基于ERPs技術(shù)探討長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積肝失疏泄對(duì)正常人群工作記憶的影響及機(jī)制＊

許琳培，周理樂，劉 永，侯俊林，趙紫薇，鄧金釵，秦中朋，高安祺，王格格，詹向紅＊＊

（1.河南中醫(yī)藥大學(xué)認(rèn)知神經(jīng)科學(xué)實(shí)驗(yàn)室 鄭州 450046；2.河南省中西醫(yī)結(jié)合防治腦認(rèn)知疾病工程技術(shù)研究中心 鄭州 450046；3.鄭州市中西醫(yī)結(jié)合防治腦認(rèn)知疾病重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 鄭州 450046）

阿爾茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一種起病隱匿且進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)退行性疾病，以記憶減退、認(rèn)知功能下降為首發(fā)表現(xiàn)和主要臨床癥狀[1]。當(dāng)前面臨AD 患病率高、死亡率高、無治愈藥物以及家庭照護(hù)、社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)過大等嚴(yán)重問題[2-3]。因此，AD 應(yīng)對(duì)策略已經(jīng)轉(zhuǎn)向前驅(qū)危險(xiǎn)因素的發(fā)現(xiàn)和預(yù)防[4-5]。

中醫(yī)治未病在緩衰益智方面具有獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，AD被中醫(yī)歸為“癡呆”、“健忘”范疇，其病位主要在腦?！毒霸廊珪份d“癡呆癥……，或以郁結(jié)，或以不遂，或以思慮，或以驚恐而漸癡呆”，明確指出各種不良情緒是癡呆的始動(dòng)因素?，F(xiàn)代研究也發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積是影響認(rèn)知功能下降和AD 發(fā)病的重要危險(xiǎn)因素之一[6-7]。長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積可引起肝失疏泄，導(dǎo)致五臟六腑功能失調(diào)，氣血津液受阻和痰濁血瘀的生成，致使腦竅不清，神失所養(yǎng)，影響認(rèn)知功能下降[8]。當(dāng)今社會(huì)生活節(jié)奏緊張、身心壓力倍增，越來越多的正常人群長(zhǎng)期處于負(fù)性情緒累積狀態(tài)，存在肝失疏泄的風(fēng)險(xiǎn)。那么長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積是否對(duì)正常人群認(rèn)知功能存在影響？其神經(jīng)機(jī)制又是如何？

艾森克人格問卷（Eysenck Personality Questionnaire，EPQ）用于評(píng)定個(gè)體長(zhǎng)期持久的人格特質(zhì)，神經(jīng)質(zhì)維度反映個(gè)體情緒穩(wěn)定程度[9-10]。其中高神經(jīng)質(zhì)具有情緒不穩(wěn)定的心理特質(zhì)，易受負(fù)性情緒刺激且調(diào)節(jié)能力較差[11]，該類人群長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積易致肝失疏泄，可能影響其認(rèn)知功能。工作記憶（Working memory，WM）是早期檢測(cè)認(rèn)知功能下降的敏感指標(biāo)[12-13]，有研究顯示，高神經(jīng)質(zhì)伴認(rèn)知功能障礙患者的工作記憶表現(xiàn)較差且更易出現(xiàn)焦慮、抑郁等負(fù)性情緒癥狀[14-15]。故本研究擬使用EPQ 在正常人群中篩選高、低神經(jīng)質(zhì)并分為情緒不穩(wěn)定組和情緒穩(wěn)定對(duì)照組，采用精準(zhǔn)實(shí)時(shí)捕捉工作記憶任務(wù)中腦電位變化的事件相關(guān)電位（Event-related potentials，ERPs）技術(shù)[16]，比較兩組被試在工作記憶經(jīng)典范式：N-back 范式[17]兩種記憶負(fù)荷下（0-back 和1-back）的行為學(xué)差別和ERPs 成分N200和P300 在相關(guān)腦區(qū)的波幅和潛伏期差異。旨在探索負(fù)性情緒累積肝失疏泄對(duì)正常人群工作記憶的影響及神經(jīng)電生理機(jī)制，為中醫(yī)藥預(yù)防認(rèn)知功能下降提供理論依據(jù)和新思路。

