酸藤子研究進(jìn)展及質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析*

韓沙 陳雅思 謝鳳鳳 張淼 黃茂春 龔志強(qiáng)

(1.廣西中醫(yī)藥大學(xué)廣西壯瑤藥重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣西 南寧 530200;2.廣西中醫(yī)藥大學(xué)賽恩斯新醫(yī)藥學(xué)院,廣西 南寧 530222)

酸藤子Embelialaeta(L.)Mez系紫金牛科酸藤子屬植物,全株、根、莖、葉、果實(shí)均可入藥,性平,味酸、澀[1]。酸藤子又名酸果藤(中國高等植物圖鑒),信筒子(福建),甜酸葉(海南島),雞母酸、掄不盡、咸酸果(廣西)。酸藤子野生資源較多,包括云、桂、川、閩及兩廣地區(qū)均有野生分布,東南亞等地也有分布[2]。酸藤子屬于傳統(tǒng)瑤藥中的老班藥,老班藥又分為五虎、九牛、七十二風(fēng)、一百零八鉆,酸藤子屬于七十二風(fēng)類[3]。酸藤子全株均可入藥,其中根和葉報(bào)道具有散瘀止痛的功效,可用于治療跌打腫痛、痛經(jīng)閉經(jīng),酸藤子的果實(shí)具有強(qiáng)壯補(bǔ)血的功效。臨床上有報(bào)道用酸藤子根和葉水煎做為外科洗藥,治療牛熱病口渴、傷食腹脹等[4-6]。酸藤子的現(xiàn)代藥理活性主要是抑菌和抗炎的研究,也有對酸藤子的抗氧化活性進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)研究[7-9]。本文從藥物的藥性功效、配伍和化學(xué)成分出發(fā)對酸藤子研究現(xiàn)狀進(jìn)行綜述,對酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物進(jìn)行預(yù)測分析,為完善酸藤子的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)體系提供科學(xué)依據(jù)。

1 生藥學(xué)特征

酸藤子為紫金?？扑崽僮訉僦参?以攀援灌木為主,稀為小灌木狀。蔡毅等[10]、梁臣艷等[11]對酸藤子的生藥學(xué)特征進(jìn)行了初步研究,酸藤子為單葉互生;常具腺點(diǎn),總狀花序,花瓣白色或帶黃色,果實(shí)為球形,花期12月至次年3月,果期4—6月。酸藤子的根為灰棕色,長圓柱形且粗糙;顯微鏡下的橫切面似石細(xì)胞樣,皮層寬廣,排列疏松。莖為紅棕色或黑色有類圓形突起的皮孔,顯微鏡下的橫切面木栓層細(xì)胞排列緊密,木質(zhì)部較寬。葉的上下表皮細(xì)胞在顯微鏡下均能看到角質(zhì)層紋理。酸藤子的藥材粉末顯微鑒別呈現(xiàn)灰棕色,具有大量類圓形的油細(xì)胞,并多含草酸鈣方晶。

2 化學(xué)成分

梁臣艷等[12]采用化學(xué)反應(yīng)法對酸藤子的提取液進(jìn)行了初步鑒別,結(jié)果顯示酸藤子除含有揮發(fā)油外,還包括黃酮、酚酸、鞣質(zhì)及其苷類等化學(xué)成分。唐天君等[13]從酸藤子莖葉提取物中分離得到醌類、酯類、芳香酸類等成分。楊林軍等[14]在進(jìn)一步研究中發(fā)現(xiàn),酸藤果中還含有甾體和生物堿等化學(xué)成分。

2.1黃酮類 黃酮類化合物具有抑菌、抗炎、保護(hù)心血管等作用,在野生中藥資源中廣泛存在。高雪梅等[15]、呂佳桐等[16]、邢潔等[17]研究結(jié)果表明酸藤子富含多種黃酮類成分。馮旭等[18]在酸藤子的乙醇提取物中分離鑒定了蘆丁、金絲桃苷等7種黃酮及其苷類化合物。蔡建秀等[19]從酸藤子葉中分離提取到6種黃酮化合物,并分析鑒定了其中三種化合物,分別為洋芹素、金圣草黃素、山柰酚素,酸藤子報(bào)道的部分黃酮類結(jié)構(gòu)如下圖1所示。

圖1 酸藤子報(bào)道中的部分黃酮類化合物結(jié)構(gòu)式

2.2揮發(fā)油類 酸藤子化學(xué)成分研究以揮發(fā)油居多。廖彭瑩等[20]對酸藤子根和枝葉的揮發(fā)性成分進(jìn)行了比較研究,結(jié)果表明酸藤子不同部位含有的揮發(fā)性成分組成及含量具有較大差異。凌中華等[21]對白花酸藤子和酸藤子的揮發(fā)性成分進(jìn)行初步研究,發(fā)現(xiàn)兩者的揮發(fā)性成分較一致但含量差異較大,主要包括棕櫚酸、亞麻酸等脂肪酸類。孟艷林等[22]利用SDE-GC-MS技術(shù)開展酸藤子中揮發(fā)性化合物定性定量分析,結(jié)果棕櫚酸含量最高,還主要包括油酸、亞油酸等脂肪酸。文獻(xiàn)報(bào)道的揮發(fā)油類化合物如下表1。

