基于技術(shù)審評的第二類化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑(盒)相關(guān)問題研究

鄭秀娥 崔濤 李國勇 楊陽 王玉 郭金雙 夏文龍 山東省食品藥品審評查驗中心 （山東 濟南 250014）

內(nèi)容提要： 針對按第二類醫(yī)療器械管理的化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）產(chǎn)品，結(jié)合國內(nèi)外免疫自動化檢測系統(tǒng)發(fā)展現(xiàn)狀，以環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）為例，從產(chǎn)品技術(shù)審評角度，對不同種類化學(xué)發(fā)光免疫試劑原理進行深入研究，探討注冊申報常見問題，以期對審評員及企業(yè)注冊申報人員提供思路和幫助。

化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）系列產(chǎn)品，作為醫(yī)療器械管理的體外診斷（In Vitro Diagnostic，IVD）試劑中發(fā)展最為迅速的產(chǎn)品之一，其代表了目前免疫類體外診斷試劑（盒）產(chǎn)品的較高檢測水準，在目前免疫分析領(lǐng)域中最具發(fā)展?jié)摿ΑＥc酶聯(lián)免疫吸附法和干式熒光免疫層析法類產(chǎn)品相比，化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品的靈敏度、準確度等有一定的優(yōu)勢，并且隨著化學(xué)發(fā)光技術(shù)不斷地改進、升級，其在各大醫(yī)院臨床檢驗領(lǐng)域占比份額越來越大，申報此類產(chǎn)品的企業(yè)也與日俱增。審評員和注冊申報人員深入了解此類產(chǎn)品發(fā)展現(xiàn)狀、方法原理及申報時常見問題，對于此類產(chǎn)品的科學(xué)審評，提高注冊申報時限效率等方面不無裨益。

本文依托國家藥品監(jiān)督管理局醫(yī)療器械技術(shù)審評中心指導(dǎo)原則和山東省藥品監(jiān)督管理局審評研究項目，研究人員實地調(diào)研了全國部分持有化學(xué)發(fā)光免疫類試劑注冊證的企業(yè)，親臨企業(yè)生產(chǎn)現(xiàn)場，與一線研發(fā)、注冊人員深入探討產(chǎn)品原理、生產(chǎn)過程及化學(xué)發(fā)光行業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀、產(chǎn)品質(zhì)量控制的關(guān)鍵點以及注冊申報過程中遇到的問題等。

1.化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）發(fā)展現(xiàn)狀

IVD領(lǐng)域是目前醫(yī)療器械中占比最大的子領(lǐng)域。2016年，全球IVD市場規(guī)模約為562億美元，占全球醫(yī)療器械市場的13%左右，增長率約5%[1]。美國、日本與歐洲為全球最主要的IVD市場，占全球市場的75%左右[2]?？鐕揪哂腥驂艛嗟匚?，羅氏（20%）、雅培（11%）、丹納赫（11%）和西門子（10%）等前4強占據(jù)了全球52%的市場份額。

我國IVD市場發(fā)展迅速，市場前景廣闊，是全球除歐盟、美國、日本等發(fā)達經(jīng)濟體之外的最大單一國家市場。2016年，我國IVD市場規(guī)模約600億元人民幣，占全球市場的15%左右，約為全球IVD市場平均增長率的3倍，但我國免疫診斷試劑僅占整個體外診斷試劑市場份額29%[1,3]?；瘜W(xué)發(fā)光免疫分析產(chǎn)品由于研發(fā)難度大，技術(shù)門檻高，且國內(nèi)企業(yè)在化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)上起步晚于進口廠家，導(dǎo)致我國高端免疫診斷市場90%以上的份額被跨國公司壟斷，其產(chǎn)品價格昂貴，醫(yī)療費用高，亟需國產(chǎn)化免疫診斷試劑上市充實市場。近年來，醫(yī)保項目覆蓋率的提升導(dǎo)致醫(yī)療需求釋放，慢性病和傳染病發(fā)病率居高不下導(dǎo)致診療次數(shù)增長，人口城鎮(zhèn)化比例提升以及人們預(yù)防疾病意識提升導(dǎo)致人均診療費用上升?；谝陨显?，未來中國體外診斷需求預(yù)計將以15%～20%的年均增長率增長，成為全球增長最快的市場。

