長鏈非編碼RNA-TUG1在胃癌發(fā)生和發(fā)展中的作用及其機(jī)制

謝津璧 王善娟 劉艷麗 張麗航 陳 秋 丁仕群 郭潤生

胃癌是人類最常見的腫瘤之一。據(jù)統(tǒng)計,亞洲地區(qū)的胃癌新發(fā)病例占全球的3/4,而中國的胃癌新發(fā)病例占亞洲一半以上[1-2]。由于早期胃癌的癥狀隱匿,且胃鏡等早期篩查手段在國內(nèi)的開展程度有限,多數(shù)患者在確診時已處于進(jìn)展期,喪失了根治性手術(shù)的機(jī)會。盡管近年來治療胃癌的外科技術(shù)有所進(jìn)步,且聯(lián)合了化學(xué)治療等多種治療方式,但進(jìn)展期胃癌的5年生存率仍無顯著提高。胃癌的侵襲、轉(zhuǎn)移和術(shù)后復(fù)發(fā)是大多數(shù)進(jìn)展期胃癌患者死亡的主要原因[3]。胃癌的發(fā)生、發(fā)展過程十分復(fù)雜,涉及細(xì)胞增殖、遷移、侵襲、凋亡等多個環(huán)節(jié),以及多條信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路多層次的交叉調(diào)控。研究胃癌發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制對提高臨床治療效果和患者生存率具有重要意義。近年來,長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA, lncRNA)作為新的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子備受關(guān)注[4-5]。lncRNA在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程中的生長、侵襲、轉(zhuǎn)移和耐藥等多個環(huán)節(jié)中發(fā)揮調(diào)控作用。關(guān)于lncRNA與胃癌關(guān)系的研究亦受到廣泛關(guān)注,一些lncRNA在胃癌發(fā)病過程中具有促癌作用,如linc01503、CRNDE等可以促進(jìn)胃癌的發(fā)生、發(fā)展[6-7];相反,LINC00982、TUBA4B等則可以抑制胃癌的發(fā)生、發(fā)展[8-9]。既往研究[10]顯示,TUG1在胃癌組織中表達(dá)增高,并能促進(jìn)胃癌細(xì)胞增殖,但鮮見TUG1促進(jìn)胃癌細(xì)胞遷移、侵襲的研究,尤其是關(guān)于其在體內(nèi)的生物學(xué)作用尚未見報道。本研究采用lncRNA芯片對胃癌和癌旁組織中差異表達(dá)的lncRNA進(jìn)行篩查并驗證,發(fā)現(xiàn)TUG1在胃癌組織中表達(dá)異常,且與一些臨床及病理因素相關(guān),并通過一系列細(xì)胞、分子生物學(xué)實驗對其在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用進(jìn)行了初步研究。

1 材料與方法

1.1 病例標(biāo)本 收集2018年10月-2020年9月于上海健康醫(yī)學(xué)院附屬嘉定區(qū)中心醫(yī)院普外科行胃癌根治術(shù)的胃癌患者60例,將切除的腫瘤組織和癌旁組織(切緣2 cm以上)標(biāo)本保存于液氮中,選取其中存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的3例患者的組織樣本進(jìn)行l(wèi)ncRNA芯片檢測。所有患者均簽署知情同意書,并知曉術(shù)后組織作為本次研究所用。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng) 人胃癌細(xì)胞株NCI-N87、MGC-803和人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1(中國科學(xué)院典型培養(yǎng)物保藏委員會細(xì)胞庫)置于含10%胎牛血清(美國賽默飛公司)、100 U/mL 青霉素和 100 mg/mL 鏈霉素(德國默克公司)的DMEM高糖培養(yǎng)基(德國默克公司)中。

1.2.2 lncRNA芯片檢測 采用lncRNA芯片(美國Arraystar公司)篩查胃癌和癌旁組織樣本中的差異表達(dá)lncRNA,通過基因本體(Gene Ontology,GO)分析和信號通路分析對差異表達(dá)lncRNA的靶基因進(jìn)行基因功能和信號通路分析。

