腎小管HIF-1α/miR-23a通路在膿毒血癥急性腎損傷中的作用機(jī)制

陳思宇 強(qiáng)立娟 朱嘉興 馬世蘭 陳占龍

膿毒血癥是指由感染引起的全身炎性反應(yīng)綜合征,其發(fā)病率很高,可由任何部位的感染引起,能夠?qū)е聶C(jī)體多個器官功能障礙,引起患者死亡[1]。膿毒血癥急性腎損傷(sepsis associated acute kidney injury,SA-AKI)是膿毒血癥最常見的并發(fā)癥之一,SA-AKI以腎臟排泄功能迅速喪失為主要特征,可嚴(yán)重影響膿毒血癥患者預(yù)后并增加患者病死率[2]。目前,筆者發(fā)現(xiàn)臨床上尚缺乏有效預(yù)防和治療SA-AKI的干預(yù)措施,因此,探索SA-AKI具體致病機(jī)制,明確SA-AKI的重要調(diào)節(jié)因子,對提高膿毒血癥治療效果、防治SA-AKI具有重要意義。腎小管上皮細(xì)胞損傷是SA-AKI的典型病理特征,研究發(fā)現(xiàn),膿毒血癥病理生理情況下,缺氧是引起腎小管上皮損傷的重要致病因素[3]。低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor,HIF)是機(jī)體適應(yīng)缺氧環(huán)境機(jī)制中的最主要因素,也是膿毒血癥引起多器官功能損傷的主要原因之一[4]。在缺氧性腎損傷中,HIF-1α主要表達(dá)于腎小管上皮細(xì)胞,HIF-1α調(diào)控的下游通路在調(diào)節(jié)能量代謝、線粒體功能、細(xì)胞凋亡等多種生理病理過程中發(fā)揮重要作用[5]。在SA-AKI的進(jìn)程中,HIF-1α可以通過調(diào)節(jié)能量代謝、促進(jìn)血管再生、降低細(xì)胞耗氧來調(diào)節(jié)腎損傷[6]。但目前筆者發(fā)現(xiàn)其在SA-AKI中的詳細(xì)機(jī)制尚未闡明。MicroRNA(miRNA)是一種內(nèi)源性非編碼小RNA,通過調(diào)節(jié)靶基因表達(dá)參與氧化應(yīng)激、炎性反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等過程。近年來一些研究提示miRNA在調(diào)節(jié)腎臟損傷和修復(fù)等方面發(fā)揮至關(guān)重要的作用[7-8]。研究表明,miR-23a可通過多種途徑調(diào)節(jié)膿毒血癥損傷期間的炎性反應(yīng)和細(xì)胞凋亡[9-10]。作為一種調(diào)節(jié)氧穩(wěn)態(tài)的核轉(zhuǎn)錄因子,HIF-1α已被證實(shí)可以直接調(diào)控多種miRNA的表達(dá)[11]。然而,SA-AKI病理生理過程中HIF-1α和miR-23a的作用機(jī)制及相互關(guān)系尚不完全清楚。因此,本研究體外培養(yǎng)腎小管上皮細(xì)胞,探討腎小管上皮細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)對miR-23a的調(diào)控作用,并分析二者參與SA-AKI發(fā)生、發(fā)展的作用機(jī)制,以期為臨床防治SA-AKI提供新的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞:人近曲小管上皮細(xì)胞(HK-2細(xì)胞)購自中國上海科學(xué)院細(xì)胞庫。

1.1.2 主要試劑:DMEM/F12培養(yǎng)基、胎牛血清均購自美國Gibco公司;脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(規(guī)格:10 mg)購自上海吉至生化科技公司;HIF-1α小干擾RNA序列(HIF-1α siRNA)及其陰性對照序列(NC siRNA)、miR-23a模擬物(miR-23a mimic)及其陰性對照(miR-NC)、miR-23a抑制劑(anti-miR-23a)及其陰性對照(anti-miR-NC)均購自上海吉瑪公司;Lipofectamine 2000試劑購自美國Invitrogen公司;TRIzol試劑、反轉(zhuǎn)錄試劑盒、qRT-PCR試劑盒均購自美國Thermo Fisher公司;CCK-8試劑盒、Annexin V-FITC/PI凋亡檢測試劑盒、BCA蛋白檢測試劑盒均購自上海愛必信生物科技公司;白細(xì)胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)ELISA檢測試劑盒購自北京鼎國昌盛公司;HIF-1α、核轉(zhuǎn)錄因子-κB-p65(nuclear factorκB-p65,NF-κB-p65)、磷酸化NF-κB-p65(p-NF-κB-p65)、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)、GAPDH一抗、過氧化物酶標(biāo)記的山羊抗兔二抗均購自英國abcam公司。

