木質(zhì)素磺酸鈣對食用菌菌絲生長影響初探

楊諾林 邵改革 張瑞穎 崔 嫚 鄭素月*

（1河北工程大學(xué)園林與生態(tài)工程學(xué)院，河北邯鄲 056038；2中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)資源與農(nóng)業(yè)區(qū)劃研究所，北京 100081；3陜西省西安市農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心，陜西西安 710007）

食用菌又稱蕈菌、蘑菇，是一種大型可食用真菌，不僅包含多種營養(yǎng)元素，還具有藥用價值，深受消費(fèi)者歡迎[1]。我國是世界上最大的食用菌生產(chǎn)國和出口國之一，同時食用菌產(chǎn)業(yè)是我國重要產(chǎn)業(yè)之一，也是我國精準(zhǔn)扶貧、鄉(xiāng)村振興的主導(dǎo)產(chǎn)業(yè)[2]。

食用菌的主要栽培料是農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)的廢棄物，如秸稈、木屑、棉籽殼等。木質(zhì)素磺酸鈣是亞硫酸鹽制漿或生物質(zhì)預(yù)處理的副產(chǎn)品，是一種廉價且可再生的資源，含有羥基、羧基和磺酸基等親水基團(tuán)[3-4]。木質(zhì)素磺酸鈣可以作為肥料添加劑，可改善土壤性狀和促進(jìn)植物生長，如木質(zhì)素磺酸鈣可以促進(jìn)香草蘭莖段生長，提高其總蛋白、葉綠素、糖、類酮及酚類物質(zhì)的含量[5]，還可以降低鹽脅迫對大麥的有害影響[6]。

食用菌栽培料富含木質(zhì)素，但培養(yǎng)母種的PDA培養(yǎng)基或PDB培養(yǎng)基不含木質(zhì)素。為進(jìn)一步研究木質(zhì)素磺酸鈣對食用菌菌絲生長的作用，試驗(yàn)以平菇（Pleurotus ostreatus）、香菇（Lentinula edodes）、毛木耳（Auricularia cornea）、黑木耳（Auricularia heimuer）、杏鮑菇（Pleurotus eryngii）、秀珍菇（Pleurotus geesteranus）、茶樹菇（Agrocybe aegerita）、雞腿菇（Coprinus comatus）、灰樹花（Grifola frondosa）、靈芝（Ganoderma lingzhi）、真姬菇（Hypsizygus marmoreus）和金針菇（Flammulina filiformis）為供試食用菌，研究不同質(zhì)量濃度的木質(zhì)素磺酸鈣對其菌絲生長的影響，為木質(zhì)素磺酸鈣在食用菌栽培中的應(yīng)用提供數(shù)據(jù)支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

（1）供試菌株：試驗(yàn)食用菌由國家食用菌標(biāo)準(zhǔn)菌株庫（China center for mushroom spawn standards and control，CCMSSC）以及中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌團(tuán)隊(duì)提供，菌株編號及名稱如表1所示。

表1 供試食用菌菌株及來源

（2）供試試劑：木質(zhì)素磺酸鈣，上海阿拉丁生化科技股份有限公司生產(chǎn)；PDA培養(yǎng)基，Becton，Dickinson and Company。

（3）供試儀器：高溫高壓滅菌鍋MLS-3780（SANYO Electric Biomedical Co.，日本），超凈工作臺（北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司），恒溫培養(yǎng)箱（SANYO Electric Biomedical Co.，日本），UTP-313 型電子天平（上?；ǔ彪娖饔邢薰荆瑪?shù)顯游標(biāo)卡尺（寧波得力工具有限公司）。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 培養(yǎng)基制備

PDA培養(yǎng)基：39 g PDA培養(yǎng)基干粉中加1 L ddH2O。在PDA培養(yǎng)基中分別添加木質(zhì)素磺酸鈣0.1 g、0.4 g，制成2種質(zhì)量濃度的培養(yǎng)基，攪拌均勻后，于121 ℃高壓滅菌30 min。以不添加木質(zhì)素磺酸鈣的PDA為對照（CK）。

1.2.2 菌株活化與培養(yǎng)

將保藏的供試試管菌株挑取直徑約為5 mm的菌塊接入PDA培養(yǎng)皿中，置25 ℃培養(yǎng)箱避光培養(yǎng)。待菌絲長滿平皿前挑選均勻、無污染、長勢較好的轉(zhuǎn)接到空白PDA培養(yǎng)皿中培養(yǎng)，然后沿菌落邊緣用打孔器挑取直徑5 mm的菌塊，接入不同質(zhì)量濃度木質(zhì)素磺酸鈣培養(yǎng)基中，觀察并記錄菌絲的生長情況。每個菌株的每個處理設(shè)5個重復(fù)。

