肺腺癌CENPA 表達(dá)與CT 征象和參數(shù)的關(guān)系研究

萬靜茹 孫宇 王東旭 郝利國

肺癌是發(fā)生在雙肺的各個部位, 起源于肺部支氣管腺體或黏膜的惡性腫瘤, 其發(fā)病率和死亡率在所有惡性腫瘤中增速最快, 據(jù)統(tǒng)計我國肺癌發(fā)病率占所有惡性腫瘤的28%, 死亡率為29.7%, 且呈逐年遞增的趨勢。早期肺癌的臨床癥狀較為隱匿, 中期發(fā)病迅速, 晚期預(yù)后極差［1-3］。晚期肺癌患者多數(shù)確診時已經(jīng)發(fā)生全身性血液系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng)或神經(jīng)系統(tǒng)轉(zhuǎn)移, 臨床癥狀多以淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、上腔靜脈綜合征、中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀等為主, 多數(shù)為非小細(xì)胞肺癌(NSCLC), 而肺腺癌是肺癌中的一種, 屬于NSCLC, 其起源于支氣管黏膜上皮, 多見于女性, 且發(fā)病年齡偏小。研究表明, 肺腺癌的發(fā)病病因與吸煙、環(huán)境污染、肺部慢性疾病、內(nèi)在功能失調(diào)等多種因素有關(guān)［4］。因此, 早期診斷對肺腺癌患者的臨床療效及預(yù)后具有非常重要的參考價值。目前, 臨床上針對肺癌的檢查方式主要有影像學(xué)檢查、鑒別診斷、組織病理學(xué)檢查等。影像學(xué)檢查在腫瘤診斷中較為常用, 電子計算機X 射線斷層掃描(computed tomography, CT)是指通過X 射線束多層面掃描患者的檢查部位, 經(jīng)數(shù)據(jù)處理后形成檢查部位的影像學(xué)圖像,用于觀察患者檢查部位內(nèi)細(xì)小的病變［5-7］。著絲粒蛋白A(centromere protein A, CENPA)是一種抗原蛋白, 其相對分子量為17 kDa, 在著絲粒的組裝形成、細(xì)胞分裂的正常運行、染色體的正確分離等過程中發(fā)揮著重要作用。有研究表明, CENPA 在多種腫瘤組織中過度表達(dá), 且CENPA 過表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［8］。因此, 本研究通過觀察并分析CENPA 表達(dá)水平與肺腺癌患者的CT 征象和參數(shù)的關(guān)系, 旨在為肺腺癌患者的臨床診斷與治療提供新的參考指標(biāo), 現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2021 年12 月～2022 年12 月在齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院附屬第二醫(yī)院進(jìn)行肺部CT 檢查的46 例肺腺癌患者為研究對象, 根據(jù)CENPA 表達(dá)水平, 將46 例患者分為CENPA-組(CENPA 陰性, 27 例)和CENPA+組(CENPA 陽性, 19 例)。其中CENPA-組,男性患者12 例, 女性患者15 例；患者年齡46～75 歲,平均年齡(59.27±5.25)歲；國際通用腫瘤分期(TNM分期)：Ⅰ期8 例, Ⅱ期12 例, Ⅲ期5 例, Ⅳ期2 例；腫瘤病理分化程度：低分化3 例, 中分化14 例, 高分化10 例。CENPA+組, 男性患者7 例, 女性患者12 例；患者年齡40～71 歲, 平均年齡(56.30±5.44)歲；TNM分期：Ⅰ期1 例, Ⅱ期5 例, Ⅲ期8 例, Ⅳ期5 例；腫瘤病理分化程度：低分化9例, 中分化7例, 高分化3例。兩組一般資料比較, 差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者符合《中國臨床腫瘤學(xué)會(CSCO)：非小細(xì)胞肺癌診療指南2022》中關(guān)于NSCLC的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②經(jīng)病理學(xué)檢測證實為NSCLC 中的肺腺癌；③TNM 分期為Ⅰ～Ⅳ期；④近1 個月內(nèi)無其他手術(shù)史；⑤臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他惡性腫瘤的患者；②患有先天性心臟、腎臟等重要臟器缺陷類疾??；③具有嚴(yán)重精神疾病或精神病史的患者；④處于妊娠期或哺乳期的女性患者；⑤術(shù)前接受過其他抗腫瘤治療的患者。所有患者對研究內(nèi)容均知情同意, 且本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審批通過。

