基于攪拌棒固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜/嗅辨同步分析法的污染河道水異味分析

陳秀雯,嚴(yán)文杰,黃波濤

(上海市環(huán)境科學(xué)研究院,上海 200233)

人類嗅辨氣味的能力十分強(qiáng)大,人鼻理論上可以嗅辨至少1萬億種氣味[1]。但是僅依靠嗅覺,研究人員常常無法明確導(dǎo)致水體異味的具體物質(zhì),這是由于異味物質(zhì)種類繁多且濃度水平較低,會對嗅覺產(chǎn)生綜合反應(yīng),導(dǎo)致嗅覺識別難度較高。由于儀器檢出限遠(yuǎn)高于嗅覺感知限值[2],以儀器檢測代替人鼻嗅辨可能導(dǎo)致出現(xiàn)人聞到較大異味但是儀器檢測不到的現(xiàn)象[3]。氣相色譜-質(zhì)譜/嗅辨同步分析法兼具質(zhì)譜和嗅辨分析的優(yōu)點(diǎn),不僅可對待測物進(jìn)行準(zhǔn)確定性、定量分析,還能使研究人員鑒別嗅辨色譜分離出的異味物質(zhì)的氣味類型和強(qiáng)度(分0, 1, 2, 3, 4等5個(gè)等級,分別代表無感、微弱、清晰、較強(qiáng)和非常強(qiáng)烈)[4],在食品分析[5-6]、香精香料生產(chǎn)[7]的香味鑒定以及環(huán)境領(lǐng)域異味檢測與溯源中得到了實(shí)際應(yīng)用。如文獻(xiàn)[8]利用這種方法鑒別了由城市污水經(jīng)多級處理而來的飲用水中異味物質(zhì),確定了土臭素、2,4,6-三氯苯甲醚是主要異味物質(zhì)。文獻(xiàn)[9]利用該技術(shù)分析了城市固體廢棄物處理廠的環(huán)境空氣,發(fā)現(xiàn)在檢測儀器上加配嗅辨口可以提高惡臭判定的精度,并確定丙酮、二甲苯等是導(dǎo)致固廢處理廠惡臭的主要異味物質(zhì)。文獻(xiàn)[10-11]通過污水處理廠的實(shí)地檢測驗(yàn)證了該方法的適用性,并認(rèn)為該方法可用于廠區(qū)惡臭物質(zhì)的篩選和排查,有助于進(jìn)一步改進(jìn)生產(chǎn)工藝以及消減特定臭味物質(zhì)的排放。文獻(xiàn)[12]采用該方法測定了飲用水中低濃度水平的土臭素,并揭示了甲基萘在化學(xué)臭味物質(zhì)形成過程中的作用。

實(shí)際樣品中異味物質(zhì)的質(zhì)量濃度一般為μg·L-1級,甚至低至ng·L-1,能被人鼻嗅到,但是很難被液液萃取、固相微萃取、固相萃取等常規(guī)預(yù)濃縮方法有效富集到。攪拌棒固相萃取技術(shù)是一種基于固相微萃取的新型無溶劑或少溶劑的樣品前處理方法[13],所用攪拌棒一般為涂覆有一層聚二甲基硅氧烷(PDMS)的內(nèi)封磁芯的玻璃管,在攪拌的同時(shí)吸附待測物。和固相微萃取法相比,攪拌棒固相萃取的固定相量要高50倍以上,靈敏度要高100～1 000倍,富集倍數(shù)也更高。這種技術(shù)簡單、高效、快速、綠色、重現(xiàn)性好、溶劑耗費(fèi)少,適合水樣中超痕量組分的富集[14-15]。但是還未見到這種方法和氣相色譜-質(zhì)譜/嗅辨同步分析法聯(lián)合用于污染水體中異味物質(zhì)篩查的研究,因此本工作采用攪拌棒固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜/嗅辨同步分析法分析某污染河道水樣,篩選出了異味物質(zhì)和推測了致臭原因。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器與試劑

Agilent 7890 GC/5975c MSD型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀;ODP4型嗅聞儀;Gerstel TDU2型熱脫附小管;吸附萃取攪拌棒(直徑10 mm,PDMS膜厚 1 mm,萃取相涂層用量63 μL)。

正己烷、甲醇、二氯甲烷均為色譜純;試驗(yàn)用水為超純水。上海市某地污染河道水樣,外觀為黑色,散發(fā)著惡臭味,氣味強(qiáng)度為4級,現(xiàn)場水溫25.2 ℃,溶解氧質(zhì)量濃度0.15 mg·L-1。

