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    水產(chǎn)品中常用獸藥殘留危害及檢測(cè)方法

    2024-05-30 16:43:44楊淑芬
    甘肅畜牧獸醫(yī) 2024年1期
    關(guān)鍵詞:呋喃質(zhì)譜法水產(chǎn)品

    楊淑芬

    (邵陽(yáng)市畜牧水產(chǎn)事務(wù)中心,湖南 邵陽(yáng) 422000)

    隨著人們生活水平的提高,其對(duì)食品的關(guān)注點(diǎn)從“吃得飽”變成了“吃得安全”。水產(chǎn)品因富含蛋白質(zhì)、脂肪酸、維生素和礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),逐漸成為人們喜愛的優(yōu)質(zhì)食品。近年來,隨著我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的高質(zhì)量發(fā)展,水產(chǎn)養(yǎng)殖品種日益豐富、養(yǎng)殖結(jié)構(gòu)逐漸合理,為養(yǎng)殖業(yè)和農(nóng)村經(jīng)濟(jì)發(fā)展提供了重要支撐。在養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的同時(shí),動(dòng)物性食品安全問題也日益突出,水體中污染物累積以及獸藥的不合理使用,導(dǎo)致養(yǎng)殖環(huán)境和水產(chǎn)品質(zhì)量安全問題成為社會(huì)公眾關(guān)注的熱點(diǎn)和焦點(diǎn)之一。

    1 水產(chǎn)品生產(chǎn)常用獸藥

    1.1 孔雀石綠

    孔雀石綠是一種人工合成的三苯甲烷類抗菌藥物,可以有效殺滅水中的真菌、細(xì)菌和寄生蟲,對(duì)寄生蟲病、水霉病和小瓜蟲病等具有良好的治療效果。因其成本低廉、抗菌效果好、能提高水產(chǎn)品的存活率,在水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)中被廣泛使用[1]。

    1.2 硝基呋喃類藥物

    硝基呋喃類藥物是一種廣譜抗生素,可以有效抵御革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、真菌以及原蟲的侵害[2],具有較高的抗菌活性、良好的藥物穩(wěn)定性、可靠的治療效果以及較低的藥物消耗量,在養(yǎng)殖業(yè)中被用來防控各種動(dòng)物疾病[3]。

    1.3 氯霉素

    氯霉素是一種人工合成的抗生素藥物,對(duì)殺滅革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌具有較好的效果,還能抑制細(xì)菌生長(zhǎng),具有成本低、抗菌效果好等優(yōu)點(diǎn),可以有效預(yù)防和治療水產(chǎn)養(yǎng)殖中的疾病。此外,氯霉素還具有抗病毒和抗寄生蟲的功效,可以全面提高水產(chǎn)養(yǎng)殖效益[4]。

    1.4 地西泮

    地西泮,是一種苯二氮卓類藥物,又叫安定,具有鎮(zhèn)定、催眠、抗驚厥、抗癲癇等作用,運(yùn)輸中使用地西泮可以降低水產(chǎn)品新陳代謝,提高水產(chǎn)品鮮活度[5]。

    1.5 氟喹諾酮

    氟喹諾酮是一類人工合成的廣譜抗菌藥物,能夠有效抑制革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌及支原體、衣原體和螺旋體,具有抗菌活性強(qiáng)、代謝活性高、價(jià)格低廉等特點(diǎn),在水產(chǎn)養(yǎng)殖中用來預(yù)防和治療各種動(dòng)物疾病[6]。

    2 獸藥殘留的危害

    2.1 危害人體健康

    在水產(chǎn)養(yǎng)殖過程中,養(yǎng)殖戶為追求經(jīng)濟(jì)效益和治療效果,濫用和不按休眠期使用藥物現(xiàn)象存在,導(dǎo)致水產(chǎn)品中出現(xiàn)獸藥殘留超標(biāo)的情況。人們長(zhǎng)期攝入帶有某些特定獸藥殘留的食品,會(huì)嚴(yán)重危害身體健康,例如不同程度的毒副作用、產(chǎn)生耐藥性、腸道菌群失調(diào)、免疫系統(tǒng)紊亂等[7]。

    2.2 破壞生態(tài)環(huán)境

    不規(guī)范超標(biāo)使用獸藥會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物體內(nèi)藥物殘留,動(dòng)物排泄物中存在相應(yīng)的藥物殘留,會(huì)影響附近的水源、土壤和空氣,導(dǎo)致生態(tài)環(huán)境失調(diào)。水體中的藥物殘留會(huì)產(chǎn)生抗性菌株,使水體中微生物數(shù)量增加,藥物殘留也在食物鏈中聚集,最終影響人體健康。

    2.3 影響產(chǎn)業(yè)發(fā)展

    養(yǎng)殖戶不規(guī)范使用獸藥會(huì)制約水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,長(zhǎng)期使用抗生素藥物也使得水產(chǎn)動(dòng)物免疫力降低,產(chǎn)生耐藥性。獸藥殘留會(huì)降低水產(chǎn)品品質(zhì),導(dǎo)致市場(chǎng)銷售水產(chǎn)品的數(shù)量減少、效益降低,同時(shí)影響出口量,阻礙水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展。

