花期糯紅高粱內(nèi)生酵母分離鑒定及功能菌篩選

胡連清，劉雯雯，陳 露，周萬海*，馮瑞章，魏 琴，趙 鑫，唐馨宇，張玉婷

（1.宜賓學(xué)院 農(nóng)林與食品工程學(xué)部，四川 宜賓 644000；2.香料植物資源開發(fā)與利用四川省高校重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，四川 宜賓 644000）

宜賓釀酒專用糯紅高粱為國(guó)家地理標(biāo)志的保護(hù)農(nóng)產(chǎn)品[1-2]。糯紅高粱的熟期短，淀粉結(jié)構(gòu)相對(duì)疏松，富含有較大部分未完全轉(zhuǎn)化的中間物質(zhì)，且蛋白、脂肪和單寧含量適中，適于酵母等發(fā)酵微生物生長(zhǎng)，作為釀酒原料其在釀酒過程中表現(xiàn)出易糊化、易發(fā)酵的優(yōu)勢(shì)[3-4]，是釀造優(yōu)質(zhì)白酒的主要原料之一[2]。關(guān)于糯紅高粱內(nèi)生酵母菌株應(yīng)用于發(fā)酵行業(yè)的報(bào)道鮮見，糯紅高粱中的內(nèi)生酵母菌種類豐富，但在各行業(yè)中的開發(fā)率以及利用率則較低，因此研究糯紅高粱內(nèi)生酵母菌的種類、內(nèi)生酵母菌株的發(fā)酵性能，為后續(xù)將其應(yīng)用于發(fā)酵行業(yè)具有重要意義。

植物內(nèi)生菌是指能夠在健康的植物組織中定殖與植物和諧共生卻又不產(chǎn)生明顯癥狀的微生物共生體[5-6]。植物內(nèi)生酵母為植物內(nèi)生菌中的一個(gè)大類，其生命周期的一部分時(shí)間內(nèi)定殖于健康植物組織中，且不會(huì)對(duì)寄主植物造成損害，它與寄主在長(zhǎng)期進(jìn)化過程中形成了相互依存、互惠互利的共生關(guān)系[7-8]。植物內(nèi)生酵母可在生長(zhǎng)過程中產(chǎn)生的一些植物激素與其他因子促進(jìn)寄主植物的生長(zhǎng)，并維持寄主植物的健康，其擅長(zhǎng)利用植物的己糖和戊糖，并且植物內(nèi)生酵母對(duì)植物化學(xué)物質(zhì)的耐受性更強(qiáng)[9]。一些研究者將分離出的植物內(nèi)生酵母應(yīng)用于食品發(fā)酵行業(yè)，如從無花果[10]、葡萄[11]、枸杞[12]和桑葚[13]等果實(shí)中分離出可以用于釀酒的內(nèi)生酵母菌株。普通的釀酒酵母菌僅能發(fā)酵六碳糖，而不能發(fā)酵由五碳糖組成的木質(zhì)纖維素，而BURA R等[14]從楊樹中分離的紅酵母皆能發(fā)酵五碳糖木糖和六碳糖葡萄糖，因此其在該方面植物內(nèi)生酵母優(yōu)于工業(yè)酵母菌株。以往有關(guān)植物內(nèi)生菌中的內(nèi)生酵母的研究較少，大都多集中在對(duì)多年生木本植物的研究上，且分離出的植物內(nèi)生酵母極少[15]；對(duì)糯紅高粱的研究也多集中在分類、種質(zhì)資源收集評(píng)價(jià)、品種選育和栽培管理技術(shù)方面，而對(duì)其內(nèi)生酵母的研究則鮮見，尤其是品種、器官組織對(duì)其菌群結(jié)構(gòu)和多樣性的影響。

本研究以宜賓地區(qū)釀酒專用的糯紅高粱為試驗(yàn)材料，分析花期糯紅高粱不同品種的不同組織中內(nèi)生酵母多樣性，并通過選擇培養(yǎng)基篩選功能酵母，以揭示花期糯紅高粱內(nèi)生酵母多樣性及群落結(jié)構(gòu)變化規(guī)律，為更深入探究功能內(nèi)生酵母在宿主生長(zhǎng)發(fā)育上起何種作用提供基礎(chǔ)支撐。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 原料糯紅高粱（雜交種金糯粱1號(hào)、地方品種青殼洋）：宜賓市翠屏區(qū)農(nóng)牧局農(nóng)技推廣中心。

