不同成熟度煙葉赤星病防控藥劑篩選研究

郭濤　劉亭亭　汪漢成　孫美麗

摘要 為評(píng)價(jià)不同成熟度（成熟、適熟、未熟）煙葉對(duì)煙草赤星病的感病性及殺菌劑對(duì)煙草赤星病的防控效果，測(cè)定了3種成熟度煙葉對(duì)赤星病的感病性，并分別選擇適熟煙葉及混合煙葉作為病情指數(shù)調(diào)查對(duì)象，評(píng)價(jià)了15種殺菌劑（12.50%腈菌唑ME、325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、57.60%氫氧化銅WDG、40%菌核凈WP、8%井岡霉素SL、80%波爾多液WP、50%醚菌酯WDG、10%苯醚甲環(huán)唑WDG、12%苯甲·氟酰胺SC、25%嘧菌酯SC、400 g/L氯氟醚·吡唑酯SC、10%多抗霉素WP、38%唑醚·啶酰菌WDG、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC和80%代森錳鋅WP）對(duì)煙草赤星病的田間防效。結(jié)果表明，煙草上部未熟煙葉對(duì)赤星病抗性最強(qiáng)，其次依次為中部適熟煙葉和下部成熟煙葉。15種殺菌劑對(duì)赤星病表現(xiàn)出不同的防治效果，2種調(diào)查方法的防效在325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、57.60%氫氧化銅WDG等12種藥劑處理時(shí)防效均較為一致。325 g/L苯甲·嘧菌酯SC（藥后5 d防效分別為100%和85.64%，10 d時(shí)分別為57.14%和64.92%）、12%苯甲·氟酰胺SC（82.81%和87.56%，50%和70.82%）、25%嘧菌酯SC（100%和81.75%，50%和53.93%）、38%唑醚·啶酰菌WDG（100%和89.18%，77.78%和58%）及200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC（86.74%和92.84%，92.86%和81.79%）的防效均較好；在施藥15 d時(shí)，25%嘧菌酯SC（56.46%和54.95%）和200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC（60.90%和55.95%）的防效仍較好。綜上，325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、12%苯甲·氟酰胺SC、25%嘧菌酯SC、38%唑醚·啶酰菌WDG及200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC 5種藥劑對(duì)適熟及混合煙葉煙草赤星病的防治效果較好，可用于煙草赤星病的防控。

關(guān)鍵詞 煙草赤星?。环乐涡Ч?；煙葉成熟度；抗病性

中圖分類(lèi)號(hào) S435.72文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A文章編號(hào) 0517-6611（2024）08-0123-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2024.08.028

Screening of Fungicides for the Control of Tobacco Brown Spot on Leaves at Different Maturity Levels

GUO Tao1，2， LIU Ting-ting2，3， WANG Han-cheng2 et al

（1.College of Life Science， Yangtze University， Jingzhou，Hubei? 434025;2.Guizhou Academy of Tobacco Science， Guiyang，Guizhou? 550081;3.College of Agriculture， Yangtze University， Jingzhou，Hubei? 434025）

Abstract In order to investigate the resistance of different mature leaves to tobacco brown spot， and also the efficacy of fungicides to this disease， the resistance of leaves with different maturities （mature， proper and immature） to tobacco brown spot was measured， and proper tobacco leaves and three kinds of maturity mixed tobacco leaves （mature， proper and immature） were selected as the evaluation object of disease index， and the field efficacy of 15 kinds of fungicides （12.5% Myclobutanil ME， 325 g/L Difenoconazole·Azoxystrobin SC， 57.60% Cu（OH）2 WDG， 40% Dimethachlon WP， 8% Validamycin SL， 80% Bordeaux mixture WP， 50% Kresoxim-methyl WDG， 10% Difenoconazole WDG， 12% Difenoconazole·Fluzoxamides SC， 25% Azoxystrobin SC， 400 g/L Cloflurfenazole·Pyraclostrobin SC， 10% Polyoxin WP， 38% Pyraclostrobin·Boscalid WDG， 200 g/L Pydiflumetofen·Difenoconazole SC， 80% Mancozeb WP）against tobacco brown spot were evaluated by the increase of disease index. Results showed that highest resistance to brown spot was the immature leaves at upper position， followed by the proper mature leaves in the middle， and poorest resistance was the mature leaves at down position. Fifteen kinds of fungicides showed different field efficacy on tobacco brown spot. Results of the two investigation methods were relatively consistent in the field efficacy of 12 kinds of fungicides， such as 325 g/L Difenoconazole·Azoxystrobin SC， 57.60% Cu（OH）2 WDG. 325 g/L Difenoconazole·Azoxystrobin SC （the field efficacies were 100% and 85.64% at 5 days after treatment， and 57.14% and 64.92% at 10 days after treatment）， 12% Difenoconazole·Fluzoxamides SC （82.81% and 87.56%， 50% and 70.82%）， 25% Azoxystrobin SC （100% and 81.75%， 50% and 5393%）， 38% Pyraclostrobin·Boscalid WDG （100% and 89.18%， 77.78% and 58%）， 200 g/L Pydiflumetofen·Difenoconazole SC （86.74% and 92.84%， 92.86% and 81.79%） had better field efficacies. And 25% Azoxystrobin SC （56.46% and 54.95%） and 200 g/L Pydiflumetofen·Difenoconazole SC （60.90% and 55.95%） still had good field efficacies after 15 days of application. Above all， the field efficacies of 325 g/L Difenoconazole·Azoxystrobin SC， 12% Difenoconazole·Fluzoxamides SC， 25% Azoxystrobin SC， 38% Pyraclostrobin·Boscalid WDG and 200 g/L Pydiflumetofen·Difenoconazole SC against tobacco brown spot were much better， they could be used in the control of tobacco brown spot.

