雞呼吸道疾病的診斷方法與構(gòu)建綜合性防控措施研究

洪穗瑤

雞呼吸道疾病是現(xiàn)代家禽養(yǎng)殖領(lǐng)域發(fā)生流行率相對(duì)較高的一類綜合性疾病，引起該種疾病的原因極其復(fù)雜，呼吸道疾病發(fā)生流行之后，病原會(huì)不斷侵害雞群的呼吸系統(tǒng)，造成呼吸系統(tǒng)異常需要明確雞呼吸道疾病的診斷方法，并構(gòu)建綜合性的防治措施，從綜合角度入手，降低呼吸道疾病的發(fā)生流行率。

一、兩種常見(jiàn)雞呼吸道疾病的診斷

1、雞傳染性鼻炎的診斷

①病原特征

副雞嗜血桿菌根據(jù)其生化特性和抗原構(gòu)造，可分為以下血清型，分別為：A、B、C、D、E、F、G、H、I、J、K、L、M、N。其中，A型和E型毒力最強(qiáng)，致病性較高。血清分型對(duì)于診斷和防治副雞嗜血桿菌病具有重要意義。副雞嗜血桿菌為革蘭氏陰性桿菌，呈短小、細(xì)長(zhǎng)、無(wú)鞭毛、無(wú)芽孢的桿狀，通常呈單個(gè)或成對(duì)排列。在普通顯微鏡下觀察，呈灰色、藍(lán)灰色或紫紅色，菌落形態(tài)為邊緣整齊、濕潤(rùn)、透明、乳光狀的小菌落。病原對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)性較強(qiáng)，可在4℃條件下存活一個(gè)月，-70℃條件下可長(zhǎng)期保存。在自然環(huán)境中，該菌可存在于土壤、水源、飼料、鳥類腸道等處。該菌對(duì)消毒劑的抵抗力較弱，一般消毒劑可迅速將其殺滅。副雞嗜血桿菌的營(yíng)養(yǎng)需求較高，需富含營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基才能生長(zhǎng)。常用的培養(yǎng)基有巧克力瓊脂、胰蛋白胨瓊脂、含有抗生素的瓊脂等。病原的生長(zhǎng)溫度為15-42℃，最適生長(zhǎng)溫度為35℃-37℃。在4℃條件下可緩慢生長(zhǎng)，但低于4℃生長(zhǎng)受抑制。副雞嗜血桿菌對(duì)酸堿度的適應(yīng)性較強(qiáng)，在pH值5.5-7.5的范圍內(nèi)生長(zhǎng)，最適pH值為6.8-7.0。副雞嗜血桿菌為需氧或微厭氧菌，在有氧條件下生長(zhǎng)良好，但在無(wú)氧條件下也可生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)速度較慢。

②流行特點(diǎn)

副雞嗜血桿菌通過(guò)其莢膜多糖抗原和菌毛等侵襲性物質(zhì)，黏附在雞的上呼吸道黏膜上，引起黏膜炎癥反應(yīng)。同時(shí)，細(xì)菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素和外毒素也會(huì)導(dǎo)致黏膜上皮細(xì)胞損傷和炎癥反應(yīng)。炎癥反應(yīng)的結(jié)果是黏膜腫脹、充血、分泌物增多，表現(xiàn)出鼻炎癥狀?；茧u是主要的傳染源。在臨床癥狀明顯的患雞中，鼻腔、喉頭、氣管等呼吸道分泌物中攜帶大量病原菌。此外，慢性感染或隱性感染的雞也可作為傳染源。副雞嗜血桿菌主要通過(guò)飛沫傳播。雞在呼吸、打噴嚏、鳴叫等過(guò)程中產(chǎn)生的飛沫中含有病原菌，可傳播給同群其他雞。此外，污染物、飼料、飲水等也可能成為傳播途徑。不同品種、不同日齡的雞均可能感染副雞嗜血桿菌，但以肉雞和育成雞的易感性較高。雞群密度過(guò)大、通風(fēng)不良、營(yíng)養(yǎng)不良等因素均會(huì)導(dǎo)致雞抵抗力下降，增加感染風(fēng)險(xiǎn)。副雞嗜血桿菌引起的雞傳染性鼻炎四季均可發(fā)生，但以春秋季節(jié)較為多發(fā)。發(fā)病率波動(dòng)較大，通常在10%-40%之間，嚴(yán)重時(shí)可高達(dá)80%。若得到及時(shí)治療，死亡率較低；若未得到有效控制，死亡率可達(dá)10%-20%。部分感染副雞嗜血桿菌的雞可能呈現(xiàn)慢性或隱性感染，成為重要的傳染源。