1.1.2 試劑

Goldview I型核酸染色劑、2×Taq聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）Master Mix、脫氧核糖核酸（deoxyribo nucleic acid，DNA）Maker、GoldView、Lysis Buffer Direct PCR裂解液：大連寶生物有限公司；引物NL1、NL2：由上海生工生物有限公司合成。

1.1.3 培養(yǎng)基

分離培養(yǎng)基為馬鈴薯葡萄糖瓊脂（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基、酵母膏胨葡萄糖瓊脂（yeast extract peptone dextrose agar，YEPD）培養(yǎng)基、酵母麥芽瓊脂（yeast malt agar，YM）培養(yǎng)基；鑒定培養(yǎng)基為WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂；選擇培養(yǎng)基為淀粉瓊脂培養(yǎng)基、脫脂乳培養(yǎng)基、三丁酸甘油酯瓊脂培養(yǎng)基、果膠瓊脂培養(yǎng)基、吐溫-80瓊脂培養(yǎng)基：成都新界實(shí)驗(yàn)器材有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

JJ060387超凈工作臺(tái)：吳江市凈化設(shè)備總廠；LDZX-75KBS高溫蒸汽滅菌鍋：上海申安醫(yī)療器械廠；DHG-9620A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱、LRH-70恒溫培養(yǎng)箱：上海一恒科技有限公司；UPT-Ⅰ-50優(yōu)普超純?nèi)∷畽C(jī)：成都市超純科技有限公司；HH-6恒溫水浴鍋、DYCR-8C恒溫振蕩器：上海高致精密儀器有限公司；Ks48+PCR儀：冠森生物科技（上海）有限公司；JS-2000凝膠電泳儀：上海培清科技有限公司；AR2130電子分析天平：德國(guó)賽多利斯集團(tuán)。

1.3 方法

1.3.1 糯紅高粱內(nèi)生酵母的分離與保藏

表面消毒處理參考劉曉靜等[16]的方法并進(jìn)行一定的優(yōu)化，糯紅高粱各組織表面消毒的具體操作方法如下：根部按流水沖洗60 min，無菌水洗滌2次，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理1 min，無菌水洗滌1次，5%NaClO處理3 min，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理1 min；莖部按流水沖洗60 min，無菌水洗滌2次，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理0.5 min，無菌水洗滌1次，4%NaClO處理4 min，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理20 s；葉和花部按流水沖洗60 min，無菌水洗滌2次，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理20 s，無菌水洗滌1次，3%NaClO處理3 min，體積分?jǐn)?shù)75%無菌乙醇處理20 s，最后用無菌水沖洗3次完成表面無菌化處理。參照胡連清等[17]的方法用滅菌剪刀根據(jù)器官組織形狀特點(diǎn)切割成小塊，分別接種至PDA、YEPD和YM種分離培養(yǎng)基上，并將最后一次無菌水洗滌液涂布于相同培養(yǎng)基上作為空白對(duì)照，以檢驗(yàn)消毒效果，然后將接種后的平板置于25 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5 d，當(dāng)組織塊傷口出現(xiàn)菌落時(shí)，及時(shí)用接種環(huán)挑取菌落，連續(xù)劃線獲得純化菌株，最后進(jìn)行YPD培養(yǎng)基的斜面和甘油管保藏。

