circRNA 經(jīng)由 ceRNA 機制調(diào)控 BMSCs 成骨分化在股骨頭壞死中的研究進(jìn)展

柳可心 劉凱 冬梅 王建忠

股骨頭壞死 ( osteonecrosis of the femoral head，ONFH )是骨科常見病和難治性疾病，發(fā)病機制為股骨頭血供受損或中斷引起股骨頭缺血、壞死，最終出現(xiàn)股骨頭塌陷、關(guān)節(jié)功能障礙等癥狀。研究調(diào)查顯示 ONFH 發(fā)病人數(shù)呈逐年上升趨勢，好發(fā)于 30～65 歲人群，并逐漸趨于年輕化，其中 30%～70% 的病例出現(xiàn)雙側(cè)股骨頭壞死，嚴(yán)重影響患者的生活[1]。按照病因 ONFH 主要分為創(chuàng)傷性股骨頭壞死( traumatic-induced osteonecrosis of femoral head，TIONFH )和非創(chuàng)傷性股骨頭壞死 ( non-traumatic osteonecrosis of the femoral head，NONFH )，前者主要由股骨頸骨折、髖關(guān)節(jié)脫位等外傷引起，后者在我國的常見原因為糖皮質(zhì)激素和酒精的過量使用[2]。因 ONFH 早期癥狀不明顯，多表現(xiàn)為髖關(guān)節(jié)的疼痛，且 X 線片檢查對早期的細(xì)微骨質(zhì)病變不敏感，所以很容易被忽視，往往錯過最佳治療時間。晚期的 ONFH 常伴隨股骨頭塌陷，人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)成為患者不可避免的選擇[3]。該病給患者帶來巨大經(jīng)濟負(fù)擔(dān)和精神壓力，因此亟需確定新的診斷標(biāo)志物以提高 ONFH 的早期檢出率，并為臨床靶向治療提供理論基礎(chǔ)。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 ( bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs )具有多方向分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞或軟骨細(xì)胞等的潛能，是髓腔內(nèi)成骨細(xì)胞的主要來源[4]。研究表明，壞死的股骨頭中 BMSCs 的數(shù)量和成骨分化能力降低[5]，與ONFH 的進(jìn)程有著密切關(guān)系。隨著高通量測序技術(shù)的發(fā)展，環(huán)狀 RNA ( circular RNA，circRNA ) 成為微小 RNA( microRNA，miRNA ) 及長鏈非編碼 RNA ( long noncoding RNA，LncRNA ) 后新的研究熱點。近年來，越來越多的研究證實 circRNA 主要通過競爭性內(nèi)源 RNA ( competing endogenous RNA，ceRNA ) 機制調(diào)控 BMSCs 成骨 / 成脂分化，參與 ONFH 的發(fā)生發(fā)展[6]。因此，研究 circRNA 在BMSCs 成骨分化中的作用及其影響 ONFH 的發(fā)生發(fā)展機制，可以為 ONFH 的早期診斷和治療提供新的策略。

一、circRNA 概述和生物功能

circRNA 是一類廣泛存在于真核細(xì)胞中的非編碼RNA，主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中，具有共價鍵首尾相連形成的閉合環(huán)狀結(jié)構(gòu)[7]。與標(biāo)準(zhǔn)線性 RNA 不同，circRNA 不含 5’ 端帽子與 3’ 端多聚 A 尾結(jié)構(gòu)，因此不受RNA 外切酶的影響，具有高穩(wěn)定性，不易被降解[8]。起初circRNA 被認(rèn)為是錯誤剪接或信使 RNA ( messenger RNA，mRNA ) 產(chǎn)生過程的副產(chǎn)物，隨著高通量測序技術(shù)和生物信息學(xué)研究方法的快速發(fā)展，在多種物種中發(fā)現(xiàn)大量的circRNA。多項研究發(fā)現(xiàn) circRNA 是調(diào)控細(xì)胞分化、維持組織穩(wěn)態(tài)等疾病生理病理過程中的重要參與者[9-11]。這表明circRNA 并非 mRNA 剪接的穩(wěn)態(tài)副產(chǎn)物，而是一類在細(xì)胞中發(fā)揮重要作用的 RNA 分子，成為非編碼 RNA 領(lǐng)域的明星分子。根據(jù) circRNA 的來源不同，可分為四類：( 1 ) 外顯子環(huán)狀 RNA ( exonic circRNA，EciRNA )；( 2 ) 內(nèi)含子環(huán)狀 RNA ( intronic circRNA，ciRNA )；( 3 ) 外顯子 - 內(nèi)含子環(huán)狀 RNA ( exon-intron circRNA，ElciRNA )；( 4 ) 來源于反義鏈轉(zhuǎn)錄本的反義環(huán)狀 RNA ( antisense circular RNA ) 以及基因間序列或其它未注釋基因組序列的環(huán)狀 RNA ( intergenic circular RNA )[12]。其中 EciRNA 占已知 circRNA 的 80% 以上，且比其它類型的 circRNA 更具序列保守型[13]。