③臨床癥狀

雞傳染性鼻炎潛伏期一般為2-4天。急性型病例的臨床癥狀較為典型，表現(xiàn)為頻繁打噴嚏，噴出帶有氣泡的鼻涕。鼻腔分泌物增多，病雞甩頭、擦鼻，導(dǎo)致周圍環(huán)境污染。病雞呼吸急促，張口呼吸，嚴(yán)重時(shí)可出現(xiàn)呼吸音。炎癥波及眼瞼、臉頰等部位，導(dǎo)致腫脹、充血。雞食欲減退，精神不振，體重減輕。急性型病例若未得到及時(shí)治療，死亡率可達(dá)10%-20%。慢性型病例的臨床癥狀較為復(fù)雜，鼻腔、鼻竇內(nèi)有膿性分泌物，病雞鼻塞，呼吸不暢。關(guān)節(jié)腫脹、疼痛，病雞行動(dòng)不便，甚至跛行。骨髓炎表現(xiàn)為疼痛、發(fā)熱、瘸腿等癥狀。眼結(jié)膜充血、腫脹、分泌物增多。慢性病例病程較長(zhǎng)，病雞逐漸消瘦，生長(zhǎng)受阻。

④病理學(xué)變化

副雞嗜血桿菌引起的雞傳染性鼻炎，病理組織學(xué)變化主要涉及呼吸道黏膜、鼻竇、骨髓等部位。呼吸道黏膜充血、水腫，上皮細(xì)胞變性、脫落，黏膜表面有大量中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。在黏膜上皮細(xì)胞間可見(jiàn)大量細(xì)菌聚集，部分菌體突破上皮細(xì)胞進(jìn)入黏膜下層。鼻竇黏膜充血、水腫，竇腔內(nèi)見(jiàn)大量膿性分泌物。鼻竇黏膜上皮細(xì)胞變性、脫落，中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。在鼻竇黏膜及分泌物中可找到大量細(xì)菌。骨髓炎表現(xiàn)為骨髓腔內(nèi)充血、水腫，骨髓細(xì)胞變性、壞死。在骨髓炎病變部位，可見(jiàn)大量細(xì)菌聚集。關(guān)節(jié)炎表現(xiàn)為關(guān)節(jié)囊充血、水腫，關(guān)節(jié)腔內(nèi)有大量膿性分泌物。關(guān)節(jié)軟骨及滑膜組織受損，周圍伴有中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。在關(guān)節(jié)液及滑膜組織中可檢測(cè)到細(xì)菌。眼結(jié)膜充血、水腫，上皮細(xì)胞變性、脫落，結(jié)膜囊內(nèi)有大量膿性分泌物。在眼結(jié)膜及分泌物中可找到大量細(xì)菌。

⑤實(shí)驗(yàn)室診斷

取病雞鼻腔、竇腔、骨髓等病變部位的病料，或采集病雞死亡后的尸體解剖組織，制成均勻的涂片。將涂片固定，使用堿性美藍(lán)或革蘭氏染色法進(jìn)行染色。用油鏡觀察涂片，觀察細(xì)菌形態(tài)、排列以及染色特性。在涂片中發(fā)現(xiàn)革蘭氏陰性、呈短小桿菌、呈鏈狀排列的細(xì)菌，可初步判斷為副雞嗜血桿菌。病原分離培養(yǎng)期間取病料或病變部位的組織，接種于含有抗生素的巧克力瓊脂平板或含有抗生素的液體培養(yǎng)基中。將平板或液體培養(yǎng)基在適當(dāng)?shù)臏囟群蜐穸认屡囵B(yǎng)24-48h。觀察細(xì)菌在培養(yǎng)基上的生長(zhǎng)情況，如菌落形態(tài)、顏色、邊緣等特征。副雞嗜血桿菌在固體培養(yǎng)基上形成的菌落通常為灰白色或淡黃色，菌落較小，直徑約1-3mm。菌落形狀為邊緣整齊、表面光滑的圓形或不規(guī)則形。菌落的邊緣通常較整齊，呈波浪狀或鋸齒狀。菌落質(zhì)地較疏松，用手指觸摸有顆粒感。菌落中心部位較透明，邊緣部位較渾濁。副雞嗜血桿菌在某些培養(yǎng)基上可產(chǎn)生溶血現(xiàn)象，即菌落周圍的培養(yǎng)基變透明。