Key words Tobacco brown spot;Field efficacy;Tobacco leaf maturity;Disease resistance

煙草是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)作物［1］，也是我國(guó)西南山區(qū)農(nóng)民致富的主要經(jīng)濟(jì)作物。煙草赤星病是其成熟期的主要真菌性病害，其病原菌為子囊菌門(mén)鏈格孢屬Alternaria sp.真菌。煙葉生產(chǎn)上，煙草赤星病常給煙農(nóng)造成重大損失，防治不及時(shí)損失可達(dá)60%以上［2-4］?；瘜W(xué)防治是赤星病最為經(jīng)濟(jì)有效的防治手段，生產(chǎn)上常使用的藥劑有菌核凈、代森錳鋅、多抗霉素、苯醚甲環(huán)唑等傳統(tǒng)性殺菌劑［5］，這些藥劑的多年頻繁使用，導(dǎo)致抗/耐藥性菌株頻繁出現(xiàn)，存在病原菌抗藥性風(fēng)險(xiǎn)，局地防控失敗的現(xiàn)象常有出現(xiàn)［6-8］，亟待尋找新的高效替代藥劑，加強(qiáng)藥劑的合理使用及科學(xué)輪換用藥方面的深入研究。

煙草赤星病主要發(fā)生于煙葉成熟期，常先侵染底部腳葉，再逐步向中上部葉片擴(kuò)展，成熟期有多次侵染循環(huán)［9］。煙株不同成熟度煙葉對(duì)赤星病的感病性各不相同，同一時(shí)期通常是下部葉片先成熟，感病性較弱，中部葉片其次，上部葉片感病性最強(qiáng)，煙葉越到成熟后期，其抵抗力越弱［10］。田間藥效試驗(yàn)是赤星病防控藥劑篩選的重要依據(jù)。傳統(tǒng)田間藥效試驗(yàn)常采取針對(duì)不同成熟度煙葉的混合葉片調(diào)查方法，該方法雖然是經(jīng)典的標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查方法，基本能反映藥劑對(duì)病害的整體防效，但對(duì)感病不同程度葉片的防治效果缺乏了解。同時(shí)煙農(nóng)通常會(huì)及時(shí)采收下部成熟葉片，對(duì)藥劑防治效果的調(diào)查存在影響。為此，為了更好地篩選煙草赤星病的高效防控藥劑，指導(dǎo)對(duì)不同部位葉片的精準(zhǔn)用藥，筆者選擇適熟煙葉及3種成熟度煙葉（下部成熟、中部適熟、上部未熟）的混合煙葉作為調(diào)查對(duì)象進(jìn)行病情指數(shù)調(diào)查，評(píng)價(jià)15種殺菌劑對(duì)煙草赤星病的田間防效，旨在篩選出高效防控藥劑，為煙草赤星病防控藥劑的選擇提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試煙草品種為“云煙105”，種植于貴州省威寧彝族回族苗族自治縣黑石頭鎮(zhèn)煙葉生產(chǎn)基地。

1.2 試驗(yàn)藥劑

供試藥劑種類(lèi)、來(lái)源及實(shí)際用量見(jiàn)表1。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