1.1.3 主要儀器:HeracellTM240iTM二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱、MultiskanTMFC多功能酶標(biāo)儀、Attune NxT流式細(xì)胞儀購自美國Thermo Fisher公司;DYY-4C電泳儀購自南京普陽科學(xué)儀器研究所;LEIA-X4熒光定量PCR儀購自濟(jì)南愛來寶儀器設(shè)備公司;iBright凝膠成像系統(tǒng)購自美國Invitrogen公司。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng):HK-2細(xì)胞采用含10% 胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基培養(yǎng),置于37℃、5%二氧化碳、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。取對數(shù)生長期的HK-2細(xì)胞進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

1.2.2 SA-AKI細(xì)胞模型構(gòu)建:參考文獻(xiàn)[12]方法,將對數(shù)生長期的HK-2細(xì)胞按照1×105個/mL細(xì)胞密度接種于24孔培養(yǎng)板,每孔100 μL,常規(guī)培養(yǎng)待細(xì)胞密度達(dá)到約80%后,加入含5 μg/mL LPS的培養(yǎng)液培養(yǎng)24 h。

1.2.3 細(xì)胞分組與轉(zhuǎn)染:LPS處理的HK-2細(xì)胞分為LPS組(不進(jìn)行轉(zhuǎn)染處理)、NC siRNA 組(轉(zhuǎn)染NC siRNA)、HIF-1α siRNA組(轉(zhuǎn)染HIF-1α siRNA)、anti-miR-NC組(轉(zhuǎn)染anti-miR-NC)、anti-miR-23a組(轉(zhuǎn)染anti-miR-23a)、HIF-1α siRNA+miR-NC組(轉(zhuǎn)染HIF-1α siRNA和miR-NC)、HIF-1α siRNA+miR-23a組(轉(zhuǎn)染HIF-1α siRNA和miR-23a mimic),以正常培養(yǎng)、未經(jīng)任何處理的HK-2細(xì)胞作為空白對照組(Control組)。轉(zhuǎn)染過程嚴(yán)格按照Lipofectamine 2000試劑說明書進(jìn)行,轉(zhuǎn)染后6 h更換培養(yǎng)液,隨后繼續(xù)培養(yǎng)48 h,檢測轉(zhuǎn)染效率。

1.2.4 qRT-PCR實(shí)驗(yàn):使用TRIzol試劑提取HK-2細(xì)胞中總RNA樣本,確定RNA濃度后,通過反轉(zhuǎn)錄試劑盒將RNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA,將合成的cDNA使用qRT-PCR試劑盒進(jìn)行定量擴(kuò)增。引物序列:HIF-1α正向引物序列:5’-GAACGTCGAAAAGAAAAGTCTCG-3’,反向引物序列:5’-CCTTATCAAGATGCGAACTCACA-3’;GAPDH正向引物序列:5’-TGTTCGTCATGGGTGTGAAC-3’,反向引物序列:5’-ATGGCATGGACTGTGGTCAT-3’;miR-23a正向引物序列:5’-CAGAGCAAGGGAACAGTAAGTGTGT-3’,反向引物序列:5’-GGAGGTCACTTCCGATCCA-3’;U6正向引物序列:5’-CTCGCTTCGGCAGCACA-3’,反向引物序列:5’-AACGCTTCACGAATTTGCGT-3’。反應(yīng)條件為:95℃ 2 min,95℃ 30 s,60℃ 30 s,72℃ 30 s,進(jìn)行40個循環(huán)。使用2-ΔΔCt法計算目的基因相對表達(dá)量。