1.2.3 慢病毒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染 攜帶目標(biāo)lncRNA全長的慢病毒(Lenti-TUG1)和攜帶TUG1-shRNA的慢病毒(Lenti-TUG1-shRNA)由上海伯豪生物科技有限公司構(gòu)建。應(yīng)用陽離子轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine 2000(美國賽默飛公司)進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染,以無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)NCI-N87、MGC-803細(xì)胞4 h后,將攜帶目標(biāo)基因的慢病毒和Lipofectamine 2000同時加入細(xì)胞培養(yǎng)基中,繼續(xù)孵育12 h。再以加入嘌呤霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)2周進(jìn)行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染。根據(jù)慢病毒轉(zhuǎn)染分為Lenti-TUG1處理組與Lenti-TUG1-shRNA處理組。

1.2.4 細(xì)胞增殖實驗(CCK-8實驗) 于96孔板中每孔接種2×103個NCI-N87、MGC-803細(xì)胞/100 μL培養(yǎng)過夜后,加入慢病毒孵育,孵育12 h后每孔加入10 μL CCK-8溶液(上海碧云天公司),繼續(xù)孵育2 h。將96孔板放入酶標(biāo)儀中,檢測溶液在波長為450 nm處的光密度(A)。設(shè)計不加慢病毒的細(xì)胞為對照組。

1.2.5 裸鼠胃癌荷瘤模型構(gòu)建 選取18只4～5周齡,體重20 g左右雌性裸鼠(上海斯萊克公司)構(gòu)建動物荷瘤模型,以檢測TUG1基因在體內(nèi)對胃癌細(xì)胞遷移和侵襲的影響。腹腔內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤模型的構(gòu)建方法:將懸于0.9%氯化鈉溶液中的5×106個攜帶綠色熒光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的胃癌穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株注入裸鼠腹腔內(nèi),3～4周后應(yīng)用小動物活體成像儀檢測胃癌在腹腔內(nèi)的擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移情況,以相對熒光強(qiáng)度來表示。實驗動物生產(chǎn)許可證號:SCXK(滬)2022-0004。實驗動物使用許可證號:SYXK(滬)2023-0035。

1.2.6 細(xì)胞遷移和侵襲實驗(Transwell實驗) 遷移實驗使用無膠被的24孔板Transwell小室(美國Corning公司),侵襲試驗使用基質(zhì)膠包被Transwell小室上室的底部膜。取細(xì)胞懸液5× 104/200 μL,加入24孔板Transwell小室上室,貼壁過夜后換無血清培養(yǎng)基。24孔板下室加入500 μL含20%胎牛血清的培養(yǎng)基,培養(yǎng)24 h后觀察NCI-N87、MGC-803細(xì)胞的穿膜狀況。以棉簽擦去上室內(nèi)的細(xì)胞,用0.1%結(jié)晶紫溶液染色,置于顯微鏡下觀察細(xì)胞遷移和侵襲情況,拍照并計數(shù)。

1.2.7 細(xì)胞凋亡實驗[膜聯(lián)蛋白(Annexin)V/碘化丙啶(PI)實驗] 至少收集1×105個經(jīng)慢病毒處理后的NCI-N87、MGC-803細(xì)胞,使用預(yù)冷的70%乙醇固定30 min后,分別加入Annexin V和PI(美國BD公司),室溫避光孵育15 min,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡情況。

1.2.8 蛋白質(zhì)印跡法 采用蛋白質(zhì)印跡法檢測TUG1基因?qū)Φ蛲黾吧掀らg質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白質(zhì)表達(dá)的影響。檢測Lenti-TUG1處理組與Lenti-TUG1-shRNA處理組細(xì)胞中RAB2A、MMP-14、Bcl-2、Bax、caspase-3和E-cadherin的蛋白質(zhì)相對表達(dá)量。在慢病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞3、6、12、24、48、72 h后,裂解細(xì)胞,收集蛋白質(zhì),測定樣品濃度定量,制備十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠,進(jìn)行樣品電泳,轉(zhuǎn)膜、封閉、一抗孵育、二抗孵育、底物發(fā)光和拍片。