1.2 檢測方法 CENPA 表達(dá)：取4%多聚甲醛固定組織, 石蠟包埋切片, 組織切片行抗原修復(fù), 加入內(nèi)源性過氧化物酶, 經(jīng)血清封片后, 加入一抗孵育過夜, 加入二抗室溫孵育60 min, 加3, 3'-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽(DAB)顯色液, 陽性表達(dá)呈棕黃色, 水洗終止顯色,加蘇木素復(fù)染細(xì)胞核, 脫水加中性樹脂封片, 顯微鏡下觀察拍照, 蘇木素染細(xì)胞核呈藍(lán)色, DAB 染陽性表達(dá)呈棕黃色。采用IPP 軟件分析組織染色的光密度值,取平均值表示肺腺組織CENPA 陽性表達(dá)情況, CENPA指標(biāo)中陽性表達(dá)細(xì)胞比例≥10%時為陽性, 反之為陰性。

CT 平掃：儀器選用美國GE 公司生產(chǎn)的全球頂級Revolution 256 排512 層超高端能譜(GE revolution 256)CT 進(jìn)行平掃。患者采取仰臥位, 由肺尖至腎上腺進(jìn)行范圍掃描, 設(shè)置參數(shù)：層厚5 mm, 層距5 mm, 螺距1.5,管電壓120 kV, 管電流105 mAs, 矩陣512×512, 在平掃后使用雙筒高壓注射器以5 ml/s 的流率經(jīng)肘靜脈團(tuán)注入非離子型對比劑碘普羅胺注射液50 ml, 等滲鹽水40 ml, 延遲掃描時間13～16 s 雙期或三期掃描。采用多平面重建(MPR)處理圖像, 薄層(層厚、層距均為1 mm)用高級模擬迭代重組(ADMIRE)重建。由兩名資深影像科醫(yī)師對圖像進(jìn)行分析。當(dāng)兩名醫(yī)師的意見相駁時, 參考上級醫(yī)師的意見協(xié)商統(tǒng)一。

1.3 觀察指標(biāo) 根據(jù)灌注圖像數(shù)據(jù)測量分析比較兩組患者BF、BV、PS、MTT 等CT 肺灌注參數(shù)。記錄并比較兩組患者CT 征象個數(shù), 其中直接征象包括分葉征、毛刺征、血管集束征、支氣管充氣征、空泡征, 間接征象包括胸膜凹陷征, 縱隔淋巴結(jié)腫大, 胸腔積液。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS23.0 統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗；計數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；等級資料采用秩和檢驗。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者CT 肺灌注參數(shù)值比較 CENPA+組CT肺 灌 注BF(39.21±5.45)ml/(100 g·min)、BV(21.11±3.18)ml/100 g、PS(17.21±2.86)ml/(100 g·min) 較CENPA-組的(19.22±3.50)ml/(100 g·min)、(4.89±1.97)ml/100 g、(4.19±2.34)ml/(100 g·min) 升 高, MTT(3.11±1.48)s 較CENPA-組的(10.53±2.27)s 短(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組患者CT 肺灌注參數(shù)值比較( ±s)

注：與CENPA+組比較, aP＜0.05

組別 例數(shù) BF［ml/(100 g·min)］ BV(ml/100 g) PS［ml/(100 g·min)］ MTT(s)CENPA+組 19 39.21±5.45 21.11±3.18 17.21±2.86 3.11±1.48 CENPA-組 27 19.22±3.50a 4.89±1.97a 4.19±2.34a 10.53±2.27a t 15.160 21.361 16.948 12.482 P 0.000 0.000 0.000 0.000