化學(xué)發(fā)光免疫分析產(chǎn)品基本可以應(yīng)用于所有的免疫診斷項目，產(chǎn)品包括甲狀腺功能檢測、腎功能檢測、腫瘤標志物檢測、傳染病檢測、激素檢測、貧血檢測、感染檢測、心臟病檢測、骨代謝檢測、糖尿病檢測等諸多疾病的檢測試劑，其中腫瘤、甲功、激素、傳染病占據(jù)了市場80%的份額。近年來，用于藥物濃度檢測的試劑逐步在市場上出現(xiàn)，例如環(huán)孢霉素和他克莫司藥物作為常用的免疫抑制劑，主要用于抗器官移植排斥反應(yīng)，還可應(yīng)用于治療某些自身免疫性疾病，定時對患者體內(nèi)環(huán)孢霉素和他克莫司的血藥濃度監(jiān)測，制定個體化給藥方案，對提高器官移植的存活率，促進環(huán)孢霉素和他克莫司在臨床的合理應(yīng)用具有重要的臨床意義[4]。

我國化學(xué)發(fā)光相關(guān)企業(yè)約有二百多家，但藥物檢測類試劑企業(yè)不到十家，其分布相對集中，形成了以北京、上海、廣東、江蘇、浙江為主的產(chǎn)業(yè)聚集區(qū)。由于國家對行業(yè)準入和產(chǎn)品質(zhì)量要求的提高，化學(xué)發(fā)光產(chǎn)業(yè)新進入者的活躍度降低，新成立的化學(xué)發(fā)光企業(yè)數(shù)量在下降，規(guī)模小、技術(shù)含量低的公司在逐漸退出。目前，國內(nèi)化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑約有四千七百左右的試劑批件，而藥物檢測類試劑僅十余個。

綜合市場先發(fā)性及占有率、化學(xué)發(fā)光儀器檢測準確性和穩(wěn)定性、檢測菜單豐富性和特色優(yōu)勢及渠道布局等因素，目前國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光企業(yè)按市場占有份額依次為新產(chǎn)業(yè)、安圖生物、邁克生物、邁瑞醫(yī)療、利德曼、迪瑞醫(yī)療、科美生物、長光華醫(yī)、博奧賽斯、源德生物、科華生物、深圳雷杜等。筆者有幸針對環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑指南編制赴深圳新產(chǎn)業(yè)開展調(diào)研。

2.化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)分類及優(yōu)缺點

化學(xué)發(fā)光免疫分析是將具有高靈敏度的化學(xué)發(fā)光測定技術(shù)與高特異性的免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于各種抗原、半抗原、抗體、激素、酶、脂肪酸、維生素和藥物等的檢測分析技術(shù)。這種方法學(xué)包含兩個部分，即免疫反應(yīng)系統(tǒng)和化學(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)。免疫反應(yīng)系統(tǒng)是將發(fā)光物質(zhì)（在反應(yīng)劑激發(fā)下生成激發(fā)態(tài)中間體）直接標記在抗原（化學(xué)發(fā)光免疫分析）或抗體（免疫化學(xué)發(fā)光分析）上，或酶作用于發(fā)光底物?；瘜W(xué)發(fā)光分析系統(tǒng)是利用化學(xué)發(fā)光物質(zhì)經(jīng)催化劑的催化和氧化劑的氧化，形成一個激發(fā)態(tài)的中間體，當這種激發(fā)態(tài)中間體回到穩(wěn)定的基態(tài)時，同時發(fā)射出光子，利用發(fā)光信號測量儀器測量光量子產(chǎn)額。該技術(shù)因具有分析速度快、線性范圍寬、無散射光干擾、無放射性污染、儀器設(shè)備簡單等優(yōu)勢，在臨床診斷、生命分析等領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用[5-8]。