1.2.5 細(xì)胞活力測定:采用CCK-8法檢測。將HK-2細(xì)胞以2×105個/孔的密度接種到96孔板上,孵育24 h后,將體積為10 μL的CCK-8溶液添加至每個孔中,37℃繼續(xù)孵育2 h。用酶標(biāo)儀檢測450 nm波長下每個孔的光密度值(OD值)。

1.2.6 細(xì)胞凋亡檢測:采用流式細(xì)胞術(shù)檢測。4組HK-2細(xì)胞調(diào)以1×106mL/孔接種于24孔板,常規(guī)培養(yǎng)24 h,加入預(yù)冷的磷酸緩沖鹽溶液(phosphate buffered solution,PBS)洗滌,用100 μL結(jié)合緩沖液重懸細(xì)胞,分別加入5 μL Annexin V-FITC溶液和10 μL PI溶液,震蕩混勻后,室溫避光孵育15 min,加入400 μL結(jié)合緩沖液稀釋細(xì)胞,于1 h內(nèi)在流式細(xì)胞儀上檢測細(xì)胞凋亡情況。

1.2.7 細(xì)胞中炎性因子水平檢測:收集4組HK-2細(xì)胞培養(yǎng)液,離心留取上清液,采用ELISA法檢測細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α含量實(shí)驗(yàn)操作嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

1.2.8 Western blot法:使用RIPA裂解緩沖液從HK-2細(xì)胞中提取總蛋白,BCA蛋白檢測試劑盒用于評估蛋白質(zhì)樣品含量。取等量蛋白質(zhì)樣品上樣,通過10 % SDS-PAGE分離,將目標(biāo)蛋白轉(zhuǎn)移到PVDF膜上,轉(zhuǎn)染蛋白的PVDF膜用5%脫脂牛奶封閉2 h,清洗PVDF膜,與稀釋的一抗在4℃共同孵育過夜,一抗包括HIF-1α(1∶800)、NF-κB-p65(1∶1 000)、p-NF-κB-p65(1∶1 000)、IκBα(1∶1 000)、p-IκBα(1∶1 000)和GAPDH(1∶1 000)。洗膜,與二抗(1∶1 000)室溫孵育1 h。洗膜,滴加增強(qiáng)的化學(xué)發(fā)光試劑,在凝膠成像系統(tǒng)中對蛋白條帶進(jìn)行可視化,以GAPDH作為內(nèi)部對照,利用Image J軟件分析蛋白條帶灰度值。

2 結(jié)果

2.1 HK-2細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)水平比較 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞中HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)水平均顯著升高(P<0.05);與LPS組比較,NC siRNA 組HK-2細(xì)胞中HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)水平變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA組HK-2細(xì)胞中HIF-1α蛋白和mRNA表達(dá)水平均顯著降低(P<0.05)。見表1,圖1。

圖1 HK-2細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)

表1 HK-2細(xì)胞中HIF-1α表達(dá)水平比較

2.2 HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)水平比較 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞中miR-23a mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.05);與LPS組比較,anti-miR-NC組HK-2細(xì)胞中miR-23a mRNA表達(dá)水平變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),anti-miR-23a組HK-2細(xì)胞中miR-23a mRNA表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)。與HIF-1α siRNA組比較,HIF-1α siRNA+miR-NC組HK-2細(xì)胞中miR-23a mRNA表達(dá)水平變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA+miR-23a組HK-2細(xì)胞中miR-23a mRNA表達(dá)水平顯著升高(P<0.05)。見表2。

表2 HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)水平比較

2.3 抑制HIF-1α表達(dá)對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞中炎性因子水平的影響 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞活力顯著降低,細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均顯著升高(P<0.05);與LPS組比較,NC siRNA 組HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA組HK-2細(xì)胞活力顯著升高,細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3,圖2。

圖2 抑制HIF-1α表達(dá)對HK-2細(xì)胞凋亡的影響

表3 抑制HIF-1α表達(dá)對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞中炎性因子水平的影響

2.4 抑制HIF-1α表達(dá)對HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)的影響 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞中的miR-23a mRNA表達(dá)水平顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與LPS組比較,NC siRNA 組HK-2細(xì)胞中的miR-23a mRNA表達(dá)水平變化差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA組HK-2細(xì)胞中的miR-23a mRNA表達(dá)水平顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