1.2.9 qRT-PCR 使用實時熒光定量試劑盒對篩選出的lncRNA進(jìn)行qRT-PCR。以GAPDH為內(nèi)參進(jìn)行相對表達(dá)量統(tǒng)計。

1.2.10TUG1基因信號通路預(yù)測分析 應(yīng)用starBase 2.0軟件平臺(https:∥rnasysu.com/encori/)預(yù)測微RNA(microRNA, miR)-186與RAB2A、miR-186與TUG1的潛在結(jié)合位點,并根據(jù)軟件現(xiàn)有數(shù)據(jù)對上述3種基因在229例胃癌患者中的表達(dá)水平進(jìn)行相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1 lncRNATUG1在胃癌組織中的表達(dá)水平 lncRNA芯片檢測結(jié)果顯示,在胃癌組織與癌旁組織中有86種lncRNA表達(dá)水平的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其中18個lncRNA相對表達(dá)量的FC≥2。與癌旁組織比較,胃癌組織中有11種lncRNA表達(dá)上調(diào),分別是TUG1、RNU6ATAC、CHI3L1、VTCN1、MUC1、ZNF202、LRRC15、SLC34A2、CSF1R、DCSTAMP、ALOX5,對應(yīng)FC值分別為5.321、5.218、4.765、4.589、4.256、3.779、 3.685、3.246、2.963、2.717、2.431;有7種lncRNA表達(dá)下調(diào),分別是THY1、COL3A1、CEMIP、CEACAM6、CD209、KLK7、C4B,對應(yīng)FC值分別為4.325、3.564、3.552、3.102、2.889、2.418、2.165。見圖1。對上述差異基因進(jìn)行信號通路分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn)TUG1涉及腫瘤發(fā)生、發(fā)展的多個環(huán)節(jié)(如細(xì)胞增殖、細(xì)胞黏附等)。根據(jù)信號通路分析結(jié)果和參考相關(guān)文獻(xiàn),本研究選取TUG1作為研究靶點。qRT-PCR結(jié)果顯示,胃癌組織中TUG1的相對表達(dá)量顯著高于癌旁組織(P<0.001)。在胃癌細(xì)胞株NCI-N87、MGC-803中,TUG1的相對表達(dá)量分別為4.642±0.477、2.234±0.127,均顯著高于人胃黏膜上皮細(xì)胞GES-1的1.011±0.17(P值均<0.01)。經(jīng)Lenti-TUG1處理后,NCI-N87和MGC-803的相對表達(dá)量增高至6.319±0.177、3.654±0.060;經(jīng)Lenti-TUG1-shRNA處理后,NCI-N87和MGC-803的相對表達(dá)量降低至2.948±0.093、1.565±0.130。

1 胃癌組織 2 癌旁組織

2.2 不同TUG1基因表達(dá)水平的患者臨床及病理因素的比較 根據(jù)胃癌組織中TUG1的中位相對表達(dá)量,將患者分為高表達(dá)組(30例)和低表達(dá)組(30例)。TUG1高表達(dá)組腫瘤體積≥5 cm3、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、有遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期為Ⅲ期的患者構(gòu)成均顯著高于TUG1低表達(dá)組(P值均<0.05)。兩組間患者年齡、性別構(gòu)成和病理分型構(gòu)成的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P值均>0.05)。見表1。

表1 TUG1低表達(dá)組與高表達(dá)組患者臨床及病理因素的比較 (n, N=30)

2.3TUG1基因?qū)CI-N87、MGC-803細(xì)胞增殖的影響 CCK-8實驗結(jié)果顯示,與對照組比較,Lenti-TUG1處理組NCI-N87細(xì)胞的A值顯著增高,Lenti-TUG1-shRNA處理組NCI-N87細(xì)胞的A值顯著降低(F=142.691;3組間兩兩比較P值均<0.01)。與對照組比較,Lenti-TUG1處理組MGC-803細(xì)胞的A值顯著增高,Lenti-TUG1-shRNA處理組MGC-803細(xì)胞的A值顯著降低(F=255.906;3組間兩兩比較P值均<0.01)。見表2。