2、雞傳染性支氣管炎的診斷

①病原特征

雞傳染性支氣管炎病毒根據(jù)其血清型可分為兩個(gè)主要的血清型傳染性支氣管炎病毒-1和傳染性支氣管炎病毒-2。傳染性支氣管炎病毒-1又可分為若干個(gè)亞型，如傳染性支氣管炎病毒-1a、傳染性支氣管炎病毒-1b等。傳染性支氣管炎病毒-2同樣可分為若干個(gè)亞型，如傳染性支氣管炎病毒-2a、傳染性支氣管炎病毒-2b等。不同血清型和亞型之間的抗原性存在差異，導(dǎo)致其引起的疾病表現(xiàn)和免疫保護(hù)力也有所不同。病毒為球形或近似球形病毒，直徑約為60-120nm。病毒粒子表面具有囊膜，囊膜上覆蓋有三角形的刺突。病毒粒子內(nèi)部包含一個(gè)直徑約為30nm的圓形核心，核心內(nèi)含有病毒的RNA和一些輔助蛋白。病毒對(duì)外界環(huán)境有一定的抵抗力，可以耐受一定程度的酸、堿、熱和干燥條件。在室溫下，病毒在羽毛、糞便等有機(jī)物中可存活數(shù)天至數(shù)周。在4℃條件下，病毒可存活數(shù)個(gè)月。在高溫（60℃）和干燥條件下，病毒較易失活。雞傳染性支氣管炎病毒在感染雞后，可以在感染部位和排泄物中檢測(cè)到。病毒在56℃條件下加熱30min即可失活。常用的消毒劑，如醛類、醇類、碘類、過(guò)氧化物類等，均可有效殺滅病毒。傳染性支氣管炎病毒主要通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用進(jìn)入宿主細(xì)胞，隨后在細(xì)胞質(zhì)中進(jìn)行復(fù)制。病毒復(fù)制過(guò)程中，會(huì)合成病毒RNA、病毒蛋白和病毒囊膜。病毒粒子在細(xì)胞內(nèi)組裝后，會(huì)釋放到細(xì)胞外，進(jìn)一步感染其他細(xì)胞。

②流行特點(diǎn)

雞傳染性支氣管炎病毒主要通過(guò)感染雞的呼吸道上皮細(xì)胞，引起細(xì)胞病變和炎癥反應(yīng)。病毒進(jìn)入宿主細(xì)胞后，利用宿主細(xì)胞的生物合成機(jī)制復(fù)制自身，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。同時(shí)，病毒還會(huì)引起免疫系統(tǒng)的應(yīng)答，導(dǎo)致全身性炎癥反應(yīng)，進(jìn)一步損傷機(jī)體組織。傳染源主要是病雞和帶毒雞。病雞在感染后，病毒在其呼吸道分泌物、糞便和蛋中大量排出。帶毒雞則可能在感染后長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)成為無(wú)癥狀攜帶者，不斷排出病毒。病毒主要通過(guò)飛沫傳播。病雞和帶毒雞在咳嗽、打噴嚏、呼吸時(shí)產(chǎn)生的飛沫中含有病毒，易感雞吸入這些飛沫后感染。此外，病毒還可以通過(guò)直接接觸、空氣氣溶膠傳播，以及污染的飼料、飲水等途徑傳播。傳染性支氣管炎病毒可感染各種年齡段的雞，但以幼齡雞最為易感。不同品種和性別的雞對(duì)病毒的易感性無(wú)明顯差異。通常情況下，雞群初次感染傳染性支氣管炎病毒后，易感性較高；在經(jīng)歷一次感染后，部分雞可產(chǎn)生一定程度的免疫力，但不同血清型和亞型之間的交叉保護(hù)力有限。傳染性支氣管炎病毒在不同地區(qū)、不同季節(jié)均有流行的可能。傳染性支氣管炎病毒的傳播速度受多種因素影響，如飼養(yǎng)管理?xiàng)l件、環(huán)境衛(wèi)生狀況、病毒血清型和亞型等。在飼養(yǎng)管理?xiàng)l件較差、衛(wèi)生條件不達(dá)標(biāo)、病毒血清型和亞型多樣化的雞群中，傳染性支氣管炎病毒的傳播和流行風(fēng)險(xiǎn)較高。

