植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠腸道菌群及腸道屏障的影響

唐宏偉，劉銘洋，史曉丹，李柏良

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 乳品科學(xué)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，黑龍江 哈爾濱 150000）

益生菌作為一種活的微生物具有諸多益生特性，當(dāng)宿主攝入足夠數(shù)量的益生菌時(shí)，益生菌能夠產(chǎn)生諸多正向的益處[1]。乳酸菌（lactobacillus，LAB）是可發(fā)酵碳水化合物中產(chǎn)生大量乳酸的一種細(xì)菌的統(tǒng)稱，在自然界中極為普遍。乳酸菌是一種安全的革蘭氏陽(yáng)性微生物，廣泛應(yīng)用于各類發(fā)酵食品中[2]。除此以外，乳酸菌也是人體腸道菌群的重要組成部分，具有多種生理功能，包括免疫細(xì)胞平衡、代謝產(chǎn)物調(diào)節(jié)和腸道菌群；乳桿菌屬作為乳酸菌的一大類，大多數(shù)菌株都具有益生作用[3-4]，其中最具有代表性的乳桿菌為植物乳植桿菌（Lactobacillusplantarum）。

植物乳植桿菌作為優(yōu)勢(shì)乳酸菌之一，具有提高機(jī)體抗氧化活性、抑制有害菌群生長(zhǎng)等多種優(yōu)良特性，植物乳植桿菌在自然界中分布廣泛，常存在于動(dòng)物腸道內(nèi)調(diào)節(jié)微生態(tài)平衡，具有增強(qiáng)非特異性免疫功能、預(yù)防腸道疾病的作用，同時(shí)還可以提供營(yíng)養(yǎng)因子、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物在腸道內(nèi)的消化吸收、促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育和提高飼料轉(zhuǎn)化率。植物乳植桿菌CCFM8661 具有緩解腸細(xì)胞鉛中毒、有助于排出農(nóng)藥殘留等功效[5-6]，在前期的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)被證實(shí)具有良好的益生作用，例如調(diào)節(jié)腸道微生物群、抗氧化特性、緩解重金屬毒性、清除幽門螺旋桿菌等[4，7]。

本實(shí)驗(yàn)以新型益生菌菌株植物乳植桿菌CCFM8661為研究對(duì)象，研究其對(duì)機(jī)體的腸道調(diào)節(jié)作用以及可能的機(jī)制，實(shí)驗(yàn)過(guò)程全程記錄并監(jiān)測(cè)小鼠的體質(zhì)量變化，通過(guò)組織病理學(xué)分析實(shí)驗(yàn)、腸道通透性實(shí)驗(yàn)及腸道菌群增殖實(shí)驗(yàn)對(duì)植物乳植桿菌CCFM8661 菌株的腸道健康調(diào)節(jié)效果進(jìn)行探究，以期為后續(xù)的深入研究與應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 材料與試劑

選取48 只BALB/c 小鼠（體質(zhì)量均為22 g 左右）飼養(yǎng)于動(dòng)物房中，溫度設(shè)置為22 ℃，濕度10%~60%，12 h 明暗交替照明，由小鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料喂養(yǎng)，適應(yīng)性喂養(yǎng)1 周，自由飲水。喂養(yǎng)1 周后，將小鼠隨機(jī)分成4 組，每組12 只，進(jìn)入正式實(shí)驗(yàn)。

植物乳植桿菌CCFM8661 菌粉：微康益生菌（蘇州）股份有限公司；DEPC 水（diethyl pyrocarbonate 水）、蘇木素伊紅染液：生工生物工程（上海）股份有限公司；伊紅美藍(lán)瓊脂、雙歧桿菌（bifidobacterium，BBL）瓊脂、乳酸桿菌選擇性（lactobacillus selective，LBS）瓊脂、產(chǎn)氣莢膜梭菌（tryptose sulfite cycloserine，TSC）瓊脂：青島海博生物技術(shù)有限公司；D-乳酸檢測(cè)試劑盒：美國(guó)MP 公司；反轉(zhuǎn)錄試劑盒、實(shí)時(shí)熒光定量多聚核苷酸鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR）檢測(cè)試劑盒：南京諾唯贊生物科技股份有限公司；脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)試劑盒：南京碧云天生物技術(shù)有限公司；乙酸標(biāo)準(zhǔn)品、丙酸標(biāo)準(zhǔn)品、丁酸標(biāo)準(zhǔn)品（均≥99%）：美國(guó)Sigma-Aldrich公司；乙酸乙酯（≥99.5%）：美國(guó)merck 公司；巴豆酸偏磷酸：美國(guó)Aladdin 公司。