1 對(duì)象與方法

1.1 調(diào)查對(duì)象

自2020 年6 月-2020 年10 月在河南省鞏義市中醫(yī)院、駐馬店市上蔡縣洙湖鎮(zhèn)衛(wèi)生院和洛陽市伊川縣人民醫(yī)院體檢科參加體檢且年齡在26-65歲的正常人群中招募志愿者。本研究方案獲得河南中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（2019HL-136-01），所有參與者均簽署知情同意書。

1.2 調(diào)查方法與內(nèi)容

招募被試采用問卷方式，受試者按要求填寫一般情況調(diào)查表、利手問卷[18]蒙特利爾認(rèn)知評(píng)價(jià)量表（Montreal cognitive assessment scale，MoCA）[19]、中國(guó)版艾森克人格問卷（Eysenck Personality Questionnaire，EPQ）[20]成人版（龔耀先教授編制）。

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

①根據(jù)艾森克人格問卷（EPQ）成人版神經(jīng)質(zhì)（N）維度得分和中國(guó)人群常模[21]，符合N分轉(zhuǎn)換分＞61.5分者納入情緒不穩(wěn)定組，N 分轉(zhuǎn)換分＜38.5 分者納入情緒穩(wěn)定對(duì)照組；②視力正?；虺C正后視力正常；③右利手，無色盲、色弱，母語為漢語的中國(guó)人，初中及以上文化程度。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

①排除癡呆、輕度認(rèn)知功能障礙、帕金森、癲癇等具有認(rèn)知功能障礙疾病的患者（MoCA 量表得分＜26分）；②EPQ量表（L）維度轉(zhuǎn)換分＞70分者；③有重要臟器（心、肝、脾、肺、腎等）嚴(yán)重疾病者；④有精神障礙病史者（如抑郁癥）；⑤有嚴(yán)重頭外傷史者；⑥不能或不愿配合本研究的受試者。

1.3 試驗(yàn)分組

將通過問卷調(diào)查和納排標(biāo)準(zhǔn)篩選出的兩組人群按同性別、年齡（±2 歲）、文化程度進(jìn)行1∶1 匹配，最終納入情緒不穩(wěn)定組50例，情緒穩(wěn)定對(duì)照組50例。

1.4 試驗(yàn)范式

本試驗(yàn)共有2 個(gè)不同負(fù)荷的N-back(n=0，l)任務(wù)，均分為練習(xí)模塊和正式模塊。練習(xí)模塊按照與正式試驗(yàn)相同的刺激程序呈現(xiàn)，被試?yán)斫庠囼?yàn)任務(wù)且行為學(xué)正確率≥90%開始正式試驗(yàn)。試驗(yàn)步驟如下：首先在屏幕中央會(huì)出現(xiàn)注視點(diǎn)“+”，之后黑屏，接著出現(xiàn)持續(xù)500 ms 的目標(biāo)數(shù)字，隨后是1500 ms 的按鍵反應(yīng)時(shí)間，最大反應(yīng)時(shí)間2000 ms。若被試在規(guī)定時(shí)間內(nèi)做出反應(yīng)自動(dòng)補(bǔ)屏進(jìn)入下一刺激試次；若被試在2000 ms內(nèi)未做出反應(yīng)則按反應(yīng)錯(cuò)誤進(jìn)行行為學(xué)記錄并直接進(jìn)入下一刺激試次（具體流程見圖1）。0-back 任務(wù)判斷每一個(gè)出現(xiàn)的數(shù)字與第一個(gè)出現(xiàn)的刺激（靶目標(biāo)）是否相同，若數(shù)字相同按“F”鍵，數(shù)字不同則按“J”鍵。1-back 任務(wù)被試需要判斷每一個(gè)出現(xiàn)的數(shù)字是否與前面相鄰的數(shù)字相同。若數(shù)字相同按“F”鍵，若不同按“J”鍵（具體流程見圖2）。