    3 獸藥殘留的原因

    3.1 使用不合理

    目前從事水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的主體是農(nóng)民,大多缺乏專業(yè)知識(shí),使用獸藥僅憑個(gè)人經(jīng)驗(yàn),沒有專業(yè)的獸醫(yī)進(jìn)行診斷,對(duì)獸藥殘留的危害認(rèn)識(shí)不足,法律意識(shí)淡薄[8]。我國(guó)水產(chǎn)品中藥物殘留超標(biāo)事件常有發(fā)生,一些養(yǎng)殖戶為了追求更高的經(jīng)濟(jì)效益,濫用和超劑量使用獸藥,也有無良企業(yè)在飼料中添加禁用藥品,導(dǎo)致水產(chǎn)動(dòng)物體內(nèi)藥物殘留超標(biāo)。

    3.2 水質(zhì)污染導(dǎo)致藥物殘留

    水質(zhì)對(duì)水產(chǎn)養(yǎng)殖至關(guān)重要,有些養(yǎng)殖場(chǎng)靠近工業(yè)園區(qū),工業(yè)生產(chǎn)中“三廢”的不合理排放導(dǎo)致許多有害物質(zhì)進(jìn)入養(yǎng)殖水源中,造成水體中重金屬、藥物殘留超標(biāo),養(yǎng)殖水質(zhì)污染間接導(dǎo)致水產(chǎn)品藥物殘留。

    4 水產(chǎn)品中獸藥殘留的檢測(cè)方法及應(yīng)用

    4.1 膠體金免疫層析法

    膠體金免疫層析法(GIGA)是一種抗體和抗原在檢測(cè)線(T線)和質(zhì)控線(C線)產(chǎn)生特異性反應(yīng),從而在膠體金反應(yīng)部位沉淀顯色的快速檢測(cè)方法。李倩等[9]采用膠體金免疫層析法對(duì)帶魚中氯霉素進(jìn)行快速檢測(cè),結(jié)果表明,通過優(yōu)化前處理方法可以檢出與液相色譜-質(zhì)譜法結(jié)果一致的陽(yáng)性樣品,檢出限達(dá)0.1 μg/kg。丘韶麟等[10]對(duì)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)的水產(chǎn)品采用膠體金免疫層析法進(jìn)行快速檢測(cè),其中孔雀石綠陽(yáng)性檢出率高于1.5%,氯霉素、硝基呋喃類代謝物陽(yáng)性檢出率均高于1.0%。宋安華等[11]對(duì)農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)在售水產(chǎn)品建立膠體金免疫法,對(duì)問題較突出的水產(chǎn)品進(jìn)行獸藥殘留快速檢測(cè),其中孔雀石綠總體不合格檢出率為3.69%,氯霉素總體不合格檢出率為1.67%,硝基呋喃類代謝物不合格檢出率為0.94%。該方法適用于大批量樣品快速篩查和市場(chǎng)抽查檢測(cè),操作簡(jiǎn)單易學(xué)、耗時(shí)短、成本較低且靈敏度高,目前廣泛應(yīng)用于動(dòng)物獸藥殘留的快速篩查[12-13]。

    4.2 酶聯(lián)免疫吸附法

    酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)是在免疫學(xué)反應(yīng)的基礎(chǔ)上,將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的高效催化作用相結(jié)合的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。在檢測(cè)過程中根據(jù)酶標(biāo)孔中顏色的變化及OD值對(duì)樣品進(jìn)行定性或定量檢測(cè)[14]。該方法可用于大批量初篩,具備檢測(cè)效率高、成本低、靈敏度較高和特異性好等優(yōu)點(diǎn)[15]。何萬義等[16]采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定水產(chǎn)品中孔雀石綠藥物殘留,結(jié)果顯示,在0~4.05 μg/L的6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍內(nèi),線性相關(guān)系數(shù)達(dá)0.998以上,樣品加標(biāo)回收率為88.6%~106.6%,樣品和樣品加標(biāo)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于10%。區(qū)兌鵬等[17]對(duì)水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物、氯霉素及氟苯尼考6種藥物殘留進(jìn)行快速檢測(cè),結(jié)果表明,6種藥物線性系數(shù)均大于0.995,樣品加標(biāo)回收率為60%~144%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)均在0~7.5%之間。林品言等[18]應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)水產(chǎn)品中磺胺類藥物殘留進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,在0.5~40.5 μg/L范圍內(nèi),相關(guān)系數(shù)達(dá)0.998以上,三種添加濃度(0.5 μg/kg、1.0 μg/kg、1.5μg/kg)平均回收率為87.5%~104.2%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)小于4.32%。影響酶聯(lián)免疫法檢測(cè)的因素較多,實(shí)驗(yàn)中容易出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。因此,目前酶聯(lián)免疫吸附法只能進(jìn)行樣品初篩,陽(yáng)性樣品必須采用高效液相色譜法或液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行復(fù)核,才能得到更精準(zhǔn)的檢測(cè)結(jié)果。

