經(jīng)輔助生殖技術(shù)的妊娠丟失與年齡、孕周、流產(chǎn)次數(shù)以及染色體異常關(guān)系的研究①

石國(guó)西,翟俊英,鈕紅麗

(南陽市第一人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科, 河南 南陽 473000)

輔助生殖技術(shù)(assisted reproductive technology,ART)是由人工授精、體外受精-胚胎移植(invitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)及其衍生技術(shù)組成的治療不孕不育的有效方式,近年來ART在超促排卵方案以及胚胎技術(shù)等方面得以快速發(fā)展,同時(shí)隨著用藥及冷凍技術(shù)的進(jìn)步,ART妊娠率也隨之提升[1,2],美國(guó)疾病預(yù)防與控制中心數(shù)據(jù)顯示,ART臨床妊娠率為52.4%[3]。但是妊娠丟失仍是導(dǎo)致受孕失敗的主要原因,且妊娠丟失率是評(píng)價(jià)ART治療不孕癥成功率的一個(gè)重要指標(biāo),在一項(xiàng)研究結(jié)果中表明[4]ART妊娠丟失發(fā)生率為22%～63%,致使部分患者需進(jìn)行多次ART,不僅增加患者的經(jīng)濟(jì)支出,同時(shí)增加患者的痛苦。因此對(duì)于導(dǎo)致妊娠丟失相關(guān)因素的探索成為臨床研究的熱點(diǎn)。故本研究以2020年7月至2022年7月于本院進(jìn)行ART的152例孕婦為研究對(duì)象進(jìn)行一項(xiàng)回顧性分析,從而為臨床的治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

分析選取2020年7月至2022年7月于本院接受ART的152例孕婦的周期資料。(1)納入標(biāo)準(zhǔn):①首次接受ART;②孕婦年齡為20～45歲。(2)排除標(biāo)準(zhǔn):①伴有認(rèn)知功能障礙者;②臨床資料缺失者;③依從性差者。根據(jù)是否發(fā)生妊娠丟失分為丟失組(n=54)和未丟失組(n=98)。

1.2 方法

1.2.1 輔助生殖技術(shù)

患者所有檢查完善后采用適當(dāng)?shù)姆绞竭M(jìn)行促排卵。對(duì)存在≥2個(gè)卵泡的患者于當(dāng)晚注射5000～10000U人絨毛膜性腺激素(hCG),注射34～36h內(nèi)完成取卵。取卵成功后根據(jù)精液情況選用合適的方式進(jìn)行受精,胚胎培養(yǎng)3d后進(jìn)行移植。然后予以患者黃體酮聯(lián)合戊酸雌二醇片口服,支持黃體功能。

1.2.2 輔助生殖技術(shù)早期流產(chǎn)影響因子分析

根據(jù)是否發(fā)生妊娠丟失分為丟失組和未丟失組,對(duì)比兩組患者的一般資料,將一般資料中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的因素采用多因素Logistic分析。

1.3 染色體數(shù)目檢測(cè)

采用NIPA技術(shù)進(jìn)行染色體數(shù)目檢測(cè):(1)患者發(fā)生妊娠丟失后及時(shí)行清宮術(shù),并將清宮術(shù)中吸出的絨毛組織浸泡于生理鹽水中進(jìn)行檢測(cè)。用生理鹽水將絨毛組織洗滌3次后完成分選,將蛻膜以及血管等組織去除,收集5～10mg絨毛組織備用。(2)檢測(cè)方法:采用細(xì)胞遺傳學(xué)、MLPA方法完成染色體檢測(cè),試劑盒購(gòu)置于荷蘭 MRC-Holland公司。

1.4 妊娠丟失定義

胚胎移植后14d內(nèi)檢測(cè)血β-hCG,若β-hCG≥10mU/mL,未見妊娠囊視為生化妊娠;可見孕囊但妊娠不足28周或體質(zhì)量不足1kg為自然流產(chǎn)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

2 結(jié)果

2.1 兩組患者一般資料對(duì)比

丟失組年齡大于未丟失組不孕年限、流產(chǎn)次數(shù)多于未丟失組,染色體異常率高于未丟失組(P<0.05),見表1。

表1 兩組患者一般資料情況比較

2.2 影響妊娠丟失的多因素Logistic分析

多因素Logistic分析顯示:年齡、流產(chǎn)次數(shù)以及不孕年限(OR值分別為0.777、0.273、0.215)為發(fā)生妊娠丟失的危險(xiǎn)因素,染色體異常率為患者發(fā)生妊娠丟失的保護(hù)因素(OR=3.673),見表2。