1.3.2 糯紅高粱內(nèi)生酵母分類鑒定方法

將分離獲得的菌株劃線接種于WL培養(yǎng)基[18-19]，25 ℃培養(yǎng)3 d，觀察單菌落的形態(tài)特征。同時(shí)，在顯微鏡下觀察酵母的細(xì)胞形態(tài)以此對(duì)分離到的酵母菌株進(jìn)行初步的形態(tài)分類。從上述平板培養(yǎng)基上挑取單菌落酵母菌體，加入Lysis Buffer Direct PCR裂解液，水浴15 min后離心，取上清液直接用通用引物NL1和NL2對(duì)26S rDNA D1/D2區(qū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR擴(kuò)增體系：5 μL DNA模板、1 μL NL1（10 mmol/L）、1μLNL2（10 mmol/L）、25 μL 2×TaqPCR Master Mix、18 μL ddH2O；PCR擴(kuò)增程序：94℃預(yù)變性4min，94℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸45 s，32個(gè)循環(huán)，72 ℃再延伸10 min[20]。PCR擴(kuò)增目標(biāo)產(chǎn)物1%瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)合格后送上海生工測(cè)序。用美國(guó)國(guó)立生物技術(shù)信息中心（national center for biotechnology information，NCBI）網(wǎng)站基于局部比對(duì)搜索工具（basic local alignment search tool，BLAST）程序進(jìn)行序列比對(duì)。

1.3.3 酵母菌多樣性指數(shù)和相似性指數(shù)計(jì)算

量化的多樣性指數(shù)可反映植物生長(zhǎng)過程中內(nèi)生菌群落結(jié)構(gòu)的演替變化規(guī)律[21]。根據(jù)鑒定的糯紅高粱內(nèi)生酵母菌和各測(cè)度指數(shù)的特點(diǎn)，應(yīng)用生態(tài)學(xué)評(píng)價(jià)方法[22]，計(jì)算不同組織中內(nèi)生酵母的豐富度數(shù)、香農(nóng)指數(shù)、均勻度指數(shù)和優(yōu)勢(shì)度指數(shù)。

1.3.4 糯紅高粱內(nèi)生酵母功能菌鑒定

將1.3.1中純化得到的菌分別接種至淀粉瓊脂培養(yǎng)基、脫脂乳培養(yǎng)基、三丁酸甘油酯瓊脂培養(yǎng)基、果膠瓊脂培養(yǎng)基以及吐溫-80瓊脂培養(yǎng)基等選擇培養(yǎng)基上，置于28 ℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)3～5 d，觀察有無光（暈）圈產(chǎn)生，進(jìn)而判斷菌株的產(chǎn)酶功能。

1.3.5 糯紅高粱內(nèi)生酵母菌生化鑒定

采用杭州濱和微生物試劑有限公司生產(chǎn)的TH-15C生化管對(duì)分離得到的內(nèi)生酵母菌進(jìn)行生化鑒定。將分離純化的內(nèi)生酵母菌接種至YEPD液體培養(yǎng)基中，30 ℃條件下培養(yǎng)72 h，離心收集菌體，然后用0.85%的NaCl溶液稀釋制備成0.5麥?zhǔn)蠞岫鹊木鷳乙海?0 μL菌懸液加至不同的酵母樣真菌糖生化鑒定管中，同時(shí)做無糖陰性對(duì)照，在30 ℃條件下培養(yǎng)48～72 h，在電子放大鏡下觀察記錄加入菌液渾濁程度的變化，判斷分離內(nèi)生酵母對(duì)不同糖的利用能力。

2 結(jié)果與分析

2.1 花期糯紅高粱內(nèi)生酵母菌的分離

采用傳統(tǒng)的平板分離法，從2個(gè)糯紅高粱花期的根、莖、葉和花組織中共分離到54株內(nèi)生酵母，其中從根中分離到10株，占分離總數(shù)的18.51%；莖中分離到28株，占分離總數(shù)的51.85%；葉中分離得到7株，占分離總數(shù)的12.96%，花中分離得到9株，占分離總數(shù)的16.68%。

2.2 糯紅高粱內(nèi)生酵母形態(tài)

將上述分離的酵母菌劃線接種至用WL營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，根據(jù)菌落的顏色和形態(tài)將其聚類，結(jié)果見表1。由表1可知，分離的54株酵母共分為8種形態(tài)類型，菌落顏色有淺綠色、淡藍(lán)色、乳白色、淡綠色、墨綠色、淺粉色、奶油色等，菌落質(zhì)地有光滑、粘稠，菌落有的平伏，有的中間隆起，表面有的光滑反光，有的光滑黯淡，菌落邊緣形態(tài)各異。

表1 糯紅高粱花期內(nèi)生酵母菌的形態(tài)Table 1 Morphology of endophytic yeasts in waxy sorghum at flowering stage