表4 抑制HIF-1α表達(dá)對HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)的影響

2.5 抑制miR-23a表達(dá)對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞中炎性因子水平的影響 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞活力顯著降低,細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均顯著升高(P<0.05);與LPS組比較,anti-miR-NC組HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),anti-miR-23a組HK-2細(xì)胞活力顯著升高,細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均顯著降低,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5,圖3。

圖3 抑制miR-23a表達(dá)對HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)的影響

表5 抑制miR-23a表達(dá)對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞中炎性因子水平的影響

2.6 抑制HIF-1α表達(dá)并過表達(dá)miR-23a對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率和細(xì)胞中炎性因子(IL-6、IL-1β、TNF-α)水平的影響 與HIF-1α siRNA組比較,HIF-1α siRNA+miR-NC組的HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);HIF-1α siRNA+miR-23a組的HK-2細(xì)胞活力顯著降低,細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平顯著升高,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表6,圖4。

圖4 抑制HIF-1α表達(dá)并過表達(dá)miR-23a對HK-2細(xì)胞凋亡的影響

表6 抑制HIF-1α表達(dá)并過表達(dá)miR-23a對HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞中炎性因子水平的影響

2.7 8組HK-2細(xì)胞NF-κB信號通路蛋白表達(dá)水平比較 與Control組比較,LPS組HK-2細(xì)胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均顯著升高(P<0.05);與LPS組比較,NC siRNA 組和anti-miR-NC組HK-2細(xì)胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA組和anti-miR-23a組HK-2細(xì)胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均顯著降低(P<0.05);與HIF-1α siRNA組比較,HIF-1α siRNA+miR-NC組HK-2細(xì)胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值變化差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),HIF-1α siRNA+miR-23a組HK-2細(xì)胞p-NF-κB-p65/NF-κB-p65、p-IκBα/IκBα比值均顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖5,表7。

圖5 8組HK-2細(xì)胞NF-κB信號通路蛋白表達(dá)水平比較

表7 8組HK-2細(xì)胞NF-κB信號通路蛋白表達(dá)水平比較

3 討論

HIF-1α是一種氧調(diào)節(jié)蛋白,是調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝以響應(yīng)缺氧變化的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子,在炎癥性疾病的發(fā)生、進(jìn)展中發(fā)揮作用。當(dāng)炎癥性疾病發(fā)生時,炎癥導(dǎo)致局部新陳代謝加快,對氧氣的需求增加;另一方面,由于血管收縮和血栓形成,組織從血流中獲得的氧氣受到限制,最終導(dǎo)致炎性缺氧,促使HIF-1α表達(dá)變化,HIF-1α在一系列生理和病理過程中起著至關(guān)重要的作用[13-14]。越來越多的證據(jù)表明,HIF-1α參與AKI的調(diào)節(jié)。Bondi等[15]研究報道,HIF-1α通過調(diào)控核因子紅細(xì)胞-2相關(guān)因子2(NRF2)活性參與缺血性AKI后纖維化。Fu等[16]報道,腎小管細(xì)胞中HIF-1α-Bcl-2/腺病毒E1B-19k相關(guān)蛋白3(BNIP3)介導(dǎo)的線粒體自噬通過抑制AKI中細(xì)胞凋亡和活性氧產(chǎn)生發(fā)揮保護(hù)作用。本研究旨在探討HIF-1α在SA-AKI中的作用和潛在機(jī)制。研究結(jié)果顯示,HIF-1α在LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中表達(dá)顯著上調(diào),抑制HIF-1α表達(dá)可增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞活力,抑制細(xì)胞凋亡。此外,HIF-1α的抑制通過降低IL-6、IL-1β和TNF-α炎性細(xì)胞因子水平改善LPS誘導(dǎo)的炎性反應(yīng)。表明HIF-1α可能在SA-AKI進(jìn)展中發(fā)揮促進(jìn)作用。