③臨床癥狀

一般潛伏期為1-4天。在某些情況下，潛伏期可能更長(zhǎng)，甚至可達(dá)2周。雛雞感染傳染性支氣管炎病毒后，病雞表現(xiàn)為精神不振、食欲減退、消瘦、羽毛松亂、體溫升高等，同時(shí)可能出現(xiàn)呼吸道癥狀，如咳嗽、打噴嚏、呼吸困難等。部分病雞可能出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，如頭頸歪斜、運(yùn)動(dòng)失調(diào)等。成年雞感染傳染性支氣管炎病毒后，可能出現(xiàn)呼吸道癥狀，如咳嗽、打噴嚏等，無(wú)明顯的臨床表現(xiàn)。部分病雞可能出現(xiàn)產(chǎn)蛋率下降、蛋品質(zhì)下降等癥狀。在慢性感染的情況下，病雞可能長(zhǎng)期表現(xiàn)為呼吸道癥狀，如咳嗽、打噴嚏等，但死亡率較低。

④病理學(xué)變化

傳染性支氣管炎病毒感染雞的呼吸道上皮細(xì)胞后，病毒會(huì)損害細(xì)胞膜和細(xì)胞器，導(dǎo)致細(xì)胞變性、壞死和脫落。病變主要出現(xiàn)在鼻腔、喉頭、氣管和支氣管等呼吸道部位。病毒感染引起呼吸道上皮細(xì)胞損傷后，黏膜會(huì)出現(xiàn)充血、水腫和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。炎性細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞等。炎性細(xì)胞浸潤(rùn)會(huì)導(dǎo)致黏膜腫脹，進(jìn)而影響呼吸道通暢。傳染性支氣管炎病毒感染雞的肺泡后，病毒會(huì)損傷肺泡上皮細(xì)胞和毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞，導(dǎo)致肺泡充血、出血和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。炎性細(xì)胞主要包括淋巴細(xì)胞、漿細(xì)胞、單核細(xì)胞等。肺泡充血、出血和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)會(huì)導(dǎo)致肺部功能減退，影響氣體交換。部分傳染性支氣管炎病毒感染雞會(huì)出現(xiàn)病毒性關(guān)節(jié)炎和肌炎。病毒感染關(guān)節(jié)滑膜后，會(huì)導(dǎo)致關(guān)節(jié)腫脹、疼痛和功能障礙。病毒感染肌肉后，會(huì)引起肌肉炎癥和肌纖維壞死。傳染性支氣管炎病毒感染雞的生殖系統(tǒng)后，病毒會(huì)損傷生殖道上皮細(xì)胞，導(dǎo)致局部充血、水腫和炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。病變主要出現(xiàn)在輸卵管、卵巢和睪丸等生殖器官。生殖系統(tǒng)病變會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降、蛋品質(zhì)下降等癥狀。

⑤實(shí)驗(yàn)室診斷

通常采用雞胚尿囊膜接種或雞胚肝細(xì)胞接種，分離出傳染性支氣管炎病毒后進(jìn)行鑒定。病毒鑒定可通過(guò)電鏡觀察、免疫熒光染色、ELISA等方法進(jìn)行。PCR是一種敏感、快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)傳染性支氣管炎病毒的方法。通過(guò)設(shè)計(jì)針對(duì)傳染性支氣管炎病毒特定基因序列的引物，對(duì)病雞的組織樣本、呼吸道分泌物、糞便等進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢測(cè)是否存在傳染性支氣管炎病毒核酸。PCR方法可檢測(cè)傳染性支氣管炎病毒的多種血清型和亞型。ELISA是一種常用的檢測(cè)傳染性支氣管炎病毒抗體的方法。通過(guò)制備傳染性支氣管炎病毒抗原，檢測(cè)病雞血清中是否存在特異性抗體。ELISA方法可用于診斷傳染性支氣管炎病毒感染、評(píng)估感染程度以及監(jiān)測(cè)疫苗接種效果。IFA是一種檢測(cè)傳染性支氣管炎病毒抗原的方法。通過(guò)制備病毒抗原，與熒光標(biāo)記的二抗結(jié)合，檢測(cè)病雞組織樣本中是否存在傳染性支氣管炎病毒抗原。IFA方法可直接觀察病毒抗原，有利于病毒定位和病理組織學(xué)診斷。病毒分離與鑒定能觀察到傳染性支氣管炎病毒顆粒，或檢測(cè)到病毒核酸，可判定為傳染性支氣管炎病毒感染。PCR能檢測(cè)到傳染性支氣管炎病毒核酸，可判定為傳染性支氣管炎病毒感染。通過(guò)比較基因序列，可進(jìn)一步確定病毒血清型和亞型。ELISA能看到病雞血清中特異性抗體滴度達(dá)到陽(yáng)性閾值，可判定為傳染性支氣管炎病毒感染。通過(guò)比較抗體滴度，可評(píng)估感染程度。IFA觀察到病雞組織樣本中傳染性支氣管炎病毒抗原，可判定為傳染性支氣管炎病毒感染。