1. miRNA 的分子海綿：miRNA 通過與靶基因中 3’ 端非翻譯區(qū)域 ( 3’UTR ) 結(jié)合抑制靶基因的翻譯，而 circRNA富含 miRNA 的結(jié)合位點，可以起到 miRNA 海綿的作用，通過直接與 miRNA 結(jié)合影響 miRNA 對靶基因 3’UTR 的結(jié)合，產(chǎn)生相應(yīng)的生物學(xué)效應(yīng)[14]。研究發(fā)現(xiàn)，circ_0015382在先兆子癇 ( pre-eclampsia，PE ) 胎盤組織中高表達(dá)，由于它能有效結(jié)合 miR-149-5p 而使 miR-149-5p 的活性下降，導(dǎo)致 miR-149-5p 靶基因的表達(dá)水平增加，進(jìn)而抑制滋養(yǎng)層細(xì)胞的增殖、遷移、侵襲和血管生成，加快 PE 的進(jìn)展[15]。Zhang 等[16]證實 circFCHO2 作為 miR-194-5p 的海綿通過 JAK1 / STAT3 途徑促進(jìn)體內(nèi)胃癌細(xì)胞的生長和肺轉(zhuǎn)移。此外，circRNA 通過 ceRNA 機制在多種疾病中發(fā)揮作用。

2. 作為翻譯模板：circRNA 雖然屬于非編碼 RNA，缺乏 5’ 端帽子與 3’ 端多聚 A 尾結(jié)構(gòu)，但隨著對 circRNA研究的深入，發(fā)現(xiàn)有少數(shù) circRNA 序列中含有開放閱讀框 ( open reading frame，ORF )、N6-甲基腺苷 ( N6-methyladenosine，m6A ) 修飾和內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點( internal ribosome entry site，IRES )，能夠以不依賴帽子結(jié)構(gòu)的方式進(jìn)行翻譯[17]。目前，已經(jīng)證實很多 circRNA 可以作為翻譯模板，為細(xì)胞提供生存所需的重要蛋白質(zhì)。例如，circ-ZNF609 在肌肉形成過程中具有編碼蛋白的作用，并且熱應(yīng)激 ( 2 h 44 ℃ ) 能使 circ-ZNF609 的翻譯能力增強[18]。Jiang 等[19]發(fā)現(xiàn)胃癌組織中環(huán)狀促分裂原活化蛋白激酶 1 ( mitogen-activated protein kinase 1，circMAPK1 )( hsa_circ_0004872 ) 相較于鄰近的正常組織表達(dá)水平下調(diào)，并證實其可通過編碼一種長度為 109 個氨基酸的新型蛋白質(zhì) MAPK1-109aa 抑制腫瘤的增殖和侵襲。circRNA 可作為翻譯模板的發(fā)現(xiàn)顛覆了以往只有 mRNA 才具有翻譯功能的認(rèn)知，也進(jìn)一步豐富了對人類基因組翻譯領(lǐng)域的研究。