1.1.2 儀器與設(shè)備

MLS-3751L-PC 高壓蒸汽滅菌器、MDF-382E-80 ℃冰箱：日本Panasonic 公司；Cubis?II 實(shí)驗(yàn)室天平：德國(guó)Sartorius 公司；SORVALL ST8/8R 低溫離心機(jī)：美國(guó)TOMOS 公司；Orbitrap?Exactive?氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀：賽默飛世爾科技公司；SMATBCD Synergy MX 全自動(dòng)酶標(biāo)儀：美國(guó)Bio Tek 公司；Tnano-800 核酸蛋白分析儀：上海測(cè)博生物科技發(fā)展中心。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 動(dòng)物分組及給藥

小鼠被隨機(jī)分為4 組：陰性對(duì)照（normal control，NC）組、植物乳植桿菌CCFM8661 低劑量組（LP，1.6×106CFU/只）、植物乳植桿菌CCFM8661 中劑量組（MP，1.6×107CFU/只）、植物乳植桿菌CCFM8661 高劑量組（HP，1.6×108CFU/只）。其中陰性對(duì)照組小鼠灌胃等體積的生理鹽水，受試樣品給予時(shí)間為14 d。對(duì)于植物乳植桿菌CCFM8661 實(shí)驗(yàn)處理組，灌胃藥品需要提前配制，分別取一定量的菌粉按照一定濃度溶解在生理鹽水中。分組及給藥見表1。

表1 動(dòng)物分組及給藥Table 1 Animal grouping and administration

1.2.2 靶標(biāo)菌培養(yǎng)

收集各組小鼠給藥前新鮮糞便于滅菌的塑料離心管中，稱取并記錄糞便質(zhì)量，加生理鹽水稀釋，糞便與生理鹽水配比為0.05 g/mL。稀釋后將1.5 mL 離心管管封口，渦旋混勻7 min。將糞便混懸液按照10 倍梯度稀釋10~104倍，接種于培養(yǎng)基中37 ℃培養(yǎng)，培養(yǎng)基種類及其培養(yǎng)條件見表2。

表2 細(xì)菌培養(yǎng)基種類及其培養(yǎng)條件Table 2 Types of bacterial medium and their culture conditions

1.2.3 樣品收集

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后使用電子天平記錄各組小鼠體質(zhì)量，將小鼠進(jìn)行脫頸處理并于眼球處取血，收集血清。收集小鼠小腸組織存放于4% 多聚甲醛溶液中固定，等待染色；收集小鼠結(jié)腸組織并液氮速凍，用于基因表達(dá)量檢測(cè)；收集小鼠盲腸內(nèi)容物用于短鏈脂肪酸含量的檢測(cè)；收集小鼠血清用于評(píng)估腸道通透性。

1.3 指標(biāo)的測(cè)定

1.3.1 小鼠體質(zhì)量測(cè)定

測(cè)量并記錄動(dòng)物初始體質(zhì)量以及實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)的空腹體質(zhì)量。

1.3.2 腸道靶標(biāo)菌菌落計(jì)數(shù)

按照1.2.2 培養(yǎng)后，以菌落形態(tài)、革蘭氏染色鏡檢、生化反應(yīng)等生理生化指標(biāo)鑒定計(jì)數(shù)菌落，計(jì)算出每克濕便中的菌落數(shù)，取對(duì)數(shù)后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。最后一次給予受試樣品后24 h，與實(shí)驗(yàn)前同樣方式取直腸糞便，以同樣的方法檢測(cè)腸道菌群。觀察雙歧桿菌、乳桿菌、腸球菌、腸桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌含量的變化。

1.3.3 組織病理學(xué)觀察

將結(jié)腸組織固定在10% 福爾馬林鹽水中24 h，然后包埋在石蠟中。切片（厚5 μm）后用蘇木素伊紅（hematoxylin-eosin，HE）染色觀察腸道病理結(jié)構(gòu)。