2.3 糯紅高粱內(nèi)生酵母菌組成

從糯紅高粱花期的根、莖、葉和花4個(gè)組織中分別分離出10、28、7、9株內(nèi)生酵母菌（表2），對(duì)分離得到的該54株酵母通過26S rDNA D1/D2區(qū)基因序列測(cè)序鑒定為12個(gè)屬17個(gè)種，分別為貝氏酵母（Begerowomyces）、粘質(zhì)皮狀新絲孢酵母（Cutaneotrichosporon）、隱球酵母（Cryptococcus）、鐮刀菌屬（Fusarium）、漢納酵母（Hannaella）、微曲酵母（Microbotryozyma）、莫氏黑粉菌（Moesziomyces）、金黃色蝶形擔(dān)孢酵母（Papiliotrema）、筑波擬酵母（Pseudozyma）、Symmetrospora、絲孢酵母菌（Trichosporon）與異常威克漢姆酵母（Wickerhamomyces），其中優(yōu)勢(shì)屬為隱球酵母（Cryptococcus），占40.74%；優(yōu)勢(shì)種為黃色隱球酵母（Cryptococcus luteolus），占35.17%。該結(jié)果表明糯紅高粱內(nèi)生酵母種類豐富多樣。

表2 糯紅高粱花期內(nèi)生酵母組成Table 2 Composition of endophytic yeasts in waxy sorghum at flowering stage

糯紅高粱為釀造白酒的優(yōu)質(zhì)原料[2]，由此可推斷，從糯紅高粱中分離的內(nèi)生酵母的生長(zhǎng)性能以及發(fā)酵性能可能較為為優(yōu)良。探索特定植物物種中內(nèi)生酵母的多樣性，對(duì)了解它們?cè)谥参镏械墓δ芴峁┝嘶A(chǔ)，而獲得可培養(yǎng)植物內(nèi)生酵母是對(duì)其進(jìn)行全基因組測(cè)序、定殖特點(diǎn)分析、理化性質(zhì)測(cè)定及其與植物互作機(jī)制解析的前提[23]。目前，有關(guān)植物內(nèi)生酵母的研究鮮見且多集中于多年生木本植物上；ZHAO J H等[24]從30棵北京油松松枝中分離得到3株內(nèi)生酵母；李亞輝等[25]從枸杞中分離得到6 株內(nèi)生酵母菌；MIDDELHOVEN W J[26]從紅杉的嫩枝中分離得到4種酵母菌種，表明其內(nèi)生酵母豐富多樣。

此外，從品種來分析，從金糯粱1號(hào)中分離得到41株內(nèi)生酵母，鑒定為11屬14種；從青殼洋中分離得到13株，鑒定為6屬6種。該結(jié)果表明金糯粱1號(hào)的內(nèi)生酵母多樣性優(yōu)于地方品種青殼洋，這可能是由于金糯粱1號(hào)為雜交新品種的緣故，相關(guān)內(nèi)容還需更進(jìn)一步的分析。金糯粱1號(hào)金糯粱1號(hào)與青殼洋兩品中花期的優(yōu)勢(shì)內(nèi)生酵母不一致且都為特有菌，金糯粱1號(hào)優(yōu)勢(shì)內(nèi)生酵母為黃色隱球酵母（Cryptococcus luteolus），而青殼洋的優(yōu)勢(shì)內(nèi)生酵母為Papiliotrema flavescens，說明不同糯紅高粱品種的內(nèi)生酵母菌組成存在一定的差異。該結(jié)果進(jìn)一步表明糯紅高粱中內(nèi)生酵母在各組織以及不同品種間可能具有不同的傳播機(jī)制。

2.4 糯紅高粱內(nèi)生酵母菌的多樣性分析

由表3可知，莖內(nèi)生酵母的豐富度指數(shù)表現(xiàn)為莖＞根＞花＞葉；糯紅高粱內(nèi)生酵母的均勻度指數(shù)表現(xiàn)為根＞花＞葉＞莖，糯紅高粱內(nèi)生酵母菌優(yōu)質(zhì)度指數(shù)表現(xiàn)為花＞根＞莖＞葉。該結(jié)果表明糯紅高粱根、莖、葉、花各部分的各項(xiàng)多樣性指數(shù)存在差異。