1.2 儀器工作條件

1.2.1 熱脫附條件

不分流模式。熱脫附程序:初始溫度20 ℃,保持 0.5 min;以100 ℃ ·min-1速率升溫到250 ℃,保持 5 min。傳輸線溫度260 ℃。

1.2.2 色譜條件

DB-5MS 毛細(xì)管色譜柱( 30 m ×0.25 mm ,0.25 μm)。柱升溫程序:初始溫度40 ℃,保持 2 min;以 5 ℃ ·min-1速率升溫至270 ℃,保持12 min。載氣為高純氦氣,流量1.8 mL·min-1;進(jìn)樣口溫度 250 ℃;分流進(jìn)樣,分流比3∶ 1。

1.2.3 質(zhì)譜條件

電子轟擊離子(EI)源;離子源溫度230 ℃;電子能量70 eV;傳輸線溫度280 ℃;四極桿溫度150 ℃。全掃描(SCAN)范圍質(zhì)荷比(m/z)29～400;電子倍增管電壓(EMV)1 258 V;冷阱進(jìn)樣-程序升溫氣化(CIS-PTV)進(jìn)樣口,進(jìn)樣口程序溫度-30～250 ℃,溫度變化速率15 ℃·s-1。

1.2.4 嗅辨條件

將色譜柱流出物以1∶1體積比分別流入質(zhì)譜檢測器和ODP4型嗅聞儀;嗅聞儀的傳輸線溫度 220 ℃;嗅辨載氣為濕潤空氣,流量2 mL·min-1。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 吸附萃取攪拌棒老化

將吸附萃取攪拌棒浸在 2 mL體積比1∶1 的甲醇和二氯甲烷混合溶液中,超聲清洗5 min,重復(fù)3次。用鑷子取出吸附萃取攪拌棒,用無塵紙擦干后置于專用老化器中,在75 mL·min-1氮?dú)饬髁肯?將老化器溫度升至300 ℃,保持1 h。

1.3.2 樣品前處理

取50.0 g水樣于250 mL三角瓶中,放入磁力攪拌子和老化好的吸附萃取攪拌棒,在室溫下以 1 000 r·min-1轉(zhuǎn)速攪拌 120 min。吸附萃取攪拌棒用水沖洗干凈,用無塵紙吸干表面水分,置于熱脫附小管中,按照1.2節(jié)條件進(jìn)行檢測。

1.3.3 氣相色譜-質(zhì)譜法定性及半定量分析

基于NIST 20標(biāo)準(zhǔn)譜庫和Masshunter定性軟件,對總離子流色譜圖中的化學(xué)組分進(jìn)行定性分析,峰面積歸一化法進(jìn)行半定量分析,以確定各化學(xué)組分的相對含量。

1.3.4 嗅辨分析

選擇2名感官評價(jià)人,每名評價(jià)人均需對氣相色譜分離出的化學(xué)組分進(jìn)行嗅辨,并記錄所嗅到的氣味類型、特征和強(qiáng)度,氣味越強(qiáng)烈的化合物對異味的貢獻(xiàn)越大。

1.3.5 水樣常規(guī)參數(shù)檢測

高錳酸鹽指數(shù)采用GB/T 11892-1989《水質(zhì) 高錳酸鹽指數(shù)的測定》檢測;化學(xué)需氧量采用HJ 828-2017《水質(zhì) 化學(xué)需氧量的測定 重鉻酸鹽法》檢測;揮發(fā)性有機(jī)物采用HJ 639-2012《水質(zhì) 揮發(fā)性有機(jī)物的測定 吹掃捕集/氣相色譜-質(zhì)譜法》檢測;半揮發(fā)性有機(jī)物采用USEPA 3510C-1996/USEPA 8270E-2018《分液漏斗液液萃取/氣相色譜-質(zhì)譜法測定半揮發(fā)性有機(jī)化合物》檢測;多環(huán)芳烴采用HJ 478-2009《水質(zhì) 多環(huán)芳烴的測定 液液萃取和固相萃取高效液相色譜法》檢測。

2 結(jié)果與討論

2.1 方法同步分析準(zhǔn)確性驗(yàn)證

選用9種異味物質(zhì)的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行儀器定性和嗅辨的同步分析,所得不同異味物質(zhì)的保留時(shí)間、嗅辨時(shí)間、氣味強(qiáng)度、氣味類型等見表1。