于煙草赤星病發(fā)生初期，選擇地勢(shì)平整，土壤質(zhì)地、肥水、耕作栽培等農(nóng)業(yè)管理措施均勻一致的地塊。設(shè)16個(gè)處理，每小區(qū)種植120株煙，用水量900 L/hm2，用背負(fù)式噴霧器正、反葉面均勻噴施，以藥液能夠均勻噴霧至小區(qū)所有植株葉片為準(zhǔn)，每種藥劑實(shí)際施藥劑量見(jiàn)表1，每處理重復(fù)3次。小區(qū)之間設(shè)有保護(hù)行，避免重噴、漏噴或影響到相鄰小區(qū)。

1.4 不同成熟度煙葉對(duì)煙草赤星病的感病性評(píng)價(jià)

隨機(jī)選擇10株感煙草赤星病的煙株，不進(jìn)行藥劑處理，自下而上在同一株同一方位選擇成熟（下部）、適熟（中部）、未熟（上部）3種成熟度煙葉分別進(jìn)行標(biāo)記，分別于0、5、10及15 d分別調(diào)查10株煙株標(biāo)記的不同成熟度煙葉的病級(jí)，通過(guò)計(jì)算病情指數(shù)增值來(lái)評(píng)價(jià)不同成熟度煙葉對(duì)赤星病的感病性。煙葉成熟度的劃分參照生產(chǎn)實(shí)踐［11-12］，通過(guò)病情指數(shù)［13］增值來(lái)評(píng)價(jià)不同成熟度煙葉對(duì)赤星病的感病性。

1.5 15種殺菌劑對(duì)煙草赤星病的田間防效評(píng)價(jià)

參照“1.4”的評(píng)價(jià)結(jié)果，分別選擇標(biāo)記的中部適熟煙葉（每處理10片）和標(biāo)記的3種成熟度的混合煙葉（每處理30片）作為調(diào)查對(duì)象，分別于0、5、10及15 d調(diào)查各藥劑處理的葉片數(shù)和各葉片的病級(jí)，計(jì)算病情指數(shù)，通過(guò)病情指數(shù)增值計(jì)算各藥劑的相對(duì)防效［14］。

病情指數(shù)增長(zhǎng)率=（施藥后病指-施藥前病指）/施藥前病指×100%

相對(duì)防效=（對(duì)照病指增長(zhǎng)率-處理病指增長(zhǎng)率）/對(duì)照病指增長(zhǎng)率×100%

1.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

使用Excel 2019進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，采用DPS 7.5軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，應(yīng)用LSD（Least Significant Difference）法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同成熟度煙葉對(duì)煙草赤星病的感病性

田間調(diào)查結(jié)果表明，下部成熟煙葉、中部適熟煙葉及上部未熟煙葉分別對(duì)煙草赤星病表現(xiàn)出不同的感病性。在第5天時(shí)，成熟、適熟及未熟煙葉的病情指數(shù)增值分別為17.78、15.56和2.22，成熟和適熟煙葉病情指數(shù)增值間不存在顯著差異，但成熟與未熟煙葉間存在顯著差異（P < 0.05）。隨著煙葉的成熟，第10天和15天時(shí)，3種成熟度煙葉病情指數(shù)增值間無(wú)顯著差異（表2）。

2.2 15種殺菌劑對(duì)煙草赤星病的田間防效

15種殺菌劑對(duì)赤星病表現(xiàn)出不同的防治效果，325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、57.60%氫氧化銅WDG、8%井岡霉素SL、80%波爾多液WP、10%苯醚甲環(huán)唑WDG、12%苯甲·氟酰胺SC、25%嘧菌酯SC、400 g/L氯氟醚·吡唑酯SC、10%多抗霉素WP、38%唑醚·啶酰菌WDG、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC及80%代森錳鋅WP 12種藥劑的防效均較為一致。325 g/L苯甲·嘧菌酯SC（2種調(diào)查方法在藥后5 d防效分別為100%和85.64%，10 d 時(shí)的防效分別為57.14%和64.92%）、12%苯甲·氟酰胺SC（82.81%和87.56%，50.00%和70.82%）、25%嘧菌酯SC（100%和81.75%，50.00%和53.93%）、38%唑醚·啶酰菌WDG（100%和89.18%，77.78%和58.00%）及200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC（86.74%和94.82%，92.86%和81.79%）的防效均較好；在施藥15 d時(shí)，25%嘧菌酯SC（56.46%和54.95%）和200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC（60.90%和55.95%）的防效仍較好。同時(shí)2種調(diào)查方法的防效在12.50%腈菌唑ME、40%菌核凈WP、50%醚菌酯WDG 3種藥劑間存在差異。