2.1 化學(xué)發(fā)光按照化學(xué)反應(yīng)類型分類

化學(xué)發(fā)光按照化學(xué)反應(yīng)類型，可分為酶促化學(xué)發(fā)光和非酶促化學(xué)發(fā)光。本文以此分類為準介紹代表企業(yè)及優(yōu)缺點，2.2和2.3為不同的分類方式，有部分重合。

2.1.1 酶促化學(xué)發(fā)光

作為標記物的酶基本不被消耗，而反應(yīng)體系中發(fā)光劑的量充分過量，發(fā)光強度穩(wěn)定，發(fā)光時間長，常采用速率法檢測。常見的酶促化學(xué)發(fā)光為堿性磷酸酶（Alkaline Phosphatase，ALP）系統(tǒng)和辣根過氧化物酶（Horseradish Peroxidase，HRP）系統(tǒng)及黃嘌呤氧化酶系統(tǒng)。標記的酶為生物大分子，需要使用長臂雙功能團等間接標記技術(shù)來解決生物活性保持問題。其測量方式簡單（速率法），成本低，靈敏度較高，但工作曲線隨時間漂移低端斜率呈非線性下移。

標記物為ALP+螺旋金剛烷環(huán)氧化物苯磷酸酯用作標記酶的優(yōu)點是：穩(wěn)定性高、靈敏度高；缺點是分子量大（140kD），空間位阻比較大，可能存在內(nèi)源性ALP的干擾，成本較高。對于化學(xué)發(fā)光免疫分析來說，ALP的底物比HRP的底物優(yōu)秀的地方在于ALP為單一組分，基本沒有自身發(fā)光，持續(xù)發(fā)光，本底低，信噪比高，靈敏度高、ALP底物穩(wěn)定性更好。反應(yīng)動力學(xué)沒有HRP底物復(fù)雜，影響因素少，結(jié)果更穩(wěn)定。但ALP易受黃疸等干擾樣本影響，需進行溫育反應(yīng)。主流企業(yè)有貝克曼、邁瑞、希森美康等。

標記物為標記HRP+魯米諾及其衍生物有安圖、強生、邁克等，需進行溫育反應(yīng)，可持續(xù)發(fā)光，也可進行增強發(fā)光，易受血紅蛋白等干擾樣本影響。HRP是免疫診斷試劑產(chǎn)品最常用的標記酶，約占80%。對于化學(xué)發(fā)光免疫分析來說，HRP的底物的優(yōu)點是成本低，專利限制少，達到信號峰值快。缺點有魯米諾在沒有HRP存在情況下，也會被H2O2氧化自身發(fā)光，本底相對較高，影響信噪比。由于增強劑的存在，反應(yīng)動力學(xué)復(fù)雜，影響因素多，結(jié)果不夠穩(wěn)定，要得到靈敏度高且平臺期長的底物不容易。

2.1.2 非酶促發(fā)光

其試劑成本較高、發(fā)光時間短，測量方式復(fù)雜（積分法），需原位進樣，儀器成本及維護費用較高。

吖啶酯：作為標記物的化學(xué)物質(zhì)，氧化反應(yīng)不需催化劑，發(fā)光過程中標記物被消耗，吖啶酯在堿性環(huán)境下，直接被過氧化物直接氧化產(chǎn)生發(fā)光信號，發(fā)光信號持續(xù)時間短，信噪比高，為閃光型。優(yōu)點為標記物為小分子化學(xué)物質(zhì)，對被標記物的構(gòu)型影響較小，試劑穩(wěn)定性好，可以兩點定標?；瘜W(xué)發(fā)光體系相對簡單，激發(fā)液成本低。代表企業(yè)為雅培、西門子。