3. 與蛋白質(zhì)相互作用：circRNA 和蛋白質(zhì)的相互作用對于 circRNA 的合成與降解及蛋白的表達(dá)與功能都會產(chǎn)生影響。RNA 結(jié)合蛋白 ( RNA binding protein，RBP ) 是一類與 RNA 的代謝加工相關(guān)的蛋白質(zhì)，參與 RNA 的成熟、運輸、定位和翻譯[20]。circRNA 可以與特定的 RBP 結(jié)合，調(diào)節(jié) RBP 與其靶 RNA 之間的相互作用[21]。人類抗原 R( human antigen R，HuR ) 是一種被廣泛研究的 RBP，研究發(fā)現(xiàn) circAGO2 在胃癌[22]、結(jié)腸癌[23]、前列腺癌[24]和神經(jīng)母細(xì)胞瘤[25]中上調(diào)，能夠與 HuR 蛋白結(jié)合并激活 HuR，促進(jìn) HuR 在靶基因的 3’UTR 富集，導(dǎo)致 argonaute 2 ( AGO2 )蛋白與靶基因的結(jié)合減少，進(jìn)而抑制 AGO2 / miRNA 沉默復(fù)合體介導(dǎo)的基因沉默效應(yīng)，加速癌癥進(jìn)展[26]。細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶 2 ( cyclin-dependent kinase 2，CDK2 ) 是一種絲氨酸 / 蘇氨酸 ( Ser / Thr ) 蛋白激酶，通常 CDK2 與細(xì)胞周期蛋白 A 和細(xì)胞周期蛋白 E 相互作用以促進(jìn)細(xì)胞由 G1 期進(jìn)入 S 期，是細(xì)胞周期轉(zhuǎn)變的必需物質(zhì)[27-28]。Du 等[29]發(fā)現(xiàn) circ-Foxo3 可與 CDK2 和細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑 p21 結(jié)合形成三元復(fù)合物，該復(fù)合物消耗了CDK2，阻止細(xì)胞由 G1 期進(jìn)入 S 期，從而影響細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞增殖。

4. 參與轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)：circRNA 主要以外顯子的形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，但其它類型 circRNA 具有的特性同樣值得一提。ciRNA 可與 RNA 聚合酶 Ⅱ ( polymerase Ⅱ，Pol Ⅱ ) 結(jié)合調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄。Zhang 等[30]鑒定出 ci-ankrd52 作為 Pol Ⅱ的正調(diào)控因子進(jìn)而促進(jìn)親本基因表達(dá)。此外，ElciRNA 可與小核糖核蛋白 ( small nuclear ribonucleoproteins，snRNPs )相互作用，再與 Pol Ⅱ 結(jié)合調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄[31]。Li 等[32]發(fā)現(xiàn)ElciRNA，如 circEIF3J 和 circPIAP2，可與 snRNPs 相互作用促進(jìn)親本基因的轉(zhuǎn)錄。

二、BMSCs 與 ONFH 的關(guān)系

Friedenstein 等[33]首次在骨髓中發(fā)現(xiàn) BMSCs，其在特定誘導(dǎo)條件下可以發(fā)育為成骨細(xì)胞[34]、脂肪細(xì)胞[35]、軟骨細(xì)胞[36]、神經(jīng)細(xì)胞[37]等。因其具有多向分化的潛力，在基因治療、組織工程、細(xì)胞替代治療和再生醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中已成為極其重要的種子細(xì)胞。

BMSCs 的成骨 / 成脂分化平衡在維持股骨頭的結(jié)構(gòu)和功能的完整性中起著關(guān)鍵作用。在正常情況下，BMSCs 成骨分化和成脂分化能力處于動態(tài)平衡，當(dāng)這一平衡遭到破壞，就會引起骨科疾病[38]。ONFH 患者 ONFH 區(qū)域成骨能力降低，相反成脂能力卻明顯增強[39]。隨著對 BMSCs 認(rèn)知的不斷深化，BMSCs 為治療 ONFH 提供了新方向。例如，BMSCs 可以分泌細(xì)胞因子，通過旁分泌效應(yīng)促進(jìn)壞死區(qū)的血液供應(yīng)[40]。Ma 等[41]在動物實驗中探討了血管內(nèi)皮生長因子-165 ( vascular endothelial growth factor 165，VEGF-165 ) 與骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 ( bone morphogenetic protein 2，BMP-2 ) 基因修飾的 BMSCs 對 ONFH 的治療作用，結(jié)果表明 VEGF-165 / BMP-2 基因轉(zhuǎn)染可促進(jìn) BMSCs的成骨分化，有益于 ONFH 的修復(fù)。此外，利用各種物理手段如體外沖擊波[42]及化學(xué)藥物如淫羊藿苷[43]、丙戊酸[44]等可促進(jìn) BMSCs 成骨分化，在 ONFH 相關(guān)的臨床前實驗中取得較好的效果并逐漸應(yīng)用于臨床。髓芯鉆孔減壓并自體 BMSCs 注射移植有效改善了患者骨髓腔內(nèi)高壓引起的微循環(huán)障礙[45]。BMSCs 注射移植在治療早中期 ONFH取得較好療效，可降低股骨頭塌陷發(fā)生率[46]?？傊?，BMSCs 是 ONFH 發(fā)生發(fā)展的重要因素，在 ONFH 早中期以 BMSCs 為靶點對疾病進(jìn)行干預(yù)，可以極大地改善患者預(yù)后。

