金銀花田東方絹金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)藥劑敏感性差異及生物農(nóng)藥篩選

安靜杰 宋健 郭江龍 黨志紅 高占林 李耀發(fā)

關(guān)鍵詞：金銀花；蠐螬；東方絹金龜；生物藥劑；藥劑敏感性

金銀花Lonicera japonica Thunb，別名忍冬，是國(guó)家確定的70種名貴中藥材之一。河北省巨鹿縣種植栽培金銀花歷史悠久，產(chǎn)量高、品質(zhì)好，常年種植面積達(dá)8000hm2，享有“中國(guó)金銀花之鄉(xiāng)”的美譽(yù)。隨著金銀花種植面積的不斷擴(kuò)大，及其土壤生態(tài)環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定，地下害蟲(chóng)基數(shù)逐年累積，發(fā)生為害程度也逐年加重，造成了金銀花產(chǎn)量下降，甚至出現(xiàn)植株成片死亡的現(xiàn)象。其中，以蠐螬對(duì)金銀花為害最重，而東方絹金龜MaLaderaorientalis Motschulsky為該地區(qū)地下害蟲(chóng)的主要優(yōu)勢(shì)種群。

東方絹金龜，又名黑絨鰓金龜，屬鞘翅目Cole-Jptera鰓金龜甲科Scarabaeidae，該蟲(chóng)在我國(guó)分布廣泛，寄主植物種類繁多。東方絹金龜成蟲(chóng)、幼蟲(chóng)均可對(duì)金銀花造成危害，其成蟲(chóng)取食植株葉片、嫩芽、花蕾等，幼蟲(chóng)咬食為害根系，嚴(yán)重影響金銀花的正常生長(zhǎng)發(fā)育。在巨鹿縣（河北省中南部），3月中旬，15cm土壤溫度平均達(dá)9.2℃時(shí)，成蟲(chóng)集中于5～10cm表土層中，4月上旬平均氣溫達(dá)10℃以上時(shí)開(kāi)始出土為害，4月中旬為其出土盛期，此時(shí)金銀花為第1茬萌芽展葉期。6月上旬為其卵孵化高峰期，8月份為東方絹金龜幼蟲(chóng)為害高峰期，此時(shí)處于3齡幼蟲(chóng)期，其耐藥性和活動(dòng)能力已明顯增強(qiáng)。由此可見(jiàn)，防治東方絹金龜成蟲(chóng)及低齡幼蟲(chóng)是控制該蟲(chóng)對(duì)金銀花為害的關(guān)鍵。劉廷輝等結(jié)合室內(nèi)和田間試驗(yàn)篩選到對(duì)東方絹金龜3齡幼蟲(chóng)高效的辛硫磷十氟蟲(chóng)腈混配組合和毒死蜱單劑。本實(shí)驗(yàn)室前期通過(guò)室內(nèi)藥劑篩選，發(fā)現(xiàn)氨基甲酸酯類和有機(jī)磷類殺蟲(chóng)劑對(duì)金龜子幼蟲(chóng)表現(xiàn)出了高殺蟲(chóng)活性。

為了有效控制東方絹金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)對(duì)金銀花的為害，并篩選出綠色、安全的生物源或高效低毒應(yīng)急性化學(xué)藥劑，筆者于2019年-2020年通過(guò)室內(nèi)篩選和田間試驗(yàn)評(píng)價(jià)了金龜子綠僵菌、蘇云金桿菌等生物源農(nóng)藥對(duì)東方絹金龜?shù)纳锘钚院吞镩g效果，并比較了對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)的活性差異。本研究將為金銀花田東方絹金龜?shù)挠行е卫硖峁┘夹g(shù)支持和防控思路。

1材料與方法

1.1供試藥劑

7.5%魚藤酮乳油（EC）、0.3%苦參堿水劑（AS）、1.5%除蟲(chóng)菊素水劑、0.3%印楝素可溶液劑（SC），內(nèi)蒙古清源保生物科技有限公司；80億孢子/mL金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑（OD）和2億孢子/g金龜子綠僵菌CQMa421顆粒劑（GR）．重慶聚立信生物工程有限公司；32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑（WP），武漢科諾生物科技股份有限公司；60g/L乙基多殺菌素懸浮劑（SC），科迪華農(nóng)業(yè)科技有限責(zé)任公司；5%阿維菌素乳油（EC），河北威遠(yuǎn)生物化工有限公司；5%甲氨基阿維菌素苯甲酸鹽水分散粒劑（WG）和4.5%高效氯氰菊酯乳油（EC），河北利時(shí)捷生物科技有限公司；2.5%高效氯氟氰菊酯乳油（先正達(dá)南通作物保護(hù)有限公司）；40%辛硫磷乳油（EC），河北盛世基農(nóng)生物科技股份有限公司；200g/L丁硫克百威乳油（EC）和10%溴氰蟲(chóng)酰胺可分散油懸浮劑（OD），美國(guó)富美實(shí)公司；50%二嗪磷乳油（EC），浙江禾本科技股份有限公司。