異魯米諾：直接標記發(fā)光物，為閃光型；易受血紅蛋白等干擾樣本影響，代表企業(yè)為新產(chǎn)業(yè)、威高、索林。新產(chǎn)業(yè)的環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑均采用此種方法進行檢測。在技術(shù)方面主要有兩個特點，一是將納米磁球作為固相載體，二是有機小分子直接化學(xué)發(fā)光。

電化學(xué)發(fā)光：氧化反應(yīng)是通過電極上的電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生，而不是由氧化劑或者發(fā)光劑產(chǎn)生，標記物為三聯(lián)吡啶釕衍生物即[Ru(bpy)3]2+，并以三乙胺為還原劑。有的為一步法，需要檢測池，高壓調(diào)整需要嚴格掌控，易受生物素等干擾樣本影響，測量方式復(fù)雜（脈沖激發(fā)、間歇式測量、流動池），儀器成本及維護費用高，環(huán)境及樣品中同類元素可導(dǎo)致本底干擾。代表企業(yè)為羅氏、深圳普門等。

2.2 化學(xué)發(fā)光按發(fā)光持續(xù)時間分類

化學(xué)發(fā)光按發(fā)光持續(xù)時間分類，可分為輝光型（glow）和閃光型（flash）。

2.2.1 輝光型發(fā)光

輝光型的發(fā)光時間在數(shù)分鐘至數(shù)十分鐘以上，常見酶促發(fā)光系統(tǒng)，以速率法測量，即在發(fā)光信號相對穩(wěn)定的區(qū)域（坪區(qū)）任意點測量單位時間的發(fā)光強度。

2.2.2 閃光型發(fā)光

閃光型的發(fā)光時間在數(shù)秒內(nèi)，如吖啶酯系統(tǒng)，檢測方法一般采用原位進樣和時間積分法測量，即在檢測器模塊加裝進樣器，保證加入發(fā)光劑和檢測兩個步驟同時進行。

2.3 化學(xué)發(fā)光按檢測類型分類

化學(xué)發(fā)光按檢測類型分類，可分為直接化學(xué)發(fā)光、間接化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光。

2.3.1 直接化學(xué)發(fā)光

直接化學(xué)發(fā)光以化學(xué)物質(zhì)，如異魯米諾和吖啶酯系列等直接標記抗原或抗體，免疫反應(yīng)后，直接引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)進行檢測。

2.3.2 間接化學(xué)發(fā)光

間接化學(xué)發(fā)光是用參與發(fā)光反應(yīng)的酶來標記抗原或抗體，免疫反應(yīng)后，加入發(fā)光底物，測定發(fā)光系統(tǒng)的發(fā)光強度來進行抗原或抗體的檢測。

2.3.3 電化學(xué)發(fā)光

電化學(xué)發(fā)光是一種在電極表面由電化學(xué)引發(fā)的特異性化學(xué)發(fā)光反應(yīng)。

2.4 化學(xué)發(fā)光免疫分析方法優(yōu)勢

與以往的放射免疫方法、酶聯(lián)免疫吸附法相比，化學(xué)發(fā)光免疫分析方法在靈敏度、線性范圍、反應(yīng)時間、誤診概率方面優(yōu)勢明顯，并且很容易實現(xiàn)自動化，進行高通量多樣本連續(xù)測定。

2.4.1 更高的靈敏度

首先方法本身結(jié)合了化學(xué)發(fā)光檢測的高靈敏度和免疫分析的高選擇性，加之很多產(chǎn)品含有磁微粒（粒徑約1μm）進行放大發(fā)光，由于磁微粒的比表面積遠遠大于酶標板，且磁微粒在反應(yīng)體系中更接近液相反應(yīng)，包被的抗原抗體更容易與待測物相結(jié)合，使得靈敏度大大提高。

2.4.2 更寬的線性范圍

酶免法（酶標儀）的線性范圍一般為0.1～3.0 OD（30倍），化學(xué)發(fā)光法（PMT）的線性范圍一般為3×102～3×107RLU（105倍），擴大了線性范圍寬度。