除上述5種藥劑（325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、12%苯甲·氟酰胺SC、25%嘧菌酯SC、38%唑醚·啶酰菌WDG、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC）外，基于適熟煙葉調(diào)查時(shí)防效好的藥劑還有10%苯醚甲環(huán)唑WDG、80%代森錳鋅WP、12.50%腈菌唑ME、400 g/L氯氟醚·吡唑酯SC、40%菌核凈WP，其5和10 d的防效分別為100%和44.44%、89.69%和44.44%、89.08%和35.29%、86.74%和85.71%、78.16%和58.82%；防控效果相對(duì)較差的殺菌劑有80%波爾多液WP和50%醚菌酯WDG，其5和10 d的防效分別為34.47%和17.65%、33.16%和40.00%。其中，4種殺菌劑在施用15 d后的防效仍較好，200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC、38%唑醚·啶酰菌WDG、400 g/L 氯氟醚·吡唑酯SC、25%嘧菌酯SC在施藥15 d后防效分別為60.90%、59.45%、65.79%、56.46%；其余藥劑的防效均低于50.00%。

基于混合煙葉調(diào)查時(shí)防效好的藥劑還有57.60%氫氧化銅WDG、80%代森錳鋅WP、10%苯醚甲環(huán)唑WDG和50%醚菌酯WDG，其5和10 d的防效分別為78.17%和62.68%、74.97%和58.73%、71.01%和41.78%、70.50%和41.64%；防控效果相對(duì)較差的殺菌劑有40%菌核凈WP和80%波爾多液WP，其5和10 d的防效分別為34.68%和49.32%、9.37%和16.99%。施藥后15 d，325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、25%嘧菌酯SC、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC的防效分別為63.12%、54.95%和55.95%；其余藥劑的防效均低于50.00%（表3、4，圖1）。

3 討論

田間藥效試驗(yàn)是評(píng)價(jià)藥劑防治植物病害最為有效的方法。該研究分別基于適熟煙葉和3種成熟度（成熟、適熟、未熟）煙葉的混合調(diào)查的方式進(jìn)行病情指數(shù)調(diào)查，通過(guò)病情指數(shù)客觀(guān)評(píng)價(jià)了15種殺菌劑對(duì)煙草赤星病的相對(duì)防效，篩選防效較好的高效藥劑，為煙草赤星病防控藥劑的選擇提供了科學(xué)依據(jù)。

藥劑應(yīng)用后進(jìn)行不同時(shí)間的病情指數(shù)調(diào)查，可以反映出不同藥劑持效期的長(zhǎng)短。在2種調(diào)查方法綜合分析下，該研究發(fā)現(xiàn)25%嘧菌酯SC和200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC 2種藥劑的持續(xù)期較長(zhǎng)，第15天時(shí)的防效仍可達(dá)50%；325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、57.60%氫氧化銅WDG和12%苯甲·氟酰胺SC 3種藥劑的持效期次之，可達(dá)10 d；10%多抗霉素WP藥劑的持效期較短，可達(dá)5 d。為此，在赤星病防控上，持效期短的藥劑宜間隔5 d左右施藥一次，持效期長(zhǎng)的藥劑可間隔10～15 d施藥一次。

抑制病原菌孢子萌發(fā)是病害防治的主要方式之一，具有抑制孢子萌發(fā)活性的藥劑通常表現(xiàn)出預(yù)防作用。該研究15種藥劑中7種藥劑（325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、25%嘧菌酯SC、50%醚菌酯WDG、38%唑醚·啶酰菌WDG、400 g/L氯氟醚·吡唑酯SC、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC、80%代森錳鋅WP）［15-19］對(duì)鏈格孢屬孢子的萌發(fā)具有抑制活性，對(duì)初始健康煙葉表現(xiàn)出較好的預(yù)防作用，而該試驗(yàn)在煙草赤星病發(fā)生后進(jìn)行，部分僅具有抑制孢子萌發(fā)活性的藥劑對(duì)赤星病的防治效果較弱，如50%醚菌酯WDG、80%代森錳鋅WP，持效期較短。為此，建議這類(lèi)對(duì)病害有預(yù)防作用的藥劑可在病害發(fā)生期前使用，可有效起到預(yù)防作用。