表2 影響妊娠丟失的多因素Logistic分析

3 討論

不孕已成為社會(huì)性問題,在一項(xiàng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果中發(fā)現(xiàn)我國(guó)不孕患者占育齡總數(shù)的12.5%,一方面影響患者的身心健康,另一方面影響其家庭和睦[5,6]。隨著促排卵技術(shù)以及胚胎培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,ART成為越來越多不孕患者的治療手段,并且每年接受ART進(jìn)行受孕的患者妊娠也呈上升趨勢(shì),但是ART高妊娠丟失發(fā)生率也是臨床目前面臨的難題[7]。作為評(píng)價(jià)ART治療成功率的重要指標(biāo)降低,妊娠丟失在接受ART患者中居高不下,不僅增加患者的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān),還增加社會(huì)醫(yī)療壓力[8],因此尋找影響妊娠丟失的相關(guān)因素具有重要意義。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)不孕年限是早期妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。胚胎不孕是一個(gè)多因素共同作用的過程,在此過程中影響不孕的因素也逐漸增加,其中不孕年限越長(zhǎng),患者接受ART的次數(shù)也相應(yīng)增加,成功率則隨之下降,同時(shí)不可控次數(shù)也逐漸增加,另外不孕年限越長(zhǎng)患者的年齡也隨之增加,進(jìn)一步增加不良因素的影響,如染色體異常的發(fā)生率更高,進(jìn)而增加妊娠丟失的發(fā)生率[9]。ART患者中非整倍體是常見的染色體異常,占所有染色體異常發(fā)生率的30%,在ART操作過程中體外操作引入的氧化、熱以及機(jī)械應(yīng)力等多種因素可對(duì)胚胎的正常發(fā)育造成影響,增加妊娠丟失的發(fā)生率[10]。同時(shí)本研究結(jié)果顯示染色體異常是妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。當(dāng)前諸多研究[11,12]染色體異常和妊娠丟失,染色體異常是早期妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,本研究結(jié)果同其結(jié)果一致,支持本研究結(jié)果。

女性年齡在妊娠丟失的相關(guān)研究中一直備受研究者的青睞,尤其是二胎生育政策的開放,產(chǎn)婦年齡呈整體上升趨勢(shì)。隨著年齡的增長(zhǎng),機(jī)體各項(xiàng)機(jī)能呈下降趨勢(shì),同時(shí)卵巢儲(chǔ)備功能也不斷減退,使得卵母細(xì)胞質(zhì)量降低,繼而影響卵子的質(zhì)量,線粒體DNA、蛋白質(zhì)等物質(zhì)在ROS等多種氧自由基的破壞下降低ATP含量,從而對(duì)微管微絲運(yùn)動(dòng)造成影響,增加染色體分離以及非整倍體的發(fā)生率,加快細(xì)胞凋亡,增加妊娠丟失的發(fā)生率。胚胎染色體核型異常發(fā)生率在>35歲女性群體中可高達(dá)70.4%,而在30～40歲女性群體中發(fā)生率為30%～35%[13]。另外隨著年齡的增加,機(jī)體常伴有子宮肌瘤等多種基礎(chǔ)疾病,一方面使得患者難以耐受妊娠,另一方面機(jī)體對(duì)激素以及子宮的容受性降低,而血管性疾病的發(fā)生降低子宮供血可進(jìn)一步增加妊娠丟失的發(fā)生率[14]。年齡是胚胎染色體核型異常的重要因素,而染色體異常也是妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)女性年齡>35歲是妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

宮腔操作次數(shù)多少是流產(chǎn)發(fā)生的危險(xiǎn)因素,反復(fù)的宮腔操作可影響子宮內(nèi)膜,降低內(nèi)膜的作用,進(jìn)而導(dǎo)致妊娠丟失的發(fā)生,并且流產(chǎn)次數(shù)增加≥3次連續(xù)自然流產(chǎn)史者再次妊娠后胚胎丟失率為40%～80%。另外流產(chǎn)次數(shù)越多對(duì)血小板的聚集功能的影響也更加明顯,提高了凝血功能,因此反復(fù)流產(chǎn)患者血液高凝狀態(tài)較無流產(chǎn)患者更為明顯,進(jìn)而降低纖溶系統(tǒng),促使胎盤發(fā)生微循環(huán)障礙,降低胎盤血流灌注量,減少胎兒供氧量,從而導(dǎo)致流產(chǎn)或生化妊娠,而本研究結(jié)果也發(fā)現(xiàn)流產(chǎn)次數(shù)是妊娠丟失發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。此結(jié)果提示對(duì)育齡期女性應(yīng)給予合理的健康教育,告知反復(fù)流產(chǎn)的危害性,降低妊娠丟失發(fā)生率。

綜上所述,年齡、流產(chǎn)次數(shù)以及不孕年限為發(fā)生妊娠丟失的獨(dú)立危險(xiǎn)因素,染色體異常率為發(fā)生妊娠丟失的獨(dú)立保護(hù)因素。