宮頸癌患者陰道微生物的分布分析

高 玲

鄭州澍青醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校，河南 鄭州 450064

女性陰道微生態(tài)作為一個(gè)十分復(fù)雜的系統(tǒng)，主要涉及陰道解剖結(jié)構(gòu)、免疫及內(nèi)分泌調(diào)節(jié)功能、微生態(tài)菌群等組成部分。陰道微生態(tài)中寄生有大量的微生物菌群，研究表明，陰道中尤以乳酸桿菌為主要優(yōu)勢菌，其在微生物菌群中的占比可達(dá)到約90%，在維持陰道微生態(tài)平衡方面發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。宮頸腫瘤的發(fā)生與乳酸桿菌減少、陰道微生物環(huán)境失調(diào)是否存在關(guān)聯(lián)，一直以來都備受人們的關(guān)注。致使陰道微生物環(huán)境失調(diào)的因素有很多種，包括陰道清洗護(hù)理不當(dāng)、濫用抗生素、性生活不正常等，同時(shí)這些因素也是引發(fā)宮頸癌前病變的危險(xiǎn)因素。有研究指出，維持陰道微生態(tài)平衡是防治女性生態(tài)系統(tǒng)失衡的一項(xiàng)重要手段[1]。對(duì)此，本研究選取50 例健康體檢女性、50 例CIN 患者以及50 例宮頸癌患者作為研究對(duì)象，分析宮頸癌患者陰道微生物的分布情況與宮頸癌的關(guān)系，現(xiàn)作出如下研究報(bào)道。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選擇我國2021年3月—2022年3月范圍內(nèi)接收的50 例健康體檢女性（健康體檢組）、50 例宮頸上皮內(nèi)瘤變患者（CIN 組）以及50 例宮頸癌患者（宮頸癌組）作為本次研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：1）疾病患者均符合相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)；2）均為已婚女性；3）入院前1個(gè)月內(nèi)沒有服用抗生素及引導(dǎo)沖洗藥物干預(yù)；4）年齡在18 歲以上；5）均知悉本次研究，并已簽署知情同意書[2]。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）近期有性生活、陰道分泌物異常及流血者；2）心、肝、腎等重要臟器病變者；3）合并泌尿生殖器炎癥者；4）存在長期使用皮質(zhì)類固醇及免疫抑制劑史者。健康體檢組，年齡在25～41 歲之間，平均年齡（29.1±3.3）歲。CIN 組，年齡在27～43歲之間，平均年齡（29.7±3.1）歲。宮頸癌組，年齡在28～40 歲之間，平均年齡（29.8±3.5）歲，其中，分別有鱗狀細(xì)胞癌29 例，腺鱗癌13 例，腺癌8 例。3 組一般資料無明顯差異，可進(jìn)行臨床研究對(duì)比。

1.2 方法

乳酸桿菌檢測：使用蘸有0.9%氯化鈉溶液的棉拭子于陰道側(cè)穹隆處采集陰道分泌物，平行滾動(dòng)后平鋪在載玻片上，自然晾干，經(jīng)革蘭染色處理后，于油鏡下對(duì)乳酸桿菌進(jìn)行檢測計(jì)數(shù)。

真菌與滴蟲檢測：采用懸滴法將陰道分泌物懸浮于0.9%氯化鈉溶液載玻片上，迅速展開鏡檢，對(duì)每張載玻片隨機(jī)觀察10 個(gè)高倍視野，若觀察到真菌或滴蟲就將結(jié)果記為（+），沒有觀察到則記為（-）。

細(xì)菌性陰道病相關(guān)菌檢測：采集宮頸口分泌物，選用BV 快速診斷試劑盒進(jìn)行檢測，觀察反應(yīng)體顏色轉(zhuǎn)變，呈綠色為陽性，呈深黃綠色為弱陽性，呈藍(lán)色為強(qiáng)陽性。若觀察到綠色、藍(lán)色就將結(jié)果記為（+），其他則為（-）。

人乳頭瘤病毒檢測：引入HPV16、HPV18 型PCR 熒光檢測法，HPV16 反應(yīng)液檢測Ct 值不足37，表明HPV16 型DNA 陽性；HPV18 反應(yīng)液檢測Ct 值不足37，則表明HPV18 型DNA 陽性。

1.3 觀察指標(biāo)

統(tǒng)計(jì)三組病原體感染情況，依據(jù)檢出結(jié)果進(jìn)行判斷，兩種或兩種以上病原體感染即為混合感染，連續(xù)計(jì)算5 個(gè)高倍視野乳酸桿菌數(shù)量，并將平均每個(gè)高倍視野下乳酸桿菌的數(shù)量計(jì)為其定植密度（個(gè)/HP）[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理軟件對(duì)本次研究各項(xiàng)觀察指標(biāo)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（±s）表示，計(jì)數(shù)資料用[n（%）]表示，計(jì)量資料通過T 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料通過χ2檢驗(yàn)，統(tǒng)計(jì)得出P＜0.05，就表明研究所得結(jié)果具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 三組乳酸桿菌在陰道黏膜分布情況