表2 對照組與Lenti-TUG1-shRNA處理組、Lenti-TUG1處理組A值的比較

2.4TUG1基因?qū)CI-N87、MGC-803遷移和侵襲的影響 Transwell實驗結(jié)果顯示,與對照組細(xì)胞遷移數(shù)量(82.2±10.7)和侵襲數(shù)量(49.2±4.0)相比,Lenti-TUG1處理組NCI-N87細(xì)胞遷移數(shù)量(132.0±12.0)和侵襲數(shù)量(67.7±4.7)均顯著增多;Lenti-TUG1-shRNA處理組NCI-N87細(xì)胞遷移數(shù)量(42.3±6.4)和侵襲數(shù)量(19.8±3.6)均顯著減少(遷移實驗:F=121.088,P值均<0.01。侵襲實驗:F=206.96,P值均<0.01)。與對照組細(xì)胞遷移數(shù)量(41.3±7.6)和侵襲數(shù)量(24.0±5.5)相比,Lenti-TUG1處理組MGC-803細(xì)胞遷移數(shù)量(62.8±3.3)和侵襲數(shù)量(34.3±2.7)均顯著增多;而Lenti-TUG1-shRNA處理組MGC-803細(xì)胞遷移數(shù)量(25.3±4.6)和侵襲數(shù)量(15.0±2.4)均顯著減少(遷移實驗:F=71.212,P值均<0.01。侵襲實驗:F=38.057,P值均<0.01)。見圖2。

1 Lenti-TUG1處理組 2 Lenti-TUG1-shRNA處理組 3 對照組

2.5TUG1基因?qū)CI-N87、MGC-803凋亡的影響 Annexin V/PI實驗結(jié)果顯示,與對照組細(xì)胞凋亡比例[(8.43±1.06)%]相比,Lenti-TUG1處理組NCI-N87細(xì)胞凋亡比例[(3.79±0.42)%]顯著降低;Lenti-TUG1-shRNA處理組NCI-N87細(xì)胞凋亡比例[(19.39±2.16)%]顯著增高(F=193.485;3組間兩兩比較P值均<0.01)。與對照組細(xì)胞凋亡比例[(8.96±2.32)%]相比,Lenti-TUG1處理組MGC-803細(xì)胞凋亡比例[(5.53±0.39)%]顯著降低;Lenti-TUG1-shRNA處理組MGC-803細(xì)胞凋亡比例[(17.46±2.88)%]顯著增高(F=49.168;3組間兩兩比較P值均<0.05)。見圖3。

A、B、C 依次為NCI-N87細(xì)胞的對照組、Lenti-TUG1處理組、Lenti-TUG1-shRNA處理組 D、E、F 依次為MGC-803細(xì)胞的對照組、Lenti-TUG1處理組、Lenti-TUG1-shRNA處理組

2.6TUG1基因?qū)β闶蟾骨环N植瘤的影響 小動物活體成像儀檢測結(jié)果顯示,與對照組細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(1.10±0.03)相比,Lenti-TUG1處理組NCI-N87細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(3.19±0.64)顯著增高,Lenti-TUG1-shRNA處理組NCI-N87細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(0.83±0.12)顯著降低(F=35.092;3組間兩兩比較P值均<0.01);與對照組細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(1.30±0.25)相比,Lenti-TUG1處理組MGC-803細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(3.22±0.51)顯著增高,而Lenti-TUG1-shRNA處理組MGC-803細(xì)胞相對熒光強(qiáng)度(0.89±0.24)顯著降低(F=36.46;3組間兩兩比較P值均<0.01)。見圖4。