2.3醌類 從目前的研究上看酸藤子醌類成分的研究較其他成分少且集中,基本是以摁貝素為主。唐天君等[13]從酸藤子莖葉提取物中分離得到2,6-二甲氧基苯醌,楊林軍等[14]、馮旭等[18]從酸藤子中發(fā)現(xiàn)大黃素甲醚。曾憲彪等[23]利用水溶助長劑從酸藤果中分離得到摁貝素。摁貝素是酸藤子的莖和果實(shí)的主要成分[24-25]。其結(jié)構(gòu)如下圖2所示。

圖2 酸藤子報(bào)道中的醌類化合物結(jié)構(gòu)式

2.4其他類 酸藤子化學(xué)成分非常豐富,但相關(guān)研究較少,除上述成分外還具有酚酸類、生物堿類、酯類以及甾體類等。楊玲玲等[26]對不同產(chǎn)地酸藤子的根、莖、葉進(jìn)行HPLC色譜圖分析,指認(rèn)了沒食子酸、原兒茶酸、兒茶素、表兒茶素等4個(gè)成分,其中沒食子酸、原兒茶酸均為小分子酚酸化合物。譚靜玲等[27]從酸藤子的醇提液中分離鑒定了(6R,9R)-1-Oxo-α-ionol-9-O-β-D-goucopyranoside、(+)-Pinoresinol等13個(gè)化合物。酸藤子報(bào)道的有機(jī)酸等其他類結(jié)構(gòu)如下圖3所示。

圖3 酸藤子報(bào)道中的酚酸類化合物結(jié)構(gòu)式

3 藥理作用

酸藤子的藥用價(jià)值高,歷史悠久,藥性溫和,能治療多種疾病,但現(xiàn)代藥理學(xué)研究較少,主要集中于抗炎,抑菌和抗氧化活性等方面。

3.1抑菌作用 廖建良等[28]采用濾紙擴(kuò)散法和平板稀釋法對酸藤子的抑菌作用進(jìn)行了初步研究,結(jié)果表明酸藤子可抑制細(xì)菌活性,且酸藤果作用強(qiáng)于莖葉,但對霉菌無效。凌春耀等[7]采用濾紙片擴(kuò)散法比較了酸藤子根、莖、葉的醇提物和水提物的抑菌作用,結(jié)果表明各部位的醇提物均對供試菌種有不同程度的抑制作用,且以根部抑菌作用最強(qiáng),而水提物無抑菌活性。

3.2抗炎作用 炎癥發(fā)生是因?yàn)闄C(jī)體遭到病原體入侵后釋放了過多的炎癥因子,當(dāng)體內(nèi)炎癥因子過多就會引起一系列的病理反應(yīng),因此抗炎主要就是降低炎癥因子的表達(dá)[29-30]。張仲敏等[9]利用二甲苯、醋酸和角叉菜膠給小鼠造模并分組,造模成功后用不同劑量的酸藤子水提物灌胃治療,治療一段時(shí)間后檢測耳水腫、血管通透性、腹部扭動(dòng)、足爪水腫程度,發(fā)現(xiàn)酸藤子對二甲苯引起的耳部水腫、角叉菜膠引起的爪部水腫具有明顯的劑量依賴性抑制作用,并能抑制醋酸引起的血管通透性增加和扭體次數(shù)的增加,這是因?yàn)樗崽僮咏档土私遣娌四z誘導(dǎo)的促炎細(xì)胞因子IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2和NO的表達(dá)。Western印跡結(jié)果顯示酸藤子可以明顯下調(diào)COX-2和iNOS的表達(dá)以及抑制NF-κB從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞核并穩(wěn)定IκBα的轉(zhuǎn)化,因此可以得出酸藤子具有較強(qiáng)的抗炎作用。

3.3抗氧化 陳振興等[8]采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基活性測定對廣西、廣東11種不同產(chǎn)地酸藤子根總黃酮的抗氧化活性進(jìn)行篩選,不同產(chǎn)地酸藤子根的總黃酮含量差異較大,但都表現(xiàn)了良好的抗氧化作用。

4 酸藤子質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析

質(zhì)量標(biāo)志物是由劉昌孝院士[31]針對來源、產(chǎn)地等造成的藥材質(zhì)量差異較大的情況提出的新概念,該概念的提出不僅可以確保藥物的藥效還可以增加藥材的穩(wěn)定性和安全性。質(zhì)量標(biāo)志物指的是藥材本身固有的或者經(jīng)加工后形成的與功能屬性密切相關(guān)的物質(zhì),該物質(zhì)不僅能反映藥材的有效性、安全性和穩(wěn)定性還能進(jìn)行定性定量鑒別。

4.1基于不同產(chǎn)地特有化學(xué)成分質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析 酸藤子在國內(nèi)廣泛分布于云南、廣西、廣東、江西、福建、臺灣等地,陳振興等[8]對廣西、廣東11種不同產(chǎn)地的酸藤子進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)各產(chǎn)地總黃酮含量差異較大,廣西南寧市青秀區(qū)的含量最低,廣東潮州市饒平縣的含量最高。因此可將黃酮類作為酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物。