1.2供試蟲(chóng)源

2019年4月-5月，于河北省巨鹿縣紀(jì)家寨村金銀花田（37°10'N，115°01'E）采集東方絹金龜成蟲(chóng)。于養(yǎng)蟲(chóng)室內(nèi)采用新鮮榆樹(shù)葉片在裝有細(xì)土的養(yǎng)蟲(chóng)盒中進(jìn)行人工飼養(yǎng)，溫度為（26±1）℃，土壤相對(duì)濕度為18%～20%。待其產(chǎn)卵，幼蟲(chóng)孵化后，分別挑取健康活潑、生理狀態(tài)一致的成蟲(chóng)和2齡幼蟲(chóng)供試。

1.3生物活性測(cè)定方法

采用浸蟲(chóng)法測(cè)定供試藥劑對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)的室內(nèi)生物活性。將各供試藥劑以含0.2%吐溫-80的水溶液稀釋成5～7個(gè)濃度的供試藥液。挑取15頭試蟲(chóng)放入鋼網(wǎng)罩中，于上述藥液中浸漬30s后取出，用濾紙吸取多余的藥液，待其自行晾干后，成蟲(chóng)單頭放入裝有新鮮榆樹(shù)葉的養(yǎng)蟲(chóng)盒（直徑9cm，高6.5cm）中。幼蟲(chóng)單頭置于養(yǎng)蟲(chóng)管（直徑1.8cm，高7.5cm）中，放入含水量18%的濕土及1粒玉米種子。處理后的試蟲(chóng)置于溫度為（26±1）℃，空氣濕度約為60%的溫室飼養(yǎng)，注意保持濕度和提供食物。每處理試蟲(chóng)不少于45頭，以含0.2%吐溫-80的水溶液為對(duì)照，重復(fù)3次。分別于24、48、72、96、120h后檢查試蟲(chóng)死亡情況（死亡標(biāo)準(zhǔn)：蟲(chóng)體明顯收縮或觸之不能正常爬行）。

如對(duì)照死亡率小于10%，則以試蟲(chóng)校正死亡率值大小評(píng)價(jià)供試藥劑對(duì)試蟲(chóng)的生物活性水平。

校正死亡率=[（處理試蟲(chóng)死亡率-對(duì)照試蟲(chóng)死亡率）／（1-對(duì)照試蟲(chóng)死亡率）]×100%。

1.4田間藥效評(píng)價(jià)方法

田間試驗(yàn)于2020年8月，在河北省巨鹿縣紀(jì)家寨村金銀花田開(kāi)展。試驗(yàn)共設(shè)60g/L乙基多殺菌素懸浮劑7.5L/hm2（制劑用量，下同）、2億孢子/g金龜子綠僵菌CQMa421顆粒劑15kg/hm2、32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑7.5kg/hm2處理，并以40%辛硫磷乳油7.5L/hm2為對(duì)照藥劑，田間統(tǒng)計(jì)每公頃約4500株金銀花，單株用藥量以5L清水稀釋。每處理3株，設(shè)清水對(duì)照，試驗(yàn)重復(fù)4次。于藥后7d調(diào)查試蟲(chóng)存活蟲(chóng)數(shù)，調(diào)查時(shí)樹(shù)冠下挖土深20cm，統(tǒng)計(jì)各處理區(qū)及對(duì)照區(qū)蠐螬活蟲(chóng)數(shù)，計(jì)算田間防治效果。

田間防效=（對(duì)照區(qū)活蟲(chóng)數(shù)一處理區(qū)活蟲(chóng)數(shù)）／對(duì)照區(qū)活蟲(chóng)數(shù)×100%。

采用SPSS 20.0和Excel 2013進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，不同處理間差異分析采用單因素方差分析（one-wayANOVA）。