抑制病原菌菌絲生長(zhǎng)也是病害防治的主要方式之一，具有抑制菌絲生長(zhǎng)活性的藥劑通常表現(xiàn)出治療作用。該研究結(jié)果表明，15種藥劑中10種藥劑（325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、10%苯醚甲環(huán)唑WDG、57.60%氫氧化銅WDG、40%菌核凈WP、8%井岡霉素SL、25%嘧菌酯SC、12%苯甲·氟酰胺SC、400 g/L氯氟醚·吡唑酯SC、10%多抗霉素WP、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC）［16，20-24］對(duì)鏈格孢屬菌絲生長(zhǎng)具有抑制活性，對(duì)已發(fā)病煙葉表現(xiàn)出較好的治療活性，如325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、25%嘧菌酯SC、12%苯甲·氟酰胺SC、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC等，防效可達(dá)80%，持效期在10 d以上。相比而言，10%多抗霉素WP、8%井岡霉素SL在病害發(fā)生后使用的防治效果較差，其主要原因?yàn)檫@2種藥劑對(duì)病原菌菌絲生長(zhǎng)的活性較弱，而不能抑制病斑部位病菌的擴(kuò)展。

選擇抑制菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)的進(jìn)行復(fù)配，組成的復(fù)配劑通常具有更廣的抗菌譜和防控效果。該試驗(yàn)中325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC和38%唑醚·啶酰菌WDG等復(fù)配劑，均分別對(duì)植物病原菌孢子萌發(fā)和菌絲生長(zhǎng)具有抑制作用［15，18，20］，它們對(duì)煙草赤星病［4］、白粉?。?5］、煙草灰霉?。?6-27］等多種病害表現(xiàn)出較好的防控效果。這些復(fù)配劑的有效成分吡唑醚菌酯、嘧菌酯為甲氧基丙烯酸酯類(lèi)殺菌劑，它們通過(guò)阻止細(xì)胞色素b和c1間電子傳遞而抑制線(xiàn)粒體呼吸作用，從而抑制病原菌［28］；氟唑菌酰羥胺、啶酰菌胺等通過(guò)抑制蛋白質(zhì)復(fù)合體II來(lái)阻止真菌的產(chǎn)能，進(jìn)而殺死病原菌，它們與吡唑醚菌酯與嘧菌酯作用靶標(biāo)不同，復(fù)配使用能增加抗菌譜，同時(shí)可以延緩病原菌抗藥性的發(fā)展［29］。為此，煙草赤星病的防控，宜選擇作用機(jī)理不同的藥劑組成的復(fù)配劑，它們可輪換或交替使用，不僅可同時(shí)防控多種煙草病害，也可減輕病原菌的抗藥性選擇壓，還具有較高的性?xún)r(jià)比。

4 結(jié)論

煙草上部未熟煙葉對(duì)赤星病抗性最強(qiáng)，其次依次為中部適熟煙葉和下部成熟煙葉。基于適熟煙葉及混合煙葉作為病情指數(shù)調(diào)查對(duì)象的田間試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，15種殺菌劑對(duì)赤星病效果間存在顯著差異，但325 g/L苯甲·嘧菌酯SC、12%苯甲·氟酰胺SC、25%嘧菌酯SC、38%唑醚·啶酰菌WDG及200 g/L氟酰羥·苯甲唑SC 5種藥劑對(duì)煙草赤星病的防治效果較好，可推薦用于煙草赤星病的防控。

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基金項(xiàng)目 中國(guó)煙草總公司科技項(xiàng)目（110202101048（LS-08），11020-2001035（LS-04））；國(guó)家自然科學(xué)基金（32160522，31960550）；貴州省科技基金（黔科合基礎(chǔ)-ZK〔2021〕重點(diǎn)036）；貴州省“百層次”創(chuàng)新型人才（黔科合平臺(tái)人才-GCC〔2022〕028-1）;貴州省科技創(chuàng)新人才團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（黔科合平臺(tái)人才-CXTD〔2023〕021）;貴州省應(yīng)用技術(shù)研究與開(kāi)發(fā)資金后補(bǔ)助項(xiàng)目；中國(guó)煙草總公司貴州省公司科技項(xiàng)目（2024XM06）。

作者簡(jiǎn)介 郭濤（1998—），男，湖北孝感人，碩士研究生，研究方向：植物保護(hù)、微生物與植物互作。*通信作者，研究員，博士，從事植物保護(hù)研究。

收稿日期 2023-05-24