二、治療方案

為了預(yù)防出現(xiàn)繼發(fā)感染，抗菌消炎，選擇使用2.5%的強(qiáng)力霉素200g以及腎腫解毒藥物100g，用3500mL的清水與腎腫毒藥物混合均勻，向其中加入50g的強(qiáng)力霉素粉劑，讓雞群飲水，每天飲水兩次連續(xù)飲水三天。同時(shí)，對(duì)于呼吸道癥狀較為嚴(yán)重的患病雞可以口服氨茶堿，使用劑量為每只雞0.2mg，每天使用一次，連續(xù)使用三天。另外在中藥治療過(guò)程中推薦使用麻杏石甘散，該中藥組方是由杏仁20g、麻黃30g、桔梗30g、石膏120g、黃芩20g、連翹20g、金銀花30g、金蕎麥根20g、牛蒡子30g、穿心蓮30g、甘草30g組成，混合均勻之后將其研磨成粉末，用60目的銅篩進(jìn)行過(guò)篩處理，按照每只雞每次使用0.5-1.0g的用量添加到飼料當(dāng)中，每天使用兩次，連續(xù)使用5天。也可以選擇使用紫苑80g、魚腥草100g、石決明、桔梗各50g、蘇葉60g、白藥子和黃藥子各45g、梔子35g、郁金35g、大黃陳皮、甘草各40g、膽草、三仙各30g，研磨成粉末之后用60目的銅篩過(guò)篩，開水煎煮剩余藥液1500mL，藥渣添加到飼料中，按照1%的比例添加到飲用水中，讓雞群飲水，每天飲水兩次，連續(xù)飲水5天。

三、預(yù)防措施

為了綜合預(yù)防雞呼吸道疾病，要堅(jiān)持每天清理雞舍，確保干凈衛(wèi)生，減少病原體的存活和傳播。避免雞群過(guò)分擁擠，合理設(shè)置雞只的密度，防止交叉感染。堅(jiān)持封閉化的養(yǎng)殖管理方式，限制人員和設(shè)備的來(lái)往，防止人為傳播病原體。禁止非必要的外來(lái)動(dòng)物進(jìn)入雞舍，并定期消殺工具和設(shè)備。疫苗接種可提高雞群的免疫力，減少疾病的發(fā)生和傳播。對(duì)于有疑似呼吸道疾病癥狀的雞只，進(jìn)行病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)以確定病原體和采取相應(yīng)的治療措施。對(duì)于已經(jīng)確診感染呼吸道疾病的雞舍，需要嚴(yán)格限制訪客和人員進(jìn)入，并注意使用專門工具進(jìn)行操作。建立健康監(jiān)測(cè)系統(tǒng)，詳細(xì)記錄雞群的相關(guān)健康指標(biāo)，以及疫苗接種和藥物治療的記錄。

綜上所述，呼吸道疾病是雞養(yǎng)殖嚴(yán)重危害最為嚴(yán)重的一類綜合性疾病，發(fā)病原因多種多樣，該種疾病的傳播流行將會(huì)直接影響到養(yǎng)殖戶的經(jīng)濟(jì)效益。對(duì)此類疾病單純使用疫苗和藥物治療遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠，需要加快構(gòu)建綜合性的防治方案，注重做好科學(xué)飼養(yǎng)管理，增強(qiáng)雞群身體抵抗力，降低呼吸道疾病的發(fā)生流行率，保障家禽養(yǎng)殖安全。