三、circRNA 經(jīng)由 ceRNA 機制調(diào)控 ONFH 中BMSCs 成骨分化

1. 促進(jìn) BMSCs 的成骨分化：circRNA 在細(xì)胞和組織中廣泛表達(dá)，Xiang 等[39]分析了從 ONFH 患者分離的 BMSCs中異常表達(dá)的 miRNA 和 circRNA，證實了 circRNA 可以通過 ceRNA 機制作用于相關(guān)信號通路介導(dǎo) BMSCs 成骨、成脂分化來參與 ONFH 的進(jìn)展。Hao 等[47]發(fā)現(xiàn)激素性股骨頭壞死 ( steroid-induced osteonecrosis of femoral head，SONFH ) 的大鼠股骨頭 BMSCs 中 circPVT1 表達(dá)水平降低而 miR-21-5p 上調(diào)。通過體內(nèi)實驗證實：上調(diào)的 circPVT1通過 ceRNA 機制作為 miR-21-5p 的分子海綿，抑制miR-21-5p 與 Smad7 的 3’UTR 的結(jié)合，促進(jìn) BMSCs 成骨分化，通過 circPVT1-miR-21-5p-Smad7 / TGFβ 軸來影響SIONFH 的發(fā)展。Liu 等[48]發(fā)現(xiàn) circ_AFF4 在 BMSCs 的成骨分化誘導(dǎo)過程中明顯增強，而 miR-135a-5p 的表達(dá)水平則顯著下降，下調(diào) circ_AFF 能夠顯著抑制 BMSCs 的成骨分化潛能。使用生信分析預(yù)測 miR-135a-5p 為 circ_AFF4的潛在靶點，通過熒光素酶報告實驗和 RNA-pull down 實驗證實 circ_AFF4 作為 miR-135a-5p 的海綿，通過激活SMAD1 / 5 途徑誘導(dǎo) BMSCs 的成骨分化。Xin 等[49]發(fā)現(xiàn)Circ_0066523 在 BMSCs 的成骨分化過程中過表達(dá)，通過體外實驗發(fā)現(xiàn)沉默 Circ_0066523 阻礙 BMSCs 的增殖和成骨分化。后續(xù)實驗證實了 circ_0066523 通過磷酸酶和張力蛋白同源物 ( phosphatase and tensin homolog，PTEN ) /磷脂酰肌醇 3 激酶 ( phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K ) /蛋白激酶 B ( protein kinase B，PKB，又稱 AKT ) 途徑促進(jìn) BMSCs 的增殖和成骨分化。基于 GEO 數(shù)據(jù)庫和實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng) ( real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR ) 測定，Chia 等[50]發(fā)現(xiàn)過表達(dá)的 circ-DAB1 ( has_circ_0113689 ) 會促進(jìn) BMSCs的增殖和成骨分化，而沉默 circ-DAB1 引起相反的功能。進(jìn)一步實驗證明 circ-DAB1 通過 miR-1270 / miR-944 /RBPJ 途徑上調(diào) DAB1 并促進(jìn) BMSCs 的細(xì)胞增殖和成骨分化。Huang 等[51]通過 RT-qPCR 發(fā)現(xiàn) circ_0067680 在成骨分化過程中在 BMSCs 中過表達(dá)，敲低 circ_0067680 抑制 BMSCs 的成骨分化。進(jìn)一步通過 RNA-pull down 實驗、RNA 免疫共沉淀 ( RNA immunoprecipitation，RIP ) 和熒光素酶報告基因分析證明，circ_0067680 作為 miR-4429 的海綿調(diào)節(jié) CTNNB1 表達(dá)，從而通過激活經(jīng)典的 Wnt / β-catenin信號通路促進(jìn) BMSCs 成骨分化。Xiang 等[39]為了研究 BMSCs 功能改變與 ONFH 之間的相關(guān)性，通過分析從 ONFH 患者分離的 BMSCs 中異常表達(dá)的 miRNA 和circRNA，并進(jìn)一步探索 circRNA 在 ONFH 中作用的潛在調(diào)節(jié)機制。結(jié)果表明，hsa_circ_0000219 和 hsa_circ_0005936分別作為 miR-144-3p 和 miR-1270 的分子海綿，抑制其與靶基因 3’UTR 結(jié)合，促進(jìn) BMSCs 的成骨分化，進(jìn)而延緩ONFH 的進(jìn)展。