1 Lenti-TUG1處理組 2 Lenti-TUG1-shRNA處理組 3 對照組

2.7TUG1基因?qū)Φ蛲鱿嚓P(guān)蛋白和EMT相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 蛋白質(zhì)印跡法檢測結(jié)果顯示,與對照組相比,Lenti-TUG1處理組NCI-N87細(xì)胞和MGC-803細(xì)胞中Bax、caspase-3和E-cadherin的蛋白質(zhì)相對表達(dá)量均顯著降低,RAB2A、MMP-14和Bcl-2的蛋白質(zhì)相對表達(dá)量均顯著增高; Lenti-TUG1-shRNA處理組NCI-N87細(xì)胞和MGC-803細(xì)胞中Bax、caspase-3和E-cadherin蛋白質(zhì)相對表達(dá)量均顯著增高,RAB2A、MMP-14和Bcl-2蛋白質(zhì)相對表達(dá)量均顯著降低(P值均<0.01)。見圖5、表3。

表3 3組間凋亡和EMT相關(guān)蛋白質(zhì)相對表達(dá)量的比較

1、2、3 依次為NCI-N87細(xì)胞的Lenti-TUG1處理組、Lenti-TUG1-shRNA處理組、對照組 4、5、6 依次為MGC-803細(xì)胞的Lenti-TUG1處理組、Lenti-TUG1-shRNA處理組、對照組

2.8TUG1基因信號通路分析 starBase 2.0軟件分析結(jié)果顯示,miR-186、RAB2A和TUG1存在相互結(jié)合的序列。在229例胃癌組織中,TUG1與RAB2A相對表達(dá)量呈正相關(guān)(r=0.180,P=0.006); miR-186與RAB2A相對表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)(r=-0.147,P=0.026)。見圖6。

A miR-186與TUG1的潛在結(jié)合序列 B miR-186與RAB2A的潛在結(jié)合序列 C TUG1與RAB2A相對表達(dá)量呈正相關(guān) D miR-186與RAB2A相對表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)

3 討 論

胃癌發(fā)病的分子機(jī)制至今尚未被完全闡明,本研究探索了 lncRNATUG1在胃癌發(fā)生和發(fā)展中的作用。首先,本團(tuán)隊?wèi)?yīng)用lncRNA芯片技術(shù)從胃癌組織中篩選出表達(dá)增高最為顯著的TUG1基因,并通過qRT-PCR對此結(jié)果在60例胃癌患者中進(jìn)行了驗證,結(jié)果顯示在胃癌組織中TUG1相對表達(dá)量顯著高于癌旁組織,并且不同表達(dá)水平間腫瘤體積、淋巴轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、TNM分期的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。既往研究[11-13]發(fā)現(xiàn),TUG1基因在胃癌中表達(dá)增高,且其表達(dá)水平與患者預(yù)后相關(guān),TUG1表達(dá)高者預(yù)后更差。因納入本研究的多數(shù)患者術(shù)后未滿3年,故未探討TUG1表達(dá)水平與患者預(yù)后(3或5年存活率)之間的關(guān)系,在后續(xù)研究中本團(tuán)隊會繼續(xù)跟蹤隨訪患者,完善這部分?jǐn)?shù)據(jù)。

以上研究結(jié)果提示,TUG1可能參與胃癌的發(fā)生、發(fā)展,故本研究通過細(xì)胞水平實驗進(jìn)一步探討其在胃癌細(xì)胞增殖、凋亡、遷移、侵襲過程中的作用。目前,TUG1被證實在多種腫瘤中發(fā)揮促癌作用,可以促進(jìn)多種消化道惡性腫瘤(如肝癌、結(jié)腸癌、胰腺癌等)發(fā)生、發(fā)展[14-16],故抑制其表達(dá)則能抑制腫瘤發(fā)展。2016年,國內(nèi)兩項研究[17-18]相繼發(fā)現(xiàn)TUG1可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞的增殖、遷移和侵襲。因此,本團(tuán)隊在后續(xù)的功能學(xué)中對此進(jìn)行了驗證。本研究選擇兩種胃癌細(xì)胞株,MGC-803來源于胃癌原發(fā)灶,NCI-N87來源于胃癌肝轉(zhuǎn)移灶。CCK-8實驗、Annexin V/PI凋亡實驗和Transwell實驗結(jié)果顯示,TUG1表達(dá)增高可以促進(jìn)胃癌NCI-N87和MGC-803細(xì)胞增殖、遷移和侵襲,并且誘導(dǎo)凋亡抵抗,以上結(jié)果與其他學(xué)者的研究結(jié)果相似。值得注意的是,本研究通過小動物活體成像儀檢測TUG1基因在體內(nèi)對胃癌細(xì)胞生長的影響,結(jié)果顯示,與對照組比較,Lenti-TUG1處理組(即TUG1表達(dá)升高時)種植瘤的熒光強(qiáng)度顯著增高,而與Lenti-TUG1-shRNA處理組(即TUG1表達(dá)降低時)種植瘤的熒光強(qiáng)度顯著降低,表明TUG1基因在體內(nèi)也可以促進(jìn)胃癌細(xì)胞生長,而在其他研究中關(guān)于其在體內(nèi)的活性較少報道。