圖1 0-back任務(wù)刺激呈現(xiàn)流程圖

圖2 1-back任務(wù)刺激呈現(xiàn)流程圖

1.5 數(shù)據(jù)采集與分析

采用Curry8 系統(tǒng)記錄腦電，佩戴NuAmps64 導(dǎo)Ag/AgCl 電極帽，雙眼外側(cè)安置電極記錄水平眼電（HEOG），左眼上下安置電極記錄垂直眼電（VEOG），雙側(cè)乳突連線為參考電極，頭皮阻抗＜5 kΩ，記錄帶通DC-200 Hz，采樣率1000 Hz；同步使用E-prime 2.0 軟件采集反應(yīng)時(shí)、正確率行為學(xué)數(shù)據(jù)。使用MATLAB 13.0 軟件分析額區(qū)Fz、中央?yún)^(qū)Cz、頂區(qū)Pz、枕區(qū)Oz 電極點(diǎn)N200和P300的波幅和潛伏期腦電成分。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料符合正態(tài)分布采用均值±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示。兩組間年齡比較采用配對(duì)樣本t檢驗(yàn)，兩組被試行為學(xué)結(jié)果的反應(yīng)時(shí)和正確率采用組別（2）×任務(wù)類型（2）雙因素方差分析，ERPs成分N200、P300的潛伏期及波幅采用組別（2）×任務(wù)類型（2）×腦區(qū)（4）重復(fù)測(cè)量方差分析。所有假設(shè)檢驗(yàn)均以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05判斷差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料結(jié)果

本試驗(yàn)最終納入被試50 對(duì)。每組受試者男性11 例，女性39 例；文化程度：每組受試者初中學(xué)歷15 例（30%）、高中學(xué)歷14 例（28%）、大學(xué)學(xué)歷21 例（42%）。年齡分布：每組受試者26-35 歲年齡層14 例（28%）、36-45 歲年齡層11 例（22%）、46-55 歲年齡層12例（24%）、56-65歲年齡層13例（26%）；情緒不穩(wěn)定組平均年齡（44.18±11.09）歲，情緒穩(wěn)定組平均年齡（44.44±11.30）歲，兩組受試者年齡比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。

2.2 行為學(xué)結(jié)果

具體結(jié)果見表1。正確率：組別主效應(yīng)[F組別（1，98）=4.611，P=0.034]有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其余因素均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意 義（P＞0.05）。反 應(yīng) 時(shí)：組 別[F組別（1，98）=5.691，P=0.019]和任務(wù)類型[F任務(wù)類型（1，98）=65.003，P＜0.001]主效應(yīng)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比較，情緒不穩(wěn)定組反應(yīng)時(shí)更長(zhǎng)（P＜0.05）；組別與任務(wù)類型[F組別*任務(wù)類型（1，98）=0.125，P=0.724]無交互作用。

表1 N-back任務(wù)行為學(xué)數(shù)據(jù)結(jié)果比較（±s，n=50）

表1 N-back任務(wù)行為學(xué)數(shù)據(jù)結(jié)果比較（±s，n=50）

組別情緒穩(wěn)定對(duì)照組情緒不穩(wěn)定組正確率（%）反應(yīng)時(shí)（ms）0-back 0.97±0.03 0.94±0.06 1-back 0.96±0.02 0.94±0.05 0-back 491.69±76.17 529.59±85.79 1-back 558.71±82.90 602.76±130.47

2.3 ERPs成分結(jié)果

2.3.1 ERPs波形圖和地形圖

兩組被試在0-back 和1-back 任務(wù)中均被成功誘發(fā)出在180 ms 之后的較大的負(fù)向波N200 和在300 ms后的較大的正向波P300。見圖3。