1.3.4 腸道屏障mRNA 表達(dá)的測(cè)定

取小鼠結(jié)腸組織，從腸道樣品中提取RNA，利用核酸蛋白分析儀測(cè)定腸道屏障mRNA 的表達(dá)。樣品中加入氯仿后培養(yǎng)5 min，4 ℃下8 000 r/min 離心20 min取沉淀。以無(wú)酶水為對(duì)照測(cè)定總RNA 濃度，樣品的吸光值A(chǔ)260/A280控制在1.9~2.1 之間。以2 μg cDNA 為模板，按照qRT-PCR 檢測(cè)試劑盒配制反應(yīng)液，用實(shí)時(shí)熒光定量PCR 系統(tǒng)（ABI 7500）進(jìn)行兩步法PCR 擴(kuò)增。根據(jù)目的基因的Ct 值和內(nèi)參基因β-actin的Ct 值，按照2-ΔΔCt法計(jì)算樣本中目的基因mRNA 的相對(duì)表達(dá)水平，通過(guò)檢測(cè)腸道黏蛋白（MUC1 和MUC2）和緊密連接蛋白（ZO - 1、Occludin 和Claudin - 1）相關(guān)基因的mRNA 表達(dá)水平來(lái)評(píng)定腸道屏障。實(shí)時(shí)熒光定量PCR引物見表3。

表3 qRT-PCR 的引物Table 3 Primers of qRT-PCR

1.3.5 腸道通透性的測(cè)定

采集的血液在4 ℃、3 500 r/min 下離心10 min，取上清液用于小鼠D-乳酸和LPS 含量的檢測(cè)，具體操作參照LPS 和D-乳酸檢測(cè)試劑盒的說(shuō)明書進(jìn)行操作。

1.3.6 短鏈脂肪酸含量的測(cè)定

稱量乙酸、丙酸、丁酸標(biāo)準(zhǔn)品，用乙酸乙酯配制成0.1、0.5、1.5、10.0、20.0、50.0 μg/mL 濃度梯度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。

準(zhǔn)確稱?。?.80±0.01）g 盲腸內(nèi)容物，加入乙酸乙酯配制成10% 懸濁液，取500 μL 懸濁液于1.5 mL 離心管中，并加入100 μL 巴豆酸偏磷酸溶液，-30 ℃凍結(jié)24 h，解凍后8 500 r/min 離心3 min（4 ℃）去除蛋白質(zhì)、脂肪等雜質(zhì)，加入等體積的乙酸乙酯進(jìn)行提取并振蕩混勻2 min，經(jīng)11 000r/min 離心10 min 后，吸取上層有機(jī)相并加入終濃度為500 μmol/L 的4-甲基戊酸作為內(nèi)標(biāo)，混勻后移入進(jìn)樣瓶，用于氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（gas chromatography - mass spectrometry，GC - MS）儀檢測(cè)。氣相色譜條件：利用HP-FFAP 毛細(xì)管柱進(jìn)行分離，檢測(cè)器溫度設(shè)定為250 ℃，進(jìn)樣量為1 μL。升溫程序：起始溫度60 ℃保持3 min，以10 ℃/min 升至200 ℃，再以30 ℃/min 升至225 ℃，保持3 min；載氣為氮?dú)?，載氣流速為1.0 mL/min。

1.4 數(shù)據(jù)處理

數(shù)據(jù)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，用SPSS 軟件進(jìn)行方差分析、單因素方差分析，P<0.05 即判定為差異顯著。采用GraphPad Prism 8.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，統(tǒng)計(jì)多組間比較數(shù)據(jù)并作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響

植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響見表4。

表4 植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠體質(zhì)量的影響Table 4 Effects of Lactobacillus plantarum CCFM8661 on body weight of mice

由表4 可知，在正常菌群狀態(tài)下，與陰性對(duì)照組相比，小鼠體質(zhì)量隨灌胃植物乳植桿菌CCFM8661 劑量的提升呈現(xiàn)顯著增加的趨勢(shì)（P<0.05），說(shuō)明在健康狀態(tài)下，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)及益生菌的攝入，宿主的脾胃功能得到改善，進(jìn)而出現(xiàn)進(jìn)食量提高、體質(zhì)量增加的情況[2]。