2結(jié)果與分析

2.1供試藥劑對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)的室內(nèi)生物活性

從各供試藥劑對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)的生物活性（表1）來(lái)看，13種供試藥劑中，僅40%辛硫磷乳油1500倍和3000倍稀釋液，以及2.5%高效氯氟氰菊酯乳油1500倍液表現(xiàn)出了較高的殺蟲(chóng)效果，120h校正死亡率分別達(dá)到了100.00%、97.78%和82.22%。2種殺蟲(chóng)劑對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)同樣表現(xiàn)出了較高的速效性，尤其是40%辛硫磷乳油，從藥后24h試蟲(chóng)校正死亡率即超過(guò)了95%。而5%甲維鹽水分散粒劑、4.5%高效氯氰菊酯乳油和10%溴氰蟲(chóng)酰胺可分散油懸浮劑1500倍液處理試蟲(chóng)120h校正死亡率均不超過(guò)20%。

6種生物農(nóng)藥7.5%魚藤酮乳油、0.3%苦參堿水劑、1.5%除蟲(chóng)菊素水劑、0.3%印楝素可溶液劑、80億孢子/mL金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑和32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑，以及2種生物源農(nóng)藥60g/L乙基多殺菌素懸浮劑、5%阿維菌素乳油對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)均未表現(xiàn)出較好的生物活性，供試的最高劑量處理時(shí)試蟲(chóng)120h校正死亡率均低于30%。

2.2供試藥劑對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)的室內(nèi)生物活性

根據(jù)成蟲(chóng)試驗(yàn)結(jié)果調(diào)整了供試化學(xué)殺蟲(chóng)劑的供試劑量，為了篩選到更多高效藥劑，補(bǔ)充了20%丁硫克百威乳油和50%二嗪磷乳油，測(cè)定了14種殺蟲(chóng)劑對(duì)東方絹金龜2齡幼蟲(chóng)的生物活性（表2）。從測(cè)定結(jié)果來(lái)看，化學(xué)殺蟲(chóng)劑40%辛硫磷乳油、20%丁硫克百威乳油、2.5%高效氯氟氰菊酯乳油、50%二嗪磷乳油均表現(xiàn)出了較高的生物活性，120h試蟲(chóng)校正死亡率均達(dá)100.00%；4種殺蟲(chóng)劑同樣表現(xiàn)出了較好的速效性。

6種生物農(nóng)藥中，80億孢子/mL金龜子綠僵菌CQMa421可分散油懸浮劑和32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑也對(duì)東方絹金龜2齡幼蟲(chóng)表現(xiàn)出了較高的殺蟲(chóng)效果，500倍稀釋液處理120h試蟲(chóng)校正死亡率分別達(dá)到了91.11%和80.00%。7.5%魚藤酮乳油、0.3%苦參堿水劑和1.5%除蟲(chóng)菊素水劑對(duì)試蟲(chóng)也表現(xiàn)出了一定的生物活性，500倍稀釋液處理120h后試蟲(chóng)校正死亡率分別為57.78%、57.78%和66.67%。而2種生物源農(nóng)藥60g/L乙基多殺菌素懸浮劑、5%阿維菌素乳油的1500倍稀釋液處理120h后對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)校正死亡率也可達(dá)70%以上。

2.3生物農(nóng)藥對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)田間效果評(píng)價(jià)

綜合供試藥劑對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)和幼蟲(chóng)的生物活性，可以看出東方絹金龜幼蟲(chóng)對(duì)多數(shù)藥劑敏感性明顯高于成蟲(chóng)。因此，筆者選取了兩種生物農(nóng)藥金龜子綠僵菌CQMa421、蘇云金桿菌G033A，以及生物源農(nóng)藥乙基多殺菌素，并以辛硫磷為對(duì)照藥劑，在田間評(píng)價(jià)了各供試藥劑對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)的防治效果。田間試驗(yàn)結(jié)果（表3）表明，2種生物農(nóng)藥2億孢子/g金龜子綠僵菌CQMa421顆粒劑制劑用量15kg/hm2和32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑7.5kg/hm2處理對(duì)田間金銀花東方絹金龜幼蟲(chóng)表現(xiàn)出了較好的防治效果，7d防效分別達(dá)到了78.81%和68.28%，與生物源農(nóng)藥60g/L乙基多殺菌素懸浮劑7.5L/hm2處理的防效（75.19%）沒(méi)有顯著性差異。40%辛硫磷乳油7.5L/hm2處理對(duì)金銀花東方絹金龜幼蟲(chóng)防效最高，達(dá)到84.55%，顯著高于32000IU/mg蘇云金桿菌G033A可濕性粉劑，但與另外兩種生物藥劑無(wú)顯著差異。