1.3 指標(biāo)測定

菌絲生長速度測定：采用十字交叉劃線法，利用游標(biāo)卡尺測量菌落直徑。菌絲生長速度（mm/d）=（菌落半徑-菌塊半徑）/培養(yǎng)天數(shù)。

菌絲促進(jìn)（抑制）率測定：菌絲促進(jìn)（抑制）率（%）=[（處理組菌落直徑-對照組菌落直徑）/對照組菌落直徑]×100%

1.4 數(shù)據(jù)處理

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel 2010處理統(tǒng)計(jì)，用SPSS 25.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，用GraphPad Prism 8.0繪制圖表。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同質(zhì)量濃度木質(zhì)素磺酸鈣對供試食用菌菌絲促進(jìn)作用

由表2、圖1可知，PDA培養(yǎng)基添加木質(zhì)素磺酸鈣對平菇、毛木耳、黑木耳、杏鮑菇、秀珍菇、真姬菇、灰樹花和靈芝菌絲生長均有促進(jìn)作用。與對照（CK）相比，PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣對平菇2菌株菌絲生長的促進(jìn)作用最顯著，菌絲促進(jìn)率為39.47%，菌絲生長速度為5.87 mm/d；添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣，該菌株菌絲促進(jìn)率為15.76%，菌絲生長速度為4.74 mm/d，此質(zhì)量濃度的木質(zhì)素磺酸鈣對平菇1菌株菌絲生長無明顯作用。與對照（CK）相比，PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣對黑木耳7菌株菌絲生長也有顯著促進(jìn)作用，菌絲促進(jìn)率為34.79%，菌絲生長速度為3.76 mm/d；添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣，該菌株菌絲促進(jìn)率為11.29%，菌絲生長速度為3.05 mm/d。

表2 木質(zhì)素磺酸鈣對13種食用菌菌絲生長的影響

PDA培養(yǎng)基添加木質(zhì)素磺酸鈣對同種類食用菌不同菌株的菌絲生長影響也不同。相同質(zhì)量濃度的木質(zhì)素磺酸鈣處理對平菇1與平菇2菌株菌絲促進(jìn)率相差較大；與對照（CK）相比，PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣明顯促進(jìn)真姬菇18菌株菌絲生長，而對真姬菇19菌株菌絲生長促進(jìn)不明顯。與對照（CK）相比，PDA培養(yǎng)基添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣，雞腿菇15菌株菌絲促進(jìn)率為0，菌絲生長速度為5.81 mm/d，而PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣，雞腿菇15菌株菌絲抑制率為0.01%，菌絲生長速度為5.77 mm/d。

2.2 不同質(zhì)量濃度木質(zhì)素磺酸鈣對食用菌菌絲的抑制作用

添加木質(zhì)素磺酸鈣對雞腿菇14菌株和金針菇20菌株菌絲生長有抑制作用。由表2、圖1可知，與對照（CK）相比，PDA培養(yǎng)基添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣，雞腿菇14菌株菌絲抑制率為0.47%，菌絲生長速度為4.90 mm/d；當(dāng)PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣時，雞腿菇14菌株菌絲抑制率為4.45%，菌絲生長速度為4.69 mm/d。與對照（CK）相比，當(dāng)PDA培養(yǎng)基添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣時，金針菇20菌株菌絲抑制率為4.31%，生長速度為2.85 mm/d；當(dāng)PDA培養(yǎng)基添加0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣時，金針菇20菌株菌絲抑制率為2.56%，菌絲生長速度為2.91 mm/d。添加0.1 g/L木質(zhì)素磺酸鈣對香菇4菌株和金針菇20菌株菌絲生長有明顯的抑制作用，而0.4 g/L木質(zhì)素磺酸鈣對其抑制作用相對較弱。

3 小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果表明：木質(zhì)素磺酸鈣對平菇、毛木耳、黑木耳、杏鮑菇、秀珍菇、真姬菇、灰樹花和靈芝菌絲生長均有顯著的促進(jìn)作用，對雞腿菇15、平菇1、香菇3、金針菇21、真姬菇18、真姬菇19菌株菌絲生長的促進(jìn)作用不明顯，對雞腿菇14菌株和金針菇20菌株菌絲生長有抑制作用。木質(zhì)素磺酸鈣與木質(zhì)素相比價格更低廉、易溶于水，添加方便，所用試驗(yàn)菌株也不同。研究所得結(jié)論與前人研究[7-13]基本相似，即在PDA培養(yǎng)基中添加木質(zhì)素磺酸鈣對大部分試驗(yàn)菌株菌絲生長具有促進(jìn)作用。

食用菌菌種的質(zhì)量對食用菌生產(chǎn)至關(guān)重要，直接影響其品質(zhì)和產(chǎn)量。在生產(chǎn)中將木質(zhì)素磺酸鈣添加在PDB培養(yǎng)基中培養(yǎng)液體菌種，提高菌種質(zhì)量，但木質(zhì)素磺酸鈣對菌絲生長的作用效果會因食用菌的種類和栽培的具體條件而異，在實(shí)際應(yīng)用中要針對不同的菌株篩選最適宜添加量。