宮頸癌組乳酸桿菌定植密度中位數(shù)為106（70～184）個(gè)/HP，CIN 組乳酸桿菌定植密度中位數(shù)為202（104～280）個(gè)/HP，健康體檢組乳酸桿菌定植密度中位數(shù)為294（164～388）個(gè)/HP。由此可見，宮頸癌組乳酸桿菌定植密度明顯低于CIN 組和健康體檢組，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。

2.2 三組陰道分泌物病原體檢出率比較

宮頸癌組真菌檢出率為52.0%，滴蟲檢出率為38.0%，BV 相關(guān)菌檢出率為68.0%，HPV 檢出率為94.0%；CIN 組各檢出率分別為42.0%、30.0%、44.0%、56.0%；健康體檢組各檢出率分別為20.0%、8.0%、18.0%、10.0%；數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），同時(shí)，宮頸癌組BV 相關(guān)菌檢出率、HPV 檢出率均高于CIN 組（P＜0.05），如表1 所示。

表1 三組陰道分泌物病原體檢出率比較（n/%）

2.3 3 組HPV 感染者陰道黏膜乳酸桿菌分布特征比較

在3 組HPV 感染者中，宮頸癌組乳酸桿菌陽性率為31.9%，CIN 組乳酸桿菌陽性率為42.9%，健康體檢組乳酸桿菌陽性率為80.0%，宮頸癌組、CIN 組乳酸桿菌陽性率均明顯低于健康體檢組（P＜0.05），如表2 所示。

表2 3 組HPV 感染者陰道黏膜乳酸桿菌分布特征比較（n/%）

3 討論

微生態(tài)系統(tǒng)中宿主、微生物及微環(huán)境之間始終處于一種平衡狀態(tài)下，并且彼此間存在相互影響、相互依存的關(guān)系。相關(guān)研究指出，陰道微生態(tài)與陰道疾病的發(fā)生存在一定的關(guān)聯(lián)[4]。乳酸桿菌作為一種生物應(yīng)答調(diào)節(jié)劑，不僅可用于抑制各類病原菌的生長繁殖，還可有效阻滯多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展。

本研究結(jié)果得出，宮頸癌組乳酸桿菌定植密度為106（70～184）個(gè)/HP，明顯低于CIN 組202（104～280）個(gè)/HP、健康體檢組294（164～388）個(gè)/HP，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。宮頸癌組、CIN 組的真菌檢出率、滴蟲檢出率、BV 相關(guān)菌檢出率及HPV 檢出率，均高于健康體檢組，數(shù)據(jù)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），同時(shí)，宮頸癌組的BV 相關(guān)菌檢出率和HPV檢出率均高于CIN 組（P＜0.05）。在3 組HPV 感染者中，宮頸癌組乳酸桿菌陽性率為31.9%，CIN 組乳酸桿菌陽性率為42.9%，健康體檢組乳酸桿菌陽性率為80.0%，可以看出宮頸癌組、CIN 組乳酸桿菌陽性率均明顯低于健康體檢組（P＜0.05）。結(jié)合研究結(jié)果來看，陰道微生態(tài)的診斷主要通過觀察陰道微生物菌群的多樣性、密集度、優(yōu)勢菌群等來進(jìn)行評(píng)定，盡管病毒感染還沒有被納入微生態(tài)評(píng)價(jià)指標(biāo)，但現(xiàn)有研究表明，菌群失調(diào)與HPV 感染存在一定的關(guān)聯(lián)[5]。HPV 作為女性陰道中較為常見的一種病原體，一般來說感染時(shí)間短暫，憑借陰道黏膜自凈功能就可迅速消滅。但倘若陰道一直存在HPV 感染，就容易致使宮頸上皮異常增生甚至癌變[6]。基于理論視角，以乳酸桿菌為主的陰道黏膜微生態(tài)失衡可能與宮頸癌發(fā)病由關(guān)。乳酸桿菌有助于維持陰道pH 穩(wěn)定，抑制某些致病菌的生長，并有助于提升免疫系統(tǒng)活力，代謝形成一系列細(xì)菌抑制物，增強(qiáng)陰道局部抗感染能力[7]。如果因某些因素使得乳酸桿菌數(shù)量減少、活性下降，其他厭氧菌群就會(huì)不斷增多，進(jìn)而產(chǎn)生大量有害代謝產(chǎn)物，同時(shí)在合并致癌因素如HPV 感染的影響下共同作用于宮頸上皮，引發(fā)CIN，并可能進(jìn)一步發(fā)展成宮頸癌[8]。

總而言之，宮頸癌發(fā)生可能與患者陰道黏膜乳酸桿菌減少、陰道微生態(tài)失衡存在一定的關(guān)聯(lián)，維持陰道內(nèi)乳酸桿菌比例正常，對(duì)于防范生殖系統(tǒng)癌前病變、阻斷癌變進(jìn)程具有十分重要的意義。