圖3 兩組被試在兩種任務(wù)下不同腦區(qū)（電極點(diǎn)）的組平均波形圖

在0-back 條件下，與情緒穩(wěn)定組相比，情緒不穩(wěn)定組N200 成分在額區(qū)、中央?yún)^(qū)和頂區(qū)功率下降，P300成分在額區(qū)、中央?yún)^(qū)、頂區(qū)和枕區(qū)均存在顯著功率下降；在1-back 條件下，與情緒穩(wěn)定組相比，情緒不穩(wěn)定組N200 成分在前額區(qū)，頂區(qū)和枕區(qū)功率下降，P300 成分在頂區(qū)和枕區(qū)功率下降明顯（見圖4）。

圖4 兩組被試在兩種條件下N200（200-300 ms）和P300（300-500 ms）地形圖

2.3.2 ERPs成分結(jié)果

（1）N200 波幅、潛伏期比較：描述統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表2，重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果見表3。

表2 兩組N200波幅及潛伏期描述統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，n=50）

表2 兩組N200波幅及潛伏期描述統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，n=50）

腦區(qū)情緒不穩(wěn)定組情緒穩(wěn)定對(duì)照組波幅（μV）額區(qū)枕區(qū)中央?yún)^(qū)任務(wù)類型0-back 1-back 0-back 1-back 0-back 1-back 0-back 1-back頂區(qū)-1.82±3.01-1.05±3.15-2.05±3.02-1.07±3.14-1.31±2.40-0.82±2.38-2.40±1.89-2.40±2.00潛伏期（ms）232.60±36.43 231.00±38.02 227.36±36.83 219.68±35.70 197.84±42.12 199.00±44.10 190.64±52.66 182.20±43.98波幅（μV）-2.36±3.19-1.21±2.56-2.21±3.37-1.21±2.57-1.47±2.50-0.85±2.50-3.15±2.19-3.35±2.17潛伏期（ms）243.64±35.89 246.04±36.49 236.60±39.00 231.56±35.88 215.72±42.09 224.52±43.60 242.88±71.15 226.56±70.06

表3 兩組N200波幅及潛伏期的重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果

N200 波幅結(jié)果顯示：組別主效應(yīng)無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。腦區(qū)和任務(wù)類型主效應(yīng)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），相較于0-back 任務(wù)，1-back 任務(wù)誘發(fā)的N200幅值更?。籒200 波幅頂區(qū)＞枕區(qū)＞中央?yún)^(qū)＞額區(qū)。任務(wù)類型與腦區(qū)存在交互效應(yīng)（P＜0.05），簡(jiǎn)單效應(yīng)分析發(fā)現(xiàn)，隨任務(wù)負(fù)荷增加，中央?yún)^(qū)和枕區(qū)的N200 波幅下降明顯。腦區(qū)、任務(wù)類型和情緒特質(zhì)組別間無交互效應(yīng)（P＞0.05），但進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，隨任務(wù)負(fù)荷增加，僅有情緒不穩(wěn)定組在中央?yún)^(qū)的N200 波幅顯著下降（P＜0.05）。

N200潛伏期結(jié)果顯示：組別和腦區(qū)主效應(yīng)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），與情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比，情緒不穩(wěn)定組潛伏期更長(zhǎng)。N200潛伏期額區(qū)、頂區(qū)＞中央?yún)^(qū)、枕區(qū)。腦區(qū)和情緒特質(zhì)組別，任務(wù)類型和情緒特質(zhì)組別，任務(wù)類型和腦區(qū)、任務(wù)類型和情緒特質(zhì)組別均存在交互效應(yīng)（P＜0.05），簡(jiǎn)單效應(yīng)分析顯示：在兩種任務(wù)類型下，情緒不穩(wěn)定組中央?yún)^(qū)和枕區(qū)的N200 潛伏期均比情緒穩(wěn)定對(duì)照組更長(zhǎng)；隨任務(wù)負(fù)荷增加，兩組頂區(qū)N200 潛伏期均縮短；但隨任務(wù)負(fù)荷增加，情緒不穩(wěn)定組中央?yún)^(qū)N200 潛伏期延長(zhǎng)，情緒穩(wěn)定對(duì)照組枕區(qū)N200潛伏期縮短。