既往研究[14-15,17-18]顯示,TUG1可以通過與miRNA如miR-145-5p、miR-144、miR-137、miR-138等結(jié)合(“海綿”作用),抑制上述miRNA表達(dá),進(jìn)而發(fā)揮其生物學(xué)功能。本研究應(yīng)用starBase2.0軟件對TUG1調(diào)控的信號通路進(jìn)行生物信息學(xué)分析,結(jié)果顯示miR-186、RAB2A和TUG1存在相互結(jié)合的序列,并且在229例胃癌組織中TUG1與RAB2A基因表達(dá)呈正相關(guān);miR-186與RAB2A基因表達(dá)呈負(fù)相關(guān),表明TUG1可能通過“海綿”作用負(fù)向調(diào)控miR-186表達(dá),進(jìn)而正向調(diào)控RAB2A蛋白表達(dá)。有學(xué)者認(rèn)為miR-186具有抑癌基因特征,在腫瘤中通常表達(dá)降低,參與調(diào)控多種腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為如增殖、遷移、侵襲、腫瘤耐藥。胃癌中的miR-186可以靶向TWIST1基因抑制細(xì)胞增殖、遷移和侵襲[19]。而RAB2A基因是Ras基因超家族成員之一,是表皮生長因子受體通路中較上游的一個功能基因,通過Ras-Raf-MAPK信號通路在細(xì)胞分化、增殖、遷移、侵襲等多方面發(fā)揮生物學(xué)作用。RAB2A作為原癌基因,其在正常細(xì)胞中的表達(dá)水平較低,且受到多種因素的調(diào)節(jié),保證Ras-Raf-MAPK信號通路對細(xì)胞增殖的正常調(diào)控[20]。腫瘤中的RAB2A通常處于持續(xù)激活狀態(tài),目前已經(jīng)證實RAB2A基因在膀胱癌、乳腺癌等多種腫瘤中的表達(dá)水平異常升高[21-22]。RAB2A基因過表達(dá)一方面誘導(dǎo)MMP-14蛋白表達(dá)促進(jìn)腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移;另一方面,也可以調(diào)控細(xì)胞質(zhì)E-cadherin表達(dá)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞EMT。本研究對MMP-14和E-cadherin的表達(dá)進(jìn)行了檢測,結(jié)果顯示當(dāng)TUG1表達(dá)降低時(即Lenti-TUG1-shRNA處理組)MMP-14的蛋白質(zhì)相對表達(dá)量顯著降低,而E-cadherin蛋白質(zhì)相對表達(dá)量顯著增高,從一定程度上證明TUG1可能通過miR-186/RAB2A信號通路調(diào)控細(xì)胞增殖、遷移、侵襲和凋亡。在后續(xù)研究中,本團(tuán)隊將采用熒光素酶技術(shù)來驗證TUG1與miR-186,以及miR-186與RAB2A的結(jié)合作用。

綜上所述,TUG1是促進(jìn)胃癌發(fā)生、發(fā)展的重要基因,針對TUG1的靶向治療設(shè)計可能為胃癌治療提供新的思路。