2.2 兩組患者CT 征象個數(shù)比較 CENPA+組直接征象+間接征象＜3 個有3 例, 直接征象3～5 個有2 例,直接征象+間接征象3～5 個有8 例, 直接征象＞5 個有2 例, 直接征象+間接征象＞5 個有4 例, 優(yōu)于CENPA-組的6、13、5、2、1 例(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組患者CT 征象個數(shù)比較(n)

3 討論

肺癌可分為非小細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌, 其中非小細(xì)胞肺癌為臨床上常見的病理類型, 約占肺癌的80%, 包括腺癌、鱗癌和大細(xì)胞癌等類型, 與小細(xì)胞肺癌相比, 非小細(xì)胞肺癌具有癌細(xì)胞生長速度慢、擴散轉(zhuǎn)移時間晚等特點, 因此, 早期非小細(xì)胞肺癌癥狀不明顯, 確診時已經(jīng)處于中晚期, 且不適宜手術(shù)治療［9］。肺腺癌為非小細(xì)胞肺癌中的一種, 國際上將肺腺癌分為五種病理亞型, 包括微乳頭狀為主型、腺泡狀為主型、貼壁狀為主型、乳頭狀為主型、實體為主伴黏液分泌型, 其中微乳頭狀型和實體為主伴黏液分泌型的預(yù)后最差。不同的肺腺癌病理亞型在臨床上的表現(xiàn)及生長方式也不相同, 所表現(xiàn)的CT 征象也存在差異［10,11］。在本研究結(jié)果中, 肺腺癌患者的CT 征象主要表現(xiàn)有直接征象和間接征象, 直接征象分為分葉征、毛刺征、血管集束征、支氣管充氣征、空泡征, 間接征象分為胸膜凹陷征、縱隔淋巴結(jié)腫大、胸腔積液。分葉征為腫瘤浸潤生長的表現(xiàn), 結(jié)節(jié)多位于左肺上葉,邊界清晰、形態(tài)不規(guī)則。毛刺征為肺腺癌較為常見的CT 征象, 表現(xiàn)為腫瘤細(xì)胞向周圍肺實質(zhì)延伸, 不與胸膜相連、放射狀無分支, 毛刺征代表腫瘤細(xì)胞的增殖活躍, 易侵犯周圍的淋巴管, 導(dǎo)致淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。血管集束征是肺腺癌的特征性表現(xiàn)之一, 為多條血管營養(yǎng), 多條血管向肺癌聚集, 血管集束征是由增粗的血管形成,其近肺門側(cè)的血管集束由血管(擴張的小動脈)或支氣管組成, 而遠(yuǎn)肺門側(cè)的血管集束則由擴張的小靜脈組成, CT 征象表現(xiàn)為一支或數(shù)支肺小血管受牽拉向病灶聚攏移位, 在病灶處中斷或貫穿病灶。支氣管充氣征為腫瘤細(xì)胞附壁生長, 支氣管結(jié)構(gòu)異常, 受腫瘤纖維的牽拉, 促使支氣管遠(yuǎn)端管腔擴張, 多見于侵襲性較弱的腫瘤細(xì)胞內(nèi)?？张菡鞅憩F(xiàn)為結(jié)節(jié)內(nèi)夾雜著小密度減壓區(qū)及小透亮區(qū), 多為不規(guī)則形狀, 邊緣不清晰, 多數(shù)呈半透明狀, 空泡征的發(fā)生與肺癌的大小、組織學(xué)分類有密切關(guān)系。CT 肺灌注參數(shù)可體現(xiàn)腫瘤生長與分級狀況, 也可反映局部血流灌注量、血管密集程度和毛細(xì)血管通透性的改變。BF、BV、PS 和MTT 均是CT 肺灌注的相關(guān)參數(shù), 其中BF 主要表示單位時間內(nèi)流經(jīng)靶組織的血容量, 能夠反映靶組織內(nèi)血液流動的速率, 且受到血容量、引流靜脈、淋巴回流及組織耗氧量等因素的影響。而腫瘤生長過程中, 會有諸多新生血管生成, 加之新生血管能夠在鄰近的組織中獲得血供, 故淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移患者BF 值呈升高趨勢。BV 是血液在腫瘤細(xì)胞血管內(nèi)的容量, 可直接體現(xiàn)有功能的血管數(shù)量,當(dāng)BV 值較大時, 表明血管數(shù)量較多, 腫瘤細(xì)胞得到的氧分及營養(yǎng)物質(zhì)較多, 可促進(jìn)細(xì)胞生長、浸潤及轉(zhuǎn)移,造成疾病復(fù)發(fā), 導(dǎo)致預(yù)后不良。PS 是血液經(jīng)靶組織血管結(jié)構(gòu)擴散至組織間隙的能力, 其能反映靶組織血管內(nèi)皮細(xì)胞及基底膜的完整性, 且能夠反映細(xì)胞間隙及管壁通透性等特征。MTT 則是造影劑從顱內(nèi)的動脈側(cè)到靜脈側(cè)所需要的時間所有通過時間的平均值［12-15］。CT 征象和CT 肺灌注參數(shù)對肺腺癌患者的病理診斷及臨床治療具有重要的參考意義。