4.2基于酸藤子傳統(tǒng)藥性的質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測分析 酸藤子又稱酸吉風(fēng)屬于瑤藥七十二風(fēng)類?，幩幹v究五氣(溫、熱、寒、涼、平)八味(辛、苦、甘、酸、澀、麻、錐、淡),酸藤子酸、澀,平,屬風(fēng)打相兼藥[32]。從周祥祿等[33]的研究中可以發(fā)現(xiàn)酸味藥的主要作用成分是黃酮類,黃酮類藥物具有抗炎抗氧化的作用,能治療高血壓、炎癥、胃病、肝炎等疾病。因此可將黃酮類作為酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物。

4.3基于酸藤子傳統(tǒng)功效的質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測分析 酸藤子用藥歷史悠久,根、葉可散瘀止痛、收斂止瀉,治跌打腫痛、腸炎腹瀉、痛經(jīng)閉經(jīng)等癥;摁貝素為酸藤子屬植物白花酸藤子和酸藤子的主要成分,具有廣泛的生理活性,能驅(qū)絳蟲、鎮(zhèn)痛、消炎、抗氧化自由基、抑制肝癌、抗肝損害等[34-38]。因此可將摁貝素作為酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物。

4.4基于酸藤子化學(xué)成分可測性的質(zhì)量標(biāo)志物預(yù)測分析 化學(xué)成分可測性是作為質(zhì)量標(biāo)志物選擇的重要依據(jù),梁臣艷等[11]利用薄層色譜法對酸藤子進(jìn)行定性鑒別,將供試品與對照品蘆丁一起展開,結(jié)果供試品中呈現(xiàn)蘆丁Rf值一致的斑點(diǎn),表明蘆丁可作為酸藤子TLC定性鑒別的質(zhì)量標(biāo)志物。邢潔等[39]利用薄層色譜法和高效液相色譜法對酸藤子進(jìn)行定性定量鑒別,結(jié)果表明酸藤子的TLC斑點(diǎn)清晰、分離度好,HPLC的線性關(guān)系良好。楊玲玲等[26]對不同產(chǎn)地酸藤子的根、莖、葉進(jìn)行HPLC色譜圖分析,指認(rèn)了沒食子酸、原兒茶酸、兒茶素、表兒茶素4個(gè)成分。因此可將沒食子酸、原兒茶酸、兒茶素、表兒茶素作為酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物。

5 展望

酸藤子作為天然藥物在安全性和穩(wěn)定性方面與其他的合成藥、化學(xué)藥相比具有較大的優(yōu)勢。隨著研究的不斷深入人們發(fā)現(xiàn)合成的食用色素不僅存在不同程度的毒性,還有導(dǎo)致癌變和畸形的可能。且隨著提取分離技術(shù)的發(fā)展,人們開始把目光轉(zhuǎn)向天然色素,天然色素具有安全性高,穩(wěn)定性好的優(yōu)點(diǎn)。酸藤子作為天然藥物,其果實(shí)中含有大量的色素,因此可將酸藤果作為天然色素的原料。林志玲[40]對酸藤果的營養(yǎng)成分和色素穩(wěn)定性進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)酸藤子果實(shí)的色素穩(wěn)定性好且富有營養(yǎng),是一種很有潛力的天然食用色素。黃曉冬等[41]對酸藤子葉的營養(yǎng)成分進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)酸藤子葉中含有17種氨基酸,且葉中的礦物質(zhì)元素種類多、含量高。因此得出酸藤子有較大的開發(fā)利用價(jià)值。

酸藤子作為傳統(tǒng)瑤藥,歷史悠久,藥用價(jià)值高,且酸藤子作為天然來源的藥用資源具有療效確切、安全性高、植物資源豐富等優(yōu)點(diǎn)。酸藤子含有糖和苷類、有機(jī)酸、黃酮類、醌類、酚酸類以及揮發(fā)油類等化學(xué)成分。雖然酸藤子的化學(xué)成分種類多且豐富,但對其研究較少且分散,缺乏全面系統(tǒng)的研究。酸藤子的臨床作用確切,是瑤族地區(qū)廣泛使用的老班藥,可治療多種疾病,但現(xiàn)代藥理學(xué)研究還只停留在抗炎、抑菌、抗氧化等方面,不夠深入具體。為了進(jìn)一步減少酸藤子由于來源和產(chǎn)地等因素導(dǎo)致的質(zhì)量差異,從藥物的傳統(tǒng)藥性功效、配伍和化學(xué)成分可測性等方面進(jìn)行質(zhì)量標(biāo)志物的預(yù)測分析。但本文只是在現(xiàn)有研究的基礎(chǔ)上進(jìn)行的預(yù)測分析,隨著研究的不斷深入,酸藤子的質(zhì)量標(biāo)志物可能會出現(xiàn)變化,因此本文只是作為一個(gè)參考,還應(yīng)從多角度對其質(zhì)量進(jìn)行評價(jià),建立可觀、高效、完善的質(zhì)量評價(jià)體系。