3結(jié)論與討論

在河北省中南部金銀花田東方絹金龜多以老熟幼蟲(chóng)在10～20cm土層越冬，4月中旬為成蟲(chóng)出土盛期，成蟲(chóng)出土后即開(kāi)始為害金銀花嫩梢、嫩芽，因此，該時(shí)期也為東方絹金龜防治的重要時(shí)期之一。而東方絹金龜卵孵化盛期為6月上旬，幼蟲(chóng)共分3齡，但1、2齡幼蟲(chóng)齡期較短，食量小，喜食腐殖質(zhì)，3齡幼蟲(chóng)齡期長(zhǎng)、食量大、為害嚴(yán)重。8月為東方絹金龜3齡幼蟲(chóng)為害高峰期，但此時(shí)該蟲(chóng)活動(dòng)能力和耐藥性均明顯增強(qiáng)，因此，7月底至8月初為東方絹金龜幼蟲(chóng)防治的關(guān)鍵時(shí)期。本研究表明，東方絹金龜成蟲(chóng)對(duì)多數(shù)殺蟲(chóng)劑敏感性低，僅對(duì)辛硫磷、高效氯氟氰菊酯等少數(shù)化學(xué)殺蟲(chóng)劑敏感。而多數(shù)殺蟲(chóng)劑對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)表現(xiàn)出了較高的生物活性，包括一些生物農(nóng)藥，筆者結(jié)合室內(nèi)篩選和田間效果評(píng)價(jià)，明確了金龜子綠僵菌CQMa421和蘇云金桿菌G033A對(duì)東方絹金龜幼蟲(chóng)7d防治效果分別達(dá)78.81%和68.28%，表現(xiàn)出了較好的防控作用。王勇等研究認(rèn)為，金龜子綠僵菌和蘇云金桿菌可替代化學(xué)農(nóng)藥用于防治馬鈴薯蠐螬。李曉等和劉迅等分別發(fā)現(xiàn)蘇云金桿菌工程菌株3A-SU4和金龜子綠僵菌防治花生蠐螬效果與化學(xué)藥劑相當(dāng)。因此，筆者建議金銀花田東方絹金龜?shù)姆揽貞?yīng)以7月底至8月初對(duì)其幼蟲(chóng)種群防控為主，可以選擇使用金龜子綠僵菌或蘇云金桿菌等生物農(nóng)藥。

從本研究結(jié)果也可以看出，高效低毒化學(xué)殺蟲(chóng)劑仍是東方絹金龜種群暴發(fā)成災(zāi)為害時(shí)的首選。噴施有機(jī)磷類和擬除蟲(chóng)菊酯類等具有強(qiáng)觸殺活性的殺蟲(chóng)劑是防治東方絹金龜成蟲(chóng)的重要選擇，本研究也再次驗(yàn)證了有機(jī)磷類殺蟲(chóng)劑辛硫磷和擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑高效氯氟氰菊酯對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)的較高防效，但也揭示了同樣為擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑的高效氯氰菊酯對(duì)東方絹金龜成蟲(chóng)活性較低。蠐螬生態(tài)適應(yīng)性屬于K-型，生活環(huán)境穩(wěn)定，具有生殖力較低，蟲(chóng)體較大，種群被大量消滅后，難以短期內(nèi)補(bǔ)償?shù)奶攸c(diǎn)。因此，從該蟲(chóng)長(zhǎng)期、有效治理的角度出發(fā)，需要結(jié)合高效低毒化學(xué)殺蟲(chóng)劑和生物殺蟲(chóng)劑進(jìn)行防治，以高效低毒化學(xué)殺蟲(chóng)劑快速壓低東方絹金龜種群數(shù)量，再輔以金龜子綠僵菌CQMa421或蘇云金桿菌G033A等生物殺蟲(chóng)劑輪換使用或者與化學(xué)殺蟲(chóng)劑混合使用。由于田間東方絹金龜成蟲(chóng)具有一定的活動(dòng)性，僅采用化學(xué)藥劑防治難以達(dá)到預(yù)期防治效果，可利用引誘劑先將成蟲(chóng)誘集后，再用高效低毒化學(xué)殺蟲(chóng)劑集中滅殺，以達(dá)到化學(xué)農(nóng)藥減量施用以及金銀花東方絹金龜綜合治理的目標(biāo)。