（2）P300波幅、潛伏期比較：描述統(tǒng)計(jì)結(jié)果見表4，重復(fù)測(cè)量方差分析結(jié)果見表5。

表4 兩組P300波幅及潛伏期描述統(tǒng)計(jì)結(jié)果（±s，n=50）

腦區(qū)情緒不穩(wěn)定組情緒穩(wěn)定對(duì)照組任務(wù)類型額區(qū)中央?yún)^(qū)頂區(qū)枕區(qū)0-back 1-back 0-back 1-back 0-back 1-back 0-back 1-back波幅（μV）7.06±3.65 6.40±3.82 6.82±3.40 6.52±3.22 6.21±3.18 6.07±3.33 2.25±2.20 2.16±2.40潛伏期（ms）380.76±51.03 382.88±61.67 398.72±58.85 402.96±79.68 402.36±65.11 394.24±70.55 396.80±89.53 414.68±95.86波幅（μV）5.63±3.51 5.56±3.20 5.46±3.61 5.63±3.21 5.21±3.45 5.14±3.31 1.06±2.85 0.82±2.22潛伏期（ms）392.92±68.03 391.72±74.15 417.76±75.72 397.04±78.95 403.12±72.62 392.80±78.65 447.28±85.85 461.80±91.39

P300 波幅結(jié)果顯示：情緒特質(zhì)組別、腦區(qū)和任務(wù)類型主效應(yīng)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），較情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比，情緒不穩(wěn)定組P300 幅值更小；相較于0-back 任務(wù)，1-back 任務(wù)誘發(fā)的P300 幅值更?。籔300 波幅額區(qū)、頂區(qū)＞中央?yún)^(qū)、枕區(qū)。任務(wù)類型和腦區(qū)存在交互效應(yīng)（P＜0.05），簡(jiǎn)單效應(yīng)分析顯示：隨任務(wù)負(fù)荷增加，兩組P300 幅值中央?yún)^(qū)和枕區(qū)均顯著下降；相較于情緒穩(wěn)定對(duì)照組，情緒不穩(wěn)定組在0-back 任務(wù)下額區(qū)P300 幅值更小，在1-back 任務(wù)下中央?yún)^(qū)和枕區(qū)P300幅值更小。

P300 潛伏期結(jié)果顯示：情緒特質(zhì)組別主效應(yīng)差異具有邊緣顯著性（P=0.079＜0.1），與情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比較，情緒不穩(wěn)定組P300 潛伏期略有延長(zhǎng)；腦區(qū)和任務(wù)類型主效應(yīng)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），相較于0-back 任務(wù)，1-back 任務(wù)誘發(fā)的P300 潛伏期更長(zhǎng)；任務(wù)類型和腦區(qū)，腦區(qū)、任務(wù)類型和情緒特質(zhì)組別均存在交互效應(yīng)（P＜0.05），簡(jiǎn)單效應(yīng)分析顯示：較情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比，僅在1-back 任務(wù)下情緒不穩(wěn)定P300 潛伏期中央?yún)^(qū)和枕區(qū)更長(zhǎng)。隨任務(wù)負(fù)荷增加，兩組P300潛伏期在額區(qū)和枕區(qū)延長(zhǎng)，而情緒不穩(wěn)定組P300潛伏期在中央?yún)^(qū)也有顯著延長(zhǎng)。