2.4.3 更短的反應(yīng)時間

酶免的總反應(yīng)時間普遍＞1.5h，加上洗滌和顯色時間一般＞2h，化學(xué)發(fā)光由于抗原抗體反應(yīng)更接近液相反應(yīng)，使得反應(yīng)速率大大加快，大部分項目出結(jié)果時間在30min以內(nèi)。

2.4.4 更小的誤診概率

化學(xué)發(fā)光體系具有更高的靈敏度和特異性，有效減少灰區(qū)；全自動化的儀器操作以減少人為失誤和交叉污染帶來的誤診；更有效地清洗系統(tǒng)，使非特異吸附較少到最低。

3.新法規(guī)下化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）相關(guān)的產(chǎn)品注冊問題

根據(jù)《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告（2021年第122號）》要求及化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）不同發(fā)光方式，以環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）為例，結(jié)合近一年來山東省注冊申報此類產(chǎn)品的發(fā)補情況，從技術(shù)審評角度對化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）的相關(guān)問題進行分析，總結(jié)出以下幾個方面的注意事項。

3.1 產(chǎn)品描述盡量詳盡

產(chǎn)品描述中對所采用的技術(shù)原理、產(chǎn)品組成等內(nèi)容應(yīng)盡量描述詳盡。尤其對于技術(shù)原理，應(yīng)包括其反應(yīng)原理（如雙抗體夾心法、競爭法等）、方法學(xué)的分類（見上文）、測量方法（終點法還是速率法）、信號處理方法、數(shù)據(jù)獲取和解讀方式，分析前處理步驟等。例如，環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）采用的是競爭法，異魯米諾直接標記在抗體上直接引發(fā)化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，發(fā)光強度與待測樣本中環(huán)孢霉素和他克莫司濃度成反比，使用相應(yīng)的方程擬合可定量測算出樣本中環(huán)孢霉素和他克莫司濃度。

3.2 生物安全性方面的說明

首先，化學(xué)發(fā)光免疫類產(chǎn)品不可避免地涉及抗原抗體，至少應(yīng)對其生物學(xué)來源（人、動物、病原體、重組或發(fā)酵產(chǎn)物等）和來源地域進行說明。其次，應(yīng)用蛋白電泳分析等技術(shù)證明所用生物材料僅含特征條帶，不包含其他。最后，應(yīng)說明此生物材料密封保存，運輸過程中不和人及環(huán)境直接接觸，或者說明僅在企業(yè)參考品中含有，參與生產(chǎn)過程及檢驗，遵循相關(guān)的生產(chǎn)檢驗操作規(guī)程進行操作等。

3.3 產(chǎn)品技術(shù)要求對檢驗方法的特殊要求

《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號）中規(guī)定產(chǎn)品檢驗方法應(yīng)與性能指標相適應(yīng)，優(yōu)先選用公認的或已頒布的標準檢驗方法，同時應(yīng)具備可操作性和可重現(xiàn)性。除此之外，檢驗方法中還應(yīng)當明確說明采用的參考品/標準品、樣本制備方法、使用的試劑批次和數(shù)量、試驗次數(shù)、計算方法等內(nèi)容，其中參考品制備等內(nèi)容可以附錄形式附在產(chǎn)品技術(shù)要求正文之后。

3.4 分析性能研究內(nèi)容及研究報告的要求

分析性能研究是對整個免疫檢測系統(tǒng)進行研發(fā)階段性能的總結(jié)，是檢測儀器、配套試劑、應(yīng)用軟件、分離技術(shù)、分離模式、檢測技術(shù)、抗原/抗體、質(zhì)控及其他要素綜合作用的結(jié)果。對于體外診斷試劑來說，除了準確度、精密度、線性范圍、靈敏度等基本性能外，如果產(chǎn)品涉及高劑量鉤狀效應(yīng)、干擾交叉反應(yīng)、高濃度的自身抗體或HAMA效應(yīng)、不同類型樣本的一致性比對、樣本加樣量、抗凝劑影響等其他內(nèi)容時，也應(yīng)一并進行研究且提供相應(yīng)的驗證報告，研究結(jié)果與產(chǎn)品說明書中相關(guān)內(nèi)容保持一致。可參考《定量檢測體外診斷試劑分析性能評估注冊審查指導(dǎo)原則》及國際通用的性能評估標準CLSI指南（EP系列文件）進行研究。