2.2 植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠腸道菌群的影響

通過(guò)為期14 d 的植物乳植桿菌CCFM8661 干預(yù)，小鼠腸道中雙歧桿菌、乳桿菌、腸桿菌、腸球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌的變化情況如圖1 所示。

由圖1 可知，糞便中雙歧桿菌和乳桿菌的含量在3 種不同劑量的植物乳植桿菌CCFM8661 干預(yù)后均顯著增加（P<0.05），而腸桿菌、腸球菌和產(chǎn)氣莢膜梭菌的含量在干預(yù)前后無(wú)顯著變化。結(jié)合《保健食品功能檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)方法（2022 版）》中“有助于調(diào)節(jié)腸道菌群檢驗(yàn)方法”中陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，證明植物乳植桿菌CCFM8661 具有調(diào)節(jié)小鼠腸道菌群的作用。劉偉賢等[3]的研究結(jié)果顯示，干酪乳桿菌K56 具有調(diào)節(jié)腸道菌群的功能，能夠顯著提高小鼠腸道內(nèi)益生菌含量，并降低條件致病菌含量，與本研究結(jié)果一致。綜上，補(bǔ)充適當(dāng)益生菌，可以通過(guò)促進(jìn)腸道內(nèi)有益菌（雙歧桿菌和乳桿菌）的增加，抑制產(chǎn)氣莢膜梭菌的增長(zhǎng)，以達(dá)到調(diào)節(jié)腸道菌群的目的[1]。

2.3 組織病理學(xué)分析

對(duì)小鼠結(jié)腸組織進(jìn)行HE 染色，并進(jìn)行組織病理學(xué)切片觀察，各組組織學(xué)改變見圖2。

圖2 小腸黏膜組織蘇木素伊紅（HE）染色結(jié)果Fig.2 Hematoxylin eosin（HE）staining results of small intestinal mucosal tissue

由圖2 可知，NC 組結(jié)腸組織形態(tài)結(jié)構(gòu)完整，結(jié)腸黏膜上皮完整，無(wú)炎癥浸潤(rùn)。各喂養(yǎng)植物乳植桿菌CCFM8661（低、中、高）組小鼠腸組織HE 染色結(jié)果無(wú)明顯改變，絨毛排列整齊緊密，粗細(xì)均勻，無(wú)明顯差異。表明植物乳植桿菌CCFM8661 維持了正常腸道組織結(jié)構(gòu)，并未對(duì)小鼠的結(jié)腸黏膜組織造成破壞。

2.4 腸道屏障結(jié)果分析

植物乳植桿菌CCFM8661 處理對(duì)小鼠結(jié)腸中ZO-1、Occludin、Claudin-1、MUC1、MUC2 mRNA 表達(dá)量的影響如表5 所示。

表5 植物乳植桿菌CCFM8661 處理對(duì)小鼠結(jié)腸中ZO-1、Occludin、Claudin-1、MUC1、MUC2 mRNA 表達(dá)量的影響Table 5 Effect of treatment with Lactobacillus plantarum CCFM8661 on mRNA expression of ZO-1，Occludin，Occludin-1，MUC1，and MUC2 in mouse colon

由表5 可知，與陰性對(duì)照組相比，植物乳植桿菌CCFM8661 灌胃組小鼠結(jié)腸Occludin、ZO-1、MUC1、MUC2 與Claudin-1 mRNA 的表達(dá)量均明顯增加。隨著植物乳植桿菌CCFM8661 灌胃劑量的增加，mRNA的表達(dá)量也隨之增加。表明植物乳植桿菌CCFM8661能夠通過(guò)上調(diào)腸上皮細(xì)胞間緊密連接蛋白和腸道黏蛋白相關(guān)mRNA 的表達(dá)量，達(dá)到保護(hù)腸道的作用[8]。

2.5 腸道通透性結(jié)果分析

在分子水平上，LPS 和D-乳酸是檢測(cè)腸屏障損傷的敏感指標(biāo)[9]，本研究采用ELISA 試劑盒檢測(cè)小鼠血清中LPS 和D-乳酸的含量，研究植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠腸道屏障通透性的影響，結(jié)果如圖3所示。

