三黃雞群雞白痢的診斷與防治

●申海龍（長興縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局 浙江 湖州 313100）

雞沙門氏菌病俗稱雞白痢，沙門氏菌為革蘭氏陰性，屬于兼性厭氧菌。主要易感15～20日齡的雛雞，不同品種的雞易感程度不同?；疾‰u以及帶菌隱性感染雞都是該病的傳染源。臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、排灰白色黏性狀糞便，具有非常高的流行性和發(fā)病率，且3周齡內(nèi)的雛雞死亡率極高[1]。因雞沙門氏菌感染后會導(dǎo)致雛雞發(fā)育緩慢、生長性能降低、蛋雞孵化率、產(chǎn)蛋率下降等，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本文對浙江省某雞場的3周齡三黃雞群疑似雞白痢感染進(jìn)行了診斷，并針對雞白痢凈化及綜合防治進(jìn)行分析討論，以期為養(yǎng)殖過程中該病的防治奠定基礎(chǔ)。

1 臨床癥狀

浙江某雞場3周齡雞突然出現(xiàn)無癥狀急性死亡，臨床癥狀主要表現(xiàn)為羽毛蓬亂、采食量下降、精神沉郁、雞冠蒼白以及明顯的腹瀉癥狀，主要可見肛門附近沾污、下痢白色稀糞，個別病雞出現(xiàn)眼盲、跛行、關(guān)節(jié)腫脹等癥狀。

2 診斷

從病死雞中隨機(jī)采集30只進(jìn)行診斷。

2.1 試驗材料

普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、沙門菌-志賀菌（SS）瓊脂培養(yǎng)基、鮮血瓊脂培養(yǎng)基和衛(wèi)矛醇及鳥氨酸脫羧酶生化鑒定管均購自青島高科園海博生物技術(shù)有限公司；沙門氏菌屬診斷血清購自寧波天潤生物藥業(yè)有限公司。

2.2 診斷方法

2.2.1 病原分離鑒定剖檢病死雞，于無菌條件下取肝、脾組織，接種于營養(yǎng)肉湯、普通營養(yǎng)瓊脂、血平板上進(jìn)行增菌培養(yǎng)，挑取鑒別培養(yǎng)基上疑似菌落分別純培養(yǎng)，在SS培養(yǎng)基和麥康凱培養(yǎng)基上進(jìn)行第二次劃線分離，37℃溫箱中培養(yǎng)24 h，觀察細(xì)菌生長情況及菌落特征。挑取平板上單個可疑菌落，置于載玻片上制成涂片，進(jìn)行革蘭氏染色，400倍油鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)。結(jié)果：分離病料在血平板上形成圓形、光滑、半透明的細(xì)小菌落；在麥康凱培養(yǎng)基上形成細(xì)小、無色、透明的菌落；在普通瓊脂培養(yǎng)基上形成無色透明的小菌落，與麥康凱上菌落形態(tài)基本沒有區(qū)別，鏡檢見革蘭氏陰性短小桿菌。使用布魯克全自動快速生物質(zhì)譜檢測儀進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。穿刺測定時，該沙門氏菌株均沒有鞭毛，根據(jù)O相血清凝集鑒定結(jié)果判斷該沙門氏菌為雞白痢沙門菌或雞傷寒沙門菌。根據(jù)質(zhì)譜鑒定結(jié)果：本研究共分離鑒定出11株沙門氏菌，分離率為36.67%。

2.2.2 血清生化試驗在潔凈的載玻片上滴加5 μL沙門菌屬診斷血清，使用牙簽蘸取單個可疑菌落與血清混合均勻，同時設(shè)生理鹽水為對照。挑取瓊脂培養(yǎng)基上單個無色、半透明菌落分別接種于衛(wèi)矛醇和鳥氨酸脫羧酶細(xì)菌生化微量鑒定管中，35℃培養(yǎng)24 h觀察試驗結(jié)果，進(jìn)一步鑒別沙門氏菌分離株的血清型。將待測菌株于37℃培養(yǎng)后挑取培養(yǎng)物作純培養(yǎng)，與A-F群多價抗O血清作玻片凝集，即可判明該菌是否屬于A-F群中的沙門氏菌。衛(wèi)矛醇、鳥氨酸脫羧酶鑒定結(jié)果顯示，鳥氨酸脫羧酶陽性，衛(wèi)矛醇陰性，表明菌株均為雞白痢沙門菌。

2.2.3 剖檢剖檢可見肝臟腫大，實質(zhì)性變質(zhì)，呈黃綠色，表面凹凸不平及有纖維素滲出物被覆，膽囊充盈。個別患雞出現(xiàn)纖維素性心包炎，心肌上有灰白色壞死點。肺瘀血、水腫，脾臟、腎臟充血腫大，偶見黃棕色斑點。從發(fā)病死亡雛雞的臟器中分離到細(xì)菌，經(jīng)過純化培養(yǎng)和分離鑒定，與接種菌株相同，可確診感染沙門氏菌。