對于環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑，性能評估時應(yīng)注意以下兩點：一是盡可能納入預(yù)期使用人群（即攝入環(huán)孢霉素或他克莫司的患者）的樣本進行評價。確需使用加標樣本進行研究時，應(yīng)提供關(guān)于藥品純度、代謝產(chǎn)物或潛在干擾物質(zhì)、樣品類型的信息等[4]。二是應(yīng)考慮藥物代謝引入的交叉反應(yīng)。

分析性能研究的各個項目的報告應(yīng)包括研究方案。根據(jù)報告和數(shù)據(jù)，提供證據(jù)的總結(jié)以及證據(jù)充分性的論證或者此項研究不適用的說明。僅僅提供研究方法、檢測結(jié)果數(shù)據(jù)導(dǎo)致研究資料單薄，不能完整再現(xiàn)企業(yè)在研發(fā)時所做的工作，另外，審評人員也不能充分了解產(chǎn)品性能全部的研究內(nèi)容導(dǎo)致發(fā)補偏差。

3.5 校準品量值溯源問題

如果申報產(chǎn)品中包含校準品，要保證校準檢測系統(tǒng)后測定樣品所得結(jié)果準確性，必須有量值溯源性，且應(yīng)當提交溯源資料。校準品是用于修正儀器和試劑產(chǎn)生的偏倚，為使檢測結(jié)果準確可信，企業(yè)必須對校準品進行賦值。賦值結(jié)果一般在標簽或說明書中給予標識，或以校準曲線的形式錄入試劑盒配套校準卡（ID卡、二維碼）中。一般企業(yè)可以溯源到國際標準物質(zhì)、參考方法或權(quán)威參考系統(tǒng)等。環(huán)孢霉素和他克莫司溯源鏈：終端用戶結(jié)果→試劑盒內(nèi)校準品→企業(yè)參考品→CRM標準品→美國NIST標準（美國國家標準與技術(shù)研究院）可供參考。

另外，在溯源過程中應(yīng)充分識別每一次量值傳遞過程中引入的不確定度，確定評估方案，量化不確定度分量，最后來計算合成不確定度和拓展不確定度（參考YY/T 1709-2020《體外診斷試劑用校準物測量不確定度評定》）。還應(yīng)考慮與校準品有關(guān)的校準頻率或校準穩(wěn)定性以及互換性研究。

3.6 參考區(qū)間建立時常見問題

根據(jù)《體外診斷試劑參考區(qū)間確定注冊審查指導(dǎo)原則》，需要建立參考區(qū)間時，應(yīng)注意以下問題：一是混淆單、雙側(cè)界值。在參考區(qū)間建立研究時，應(yīng)依據(jù)臨床意義的不同確定檢測項目的單側(cè)界值或雙側(cè)界值。通常使用雙側(cè)2.5%～97.5%的人群分布，單側(cè)時可選擇95%或5%。二是數(shù)據(jù)是否符合正態(tài)分布繼而導(dǎo)致統(tǒng)計方法不同。在繪制完分布圖后宜采用假設(shè)檢驗方法進行綜合判斷是否符合正態(tài)分布。根據(jù)是否為正態(tài)分布選擇合適的方法進行數(shù)據(jù)離群值判斷（Dixon方法適用于非正態(tài)分布數(shù)據(jù)，Tukey法適用于正態(tài)分布數(shù)據(jù)），處理完離群值后，方可進行參考區(qū)間建立。如參考值數(shù)據(jù)近似正態(tài)分布或檢測數(shù)據(jù)經(jīng)變量轉(zhuǎn)換后呈正態(tài)分布，可采用正態(tài)分布法確定參考區(qū)間；如參考值數(shù)據(jù)呈偏態(tài)分布，可采用百分位數(shù)法（非參數(shù)法）確定參考區(qū)間。