圖3 腸道通透性指標(biāo)LPS 和D-乳酸的測(cè)定Fig.3 Determination of intestinal permeability indexes of LPS and D-lactic acid

由圖3 可知，與陰性對(duì)照組相比，植物乳植桿菌CCFM8661 各處理組LPS 和D-乳酸的含量均極顯著降低（P<0.01），這表明植物乳植桿菌CCFM8661 會(huì)導(dǎo)致腸道屏障通透性的降低[10]。但低、中、高劑量組的LPS 和D-乳酸含量均無(wú)明顯差異。以上結(jié)果表明，植物乳植桿菌CCFM8661 具有良好的降低腸道通透性的效果。

2.6 植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠結(jié)腸內(nèi)短鏈脂肪酸含量的影響

由于腸道菌群在調(diào)節(jié)代謝、機(jī)體免疫反應(yīng)及維持腸道屏障等方面的作用，服用益生菌調(diào)節(jié)腸道菌群目前被認(rèn)為是炎癥性腸?。╥nflammatory bowel disease，IBD）治療及延緩惡化方面的新方法。短鏈脂肪酸（short-chain fatty acids，SCFAs）除具有調(diào)節(jié)機(jī)體電解質(zhì)平衡[11]、刺激胃腸激素分泌、調(diào)節(jié)腸道動(dòng)力等功能外，還可以參與宿主免疫反應(yīng)過(guò)程。SCFAs 是腸道中最豐富的菌群代謝物，具有1~6 個(gè)碳原子的脂肪族尾部的羧酸，包括甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、戊酸和己酸，其中乙酸、丙酸和丁酸最豐富[12]。因此，本研究測(cè)定乙酸、丙酸和丁酸含量，探究植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠結(jié)腸內(nèi)短鏈脂肪酸含量的影響，結(jié)果如圖4 所示。

圖4 植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)小鼠結(jié)腸內(nèi)短鏈脂肪酸含量的影響Fig.4 Effect of Lactobacillus plantarum CCFM8661 on content of short-chain fatty acids in mouse colon

由圖4 可知，與陰性對(duì)照組相比，植物乳植桿菌CCFM8661 的干預(yù)可以明顯增加乙酸、丙酸和丁酸的含量。結(jié)果表明，植物乳植桿菌CCFM8661 能夠調(diào)控腸道菌群代謝物，這與其對(duì)腸道菌群的調(diào)控密不可分。

3 討論與結(jié)論

本研究欲證實(shí)植物乳植桿菌CCFM8661 是否具有調(diào)節(jié)腸道菌群、改善腸道環(huán)境的功效，使用BALB/c 小鼠來(lái)評(píng)價(jià)植物乳植桿菌CCFM8661 對(duì)腸道菌群和腸屏障的影響。大量研究表明，植物乳植桿菌能夠通過(guò)調(diào)節(jié)腸道菌群來(lái)緩解便秘[13-14]，人體腸道菌群中雙歧桿菌、乳桿菌是有益菌的代表，通過(guò)降低腸道內(nèi)環(huán)境的pH 值、抑制有害菌增殖而發(fā)揮作用[15]。產(chǎn)氣莢膜梭菌是致病菌，能分解肌肉和結(jié)締組織中的糖，產(chǎn)生大量氣體，導(dǎo)致組織嚴(yán)重氣腫，進(jìn)而影響血液供應(yīng)，引起氣性壞疽[16]。腸桿菌在相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間內(nèi)被認(rèn)為是非致病菌，直到20 世紀(jì)中葉，研究人員才發(fā)現(xiàn)一些特殊的腸桿菌對(duì)人和動(dòng)物有致病性，會(huì)引起嚴(yán)重腹瀉和敗血癥[17]。因此欲調(diào)節(jié)腸道菌群并避免其失衡，本實(shí)驗(yàn)選用這5 種代表菌作為評(píng)價(jià)腸道菌群變化的指標(biāo)。