表1 異味物質(zhì)定性及嗅辨結(jié)果

由表1可知,同一化合物的嗅辨時(shí)間較保留時(shí)間延遲0.50～1.20 min,可能和分流后輔助加濕導(dǎo)致樣品在毛細(xì)管中運(yùn)行距離變長有關(guān),也可能和人體嗅辨反應(yīng)延遲有關(guān),該結(jié)果與文獻(xiàn)[16]的基本吻合。為保證檢測結(jié)果的科學(xué)性和可靠性,滯后時(shí)間差是必須考慮的問題,該工作留作以后研究。另外,氣味流出時(shí)間十分短暫,建議相關(guān)研究選擇氣味最明顯的土臭素作為關(guān)鍵異味物質(zhì)。

2.2 污染河道水樣的常規(guī)參數(shù)檢測結(jié)果分析

按照1.3.5節(jié)方法對污染河道水樣的常規(guī)參數(shù)進(jìn)行檢測,所得高錳酸鹽指數(shù)和化學(xué)需氧量均超出GB 3838-2022《地表水環(huán)境質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》,未檢出多環(huán)芳烴以及常見的環(huán)境有機(jī)污染物(41種揮發(fā)性有機(jī)物和13種半揮發(fā)性有機(jī)物)?；瘜W(xué)需氧量高意味著水樣中含有大量的有機(jī)污染物,但是常見的環(huán)境有機(jī)污染物均未檢出,說明該水樣中的有機(jī)物種類、含量以及異味來源有待進(jìn)一步研究。

2.3 污染河道水樣中有機(jī)污染物的定性、半定量分析及其嗅味特征分析

按照試驗(yàn)方法分析污染河道水樣,所得的總離子流色譜圖見圖1,其中標(biāo)“*”的色譜峰面積較大。

圖1 水樣的總離子流色譜圖Fig.1 Total ion chromatogram of the water sample

對圖1色譜圖的色譜峰進(jìn)行統(tǒng)計(jì),共發(fā)現(xiàn)329個(gè)色譜峰,說明水樣中所含化合物種類較多。對相對含量高于0.01%的化合物進(jìn)行分析,其定性、半定量和嗅辨結(jié)果見表2。表中,“/”表示未查到或者不確定相關(guān)信息。

由表2可知,嗅辨結(jié)果中描述的氣味強(qiáng)度和類型與原始水樣惡臭味有一定差距,推測原始水樣嗅味特征可能由其中所含化合物相互作用以及其氣味協(xié)同或拮抗作用綜合形成[17]。由各化合物的相對含量可知,保留時(shí)間38.77 min處的化合物相對含量較高,其次是27.58, 33.81, 43.28, 47.17, 51.56 min處的,這些化合物主要為醇類和醚類物質(zhì),但是匹配度較低,只有74%～85%。分析這6個(gè)化合物(圖1標(biāo)*的6個(gè)色譜峰對應(yīng)的化合物)對應(yīng)的質(zhì)譜圖(圖2),6個(gè)質(zhì)譜圖中豐度最大離子m/z約59.1對應(yīng)CH3CH2CH2-O-或其相近結(jié)構(gòu),后5個(gè)質(zhì)譜圖中豐度次大的離子m/z117.1對應(yīng)CH3CH2CH2-O-CH2CH2CH2-O-或其相近結(jié)構(gòu),后3個(gè)質(zhì)譜圖中m/z約59.1, 117.1, 175.1, 233.2, 291.2處一組特征離子對應(yīng)CH2CH2CH2-On(n=1,2,3,4,5)或其相近結(jié)構(gòu)。

圖2 相對含量較高的6個(gè)化合物的質(zhì)譜圖Fig.2 Mass spectra of the 6 compounds with higher relative contents