由于正常未使用相應(yīng)藥物的人群樣本中無可檢出的特定藥物及其代謝產(chǎn)物，環(huán)孢霉素和他克莫司檢測試劑盒（化學(xué)發(fā)光法）等藥物檢測類試劑不涉及此部分內(nèi)容，可對相應(yīng)的治療范圍進行研究并體現(xiàn)在說明書中供臨床醫(yī)生參考。

3.7 臨床評價需要注意的情況

如果待評價試劑與比對方法對不同人群亞組表現(xiàn)出不同的性能，或者待評價試劑對不同的人群具有不同的參考區(qū)間，則應(yīng)對不同的人群進行分層統(tǒng)計，做臨床試驗的產(chǎn)品應(yīng)納入符合統(tǒng)計學(xué)要求數(shù)量的樣本，免于臨床試驗的產(chǎn)品每個人群應(yīng)分別納入至少100例樣本，如超敏C反應(yīng)蛋白和常規(guī)C反應(yīng)蛋白、某些激素類產(chǎn)品等。對于藥物檢測類試劑臨床評價入組病例時應(yīng)充分考慮不同治療方案（移植物等）、人群選擇、地域選擇、年齡范圍、移植后的時間和抽血時間（谷濃度及其他與給藥相關(guān)的時間點等）等與給藥相關(guān)的因素等內(nèi)容，樣本應(yīng)能夠充分評價產(chǎn)品臨床使用的安全性、有效性[4]。

4.小結(jié)

免疫檢測自動化、系統(tǒng)化是技術(shù)發(fā)展趨勢；化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）系列產(chǎn)品的檢測項目逐步在完善，以期滿足臨床需求；國內(nèi)企業(yè)在化學(xué)發(fā)光領(lǐng)域發(fā)展迅速，加之國家層面上科研項目支持、政策引導(dǎo)，國產(chǎn)自動化系統(tǒng)前景廣闊，國產(chǎn)化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）產(chǎn)品也會逐步趕超國際水平，由于藥物檢測類試劑檢測的血藥濃度與療效及毒性密切相關(guān)，且血藥濃度易被多方面因素影響，隨著時間推移，此類產(chǎn)品也會越來越多，以滿足臨床的需求。

按第二類醫(yī)療器械管理的化學(xué)發(fā)光免疫類體外診斷試劑（盒）產(chǎn)品常見的種類有直接發(fā)光法、間接發(fā)光法和電化學(xué)發(fā)光法產(chǎn)品，不同種類的產(chǎn)品有各自的優(yōu)缺點，應(yīng)根據(jù)檢測指標的特性選擇相應(yīng)方法學(xué)的產(chǎn)品，才能獲得靈敏度和特異度較高的檢測結(jié)果。在技術(shù)審評過程中，應(yīng)充分考慮產(chǎn)品所采用的原材料、反應(yīng)原理、分析性能研究相關(guān)內(nèi)容以及校準品溯源情況、參考區(qū)間建立過程（如需要）和臨床評價確認的結(jié)論，結(jié)合已經(jīng)發(fā)布的相關(guān)國家、行業(yè)標準、指導(dǎo)原則、已上市產(chǎn)品的市場應(yīng)用反饋等，綜合評估企業(yè)所提交的注冊申報資料所呈現(xiàn)的風(fēng)險。對性能研究、臨床評價、產(chǎn)品技術(shù)要求和產(chǎn)品說明書應(yīng)予以重點關(guān)注，以提升產(chǎn)品上市后的安全，減少風(fēng)險隱患。