3 討論

3.1 分離鑒定

雞群有發(fā)病跡象時養(yǎng)殖場一般采取就地取樣的方法，分為在體取樣和解剖收集病料，在體取鼻腔和氣管內(nèi)分泌物，解剖取肺臟、氣管、法氏囊等器官。病料無菌處理后，可直接在普通瓊脂、血瓊脂或鑒別培養(yǎng)基平板上劃線分離，但對于已經(jīng)被污染的待檢材料包括飲水、糞便、飼料、腸內(nèi)容物等，可能含有大量雜菌，因此常用增菌培養(yǎng)基擴(kuò)增菌量后再分離[2]。雞沙門氏菌的鑒別培養(yǎng)基常用麥康凱、伊紅美蘭、SS和HE等瓊脂培養(yǎng)基。

3.2 血清學(xué)檢測

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、酶聯(lián)免疫斑點試驗（ELISPOT）、血清平板凝集試驗（SPA）、血凝抑制試驗（HI）和膠體金等方法。其中ELISA與SPA試驗方法因其快速、高效、穩(wěn)定的特點已成為理想的實驗室診斷方法，適用于群體檢測[3]。

3.3 分子生物學(xué)診斷

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和蛋白質(zhì)免疫印跡（Western Blot）等方法。其中PCR方法是最常用的診斷方法，針對16S rRNA或者雞白痢特異性基因（SEP、pagC）設(shè)計引物，抽提基因組，利用PCR技術(shù)進(jìn)行特異性擴(kuò)增，完成對樣本中沙門氏菌的檢測，此方法操作簡單、靈敏度高、成本較低且特異性強(qiáng)[4]。

4 雞白痢的防治措施

4.1 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

該病發(fā)生無明顯的季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病。特別在春季和冬季，受到氣候變化的影響，雞舍內(nèi)寒冷潮濕，通風(fēng)頻率減少，易導(dǎo)致雞沙門氏菌感染。同時雞舍內(nèi)飼養(yǎng)密度過大，雞群擁擠，溫度過高，濕度過大，空氣不流通等因素不僅可引起雞群應(yīng)激，降低免疫力，還可導(dǎo)致雞呼吸道黏膜產(chǎn)生炎癥，引起雞白痢的感染及傳播。可通過合理通風(fēng)、選用干凈的水源和營養(yǎng)豐富的飼料來控制感染風(fēng)險，設(shè)定合理的飼養(yǎng)空間，避免飼養(yǎng)密度過大，定期消毒，完善飼養(yǎng)管理制度[5]。

4.2 雞群凈化

垂直傳播是雞白痢傳播途徑之一，也是雞白痢能夠在雞場中持續(xù)感染的主要原因之一，垂直傳播可控性較差，一旦感染便代代相傳，無法徹底根治，因此首先要確保無雞白痢病源，確保雞群安全，臨床上通常采用加熱法和抗生素處理法來抑制種蛋內(nèi)雞沙門氏菌傳播[6]。

4.2.1 加熱法種蛋在46.1℃維持14 h，待溫度冷卻至37.8℃時移入常規(guī)孵化溫度繼續(xù)孵化。該方法可以較為徹底地消滅種蛋內(nèi)雞沙門氏菌病原體，但也會造成種蛋的孵化率下降。

4.2.2 抗生素處理法將種蛋放在裝有對雞沙門氏菌有治療作用的抗生素溶液的密閉容器中，或直接注射抗生素溶液，但這種處理法對雞沙門氏菌的清除不夠徹底，且影響孵化率。

4.3 藥物治療

因雞沙門氏菌對抗生素耐藥性較為普遍，普通抗生素藥物對治療雞白痢效果較差，因此治療前應(yīng)先進(jìn)行藥敏試驗，再選擇合理的治療藥物，臨床上常對患病雞用慶大霉素混飲，但是抗菌藥物一般只能緩解雞白痢感染急性期癥狀，停用后易復(fù)發(fā)。此外，濫用抗菌藥物會導(dǎo)致家禽體內(nèi)菌株耐藥性加重，還會造成藥物殘留，影響禽類相關(guān)食品安全，危害人類健康[7]。研究表明在防治雞白痢的藥物選擇方面，中藥具有較好的療效，如白頭翁、白術(shù)、茯苓、蒲公英、甘草等中藥配伍的中藥提取液對雞白痢感染具有良好的治療效果[8]，但是中藥作用機(jī)制不明，成分復(fù)雜，在獸醫(yī)臨床應(yīng)用上仍有許多工作需要完成。