結(jié)合文獻(xiàn)[18]的研究可知,聚丙二醇裂解會產(chǎn)生m/z59.1, 117.1, 175.1, 233.2, 291.2等與聚丙二醇結(jié)構(gòu)單元相關(guān)的產(chǎn)物離子,分別對應(yīng)含有1, 2, 3, 4, 5個(gè)丙二醇重復(fù)單元的聚丙二醇片段。根據(jù)以上結(jié)果推測該水樣中存在含-CH2CH2CH2-O-重復(fù)單元的聚合物,可能是聚丙二醇或聚丙二醇與醇作用后生成的醚類產(chǎn)物。聚丙二醇可作為植物油、樹脂和石蠟的溶劑,也可用于制備醇酸樹脂, 乳化劑、反乳化劑、潤滑油和增塑劑等,是非常常見的工業(yè)助劑。因此,推測以聚丙二醇為母體生成的醇類和醚類物質(zhì)可能是污染河道水體的主要物質(zhì),可能來源于工業(yè)、生活污水不經(jīng)處理直接排放、不達(dá)標(biāo)排放、偷排亂排等,但是這些物質(zhì)無明顯臭味[19],說明這些化合物不是導(dǎo)致河道水體惡臭的主要物質(zhì),針對樣品中相對含量較大的組分進(jìn)行解析,不能找到污染河道并且導(dǎo)致水體惡臭的物質(zhì)。綜合表2結(jié)果進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),化合物氣味強(qiáng)度和該物質(zhì)的相對含量不成正比,如26 min以內(nèi)的化合物相對含量較低,但嗅到的氣味強(qiáng)度較大,26～55 min內(nèi)的化合物相對含量較大,卻未嗅到強(qiáng)烈異味,氣味強(qiáng)度也較低,這主要和各異味物質(zhì)的嗅閾值有關(guān),說明應(yīng)結(jié)合各化合物的嗅味特征綜合分析。

由于化合物嗅辨時(shí)間與保留時(shí)間存在一定時(shí)間差,嗅辨所得的氣味強(qiáng)度和類型具有一定主觀性,且檢出物種類繁多,逐一排查和確認(rèn)的工作量十分龐大,在兼顧科學(xué)性、嚴(yán)謹(jǐn)性和效率的前提下,先選擇氣味強(qiáng)度較大的保留時(shí)間段,再選擇其中與NIST20標(biāo)準(zhǔn)譜庫匹配度較高的化合物進(jìn)行剖析探討。綜合考慮,試驗(yàn)選擇的研究對象為氣體強(qiáng)度比較大的保留時(shí)間在26 min以內(nèi)流出的化合物。其中:在含硫化合物中,正丁硫醇和2-乙基噻吩匹配度分別為86%和72%,二者均有惡臭味。在含氮化合物中,2-乙基-5-甲基吡啶匹配度為94%,有刺激性氣味;吲哚匹配度為91%,高度稀釋后有新鮮花香味;甲基吲哚匹配度高達(dá)93%,純試劑有強(qiáng)烈惡臭,但稀釋后有茉莉花香,極度稀釋后有成熟水果香味。在烴類化合物中,烷烴類中二甲基二惡烷的匹配度為94%,有劇烈臭味;芳香烴類中苯、甲苯、乙苯、苯、二甲苯、三甲苯等的匹配度都在90%以上,均有香味;烯烴類中三甲基雙環(huán)-庚-2-烯的匹配度為98%,氣味微弱。在含氧有機(jī)物中, 2-乙基己醇的匹配度為99%,有青草香味[20];十二醇的匹配度為91%,3-庚酮的匹配度為91%,均具有香味特征。從上述化合物的相對含量上看,這些化合物的相對含量均低于1.00%,一些化合物的相對含量甚至只有0.01%,卻是河道水體異味的主要貢獻(xiàn)者。這是由于異味物質(zhì)的嗅閾值往往很低,極低的濃度水平就可帶來強(qiáng)烈的異味,即使異味物質(zhì)的含量降低了90%,人的嗅覺感覺只能去除50%[21]。從氣味特征上看,這些化合物有臭味也有香味,各種氣味組成的復(fù)合氣味共同作用導(dǎo)致了河道惡臭。綜上所述,水體臭味是多種微量化合物散發(fā)的復(fù)合氣味,導(dǎo)致惡臭的化合物包括含硫化合物(硫醇、噻吩), 含氮化合物(吲哚、吡啶), 烷烴類化合物(烷烴、烯烴、芳香烴)和含氧有機(jī)物(醇、酮、醚)等。

本工作通過攪拌棒固相萃取-氣相色譜-質(zhì)譜/嗅辨同步分析法分析污染河道水樣,發(fā)現(xiàn)該河道水中相對含量較高的組分(醇類、醚類)不是關(guān)鍵異味物質(zhì),多種微量異味物質(zhì)(含硫化合物、含氮化合物、烴類化合物以及含氧有機(jī)物)共同作用導(dǎo)致河道惡臭。本工作對河水污染事件異味物質(zhì)的判定及溯源有一定指導(dǎo)意義,也能為環(huán)境事故應(yīng)急監(jiān)測提供一種新思路。