2. 抑制 BMSCs 的成骨分化：盡管許多 circRNA 在BMSCs 的成骨分化中起到了促進(jìn)作用，但在持續(xù)的探索中，也發(fā)現(xiàn)許多可以抑制 BMSCs 成骨分化的 circRNA。Chen 等[52]在 SONFH 來源的 BMSCs 中檢測到 circRNA CDR1as 過表達(dá)。上調(diào) CDR1as 會導(dǎo)致 BMSCs 成骨分化降低，脂肪分化增加。熒光素酶報告基因檢測證實 CDR1as和 WNT5B 的 miR-7-5p 結(jié)合位點，表明 circRNA CDR1as可能通過 CDR1as-miR-7-5p-WNT5B 軸在 BMSCs 的成骨 / 成脂分化中起關(guān)鍵作用。Kuang 等[53]在 SONFH 和TIONFH 患者的股骨頭組織中均檢測到 circUSP45 的表達(dá)水平上調(diào)，進(jìn)一步實驗發(fā)現(xiàn)上調(diào)的 circUSP45 通過 ceRNA機制作為 miR-127-5p 分子海綿，進(jìn)而抑制 miR-21-5p 與PTEN 的結(jié)合，通過抑制 AKT 信號通路來抑制 BMSCs 的成骨分化，影響 ONFH 的進(jìn)程。Zhang 等[54]對 TIONFH 血液樣本進(jìn)行測序后發(fā)現(xiàn)眾多差異性表達(dá)的 circRNA，后續(xù)對 TIONFH 患者的 BMSCs 和破骨細(xì)胞樣細(xì)胞 ( osteoclastlike cell，OLC ) 進(jìn)行監(jiān)測，驗證了 circRNA_25487 作為miR-134-3p 的分子海綿，抑制了 miR-134-3p 與 p21 的結(jié)合從而抑制 BMSCs 成骨分化。Han 等[55]發(fā)現(xiàn) circ_0058792相對于健康個體明顯上調(diào)，而 miR-181a-5p 則下調(diào)。沉默circ_0058792 和過表達(dá) miR-181a-5p 后會顯著提高堿性磷酸酶活性和基質(zhì)礦化能力。后續(xù)證實 circ_0058792 作為miR-181a-5p 的分子海綿，通過 TGF-β / Smad7 途徑來調(diào)節(jié) BMSCs 的成骨分化。Feng 等[56]利用 circRNA 微陣列檢測 ONFH 的 BMSCs 中 circRNA 表達(dá)譜，進(jìn)一步研究了上調(diào)最顯著的 circHGF 對 BMSCs 的增殖和成骨分化的影響。實驗證實 circHGF 通過 ceRNA 機制與 miR-25-3p 結(jié)合，抑制 miR-25-3p 與靶基因 SMAD7 的 3’UTR 結(jié)合，抑制了BMSCs 的增殖和成骨分化。以上 circRNA 經(jīng)由 ceRNA 機制對 BMSCs 成骨分化的調(diào)控作用見表1。