3 討論

3.1 長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積易致肝失疏泄影響認(rèn)知功能下降

人格特質(zhì)和情緒及情緒調(diào)節(jié)之間存在極大相關(guān)性[22]，“情緒三原色理論”[23]認(rèn)為情緒是一種先天狀態(tài)，通過三種核心單胺神經(jīng)調(diào)節(jié)劑調(diào)控四種基本情緒（恐懼、憤怒、快樂、悲傷）從而產(chǎn)生更復(fù)雜情緒以影響認(rèn)知和行為。研究發(fā)現(xiàn)高神經(jīng)質(zhì)者由于本身固有的性情敏感和情緒不穩(wěn)定，更易感受憤怒、悲傷、恐懼和焦慮等負(fù)面情緒或更易接收外界壓力和刺激而處于負(fù)性情緒狀態(tài)[24]。情志是中醫(yī)對(duì)情緒的特有稱謂[25]，基本情緒理論與中醫(yī)“五志”內(nèi)涵相似[26]。五志涵蓋“七情”分為：怒、喜、思（憂）、悲、恐（驚）5 種情緒，五志和五臟及五行之間存在對(duì)應(yīng)關(guān)系：怒、喜、思、悲、恐分別對(duì)應(yīng)肝、心、脾、肺、腎和木、火、土、金、水。通過五種基本情志之間的生克乘侮、勝?gòu)?fù)制化關(guān)系與五臟相互影響[27]。肝主疏泄、調(diào)暢情志，肝是情緒調(diào)節(jié)的關(guān)鍵。高神經(jīng)質(zhì)者對(duì)負(fù)性情緒的激活閾值較低，感受事件壓力產(chǎn)生憤怒時(shí)可直接傷肝；感受壓力產(chǎn)生恐懼時(shí)，水生木（腎-肝）可快速影響肝的疏泄功能。長(zhǎng)期感受或過度思憂、悲傷則可通過相乘相侮（土侮木，金乘木）引起肝失疏泄。因此，認(rèn)為高神經(jīng)質(zhì)人群長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積易致肝失疏泄。肝為人體氣機(jī)升降之樞紐，肝經(jīng)與督脈上交與巔頂，肝腦相維，肝的疏泄功能直接影響腦的認(rèn)知。若肝疏泄失職，氣機(jī)升降失常，或?qū)е缕⑽高\(yùn)化失調(diào)，經(jīng)脈氣機(jī)阻滯，從而引起氣血津液生化乏源或運(yùn)行失常而不能上濡于腦，神失所養(yǎng)致智識(shí)不榮、記憶下降；或脈道阻塞，血行不暢易成瘀血，三焦氣化不利、氣滯水停易生痰濁，氣血津液運(yùn)行不暢，痰濁血瘀上蒙清竅，遂致神遲腦頓。研究顯示，高神經(jīng)質(zhì)老年人群易產(chǎn)生負(fù)性情緒進(jìn)而影響認(rèn)知功能[28]，本課題組前期提出“肝失疏泄致腦老化”科學(xué)假說[29]，并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)已證實(shí)“長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積肝失疏泄加速認(rèn)知功能下降”[30-31]。綜上，認(rèn)為長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積可致肝失疏泄而引發(fā)或加速認(rèn)知功能下降。本試驗(yàn)旨在將研究關(guān)口前置，探索長(zhǎng)期負(fù)性情緒累積對(duì)正常人群認(rèn)知功能的影響。