表3 花期糯紅高粱不同組織內(nèi)生酵母菌多樣性指數(shù)Table 3 Diversity indexes of endophytic yeasts in different tissues of waxy sorghum at flowering stage

2.5 糯紅高粱內(nèi)生酵母功能菌篩選

利用淀粉瓊脂培養(yǎng)基、脫脂乳培養(yǎng)基、三丁酸甘油酯瓊脂培養(yǎng)基、果膠瓊脂培養(yǎng)基、吐溫-80瓊脂培養(yǎng)基等選擇培養(yǎng)基對(duì)分離得到的54株內(nèi)生酵母進(jìn)行功能鑒定，結(jié)果見表4。由表4可知，篩選出的54株酵母中，其中29株內(nèi)生酵母為功能酵母菌，F(xiàn)AJ28菌株的功能最為豐富，同時(shí)具有產(chǎn)淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、產(chǎn)酯酶與纖維素酶5種功能；產(chǎn)酯酶的菌株最多，包括FAJ30、FBR14、FBF20、HBF22、FAL13、FAJ9等15株；產(chǎn)纖維素酶的內(nèi)生酵母菌較少，包括菌株FAL15、FAL17、FAJ18；另外結(jié)果還顯示，菌株FBJ15產(chǎn)淀粉酶能力最強(qiáng)，菌株FAF8產(chǎn)蛋白酶能力最強(qiáng)，菌株FAJ43產(chǎn)脂肪酶能力最強(qiáng)；菌株HBF22產(chǎn)酯酶能力最強(qiáng)。

表4 花期糯紅高粱功能內(nèi)生酵母篩選Table 4 Screening of functional endophytic yeasts in waxy sorghum at flowering stage

植物內(nèi)生酵母能產(chǎn)生植物激素以及分泌一些可作為生物催化劑和抗菌劑的生物化學(xué)品，這些分泌物植物生長(zhǎng)方面也具有一定的促進(jìn)作用，如VAZ A B M等[27]從西蘭花中分離得到3株具有抗菌活性的內(nèi)生酵母；NASSAR A H等[28]從玉米中分離得到8株產(chǎn)生長(zhǎng)素IAA和IPYA的內(nèi)生酵母菌，并從楊樹中分離得到的內(nèi)生酵母菌株WP1顯著促進(jìn)了甜椒的生長(zhǎng)，促使甜椒根與芽質(zhì)量的增加，并促使甜椒提前開花與結(jié)實(shí)，同時(shí)顯著提高了果實(shí)的產(chǎn)量。本研究分離出的2株異常威克漢姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）FAL15與FAL17，經(jīng)鑒定為功能菌，有研究顯示，異常威克漢姆酵母菌類在發(fā)酵行業(yè)應(yīng)用廣泛，如制備低溫大曲[29]、釀造酒曲與醬油[30-31]、發(fā)酵面團(tuán)[32]、制成凍干菌劑[33]等，除此之外，該菌類耐低溫[34]、產(chǎn)酯[35]、產(chǎn)香[36]、產(chǎn)尿素[37]且產(chǎn)風(fēng)味物質(zhì)能力強(qiáng)[38]。糯紅高粱又為釀造白酒的優(yōu)質(zhì)原料，因此推測(cè)從糯紅高粱分離得到的異常威克漢姆酵母菌可能適用于酒曲發(fā)酵和醬曲發(fā)酵等食品發(fā)酵行業(yè)，后續(xù)將會(huì)對(duì)FAL15與FAL17兩菌株的功能分析作更深入的研究。