結(jié)果顯示，植物乳植桿菌CCFM8661 的攝入能顯著改變宿主的腸道菌群，主要是能顯著提高宿主腸道內(nèi)雙歧桿菌和乳桿菌的含量（P<0.01），而對(duì)于腸桿菌、腸球菌含量的影響較小，對(duì)于產(chǎn)氣莢膜梭菌則會(huì)降低其含量。陰性對(duì)照組干預(yù)前后，益生菌（雙歧桿菌、乳桿菌）及產(chǎn)氣莢膜梭菌含量均增加，但是變化幅度遠(yuǎn)不及低、中、高劑量組，這可能與動(dòng)物周齡的增加、腸道容量的提高有關(guān)[18]。結(jié)合《保健食品功能檢驗(yàn)與評(píng)價(jià)方法（2022 版）》中的陽(yáng)性結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)，判定樣品調(diào)節(jié)腸道菌群功能動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的結(jié)果呈陽(yáng)性，認(rèn)為植物乳植桿菌CCFM8661 具有調(diào)節(jié)腸道菌群功能。

腸道屏障已成為治療和預(yù)防疾病的重要關(guān)注靶標(biāo)[19]。大量基于動(dòng)物模型的研究結(jié)果表明，植物乳植桿菌可以顯著增強(qiáng)腸道屏障[20-21]。本研究發(fā)現(xiàn)植物乳植桿菌CCFM8661 可以明顯提高小鼠結(jié)腸內(nèi)Claudin-1、Occludin、ZO-1、MUC1 和MUC2 的mRNA 表達(dá)水平，結(jié)果表明植物乳植桿菌CCFM8661 可以通過(guò)改變緊密連接蛋白和腸道黏蛋白的基因表達(dá)量間接改善腸道黏膜屏障的強(qiáng)度。 這與之前的研究，植物乳植桿菌KLDS1.0386 可以上調(diào)小鼠腸道上皮中Claudin-1、ZO-1、MUC1 和MUC2 的表達(dá)，降低結(jié)腸通透性的結(jié)果一致[22]，證明了植物乳植桿菌CCFM8661 的添加能夠改變小鼠腸道通透性，提高腸道屏障的強(qiáng)度，與陰性對(duì)照組相比，低、中、高劑量組腸道中LPS 和D-乳酸含量分別下降了7.70%、13.44%、14.94% 和22.89%、27.36%、30.24%（P<0.01）；而在本實(shí)驗(yàn)中以高劑量干預(yù)小鼠為例，腸道菌群雖發(fā)生變化，組織切片觀察實(shí)驗(yàn)卻未見明顯效果，因此需進(jìn)一步驗(yàn)證。

短鏈脂肪酸（SCFAs）參與人體代謝，在肝臟、骨骼肌、脂肪組織和胰島等不同器官中具有重要功能，對(duì)人體健康起著重要的作用[23]，濃度過(guò)低或過(guò)高都會(huì)對(duì)健康產(chǎn)生不利影響。SCFAs 含量受多種因素影響，其中最重要的原因是內(nèi)源發(fā)酵[24]。細(xì)菌生長(zhǎng)過(guò)程中將難以消化的碳水化合物（膳食纖維）通過(guò)一系列代謝反應(yīng)分解，以滿足自身生長(zhǎng)的能量需要，產(chǎn)生的SCFAs 是主要的最終產(chǎn)物[25]，因此維持腸道菌群平衡是調(diào)節(jié)SCFAs 含量的重要因素之一。本研究結(jié)果證明，植物乳植桿菌CCFM8661 可以增加腸道內(nèi)短鏈脂肪酸的含量，其中低、中、高劑量組腸道中的乙酸、丙酸和丁酸含量分別升高了18.25%、24.87%、30.61%，3.73%、6.75%、8.34% 和2.11%、4.01%、7.86%。這與張晨玥等[26]的結(jié)果一致。

綜上，植物乳桿菌CCFM8661 促進(jìn)了腸道中雙歧桿菌和乳酸桿菌生長(zhǎng)，抑制了產(chǎn)氣莢膜梭菌的增殖。喂食植物乳桿菌CCFM8661 能顯著改變小鼠腸道的通透性，降低腸道中LPS 和D-乳酸的含量，增強(qiáng)腸道屏障，增加腸道中短鏈脂肪酸（乙酸、丙酸和丁酸）的含量。總之后期將針對(duì)植物乳植桿菌CCFM8661 的功效及安全性進(jìn)行系統(tǒng)研究，為其在食品中更廣泛的應(yīng)用提供參考。