3.2 負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群工作記憶行為表現(xiàn)較差

本研究行為學(xué)結(jié)果顯示，與情緒穩(wěn)定組相比較，情緒不穩(wěn)定組反應(yīng)時(shí)延長(zhǎng)，正確率下降。這與Eysenck 等[32]的研究發(fā)現(xiàn)負(fù)性情緒累積消耗大量認(rèn)知資源，削弱個(gè)體加工效能，導(dǎo)致任務(wù)執(zhí)行能力下降的結(jié)論相符。情緒不穩(wěn)定組被試可能由于其長(zhǎng)期形成的敏感多疑導(dǎo)致大腦中樞中的情緒中樞易被喚醒，對(duì)焦慮、抑郁、憂思等負(fù)性情緒刺激體驗(yàn)深刻且心理沖突大[33]，使其處理N-back 任務(wù)時(shí)注意力分散，致使工作記憶判斷力下降；依據(jù)“情緒加工效能理論”[34]，個(gè)體工作記憶系統(tǒng)中的認(rèn)知資源有限，負(fù)性情緒大量累積會(huì)占用認(rèn)知資源數(shù)量，導(dǎo)致情緒不穩(wěn)定組個(gè)體用于認(rèn)知加工的工作記憶資源相應(yīng)減少，對(duì)目標(biāo)刺激的工作記憶加工負(fù)擔(dān)增加，導(dǎo)致反應(yīng)速度降低。此外，本試驗(yàn)結(jié)果顯示，隨任務(wù)負(fù)荷增加，兩組反應(yīng)時(shí)均明顯延長(zhǎng)。說明認(rèn)知負(fù)荷越大，工作記憶整體功能輸出效率越低。綜合以上結(jié)果提示，受負(fù)性情緒累積肝失疏泄影響的正常人群工作記憶能力已經(jīng)開始下降。

3.3 負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群工作記憶水平下降

N200 和P300 成分是與情緒狀態(tài)、注意程度有關(guān)的內(nèi)源性成分。N200反映刺激評(píng)估的認(rèn)知過程、選擇性注意和對(duì)目標(biāo)刺激的辨別能力。其波幅反映選擇性注意資源分配的多少，潛伏期反映認(rèn)知加工速度。P300 反映工作記憶對(duì)注意力資源分配和加工過程的認(rèn)知水平，其波幅反映工作記憶中表征的更新能力和目標(biāo)刺激對(duì)信息加工時(shí)腦區(qū)的喚醒程度[35]，潛伏期反映對(duì)目標(biāo)刺激分類的速度[36]。大量研究表明N200 和P300 的波幅和潛伏期在認(rèn)知功能下降的預(yù)測(cè)和前期診斷中具有前瞻性意義[37-39]。

工作記憶功能包括對(duì)信息進(jìn)行編碼、更新、短時(shí)保存和提取[40-41]。N-back 范式中有不同的任務(wù)負(fù)荷，0-back 任務(wù)僅需對(duì)當(dāng)前信息進(jìn)行輸入和編碼匹配；1-back 任務(wù)除了完成匹配過程外，還需完成工作記憶的更新和短時(shí)存儲(chǔ)。因此1-back 難度更大，需要投入更多的注意資源。根據(jù)注意資源分配理論，負(fù)性情緒如憤怒、焦慮、抑郁等會(huì)占用一定的注意資源，導(dǎo)致加工目標(biāo)刺激的工作記憶資源減少[42]。本研究結(jié)果顯示：在兩種任務(wù)類型下，與情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比，情緒不穩(wěn)定組的N200 潛伏期均更長(zhǎng)。說明受負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群的目標(biāo)刺激識(shí)別能力更差，認(rèn)知加工速度更慢。在0-back 任務(wù)下，情緒不穩(wěn)定組的額區(qū)P300波幅比情緒穩(wěn)定對(duì)照組更小，表明負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群由于負(fù)性情緒本身就占用部分的注意資源，因此對(duì)用于目標(biāo)加工的選擇性注意分配減少，導(dǎo)致波幅下降和額區(qū)的喚醒程度降低。額區(qū)是情緒活動(dòng)最重要的場(chǎng)所，本結(jié)果顯示負(fù)性情緒在工作記憶的信息輸入和編碼環(huán)節(jié)就已經(jīng)影響到額區(qū)的信息加工，符合Chang[43]研究的負(fù)性情緒對(duì)額區(qū)影響比積極情緒更為明顯的結(jié)論。一些研究認(rèn)為，負(fù)性刺激可能會(huì)損害高負(fù)荷任務(wù)工作記憶中的信息保持功能[44-45],本結(jié)果在1-back 任務(wù)下，較情緒穩(wěn)定對(duì)照組相比，情緒不穩(wěn)定組中央?yún)^(qū)和枕區(qū)N200 和P300 潛伏期更長(zhǎng)、P300 波幅更小。提示負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群在進(jìn)行高難度的記憶任務(wù)時(shí)的工作記憶認(rèn)知加工水平更差，原因可能是工作記憶過程中的選擇性注意資源減少，用于更新和短時(shí)存儲(chǔ)的認(rèn)知資源不足，信息識(shí)別能力、刷新靈活性和貯存保持性受損。