2.6 糯紅高粱不同部位內(nèi)生酵母菌生化鑒定結(jié)果

糯紅高粱不同部位內(nèi)生酵母菌生化鑒定結(jié)果見表5。由表5可知，能夠利用甘露醇的有11株，其中FAJ31、FBJ17、FAJ30、FAJ43、FBR14、FAL13利用效果較好；能夠利用甘露醇的有16株，其中HBF22、FBJ17、FAJ41、FAJ30、FBR14、FBF20利用效果較好；能夠利用水楊素的有6株，分別為FAJ11、FAR1、FBF19、FAJ31、FBJ17、FBR14；能夠利用鼠李糖的有12株，其中HBF22、FAJ31、FBJ17、FBR14、FBF20、FAL13利用效果較好；能夠利用葡萄糖的有12株，其中FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用蔗糖的有12株，其中FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用木糖醇的有15株，其中HBF22、FAJ31、FAJ41、FAJ43、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用松三糖的有12株，其中FAJ31、FBJ17、FBF20利用效果較好；能夠利用蕈糖的有10株，其中FAJ31、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用麥芽糖的有13株，其中HBF22、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用阿糖的有13株，其中FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用衛(wèi)矛糖的有12株，其中HBF22、FAJ31、FBJ17、FAJ43利用效果較好；能夠利用棉子糖的有13株，其中FAJ31、FBJ17、FAJ30、FBJ16利用效果較好；能夠利用肌醇的有13株，其中FAJ31、FBJ17利用效果較好；能夠利用N-乙酰葡胺的有13株，其中FAJ31、FAJ43、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用乳糖的有8株，其中FAJ31、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用纖維二糖的有13株，其中FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用半乳糖的有13株，其中FAJ31、FBJ17、FBR14利用效果較好；能夠利用山梨醇的有12株，其中FAJ31、FBJ17、FAJ43利用效果較好；能夠利用木梨糖的有16株，其中FAJ31、FAJ41、FAJ30、FBJ17、FBR14、FBF20利用效果較好。由此可見，糯紅高粱中的內(nèi)生酵母在其生長(zhǎng)發(fā)育過程中發(fā)揮著重要作用，相關(guān)內(nèi)容值得進(jìn)一步的研究。

表5 花期糯紅高粱內(nèi)生酵母菌碳源同化實(shí)驗(yàn)結(jié)果Table 5 Experimental results of carbon source assimilation of endophytic yeasts in waxy sorghum at flowering stage

3 結(jié)論

糯紅高粱花期內(nèi)生酵母種類組成豐富且功能多樣，從糯紅高粱根、莖、葉和花組織中分離得到54株可培養(yǎng)的內(nèi)生酵母菌菌株，鑒定為12個(gè)屬17個(gè)種，分別為貝氏酵母（Begerowomyces）、粘質(zhì)皮狀新絲孢酵母（Cutaneotrichosporon）、隱球酵母（Cryptococcus）、鐮刀菌屬（Fusarium）、漢納酵母（Hannaella）、微曲酵母（Microbotryozyma）、莫氏黑粉菌（Moesziomyces）、金黃色蝶形擔(dān)孢酵母（Papiliotrema）、筑波擬酵母（Pseudozyma）、Symmetrospora、絲孢酵母菌（Trichosporon）與異常威克漢姆酵母（Wickerhamomyces），其中優(yōu)勢(shì)屬為隱球酵母（Cryptococcus），優(yōu)勢(shì)種為黃色隱球酵母（Cryptococcus luteolus）。糯紅高粱根、莖、葉、花各組織中的內(nèi)生酵母各項(xiàng)多樣性指數(shù)均有明顯差異，其豐富度指數(shù)表現(xiàn)為莖＞根＞花＞葉；均勻度指數(shù)表現(xiàn)為根＞花＞葉＞莖；優(yōu)勢(shì)度指數(shù)表現(xiàn)為花＞根＞莖＞葉。通過選擇培養(yǎng)基篩選出29株功能酵母菌，其中菌株FAJ28的功能最為豐富，產(chǎn)酯酶的菌株最多，產(chǎn)纖維素酶的內(nèi)生酵母菌最少；另研究結(jié)果還顯示，菌株FBJ15產(chǎn)淀粉酶能力最強(qiáng)，菌株FAF8產(chǎn)蛋白酶能力最強(qiáng)，菌株FAJ43產(chǎn)脂肪酶能力最強(qiáng)；菌株HBF22產(chǎn)酯酶能力最強(qiáng)。糯紅高粱花期內(nèi)生酵母菌生化功能豐富，對(duì)山梨糖、甘露醇等有一定的利用作用。