miR-23a是miR-23家族的成員。最近研究表明,miR-23家族在炎性反應(yīng)和腎臟損傷的發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用[17]。先前的一項(xiàng)研究報道,miR-23a對高葡萄糖誘導(dǎo)腎小管上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化和體外腎纖維化的進(jìn)展有顯著影響[18]。本研究表明,LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中miR-23a表達(dá)水平顯著升高,抑制miR-23a表達(dá)后,LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞活力升高,細(xì)胞凋亡率以及細(xì)胞中IL-6、IL-1β和TNF-α水平均降低。該結(jié)果提示miR-23a可能參與SA-AKI發(fā)生、發(fā)展。此外,本研究結(jié)果顯示,抑制HIF-1α表達(dá)可降低LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中miR-23a水平,同時,miR-23a過表達(dá)逆轉(zhuǎn)了抑制HIF-1α表達(dá)對LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞活力、細(xì)胞凋亡以及IL-6、IL-1β、TNF-α等炎性細(xì)胞因子水平的調(diào)控作用。上述結(jié)果表明HIF-1α可能通過調(diào)控miR-23a表達(dá)在SA-AKI中發(fā)揮作用。既往研究表明,HIF-1α參與AKI中多種功能性miRNA的調(diào)節(jié)[19],并且HIF-1α水平受特定miRNA的調(diào)節(jié)。本研究結(jié)果證實(shí),在SA-AKI中,HIF-1α可能通過調(diào)控miR-23a表達(dá)發(fā)揮作用。HIF-1α/miR-23a途徑可能是SA-AKI的有效干預(yù)靶點(diǎn)。

NF-κB是一種特征性促炎轉(zhuǎn)錄因子,NF-κB信號通路在炎癥和免疫反應(yīng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。大量研究表明,NF-κB信號通路參與調(diào)節(jié)LPS誘導(dǎo)的腎損傷炎性反應(yīng)的基因表達(dá)和膿毒血癥的病理生理過程[20-22]。NF-κB的激活受IκB激酶(IKKs)和抑制蛋白IκB調(diào)控,可被LPS、促炎細(xì)胞因子等多種刺激激活。在膿毒血癥小鼠的腎臟組織中,通過檢測NF-κB-p65易位和相關(guān)蛋白的磷酸化程度,可以觀察到NF-κB信號的激活[23]。近年來有證據(jù)顯示,AKI中HIF-1α可以調(diào)節(jié)NF-κB信號通路,同時NF-κB參與了AKI中HIF-1α表達(dá)的增加[24-25]。但SA-AKI中HIF-1α調(diào)控NF-κB信號通路激活的具體機(jī)制尚未完全闡明。Fan等[26]報道,miR-23a可能通過活化NF-κB信號通路參與細(xì)胞生物學(xué)過程。Xu等[27]報道,miR-23a-3p通過靶向膿毒血癥中的NF-κB信號傳導(dǎo)來改善AKI。本研究結(jié)果顯示,LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中NF-κB-p65和IκBα磷酸化水平升高,抑制HIF-1α和miR-23a表達(dá)均明顯降低LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中NF-κB-p65和IκBα磷酸化水平;此外,miR-23a過表達(dá)減弱了抑制HIF-1α表達(dá)降低LPS誘導(dǎo)的HK-2細(xì)胞中NF-κB-p65和IκBα磷酸化水平的作用。該結(jié)果表明,腎小管HIF-1α可能通過調(diào)控miR-23a表達(dá),進(jìn)而調(diào)節(jié)NF-κB信號通路活化,促進(jìn)SA-AKI的發(fā)生。

綜上所述,抑制腎小管HIF-1α表達(dá)能夠增強(qiáng)LPS誘導(dǎo)的腎小管上皮細(xì)胞活力、抑制細(xì)胞凋亡和細(xì)胞中炎性反應(yīng),其作用機(jī)制可能與抑制miR-23a表達(dá),從而抑制NF-κB信號通路激活有關(guān)。本研究結(jié)果證實(shí),HIF-1α和miR-23a參與SA-AKI發(fā)生、發(fā)展,HIF-1α/miR-23a途徑可能是SA-AKI的潛在治療靶點(diǎn)。但本研究僅從體外細(xì)胞層面開展了實(shí)驗(yàn)探索,后期仍需在動物實(shí)驗(yàn)中進(jìn)一步驗(yàn)證。