3.4 隨記憶負(fù)荷增加，負(fù)性情緒累積肝失疏泄人群工作記憶水平下降更顯著

本研究結(jié)果顯示：隨任務(wù)負(fù)荷增加，兩組被試均出現(xiàn)頂區(qū)N200 潛伏期縮短，額區(qū)和枕區(qū)P300 潛伏期延長(zhǎng)，中央?yún)^(qū)和枕區(qū)N200 和P300 波幅下降。提示隨任務(wù)負(fù)荷增加，頂區(qū)的目標(biāo)刺激加工過程縮短。額區(qū)和枕區(qū)延長(zhǎng)，中央?yún)^(qū)和枕區(qū)喚醒降低，這可能是由于高負(fù)荷任務(wù)下，注意力高度集中在頂區(qū)，頂區(qū)的神經(jīng)中樞活動(dòng)數(shù)目增加，其他腦區(qū)的注意資源相應(yīng)減少，造成不同腦區(qū)注意資源分配不均。有研究發(fā)現(xiàn)，工作記憶容量高的人完成高認(rèn)知負(fù)荷任務(wù)的表現(xiàn)更好[46-47]，負(fù)性情緒可能會(huì)導(dǎo)致個(gè)體工作記憶容量的減小[48]，且處于負(fù)性情緒狀態(tài)的個(gè)體在高認(rèn)知負(fù)荷任務(wù)中的信息保持功能受記憶負(fù)荷的影響較大[44]。本結(jié)果顯示，隨任務(wù)負(fù)荷增加，僅有情緒不穩(wěn)定組在中央?yún)^(qū)出現(xiàn)N200 波幅下降和N200、P300 潛伏期顯著延長(zhǎng)。提示負(fù)性情緒累積、肝失疏泄人群隨認(rèn)知難度加大，用于工作記憶加工的認(rèn)知資源減少更明顯，可能是由于該類人群工作記憶容量減小，難以支撐其繼續(xù)完成更新操作過程。

4 小結(jié)

綜上所述，本研究認(rèn)為負(fù)性情緒累積肝失疏泄正常人群已經(jīng)出現(xiàn)工作記憶水平下降的表現(xiàn)，其機(jī)制可能與該類人群的注意資源分配減少和工作記憶容量減小有關(guān)。因此，應(yīng)重視負(fù)性情緒累積肝失疏泄對(duì)認(rèn)知功能下降的影響，充分發(fā)揮中醫(yī)藥“未病先防，既病防變”的治未病優(yōu)勢(shì)進(jìn)行情志調(diào)理、鍛煉養(yǎng)生、藥膳調(diào)體等干預(yù)。此外，年齡是正常認(rèn)知老化的重要影響因素[49]，但本研究?jī)H以26-65 歲的正常人群為研究對(duì)象，下一步研究應(yīng)該探索負(fù)性情緒累積肝失疏泄對(duì)不同年齡段正常人群認(rèn)知功能的影響，并擴(kuò)大樣本量和調(diào)查范圍，以期為中醫(yī)情志與認(rèn)知功能下降研究提供新的理論內(nèi)涵和實(shí)證依據(jù)。