變化規(guī)律與提鉀降堿技術(shù)的研究［D］. 福州：福建農(nóng)林大學(xué)，2017.

［10］Epstein E，Rains D W，Elzam O E. Resolution of dual mechanisms of potassium absorption by barley roots［J］. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，1963，49（5）：684-692.

［11］van Kleeff P J M，Gao J，Mol S，et al. The Arabidopsis GORK K+-channel is phosphorylated by calcium-dependent protein kinase 21（CPK21），which in turn is activated by 14-3-3 proteins［J］. Plant Physiology and Biochemistry，2018，125：219-231.

［12］湯 利，施衛(wèi)明，王校常. 植物鉀吸收轉(zhuǎn)運(yùn)基因的克隆與作物遺傳改良［J］. 植物營(yíng)養(yǎng)與肥料學(xué)報(bào)，2001，7（4）：467-473.

［13］Gambale F，Uozumi N. Properties of shaker-type potassium channels in higher plants［J］. The Journal of Membrane Biology，2006，210（1）：1-19.

［14］Lebaudy A，Véry A A，Sentenac H. K+channel activity in plants：genes，regulations and functions［J］. FEBS Letters，2007，581（12）：2357-2366.

［15］王 倩，劉好寶. 煙草重要基因篇：2.煙草鉀吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因［J］. 中國(guó)煙草科學(xué)，2014，35（2）：139-142.

［16］Sano T，Becker D，Ivashikina N，et al. Plant cells must pass a K+threshold to re-enter the cell cycle［J］.The Plant Journal，2007，50（3）：401-413.

［17］Liu H B. Cloning and expression analysis of potassium channel gene NKT3 from Nicotiana tabacum［J］. African Journal of Biotechnology，2012，11（48）：10824-10830.

［18］曲平治，劉貫山，劉好寶，等. 普通煙草K+通道基因NKT4的克隆、序列和表達(dá)分析［J］. 植物遺傳資源學(xué)報(bào)，2009，10（3）：354-359.

［19］司叢叢，劉貫山，劉好寶，等. 煙草鉀離子通道基因NKT5的克隆和序列分析［J］. 中國(guó)煙草科學(xué)，2010，31（4）：8-13.

［20］黃路平，劉 侖，魯黎明，等. 煙草NtKAT3基因克隆、序列和表達(dá)分析［J］. 浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2017，29（7）：1057-1063.

［21］卓 維，陳 倩，楊尚諭，等. 煙草K+通道NtSKOR基因的克隆及表達(dá)分析［J］. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2018，33（5）：99-105.

［22］靳義榮，宋毓峰，白 巖，等. 林煙草鉀離子通道基因NKT6的克隆與表達(dá)定位分析［J］. 作物學(xué)報(bào)，2013，39（9）：1602-1611.

［23］Hamamoto S，Marui J，Matsuoka K，et al. Characterization of a tobacco TPK-type K+channel as a novel tonoplast K+channel using yeast tonoplasts［J］. The Journal of Biological Chemistry，2008，283 （4）：1911-1920.

［24］閆亞飛，王根洪，程廷才，等. 煙草鉀離子通道基因NtTPK2的克隆及序列分析［J/OL］. 中國(guó)科技論文在線，（2012-03-07）［2023-05-08］. http：//www.paper.edu.cn/releasepaper/content/201203-247.

［25］Sato Y，Nanatani K，Hamamoto S，et al. Defining membrane spanning domains and crucial membrane-localized acidic amino acid residues for K+transport of a Kup/HAK/KT-type Escherichia coli potassium transporter［J］. Journal of Biochemistry，2014，155（5）：315-323.

［26］Mser P，Thomine S，Schroeder J I，et al. Phylogenetic relationships within cation transporter families of Arabidopsis［J］. Plant Physiology，2001，126（4）：1646-1667.

［27］Yang Z F，Gao Q S，Sun C S，et al. Molecular evolution and functional divergence of HAK potassium transporter gene family in rice （Oryza sativa L.）［J］. Journal of Genetics and Genomics，2009，36（3）：161-172.

［28］Zhang Z B，Zhang J W，Chen Y J，et al. Genome-wide analysis and identification of HAK potassium transporter gene family in maize （Zea mays L.）［J］. Molecular Biology Reports，2012，39（8）：8465-8473.

［29］Guo Z K，Yang Q，Wan X Q，et al. Functional characterization of a potassium transporter gene NrHAK1 in Nicotiana rustica［J］. Journal of Zhejiang University Science B，2008，9（12）：944-952.

［30］魯黎明，楊鐵釗. 煙草鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體基因NtHAK1的克隆及表達(dá)模式分析［J］. 核農(nóng)學(xué)報(bào)，2011，25（3）：469-476.

［31］譚 穎，秦利君，趙 丹，等. 共轉(zhuǎn)化法獲得HAK1基因高表達(dá)煙草提高植株鉀吸收能力［J］. 植物生理學(xué)報(bào)，2013，49（7）：689-699.

［32］魯黎明. 煙草鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體基因TPK1的電子克隆及生物信息學(xué)分析［J］. 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)，2011，44（1）：28-35.

［33］宋毓峰. 林煙草鉀轉(zhuǎn)運(yùn)體基因NsHAK11的克隆與功能分析［D］. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院，2014.

［34］陸玉建，李 震，張弘揚(yáng)，等. AtHKT1啟動(dòng)子轉(zhuǎn)化本生煙草的初步研究［J］. 華北農(nóng)學(xué)報(bào)，2018，33（增刊1）：10-16.

［35］馬揚(yáng)揚(yáng)，陳思原，吳志高，等. 水肥一體化技術(shù)對(duì)烤煙生育期鉀氯變化的影響［J］. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2023，51（10）：1-11.

［36］王瑞新. 煙草化學(xué)［M］. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2003.

［37］張 美. 煙草鈣依賴(lài)型蛋白激酶生化及表達(dá)分析［D］. 武漢：武漢大學(xué)，2005.

［38］武恒燕. 富鉀基因型烤煙的篩選及NHX基因的生物信息學(xué)變異分析［D］. 鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.