CENPA 是在細(xì)胞分裂過程中起重要調(diào)節(jié)作用的功能蛋白, 在著絲粒的組裝形成、染色體的正確分離及細(xì)胞分裂等過程中發(fā)揮作用, 與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展、侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后不良密切相關(guān)。研究發(fā)現(xiàn),CENPA 在肺腺癌組織及相鄰的癌旁組織中表達(dá)均有所升高, CENPA 過表達(dá)與腫瘤的病理分級、胸膜浸潤顯著相關(guān), 且CENPA 陽性表達(dá)的肺腺癌患者無復(fù)發(fā)生存期(RFS)更短［16］。也有研究表明, CENPA 高表達(dá)與肺腺癌進(jìn)展密切相關(guān), 在預(yù)測肺腺癌患者的總生存期中具有獨立的預(yù)后價值, CENPA 下調(diào)顯著抑制異種移植肺癌細(xì)胞的生長, CENPA 通過細(xì)胞性周期進(jìn)程在肺腺癌細(xì)胞增殖中發(fā)揮多種正向和負(fù)向的協(xié)同調(diào)節(jié)作用［17］。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn), CENPA+組CT肺灌注BF(39.21±5.45)ml/(100 g·min)、BV(21.11±3.18)ml/100 g、PS(17.21±2.86)ml/(100 g·min) 較CENPA-組的(19.22±3.50)ml/(100 g·min)、(4.89±1.97)ml/100 g、(4.19±2.34)ml/(100 g·min) 升 高, MTT(3.11±1.48)s 較CENPA-組的(10.53±2.27)s 短(P＜0.05)。CENPA+組直接征象+間接征象＜3 個有3 例, 直接征象3～5 個有2 例, 直接征象+間接征象3～5 個有8 例,直接征象＞5 個有2 例, 直接征象+間接征象＞5 個有4 例, 優(yōu)于CENPA-組的6、13、5、2、1 例(P＜0.05)。結(jié)果提示, CENPA 通過調(diào)節(jié)肺腺癌患者腫瘤細(xì)胞分裂與增殖, 從而促進(jìn)腫瘤的侵襲和轉(zhuǎn)移。

綜上所述, 肺腺癌患者CENPA 表達(dá)水平與CT 征象和參數(shù)相關(guān), CENPA 陽性表達(dá)的肺腺癌患者CT 征象和參數(shù)明顯更差, 因此CENPA 陽性表達(dá)可作為診斷肺腺癌發(fā)病的參考依據(jù)。