四、臨床價值

1. 疾病診斷：早診早治 ONFH 是延緩股骨頭塌陷及改善預(yù)后的重要舉措。大多數(shù) circRNA 在不同物種間序列具有高度保守性，且在不同組織和發(fā)育階段選擇性表達(dá)，在血清和組織中具有高穩(wěn)定性。因此，circRNA 有作為反映疾病診斷和預(yù)后的潛在生物標(biāo)志物的潛力。Jiang 等[57]使用 RT-qPCR 檢測了 NONFH 患者血漿和局部 circCDR1as 的表達(dá)水平。結(jié)果與健康對照組相比后發(fā)現(xiàn) NONFH 患者的血漿 circCDR1as 表達(dá)顯著增高，局部壞死組織中的 circCDR1as 顯著高于鄰近的非受累組織。更重要的是 circCDR1as 的表達(dá)水平與疾病的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)：與 ARCO 1 / 2 期相比，ARCO 3 期患者的血漿和局部 circCDR1as 表達(dá)明顯上調(diào)；同樣，與 ARCO 3 期相比，ARCO 4 期患者的血漿和局部 circCDR1as 表達(dá)明顯上調(diào)。通過接收者操作特征 ( receiver operating characteristic，ROC ) 曲線分析表明，血漿中 circCDR1as 的表達(dá)水平可作為 NONFH 患者疾病嚴(yán)重程度的良好評價指標(biāo)。相信未來可通過抽取血液、穿刺局部樣本或利用基因芯片技術(shù)快速篩查異常表達(dá)的 circRNA，為 ONFH 的早期診斷、病情監(jiān)測提供有效的數(shù)據(jù)支持。

2. 疾病治療：由于 ONFH 的后期致殘率高，股骨頭塌陷疼痛，關(guān)節(jié)功能障礙，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，晚期多需要進(jìn)行人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)。雖然手術(shù)治療有較好的效果，但創(chuàng)傷大、費用高、患者恢復(fù)周期較長等問題很大程度限制了手術(shù)的治療方式。以特定 circRNA 為靶點的精準(zhǔn)醫(yī)療成為研究熱點。孫含瑞[58]證明 circRNA-25487 表達(dá)水平的高低與 TIONFH 患者和股骨頸骨折未壞死患者的BMSCs 成骨增殖、分化能力均呈負(fù)相關(guān)。通過茜素紅染色、堿性磷酸酶 ( alkaline phosphatase，ALP ) 染色發(fā)現(xiàn)，補腎活血藥可以調(diào)節(jié) circRNA-25487 的基因表達(dá)水平，進(jìn)而調(diào)控 BMSCs 的成骨分化能力。該研究為 BMSCs 成骨能力的調(diào)控機制提供有力實驗依據(jù)，為臨床早期防治 ONFH 提供新的方法。在未來，相信通過調(diào)控特定 circRNA 的表達(dá)以促進(jìn) BMSCs 成骨分化會為治療 ONFH 提供更多可能。

五、總結(jié)和展望

ONFH 的發(fā)病機制復(fù)雜，致殘率高，并逐漸趨于年輕化，所以早期診斷、治療尤為重要。近年來，隨著分子生物學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展與成熟，已有大量研究表明，circRNA經(jīng)由 ceRNA 機制介導(dǎo) TGF-β / SMAD、PI3K / AKT、NOTCH和 Wnt / β-catenin 等信號通路調(diào)控 BMSCs 成骨分化在ONFH 病程發(fā)展中發(fā)揮重要作用。目前，circRNA 相關(guān)研究尚處于起步階段，研究方向集中于 ceRNA 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。在未來，circRNA 與蛋白結(jié)合、作為翻譯模板、調(diào)控基因轉(zhuǎn)錄等功能是否存在于 ONFH 的發(fā)生發(fā)展中有待深入探究。此外，需要更多的基礎(chǔ)研究和臨床試驗去探尋circRNA 調(diào)控 BMSCs 的成骨分化以外的調(diào)控 ONFH 的相關(guān)機制，如影響成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞的活性、血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和軟骨細(xì)胞的分化等。隨著研究的深入，ONFH 的早期防治、診斷和治療有望提升到分子水平，或可通過基因芯片快速篩查異常表達(dá)的 circRNA，提高 ONFH 早期檢出率，并以 circRNA 為靶點為 ONFH 的早期診斷和治療提供新的視角。