    4.3 高效液相色譜法

    高效液相色譜法(HPLC)是檢測(cè)水產(chǎn)品中藥物殘留最常見的一種方法。隨著技術(shù)的進(jìn)步,高效液相色譜儀已經(jīng)成為各實(shí)驗(yàn)室的必備儀器,特別是在市縣級(jí)檢測(cè)機(jī)構(gòu),結(jié)合紫外檢測(cè)器,能夠準(zhǔn)確地檢測(cè)處水產(chǎn)品中的獸藥殘留。葛寶坤等[19]采用高效液相色譜-紫外法(HPLC-UV)檢測(cè)魚和蝦中呋喃它定、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃唑酮藥物殘留量,在5~100 μg/kg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,檢出限分別為5 μg/kg、2 μg/kg、3 μg/kg和2 μg/kg。王媛等[20]研究發(fā)現(xiàn),將水產(chǎn)品進(jìn)行衍生前處理后,經(jīng)高效液相-紫外檢測(cè)器測(cè)定,在5.0~500 μg/L質(zhì)量濃度范圍內(nèi)存在良好的線性關(guān)系,定量限均能達(dá)到1.0 μg/kg。王明輝等[21]采用高效液相色譜法同時(shí)測(cè)定貝類中的多西環(huán)素和金霉素,研究表明在200~5 000 ng/mL范圍內(nèi),線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)均大于0.99。液相色譜法發(fā)展雖比較成熟,但是該方法對(duì)樣品前處理要求較高,靈敏度和分離度較低,還需要配合液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行驗(yàn)證。

    4.4 高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

    隨著技術(shù)的進(jìn)步,高效液相色譜-質(zhì)譜法(HPLC-MS/MS)已被廣泛應(yīng)用于測(cè)定水產(chǎn)品中的獸藥殘留,并被認(rèn)為是測(cè)定水產(chǎn)品中藥物殘留含量的有效手段。對(duì)比高效液相色譜,質(zhì)譜的檢測(cè)器較紫外檢測(cè)器在準(zhǔn)確定性、定量、檢測(cè)速度、檢測(cè)限等方面更具優(yōu)勢(shì)。吳剛[22]通過液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定水產(chǎn)品中AOZ、AHD和SEM藥物殘留量,結(jié)果表明,測(cè)定的3種硝基呋喃類代謝物的檢出限均為0.2 μg/kg,在10~200 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系較好。朱欣欣等[23]采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法對(duì)水產(chǎn)品中孔雀石綠和地西泮殘留量進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明孔雀石綠、地西泮在0.5~20.0 ng/mL范圍內(nèi),線性關(guān)系好,回收率為82.1%~96.1%,檢測(cè)低限為0.5 ng/mL,精密度為2.9%~7.8%。楊麗等[24]等采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定魚肉中呋喃它酮(AMOZ)、呋喃西林(SEM)、呋喃妥因(AHD)和呋喃唑酮(AOZ)4種硝基呋喃類代謝物殘留量,研究發(fā)現(xiàn),硝基呋喃代謝物在0.5~50.0 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)大于0.996,檢出限均為0.5 μg/kg,3種不同濃度添加水平(0.5 μg/kg、1.5 μg/kg、5.0 μg/kg)的回收率在70%~120%,符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定要求。劉少穎等[25]利用超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定淡水魚中喹諾酮類和氯霉素殘留含量,結(jié)果表明,在0.1~200 ng/mL濃度內(nèi)線性系數(shù)均大于0.99,定量限為0.02~0.49 μg/kg,回收率為67.7%~116.1%,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.64%~19.93%,檢出限為0.01~0.15 μg/kg。從多個(gè)學(xué)者的研究結(jié)果中可以明顯看出,HPLC-MS/MS較HPLC得到了技術(shù)上的突破,能滿足更低的檢測(cè)限,線性范圍寬,更適用于水產(chǎn)品中各種獸藥殘留的檢測(cè)分析。

    5 結(jié)語

    水產(chǎn)品的質(zhì)量安全關(guān)鍵在養(yǎng)殖環(huán)節(jié),如果在養(yǎng)殖過程中不能嚴(yán)格按規(guī)定使用獸藥,不重視獸藥殘留潛在的危害性,水產(chǎn)品的質(zhì)量安全就得不到有效保障。獸藥殘留不僅會(huì)影響水產(chǎn)品質(zhì)量,而且對(duì)人類的健康和生態(tài)環(huán)境也會(huì)造成極大威脅。因此,要加強(qiáng)水產(chǎn)品獸藥殘留檢測(cè),減少獸藥殘留超標(biāo)水產(chǎn)品流入市場(chǎng),以保證消費(fèi)者買得放心,為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的長(zhǎng)期健康發(fā)展保駕護(hù)航。

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